2食品微生物常用仪器
各行业实验室应配仪器清单
技术服务-3简单有机合成实验室所需基本仪器和设备实验室用较大仪器有:称量用:天平(两位天平,最大称量1000克);称量纸量筒:10mL;25mL;50mL;100mL;250mL烧杯:塑料烧杯一套,玻璃烧杯一套鉴定反应用:紫外灯;碘缸;烤板用显色剂等分离用:展缸;硅胶柱;硅胶板;刮刀;玻璃刀;滤纸;剪刀旋液用:旋蒸;旋蒸瓶(250mL,500mL,1000mL,2000mL);脱脂棉花;硅胶(100目一200目);橡皮管;水真空循环泵点板判断用:镊子(两个,一大一小);毛细管(0.2mm,0.5mm)过柱用:烧杯;锥形瓶;储液球;加压球实验用:冷凝管(19#,球形;直形各一个);反应器(单口烧瓶50mL,100mL,250mL,500mL各一个;三口烧瓶250mL,500mL,1000mL各一个);搅拌器(一般磁力搅拌器一台,强力磁力搅拌器一台,机械搅拌器一台,搅拌磁子一套,四氟乙烯搅拌棒不同型号各一根,四氟乙烯塞19#、24#各一个;温度计一套;加热锅一套;加热圈一套;变压器一台;直形蒸馏头;真空接引管;分液器(250mL,500mL,1000mL);恒压滴液漏斗(100mL,250mL,500mL);过滤器(过滤瓶:250mL,500mL;1000mL;2.5L;布氏漏斗一套);甲基硅油;装反应仪器的塑料篮子;封口膜;玻璃棒,配套胶头滴管;针头针管;样品管;气球若干;橡皮塞;氮气瓶;瓷托盘;医用橡皮手套,一次性塑料手套;防毒面具;护目镜;聚四氟乙烯生料带;洗耳球;双头针等化妆品生产企业实验室QS认证检验设备配置电子天平:称量水份测定仪:测定原料及产品的水份含量傅立叶变换红外分光光度计:定性分析化装品原料气相色谱仪:定性分析化装品原料及半成品中所含物质高效液相色谱仪:定性或定量分析超声波清洗机:试剂脱气震荡器:高效液相色谱的样品前处理工作生化培养箱:生化培养箱测试微生物含量(霉菌和细菌)干燥箱:恒温烘焙、干燥或干热灭菌、水分测定ph计:测定PH值超净工作台:提供相对无菌的实验环境培养箱:微生物的培养灭菌器(消毒器、灭菌锅):培养基、干燥器皿等物品的灭菌、消毒显微镜:微生物结构、形态等的观察水浴锅:恒温阿贝折光仪:测定原料及成品的纯度熔点仪:测定原料及半成品的熔点比重计:测定原料及半成品的比重针入度仪:测定原料及产品的硬度粘度计:测定原料及半成品的粘度真空干燥箱:测定成品的稳定性低温恒温箱:测定成品的稳定性恒温恒湿箱:测定成品的稳定性扭矩仪:测定成品瓶盖的扭矩旋涡混合器:混合口红折断仪:测定口红的折断率箱式电炉(马弗炉):测定灰份乳制品生产企业实验室QS认证检验设备配置超净工作台:提供相对无菌的实验环境分析天平:称量样品干燥箱:样品或试剂、器皿的恒温烘焙、干燥或干热灭菌离心机:产品的分离分析灭菌器:培养基、玻璃器皿等物品的灭菌、消毒水浴锅:恒温培养箱:微生物的培养显微镜:微生物结构、形态等的观察分光光度计:测量物质对不同波长单色辐射的吸收程度,定量分析定氮仪(蛋白质测定装置):产品蛋白质含量的测定(含乳饮料)黄酒生产必备出厂检验设备必备的出厂检验设备(一)分析天平(0.1mg);(二)干燥箱;(三)水浴锅;(四)电炉;(五)计量器具;(六)酒精计(分度值0.2);(七)测酒精度用温度计(分度值0.1°C);(八)酸度计(精度0.02pH);(九)灭菌锅;(十)无菌室或超净工作台;(十一)微生物培养箱;(十二)电冰箱。
微生物常用仪器
时可根据情况,定期做无菌试验,以测定净化台是否符 合无菌要求。
(五)、离心机
离心机的类型: 普通离心机 高速离心机 超速离心机
类型 最大转速(r/min) 最大RCF(g) 分离形式
普通离心机 6000 6000 固液沉淀
隔水式培养箱
隔水式培养箱数字 控温,不锈钢内胆, 俗称水夹套培养箱。 温度均匀,断电后仍 能保持较长时间恒温。
电热恒温培养箱
2、生化培养箱
3、二氧化碳培养箱
培养箱的配置和使用
配置:22(℃)、30(℃)、37(℃)培养箱各一个 使用注意事项: (1)箱内不能放入过热或过冷的物品,取放物品时应快速进
(四)、超净工作台
三大类 型: 侧流式、直流式和外流式垂直ຫໍສະໝຸດ 超净工作台水平单向流洁净工作台
超净台的使用和注意事项
1、使用前先打开紫外灯照射,紫外线照射时间40~60分钟; 2、使用中,有机玻璃罩受到污染,严禁用酒精棉球擦拭,
请用含水棉布檫拭; 3、请保持超净台整洁,不要堆积杂物; 4、使用完毕,勿忘关闭煤气开关或酒精灯; 5、请做好使用记录。 6、如遇故障,除记录在册外,还应及时与有关人员联系,
备有消除转子与空气摩擦热的真空和 冷却系统,有更为精确的温度和速度 控制、监测系统、有保证转子正常运 转的传动和制动装置等。
应用
收集易沉降的大颗粒( 收集微生物、细胞碎片、大细 主要分离细胞器、病毒、核酸、蛋白
如RBC、酵母细胞等) 胞器、硫酸铵沉淀物和免疫沉 质、多糖等甚至能分开分子大小相近
淀物等。但不能有效沉淀病毒 的同位素标记物15N-DNA和未标记的
3、转动物镜转换器,放在低倍镜的位置。
微生物实验室要求
微生物检验实验室操作技术要求第一节实验室管理制度一、实验室管理制度1.实验室应制定仪器配备管理、使用制度,药品管理、使用制度,玻璃器皿管理,使用制度,并根据安全制度和环境条件的要求,本室工作人员应严格掌握,认真执行。
2.进入实验室必须穿工作服,进入无菌室换无菌衣、帽、鞋,戴好口罩,非实验室人员不得进入实验室,严格执行安全操作规程。
3.实验室内物品摆放整齐,试剂定期检查并有明晰标签,仪器定期检查、保养、检修, 严禁在冰箱内存放和加工私人食品。
4.各种器材应建立请领消耗记录,贵重仪器有使用记录,破损遗失应填写报告;药品、器材、菌种不经批准不得擅自外借和转让,更不得私自拿出,应严格执行《菌种保管制度》。
5.禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗,实验室内不得带入私人物品,离开实验室前认真检查水、电、暖气、门窗,对于有毒、有害、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。
6.科、室负责人督促本制度严格执行,根据情况给于奖惩,出现问题立即报告,造成病原扩散等责任事故者,应视情节直至追究法律责任。
二、仪器配备、管理使用制度1.食品微生物实验室应具备下列仪器:培养箱、高压锅、普通冰箱、低温冰箱、厌氧培养设备、显微镜、离心机、超净台、振荡器、普通天平、千分之一天平、烤箱、冷冻干燥设备、匀质器、恒温水浴箱、菌落计数器、生化培养箱,电位pH计、高速离心机。
2.实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求,保证准确可靠,凡计量器具须经计量部门检定合格方能使用。
3.实验室仪器安放合理,贵重仪器有专人保管,建立仪器档案,并备有操作方法,保养、维修、说明书及使用登记本,做到经常维护、保养和检查,精密仪器不得随意移动,若有损坏需要修理时,不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员,经科室负责人同意填报修理申请、送仪器维修部门。
4.各种仪器(冰箱、温箱除外),使用完毕后要立即切断电源,旋钮复原归位,待仔细检查后,方可离去。
5.一切仪器设备未经设备管理人员同意,不得外借,使用后按登记本的内容进行登记。
食品中大肠菌群的检验
6)大肠菌群最可能数(MPN)的报告
按5)确证的大肠菌群LST阳性管数 ,检索MPN表(见附录B),报告每g( mL)样品中大肠菌群的MPN值。
表B.1 大肠菌群最可能数(MPN)检索表
第二法:大肠菌群平板计数法
需要用到的培养基
(1)VRBA:结晶紫中性红胆盐琼脂
成分:蛋白胨7.0g,酵母膏3.0g,乳糖10.0g ,氯化钠5.0g,胆盐或3号胆盐1.5g,中性 红0.03g,结晶紫0.002g,琼脂15g~18g
产气克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠杆菌是人和温血动物肠道 内普遍存在的细菌,是粪便中 的主要菌种产。气一克般雷生白活氏在菌人大 肠中并不致病,但它侵入人体 一些部位时,可引起感染 。
总大肠菌群系指一 群在37℃培养24小 时能发酵乳糖、产 酸产气、需氧和兼 性厌氧的革兰氏阴 性无芽胞杆菌。
大肠菌群
耐热大肠菌群(粪大肠
肠出血性大肠杆菌,感染性腹泻 是近年来新发现的危害严重的肠 道传染病,已逐渐成为威胁人群 健康的重要公共卫生问题。
致病性大肠杆菌能引起食物 中毒。致病性菌株能侵入肠 粘膜上皮细胞,具有痢疾杆 菌样致病力。肠致病性大肠 杆菌(EPEC)、肠毒素性 大肠杆菌(ETEC)和肠侵 袭性大肠杆菌(EIEC)等。
粉溶液200mL,0.1%煌绿水溶液 13.3mL,蒸馏水800mL, pH7.2±0.1。 制法:略
抑菌剂的选择
大肠菌群检验中常用的抑菌剂有胆盐、十二烷 基硫酸钠、洗衣粉、煌绿、龙胆紫、孔雀绿等 。
抑菌剂的主要作用是抑制其它杂菌,特别是革 兰氏阳性菌的生长。国家标准中LST肉汤利用 十二烷基硫酸钠作为抑菌剂,BGLB肉汤利用 煌绿和胆盐作为抑菌剂。
其他项目
抗生素残留、beta-内酰胺酶、 商业无菌等
食品中大肠菌群的检验
(2)BGLB:煌绿乳糖胆盐肉汤 成分:蛋白胨10.0g,乳糖10.0g,牛胆粉
O157:H7(EHEC)
O157:H7
肠出血性大肠杆菌,感染性腹泻 是近年来新发现的危害严重的肠 道传染病,已逐渐成为威胁人群 健康的重要公共卫生问题。
致病性大肠杆菌能引起食物 中毒。致病性菌株能侵入肠 粘膜上皮细胞,具有痢疾杆 菌样致病力。肠致病性大肠 杆菌(EPEC)、肠毒素性 大肠杆菌(ETEC)和肠侵 袭性大肠杆菌(EIEC)等。
食源性致病菌及其毒素
沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌及其肠毒素、溶血性 链球菌、蜡样芽孢杆菌、副溶血性弧菌、单增李斯特菌、阪 崎肠杆菌、空肠弯曲菌、致病性大肠埃希氏菌等
霉菌酵母菌及其毒素
黄曲霉毒素B1 、B2等
其他项目
抗生素残留、beta-内酰胺酶、 商业无菌等
商业Байду номын сангаас菌
概念:罐头食品经过适度的杀菌后,不含有致 病性微生物,也不含有在通常温度下能在其中 繁殖的非致病性微生物。这种状态叫做商业无 菌。
三、检测方法
GB 4789.3-2010 《大肠菌群计数》
第一法:大肠菌群MPN计数法 第二法:大肠菌群平板计数法
第一法:大肠菌群MPN计数法
大肠菌群计数检验流程
LST不产气(-) 小导管里无气泡
LST产气(+)
0
将产气的试管内 样品接种到 BGLB肉汤
食品微生物检验常用的仪器.
2、高压灭菌锅
• 用途:培养基、生理盐水、废弃物、采样 器、纱布、衣物的灭菌。 • 种类:手提式、立式、卧式杀菌锅
不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器(电热)
全自动高压灭菌器
大型高压蒸汽杀菌锅的基本操作方法
1. 2. 放干消毒锅内的剩余水,加入纯净水至最高水位; 放入物品,关上消毒锅门;冷凝阀开1圈;消毒钮顺时 针拨至“关”; 选择所需的杀菌压力0.07、0.11或0.14Mpa后;开启 电源; 当温度达到100℃左右时就可将消毒钮顺时针拨至 “消毒”及冷凝阀关至刚好有冷凝水和蒸气冒出为止; 当消毒室温度达到所需温度时开始计时,到时间后关 闸。
2、含菌试管的清洗
• 高压灭菌后,肥皂水刷洗干净,烘干 或晾干备用。
3、含菌平皿的灭菌
(1)、底盖分开放,放入桶中,高压 灭菌; (2)、趁热倒去污物; (3)、肥皂水刷洗干净,烘干或晾干 备用。
4、含菌吸管的清洗
(1)、把含菌吸管投入3%的来苏尔液 内浸泡30min以上杀菌; (2)、用肥皂水洗涤一次; (3)、最后用清水冲洗干净即可。
角 式 和 外 摆 式转 角式、外摆式转子等 子
仪 器 结 构 性 能 速 率 不 能 严 格控 有消除空气和转子间摩 备有消除转子与空气摩擦热 和特点 制 , 多 数 室 温下 擦热的制冷装置,速率 的真空和冷却系统,有更为 操作 和温度控制较准确、严 精确的温度和速度控制、监 格。 测系统、有保证转子正常运 转的传动和制动装置等。
3.
4. 5.
使用高压蒸汽杀菌锅的注意事项
A:为避免烫伤,只有当温度降低到70℃以下时放 可小心的打开消毒锅门。 B:为避免消毒锅冷却后消毒室内产生负压而打不 开消毒锅门,所以当消毒室温度低于70℃时就可 慢慢把门打开。 C:根据消毒物品选择排气方式: (1).如有液体(营养液等)请选择慢排。 (2).如只有废品等可选择快排。
食品微生物检验技术存在的问题及对策探讨
食品微生物检验技术存在的问题及对策探讨食品微生物检验技术是保障食品安全的重要手段之一,但在实际操作中存在一些问题,需要我们探讨并提出相应的对策。
问题一:检测结果的可靠性不高食品微生物检验技术在样品处理、培养方法、分析仪器等方面存在一定的误差,导致检测结果的可靠性不高。
这主要表现在以下几个方面:1. 样品前处理不规范:在食品微生物检验中,样品的前处理步骤对于结果的准确性至关重要。
由于不同食品样品的特殊性,没有统一的前处理方法,操作人员在处理过程中往往存在主观性,导致结果的可靠性不高。
2. 培养方法的限制:食品微生物检验中常用的培养方法存在一定的限制,有些微生物无法适应常规的培养条件,导致无法检测出来。
由于培养时间较长,无法满足食品生产过程中的快速检测需求。
3. 分析仪器的误差:检测结果的准确性还受到分析仪器的误差影响。
在食品微生物检验中,常用的分析仪器包括PCR、质谱仪等,但这些仪器在实际使用过程中存在一定的误差,导致检测结果的可靠性不高。
对策一:建立标准化的检测方法与操作规范为了提高食品微生物检验结果的可靠性,需要建立标准化的检测方法与操作规范。
要制定统一的样品前处理方法,确保各类食品样品的处理方法一致;要建立标准化的培养方法,包括培养条件、培养时间等,确保微生物能够在最适宜的条件下生长;要对常用的分析仪器进行校准与验证,确保分析结果的准确性。
问题二:检测时间长,无法满足快速检测需求传统的食品微生物检验方法需要较长的培养时间,无法满足食品生产过程中的快速检测需求。
在食品加工、贮藏等环节中,微生物的繁殖速度很快,如果检测时间过长,食品可能已经被微生物污染导致损毁。
对策二:引入快速检测技术为了解决食品微生物检验时间长的问题,可以引入快速检测技术。
目前,PCR和质谱技术等快速检测方法已经被广泛应用于食品微生物检验中,可以在短时间内得到准确的结果。
还可以结合生物传感技术、免疫技术等快速检测方法,提高检测的速度和准确性。
实验室常用仪器设备清单汇总(15大类)
实验室常用仪器设备清单汇总(15大类)一、实验室基础仪器(科研院校、食品、公共卫生、化学、生物、第三方检测、企业化验室等)1、普通电子精密天平:样品称量2、千分之一电子分析天平:样品称量3、万分之一电子分析天平:样品称量4、十万分之一电子分析天平:样品称量5、高压灭菌锅:玻璃器皿的杀菌6、超声波清洗器:玻璃器皿及器材的清洗7、台式低速离心机:分离液体与固体颗粒或液体与液体的混合物8、超纯水机:制备纯水/超纯水9、紫外可见分光光度计:对物质进行定量或定性的分析10、测汞仪:汞的测量11、原子吸收分光光度计:主要用于微量元素和痕量分析测量及分析12、原子荧光分光光度计:样品中砷、汞、硒、锡、铅、铋、锑、碲、锗、镉、锌等十一种元素的痕量分析测量。
13、离子色谱仪:对样品中的阳离子,阴离子进行分析和测量14、气相色谱仪:根据测的项目不同,进行配置15、恒温恒湿培养箱:细菌及细胞培养16、电热鼓风干燥箱:排除标本内的残留水分、微生物用玻璃器皿的干热杀菌、加热实验之前的预热17、电加热板:样品加热18、显微镜:放大物体二、大气环境监测仪器(环境监测站、环保局、第三方检测等)(一)环境监测仪器1、大气采样器:用于环境空气、作业场所中的有毒有害气体、甲醛、氨气、TVOC、苯等采样2、颗粒物采样器:捕集环境大气中的总悬浮微粒(TSP)和可吸入微粒(PM10)或细颗粒(PM2.5)3、大气颗粒物综合采样器:采集环境大气、室内空气中各种有害气体,捕集环境大气中的总悬浮微粒(TSP)和可吸入微粒(PM10、PM2.5)4、空气氟化物采样器:用于环境中氟化物和重金属采集5、挥发性有机物采样器:环境空气中挥发性有机物采样,吸附管法6、降水降尘采样器:具有融雪,冷藏功能,降尘、降水7、皂膜流量计:校准小流量采样器,量程可选(二) 固定污染源废气检测1、自动烟尘烟气测试仪:测定烟尘,O2、SO2、NO、NO2、CO、CO2、H2S2、沥青烟采样枪:固定污染源废气沥青烟检测3、氟化物采样枪:固定污染源废气氟化物检测4、油烟采样枪:固定污染源废气油烟检测5、低浓度烟尘采样枪:固定污染源烟尘滤膜法检测6、烟气采样器:固定污染源废气采样7、挥发性有机物采样器:固定污染源挥发性有机物采样,吸附管法8、非甲烷总烃采样器:总烃、非甲烷总烃、甲烷采样9、林格曼烟气黑度测定仪:1000米,烟气黑度测定10、综合流量校准仪:校准流量、压力等三、水质检测仪器(水厂、污水厂、供水厂、自来水厂、污水在线监测系统等)1、COD测定仪:衡量水中有机物质含量多少的指标,量越大污染越严重2、BOD速测仪:检测水中的生物化学需氧量(BOD)3、氨氮检测仪:测量水中的氨氮,氨氮含量较高时,对鱼类则可呈现毒害作用。
《食品微生物检验技术》课程作业要求
《食品微生物检验技术》课程作业要求班级:__食生111__学号:___53__姓名:樊继国分数___________黄豆酱中微生物的检验一、国家标准中鱼类罐头需检测的微生物种类及标准微生物种类菌落总数酵母霉菌金黄色葡萄球菌国家标准<100cfu/ml≤100cfu/ml≤30cfu/ml不得检出二、黄豆酱中菌落总数的检测1、实验原理菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克(每毫升)检样所生长出来的细菌菌落总数。
菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。
当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价。
菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。
本方法规定的培养条件下所得到的结果,仅包括在培养琼脂上面生长的嗜中温性的菌落总数。
2、实验器材2.1仪器:冰箱:2℃~5℃。
恒温培养箱:28℃±1℃。
均质器。
恒温振荡器。
显微镜:10某~100某。
电子天平:感量0.1g。
无菌锥形瓶:容量500mL、250mL。
无菌广口瓶:500mL。
无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)。
菌平皿:直径90mm。
无菌试管:10mm某75mm无菌牛皮纸袋、塑料袋。
2.2培养基:平板计数琼脂培养基⑴组成成分1.0g葡萄糖2.5g酵母浸膏5.0g胰蛋白胨15.0g琼脂1000mL蒸馏水PH7.0±0.2⑵营养琼脂培养基的配置①取20g营养琼脂培养基放到三角瓶并且加入1000mL的蒸馏水,然后震荡摇匀。
②然后用脱脂棉做成棉塞塞到三角瓶口,用牛皮纸包扎好。
③放到高压锅内以高温、十五分钟杀菌④杀菌后,取出培养基,自然冷却到40℃左右备用⑶琼脂培养基做法把组成成分里面的成分加入到蒸馏水中煮沸溶解,然后调节PH,装到试管里面和三角瓶中,在高温杀菌十五分钟左右。
食品微生物检验常用的仪器
05
其他仪器
离心机
总结词
用于分离和浓缩微生物样品
详细描述
离心机是食品微生物检验中常用的仪器之一,主要用于分离和浓缩微生物样品。 通过高速旋转,离心机能够将样品中的不同组分进行分离,如细胞、细菌、病 毒等,以便进一步进行微生物检测和分析。
振荡器
总结词
用于混合和分散微生物样品
详细描述
振荡器在食品微生物检验中主要用于混合和分散微生物样品 。通过振荡作用,可以将样品中的微生物均匀分散,以便进 行后续的计数和分离操作。同时,振荡器还可以用于菌液的 混匀,促进微生物的生长和繁殖。
干热灭菌器
干热灭菌器是利用干燥的高温空气来杀灭微生物的灭菌设备,适用于玻璃 器皿、金属器械等物品的灭菌。
干热灭菌器的原理是通过高温空气来使微生物脱水、氧化而死亡,从而达 到灭菌的目的。
干热灭菌器的使用方法包括预热、灭菌和冷却等步骤,使用时应控制好温 度和时间,避免对物品造成损坏。
紫外线灭菌灯
紫外线灭菌灯是利用紫外线来 杀灭微生物的灭菌设备,具有 高效、快速、无污染等特点。
03
灭菌设备
压力蒸汽灭菌器
压力蒸汽灭菌器是利用高温高压蒸汽来杀灭微生物的灭菌设备,广泛应用于实验室、食品加工、医疗 等领域。
压力蒸汽灭菌器的原理是通过加压的蒸汽来穿透物品,使微生物受到高温而死亡,从而达到灭菌的目的。
压力蒸汽灭菌器的使用方法包括预热、灭菌、排气和干燥等步骤,使用时应严格按照操作规程进行。
THANKS
匀浆机
总结词
用于破碎微生物细胞壁,释放细胞内物 质
VS
详细描述
匀浆机是食品微生物检验中用于破碎微生 物细胞壁,释放细胞内物质的仪器。通过 高速旋转和冲击力,匀浆机能够破碎微生 物细胞壁,使细胞内的物质释放出来,以 便进行后续的检测和分析。这种方法常用 于检测食品中的细菌内毒素、细菌菌体等 物质。
微生物检验室
新建无菌室的处理程序
先用3%的煤酚皂擦洗工作台面及地面, 再用甲醛加高锰酸钾熏蒸空气。日后 要定期熏蒸;
每两星期用酒精棉球擦拭紫外线灯管; 每次使用无菌室前用紫外灯照射30~
60分钟; 每次使用完无菌室后,要及时用3%的
煤酚皂擦洗工作台面及地面。
三、无菌室无菌程度的测定
测定无菌室无菌程度一般采用平板法:
实验室管理制度
5.禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、 喧哗,实验室内不得带入私人物品,离 开实验室前认真检查水、电、暖气、门 窗,对于有毒、有害、易燃、污染、腐 蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。
6.科、室负责人督促本制度严格执行, 根据情况给于奖惩,出现问题立即报告, 造成病原扩散等责任事故者,应视情节 直至追究法律责任。
一、无菌室的结构与要求
(一)无菌室的结构
无菌室通常包括缓冲间和工作间两大部分。 无菌室的大小,房间不宜过大,以便于空气灭菌。 应按每个操作人员占用面积不少于3平方米设置。以 适宜操作为准,一般可为9~12m2。缓冲间与工作间 二者的比例可为1:2,高度2.5m左右为适宜。工作 间内设有固定的工作台、紫外线灯、空气过滤装置 及通风装置;较为理想的应有空调设备、空气净化 装置,以便在进行微生物操作时切实达到无尘无菌。 工作间的内门与缓冲间的门力求迂回,避免直接相 通,减少无菌室内的空气对流。窗户应装有两层玻 璃,以防外界的微生物进入。
检验室建设布局图
6
1.办公台 2.文件柜 3.样品柜 4.通风橱 5.实验边台 6,7.无菌台 8.天平台 9.在落地仪器区再加个高温仪器台,放高压灭菌锅、干燥箱、水浴锅、电热板等
传递窗
(3)分隔内外间的墙壁上应开一个小窗,作接种
过程中必要内外传递物品的通道,以减少人员 进出内间的次数降低污染程度,小窗宽60厘米, 高40厘米,厚30厘米。
微生物检测实验室常见的仪器设备
实验室的仪器设备是指用于教学、科研、技术开发试验而设置的仪器设备。
通常人们习惯将通用于测试的仪器设备称作仪器,而将较大型的用于制作和生产性质的仪器设备称为设备。
随着科学技术的不断发展,现代的仪器设备既有制作、生产的功能,又具有测试功能,也就是说,由于测试、制作和生产分不开,使得与其相关的仪器和设备也难以划分和界定。
因此,人们便将仪器和设备通称为仪器设备。
开展食品微生物检测工作,离不开实验室的仪器设备。
具有适合于食品微生物检测功能且状态良好的仪器设备,是获得高质量实验室检测结果的要求之一。
食品微生物检测实验室的仪器设备主要包括有以下几类。
1保证检测用无菌环境的仪器设备生物安全柜和超净工作台是用于实验室的主要隔离设备。
生物安全柜可有效防止有害悬浮微粒的扩散,为操生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操生物安全柜常使用一次性接种环或电热式接种环灭菌器。
电热式接种环灭菌器配有硼硅酸玻璃或陶瓷保护罩,可减少接种环灭菌时感染性物质的飞溅和散布,但电热式接种环灭菌器会扰乱气流,因此,应置于生物安全柜中靠近工作表面后缘的地方。
2保证检测用实验用品与用具无菌(灭菌)的仪器设备在食品微生物实验室中,用于灭菌的设备通常为高压蒸汽灭菌器或用于干热灭菌的干燥箱。
高压蒸汽灭菌器是应用最广、效果最好的灭菌器,广泛用于培养基、生理盐水、废弃培养物等物品的灭菌。
其种类有手提式、立式、卧式等,目前大部分高压蒸汽灭菌器具有自动过程控制。
干燥箱主要用于金属、玻璃器皿的干热灭菌。
而离子辐射和环己烷灭菌设备由于具有较大的毒性,通常只用于对热敏感物质的灭菌。
接种环的灭菌通常使用酒精灯,但红外线加热灭菌器或灭菌喷灯等设备由于具有使用安全的特点,为接种环的灭菌带来了3满足微生物恒温生长培养的仪器设备微生物培养的设备为培养箱、摇床和水浴锅等。
其中培养箱是微生物培养的主要设备,可分为恒温培养箱、恒温恒湿培养箱、低温培养箱、高温培养箱、微需氧培养箱和厌氧培养箱等。
食品检测仪器汇总
食品检测仪器汇总检测项目:包括农残、兽药/抗生素、添加剂、重金属及有害物质、毒素微生物、常规理化、接触材料可根据客户需要增加删减。
序号名称主要用途1 电子天平食品检验用试剂、样品和标准品的称量2 酸度计食品检验过程中pH值的测定3 冷冻离心机食品检验过程中营养成分或者污染物等的提取分离4 离心机食品检验过程中营养成分或者污染物等的提取分离5 超净工作台食品检验过程中提供局部超净工作环境6 生物安全柜食品检验过程中提供洁净安全的操作环境7 索氏提取器食品检验过程中营养成分或者污染物的提取8 超临界萃取仪食品检验过程中营养成分或者污染物的提取9 磁力搅拌器食品检验过程中目的物质提取或反应过程中的搅拌混匀10 微波消解仪(高压)食品检验过程中样品的消解11 冷冻干燥机食品检验过程中样品的冷冻干燥12 碎花制冰机食品检验用冰的制备13 高压灭菌器食品检验中灭菌试剂的制备14 冰箱食品样品和试剂的存放15 冷藏柜食品样品和试剂的存放16 立式超低温冰箱食品样品和试剂的超低温保存17 超声波清洗器食品检验过程中样品的提取、脱气、混匀、细胞粉碎、实验器皿的清洗等18 超声波提取器提取食品营养成分或者污染物19 超声波细胞破碎仪食品检验过程中细胞的破碎20 马弗炉食品检验过程中食品的灰分测定及干法消解21 电热恒温干燥箱食品检验过程中样品的干燥22 电热恒温培养箱食品检验过程中微生物的培养23 真空干燥箱食品检验中对照品及样品干燥24 恒温恒湿箱为食品检验提供稳定的恒温恒湿环境25 可控温振荡箱食品检验中微生物的培养26 恒温恒湿培养箱食品检验中微生物的培养27 霉菌培养箱食品检验中霉菌的培养28 厌氧培养箱食品检验中微生物的厌氧培养29 细胞培养箱食品检验中细胞优化与培养30 三气细胞培养箱食品检验中微需氧菌的培养31 超纯水系统食品检验用超纯水的制备32 匀浆器食品检验过程中样品的粉碎、均质和乳化。
33 组织匀浆器食品检验过程中组织匀浆,以提取包括蛋白质、RNA和DNA在内的细胞内容物34 恒温混匀器食品检验过程中样品的均匀化处理35 均质器食品检验过程中样品的均一化处理36 漩涡混合器食品检验过程中试样的漩涡混匀37 固相萃取装置食品样品中目标物质的自动化提取38 快速溶剂萃取仪食品样品中目标物质的自动化提取39 真空离心浓缩仪食品检验过程中目标物质的浓缩40 全自动核酸提取系统食品检验过程中核酸的提取和纯化41 氮吹仪食品检验过程中目标物质的浓缩42 除湿器食品检验环境的湿度控制43 超声粉碎机食品样品的粉碎处理44 旋转蒸发仪食品检验过程中有机溶剂去除45 鞋套机保护无菌室的清洁环境46 自动微生物快速检测分析系统食品中微生物的快速鉴定分析47 恒温摇床食品检验过程中微生物的控温振荡培养48 低温摇床食品检验过程中微生物的低温振荡培养49 恒温水浴食品检验过程中样品前处理50 恒温振荡水浴食品检验过程中样品前处理51 智能循环水浴食品检验过程中样品前处理52 显微镜(带成像系统)食品检验过程中细胞和微生物样本的观察53 全自动微生物平板螺旋加样系统食品中微生物污染程度的测定54 液氮罐食品样品、菌株和细胞株的低温保存55 体视显微镜食品样品的显微观察56 实时荧光定量PCR检测系统食品样品中致病微生物相关基因的快速、定量分析57 定性PCR仪食品中致病微生物相关基因的扩增分析58 多点接种仪食品检验过程中微生物的快速接种59 红外接种环灭菌器食品微生物检验过程中对接种环的快速灭菌60 扫描电镜食品中微生物与细胞的显微结构观察与分析61 全自动微生物免疫荧光分析系统食品中致病微生物的快速筛选62 全自动食品微生物定量分析系统食品中微生物污染水平的快速定量分析63 全自动病原微生物检测系统食品中致病微生物的快速检测64 微生物鉴定系统—全细胞脂肪酸分析系统食品中微生物的快速鉴定65 微生物表型芯片分析系统食品中微生物的快速分型分析66 飞行时间质谱微生物鉴定系统食品中微生物的快速鉴定67 全自动微生物指纹图谱分析系统食品中微生物的快速分型分析68 全自动基因指纹分析仪食品中微生物的快速分型分析69 基因定量分析系统-焦磷酸测序食品中微生物的快速鉴定与分型70 全自动样本储存管理系统食品检验过程中核酸、蛋白、抗体、微生物等样本的保存71 基因芯片分析系统食品检验过程中多种致病基因的快速分析72 悬浮芯片分析系统食品中微生物的快速检测分析73 自动化革兰氏染色系统食品微生物检测过程中快速革兰氏染色分析74 快速致病菌免疫磁珠基因筛选系统食品中致病微生物的快速检测分析75 全自动致病菌酶标检测系统食品中致病微生物的快速检测分析76 全自动平板划线系统食品中微生物的快速划线、分离77 培养基自动制备分装仪食品微生物检测过程中培养基的快速分装78 商业无菌自动化检测系统食品检验过程中商业化无菌检测79 凝胶成像仪食品检验过程中DNA样品的成像分析80 倒置显微镜食品检验过程中细胞和微生物样本的观察81 抑菌圈测量仪食品中抗菌成分的测定82 核酸蛋白分析仪食品中核酸和蛋白质的定量分析83 二维电泳系统食品中过敏原如蛋白质的差异分析84 通用电泳仪食品中核酸和蛋白质的分离检测85 水平电泳槽食品中核酸的分离检测86 垂直电泳槽食品中蛋白质的分离检测87 核酸高压测序胶系统食品中核酸序列分析、蛋白质等电点分析88 脉冲场电泳系统食品中致病微生物遗传物质差异分析89 全自动毛细管电泳系统食品中蛋白质、游离脂肪酸、食品添加剂、农药残留、生物毒素和抗生素检测;糖类、维生素分析90 真空转印仪食品检测过程中DNA与蛋白质的凝胶转膜实验91 全凝胶洗脱仪食品检测过程中DNA与蛋白质的纯化92 微量过滤装置食品检测过程中DNA与蛋白质的纯化93 电穿孔仪食品检测过程中基因的转化94 遗传分析系统食品中转基因成分及致病菌的鉴定95 紫外交联仪食品检测过程中DNA膜杂交分析96 分子杂交炉食品检测过程中核酸的杂交分析97 射线计数仪食品中同位素的定量分析98 水分活度测定仪食品中水分含量的测定99 温湿度数据跟踪系统食品采样与检测过程中温度、湿度数据的跟踪监测100 全自动基因测序仪食品中DNA序列的高通量分析101 紫外可见分光光度计食品检测过程中紫外可见分光光度法的测定102 紫外透射率分析仪食品检测过程中光谱透射率的测定103 紫外分析仪食品检测过程中蛋白质和核酸的紫外定性分析104 多功能酶标仪食品检测过程中酶联免疫法的分析105 薄层色谱系统食品检测过程中样品的薄层点样、展开及成像106 激光共聚焦显微镜食品样本中微生物观察及切片样本观察;组织结构的精确描绘、定位(二维和三维)和上述结构的动态变化107 水分测定仪食品中水分含量测定108 酒精计食品样品中乙醇含量的测定109 纤维测定仪食品中纤维含量的测定110 示波极谱仪食品检验中元素的分析111 测汞仪食品中汞元素的分析112 荧光分光光度计食品中有害物质如3,4-苯并芘的测定113 氨基酸分析仪食品中氨基酸含量的测定114 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱食品中农兽药残留、违禁添加的化学药物及其他有机污染物的快速筛查检测;食品中真菌毒素的快速筛查检测;未知物的鉴定分析115 自动电位滴定仪食品中酸度、维生素C等的含量测定116 阿贝折射仪食品样品的折射率和相关物质的浓度测定117 数显电导仪食品样品电导率的测定118 X射线荧光光谱仪食品中有害元素的测定119 凝胶渗透色谱食品中农药残留、蛋白质和多糖多肽分子量测定以及样品前处理和净化120 液相色谱食品中营养成分或污染物等的分离测定121 气相色谱食品中挥发性营养成分或污染物等的分离测定122 气相顶空进样器食品中挥发性营养成分或污染物等的分离测定123 拉曼光谱仪食品中氨基酸、多肽、蛋白质、DNA、RNA和糖类分子的鉴定分析124 全自动定氮仪食品中蛋白质的定量分析125 原子吸收光谱仪食品中微量元素的测定126 脂肪酸分析仪食品中脂肪酸的测定127 电感耦合等离子体质谱食品中微量元素的测定128 气相色谱-质谱联用仪食品中挥发性成分或者污染物等的分离测定129 三重串联四极杆气质联用仪食品中挥发性成分或污染物等的分离测定130 串联四级杆液质联用仪食品中营养成分或污染物等的分离、测定131 液相色谱-离子肼质谱仪食品中营养成分或污染物等的分离、测定132 全波段显微化学图像系统食品中混合物、粒度、组分粒子的结块、多晶体、水合物及其他痕量污染物的分析133 离子色谱食品样品中阴离子与阳离子的测定134 原子荧光光谱仪食品样品中可形成氢化物微量元素的测定(重金属元素)135 电感耦合等离子体发射光谱仪食品中微量元素的测定136 锥入度测定仪食品样品中黏稠度的测定137 穿刺力测定仪食品包装瓶塞穿刺力值的测定138 热急变试验仪食品包装玻璃制品冷热急变的合格性实验、递增性、破坏性实验分析139 内压力试验仪食品包装瓶内压力值的测定140 内应力试验仪食品包装玻璃瓶内应力值的测定141 垂直轴偏差测试仪食品包装轴偏差的测定142 瓶底、壁厚测定仪食品包装瓶底、壁厚度的测定143 弧度测定仪食品包装瓶弧度的测定144 自动振筛仪食品包装玻璃瓶中特定元素含量的分析145 水平圆周转动振荡器食品包装瓶与盖的密封性分析146 落镖冲击试验机用于厚度小于1mm的食品包装用塑料薄膜或薄片50%破损时的冲击质量和能量分析147 耐破度仪食品包装材料耐破度分析148 涂层柔性和粘附力测试装置食品包装材料涂层柔性和粘附力分析149 内涂层连续性测试装置食品包装材料的内涂层连续性分析150 韧性实验装置食品包装材料的韧性分析151 氧化膜厚度测定仪食品包装材料的氧化膜厚度分析152 密度天平食品包装材料的密度值分析153 线热膨胀系数测定仪食品包装材料平均线热膨胀系数分析154 轧盖机食品包装瓶与盖的密封性分析155 折断力仪食品包装瓶的折断力分析156 扭矩仪瓶装食品瓶盖锁紧、开启扭矩值大小的分析157 平氏粘度计液态食品样品的粘度分析158 硬度计食品包装材料的硬度值分析159 落球冲击试验机食品包装材料聚乙烯、聚氯乙烯等固体复合硬片耐冲击实验分析160 陶瓷纤维马弗炉食品包装材料的炽灼残渣分析161 数字式紫外辐射照度计食品检测无菌环境紫外辐射强度分析162 万能材料试验机食品包装材料的剥离强度、撕拉强度分析163 湿透仪食品包装材料的水蒸气透过率分析164 气体透过仪食品包装材料氧气透过率分析165 热封仪食品包装材料封口性能分析,与撕拉力测试仪合用166 病理组织检查设备(包括全自动脱水机、全自动组织包埋机、病理组织切片机、自动封片机、全自动冷冻切片机、输出仪、全自动显微图像分析系统)食品毒理实验中组织病理学检查167 激光扫描共聚焦倒置显微镜食品毒理实验中细胞结构改变的观察168 全自动生化分析仪食品毒理实验过程中动物生化指标的检测分析169 实验动物生理检测系统食品毒理实验过程中动物心电、脑电、体温和血压等生理参数分析170 激光扫描细胞仪食品毒理实验过程中细胞内物质的定量分析及组织扫描171 流式细胞仪食品毒理实验过程中细胞快速分类分析172 全自动血细胞分析仪食品毒理实验过程中动物血相的快速分析173 活体生物成像系统食品毒理实验过程中活体生物体内成像分析174 小动物活体分子成像系统食品毒理实验过程中活体生物体内监控基因的表达分析175 活细胞工作站系统食品毒理实验过程中细胞和组织的全方位观察和记录176 血气分析仪食品毒理实验过程中动物的血气分析。
微生物实验室常用设备耗材
洁净室等级
洁净度级别
尘粒最大允许数/立方米 ≥0.5μm尘粒数
≥5μm尘粒数
微生物最大允许数浮游菌/立方米
沉降菌/皿
100级
3,500
0
5
1
10,000级
350,000
2,000
100
3
100,000级
3,500,000
20,000
500
10
300,000级
10,500,000
60,000
1000
高压蒸汽灭菌锅
影响湿热灭菌的因素:1、微生物种类和数量;2、灭菌物品特性;3、蒸汽的性质:饱和蒸汽热含量高、潜热大、穿透力强;湿饱和蒸汽热含量低、过热蒸汽穿透力差;4、灭菌时间等。
高压蒸汽灭菌锅
灭菌程序运行监控1、 关键参数应在验证确定的范围内:温度、压力、时间、湿度、灭菌气体浓度、辐照剂量等2、灭菌程序定期验证,时效不超过半年。3、灭菌设备或程序发生变更重新进行验证。灭菌保证1、灭菌效果与灭菌前产品污染程度及污染菌特性有关,把握微生物污染水平及污染菌耐受性,注意各个环节降低污染程度。2、灭菌冷却阶段防止已灭菌物品再次污染。3、适用生物指示剂、化学指示剂等监控灭菌结果。
微生物实验室常用设备耗材
国标常用设备耗材
金黄色葡萄球菌检验
沙门氏菌检验
一、环境及设备
环境及设备
酒精灯
移液枪
无菌室(接种室)
操作台
无菌室(接种间)操作要求
从包装中取出吸管时,吸管尖部不能触及试管或平皿边; 接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作,接种细菌活样品时,吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒; 接种环和针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝,必要时还要烧到针和环与杆的连接处,接种结核菌和烈性菌的接种环应在沸水中煮沸5min,再经火焰烧灼; 吸管吸取菌液或样品时,应用相应的橡皮头吸取。
微生物实验室常用玻璃器皿的准备(粮食微生物课件)
杯等
吸管
清洗方法
用酸溶液先 浸泡2-3h, 再用自来水
冲干净
用瓶刷或海绵 蘸上洗涤剂刷 洗后晾干,急 用时可放烘箱 烘干。
1. 使 用 后 立 即 投 入 盛 有 自来水的量筒或标本瓶 内,以免干燥后难以冲 洗干净。 2. 吸 过 含 有 微 生 物 培 养 物的吸管应立即投入灭 菌消毒液的量筒或标本 瓶内。 吸管内壁如果有油垢, 先浸泡再冲洗。
玻璃器皿的种类
二、杜氏试管
用途:观察细菌产气情况。(小试管规格6mm×36mm)
三、吸管
玻璃器皿的种类
二、玻璃器皿的清洗
1、清洗方法
新玻璃器皿
使用过的玻璃器皿
类型
试 管 、 培 养 皿 、吸 过 血 液 、 血 清 、 糖 溶 用 过 的 载 玻 片 与
三 角 烧 瓶 、 烧 液 或 染 料 溶 液 等 的 玻 璃 盖玻片
微生物的实验室的生物安全
1.规范食品微生物安全操作技术
① 样品容器可以是玻璃的,但最好是塑料制品 ② 运输样品时,应使用两层容器避免泄露或溢出 ③ 应采用机械移液器,禁止用口移,注射器不能用于吸取液体 ④ 在微生物操作中释放的大颗粒物质很容易在工作台台面及手上附着,应该带
一次性手套,最好每小时更换一次,实验中避免接触口、眼及脸部 ⑤ 鉴定可疑微生物时,各个防护设备应与生物安全柜及其他设备同时使用 ⑥ 工作结束,必须用有效的消毒剂处理工作区域
常用玻璃器皿的种类
玻璃器皿的种类 一、试管
种类:普通试管、具支试管、离心式管
规格:普通试管以外径(mm)×长度(mm)表 示,如15×150、18×180、20×200等。离心试 管以容量毫升数表示。
玻璃器皿的种类
主要用途: (1)盛取液体或固体试剂 (2)加热少量固体或液体 (3)制取少量气体反应器 (4)收集少量气体 (5)溶解少量气体、液体或固体的溶质。 (6)离心时作为盛装的容器 (7)用作少量试剂的反应容器,在常温或加热时使用
2024年微生物实验室管理制度
5.所有检测工作均应按检验规定进行,不得擅自变更以免发生意外事故。
6.凡使用有毒、刺激性、腐蚀性试剂,或操作中产生有毒、有刺激性物质时,应在通风橱内进行,并按规定戴好防护眼镜、及浸塑手套等防护用具。操作结束后,要及时妥善处理现场。
4.称取药品试剂应按操作规范进行,用后盖好,必要时可封口或黑纸包裹,不使用过期或变质药品。
四、玻璃器皿管理、使用制度
1.根据测试项目的要求,申报玻璃仪器的采购计划、详细注明规格、产地、数量、要求,硬质中性玻璃仪器应经计量验证合格。
2.大型器皿建立账目,每年清查一次,一般低值易耗器皿损坏后随时填写损耗登记清单。
二、复核制度
1.化验员将检验记录填写完毕后由部门主管复核。未经复核签名的记录处于未完成状态,不能进入批记录。检验员对此负责。
2.复核依据为该品种或该项目检验规程。复核内容为检验项目完整、不缺项;书写工整、正确,改错正确(必要时加以说明);检验依据与检验指令单一致;计算公式、计算数值均正确;实验记录填写完整、正确。
2.实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求,保证准确可靠,凡计量器具须经计量部门检定合格方能使用。
3.实验室仪器安放合理,贵重仪器有专人保管,建立仪器档案,并备有操作方法,保养、维修、说明书及使用登记本,做到经常维护、保养和检查,精密仪器不得随意移动,若有损坏需要修理时,不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员,由经理同意填报修理申请、送仪器维修部门。
3.玻璃器皿使用前应除去污垢,并用清洁液或2%稀盐酸溶液浸泡24 h后,用清水冲洗干净备用。
4.器皿使用后随时清洗,染菌后应严格高压灭菌,不得乱弃乱扔。
(高考生物)食品检验技术(微生物部分)教案
(生物科技行业)食品查验技术 (微生物部分 )教课设计教课设计纸讲课时间第一教课周讲课节数 3 课时教课目标:认识食品卫生标准的内容;认识食品微生物查验的意义;掌握食品微生物查验的范围;掌握食品卫生标准中的微生物指标;认识食品微生物查验方法的新进展;掌握常用玻璃器清洗方法和灭菌方法认识和掌握微生物查验常用的仪器及使用注意事项讲课章节:第一章食品中的微生物及其查验第二章食品微生物查验的基本条件与设施第三章培育基和实验基本操作技术:第一节培育基重点与难点:重点食品微生物查验的范围,食品卫生标准中的微生物指标。
微生物查验常用仪器的使用方法,常用玻璃器清洗方法和灭菌技术。
难点如何正确使用微生物查验所用的仪器,如何利用所学知识建设食品微生物查验新方法的掌握和应用。
讲课内容:第一章食品中的微生物及其查验1 、食品卫生标准的内容2 、食品微生物查验的意义3 、食品微生物查验的范围4、食品卫生标准中的微生物指标5、食品微生物查验方法的新进展第二章食品微生物查验常用仪器、玻璃器皿、消毒与灭菌方法一、常用仪器及其使用显微镜;冰箱;超净工作台、杀菌锅;离心计;水浴锅、培育箱;烘箱或干燥箱;匀质器二、常用玻璃仪器及器具三、玻璃器皿的冲洗和灭菌(一 )、新购的玻璃器皿(二 )、用过的玻璃器皿(三)、玻璃器械的灭菌第一节培育基一、培育基中的主要成分及其作用(一)、营养物质(二)、水作业: 1、食品的卫生标准内容包含哪些?2、对食品进行微生物查验拥有何意义?3、食品微生物查验的范围包含哪些?4、食品卫生标准中的微生物指标有哪些?(1)如何正确使用超净台 ?(2)简述手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法(3)在微生物实验室中如何配置培育箱,使用中要注意哪些问题 ?(4)如何正确使用干热灭菌方法对玻璃器械进行灭菌?(5)在微生物实验室中如何配置水浴锅,使用中要注意哪些问题 ?(6)如何进行玻璃器皿的冲洗和灭菌?教课方法:面授课后剖析:教课设计纸讲课时间第二教课周讲课节数 3 课时教课目标:认识培育基的主要构成、作用和培育基的分类;掌握培育基的制备技术;掌握无菌技术的观点、要求;掌握微生物的接种与分别技术;认识微生物的培育方法;认识微生物生长现象的察看及记录;掌握细菌生化试验观点,生化试验的原理、试验方法和试验结果的察看记录。
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隔水式培养箱
隔水式培养箱数 字控温,不锈钢内胆, 俗称水夹套培养箱。 温度均匀,断电后仍 能保持较长时间恒温。
电热恒温培养箱
2、生化培养箱
3、二氧化碳培养箱 、
培养箱的配置和使用
配置: ( 配置:22(℃)、30(℃)、37(℃)培养箱各一个 ( ( 使用注意事项: 使用注意事项: (1)箱内不能放入过热或过冷的物品 箱内不能放入过热或过冷的物品, (1)箱内不能放入过热或过冷的物品,取放物品时应快速 进行并做到随手关闭箱门。 进行并做到随手关闭箱门。 (2)内放一杯水 以保持湿度。 内放一杯水, (2)内放一杯水,以保持湿度。 (3)培养物不能放在最底层 也不得放置过于拥挤。 培养物不能放在最底层, (3)培养物不能放在最底层,也不得放置过于拥挤。 (4)每月消毒一次 先用3%的来苏尔液涂布消毒, 每月消毒一次, 3%的来苏尔液涂布消毒 (4)每月消毒一次,先用3%的来苏尔液涂布消毒,再用清 水擦净。 水擦净。 (5)不得当烘箱使用 不得当烘箱使用。 (5)不得当烘箱使用。
(五)、离心机 )、离心机 离心机的类型: 离心机的类型: 普通离心机 高速离心机 超速离心机
类型
普通离心机
高速离心机 25000 89000 固液沉淀分离
超速离心机 可达75000以上 可达510000以上 密度梯度区带分离或差速沉 降分离 角式、外摆式、区带转子等
最大转速(r/min) 6000 最大RCF(g) 6000 分离形式 转子 固液沉淀
一、常用仪器及其使用
显微镜 冰箱 超净工作台、 超净工作台、杀菌锅 离心机 水浴锅、 水浴锅、培养箱 烘箱或干燥
普通显微镜的保养
1、观察完后,移去观察的载玻片标本。 观察完后,移去观察的载玻片标本。 观察完后 2、用过油浸镜的,应先用擦镜纸将镜头上的油擦去, 、用过油浸镜的,应先用擦镜纸将镜头上的油擦去, 再用擦镜纸蘸着擦镜液擦拭2—3次 再用擦镜纸蘸着擦镜液擦拭2—3次,最后再用擦 镜纸将二擦镜液苯擦去。 镜纸将二擦镜液苯擦去。 3、转动物镜转换器,放在低倍镜的位置。 、转动物镜转换器,放在低倍镜的位置。 4、将镜身下降到最低位置,调节好镜台上标本移动 、将镜身下降到最低位置, 器的位置,罩上防尘套。 器的位置,罩上防尘套。
数字显微镜
(二)、培养箱 )、培养箱
1. 智能隔水恒温培养箱 2. 隔水培养箱 3. 电热培养箱 4. 生化培养箱
电热恒温培养箱 1、普通恒温培养箱 、
卧式恒温振荡培养箱
智能培养箱
微电脑智能化双目控温系 统具有控温保护、准确、 可靠。工作温度任意调节 并具有偏差报警功能,镜 面不锈钢内胆,外门内层 用一层门,观察箱内情况 时不影响箱内温度。9000 系列隔水式加热方式,具 有温度均匀且断电后仍能 保持较长时间恒温。
玻璃器材的干热灭菌方法
(1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后,用报纸 将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后, 将培养皿 包好,或装入特制的铁筒中。 包好,或装入特制的铁筒中。 (2)将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中,彼此间留 将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中, 将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中 有一定的空隙以便流通空气。 有一定的空隙以便流通空气。 (3)关紧箱门,打开排气孔接上电源。 关紧箱门, 关紧箱门 打开排气孔接上电源。 (4)待箱内空气排出到一定程度时,关闭上排气孔, 待箱内空气排出到一定程度时, 待箱内空气排出到一定程度时 关闭上排气孔, 继续加热至一定温度后, 继续加热至一定温度后,调节温度控制旋钮固定 温度, 小时即可。 温度,在160℃—165℃保持 小时即可。 ℃ ℃保持2小时即可 (5)待自然降温冷却后 ℃以下 才能开门取出玻璃 待自然降温冷却后(60℃以下)才能开门取出玻璃 待自然降温冷却后 器皿。
台式高速冷冻离心机
差速沉降(沉淀) 差速沉降(沉淀)法:
密度梯度离心法: 密度梯度离心法:
转子
许多离心机可以配用不同大小的离心管,只需要改变转子或使用一个与不同的吊桶/ 适配器相配的转子。 1.水平转子:盛样品的离心管放在吊桶内,以转子的加速度运转。水平转子用 .水平转子: 于低速离心机,其主要缺陷是延长了沉淀的路径。同时,减速过程中产生的对流 会引起沉淀物的重新悬浮。 2.角式转子:许多高速离心机及微量离心机安装。由于沉降路径短,沉淀颗粒 .角式转子: 时角式转子比水平转子的效率更高。 3.垂直管转子:用于高速及超高速离心机进行等密度梯度离心时。这种转子在 .垂直管转子: 沉淀没有形成之前不能用来收集悬浮液中的颗粒。
使用高压蒸汽杀菌锅的注意事项
A:为避免烫伤,只有当温度降低到70℃以下时放 :为避免烫伤,只有当温度降低到 ℃ 可小心的打开消毒锅门。 可小心的打开消毒锅门。 B:为避免消毒锅冷却后消毒室内产生负压而打不 : 开消毒锅门,所以当消毒室温度低于70℃ 开消毒锅门,所以当消毒室温度低于 ℃时就可 慢慢把门打开。 慢慢把门打开。 C:根据消毒物品选择排气方式: :根据消毒物品选择排气方式: 如有液体( (1).如有液体(营养液等)请选择慢排。 ) 如有液体 营养液等)请选择慢排。 如只有废品等可选择快排。 (2).如只有废品等可选择快排。 ) 如只有废品等可选择快排
自动细菌菌落测定分析仪
菌落计数器
快速自动菌数导电测定仪 1、可直接测读菌体本身在 培养液中造成的导电度变化, 或利用菌体在代谢过程中的 产物所造成的导电度变化, 快速测定样品中细菌含量数 目。 2 2、适用于各种食品,制药, 石化工厂的微生物品质管理, 取代传统方法将侦测时间由 3-5天减到几个小时。亦可 用于做样品的抗菌性试验。
(三)匀质器
匀浆机
无菌均质器 高速匀浆机
无菌均质器
该均质器广泛用于动物组织、生物样品、 食品、化妆品的均质处理,特别适合于 微生物检测样本的制备,具有均质柔和、 样品无污染、无损伤、不升温、不需灭 菌处理、不需洗刷器皿的特点,样本装 在特制的一次性无菌均质袋中,不与仪 器接触,预防交叉污染。
(四)、超净工作台 )、超净工作台
手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法
)、关好排水阀门放入清水至标度为止 (1)、关好排水阀门放入清水至标度为止 )、关好排水阀门放入清水至标度为止。 )、将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌 (2)、将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌 )、 锅中,关上器盖。 锅中,关上器盖。 )、通电加温 (3)、通电加温,同时打开排气活门,排尽锅内 )、通电加温,同时打开排气活门, 的空气,再关闭活门。 的空气,再关闭活门。 (4)、当达到所需温度时开始计时,并在此温度 当达到所需温度时开始计时, 当达到所需温度时开始计时 下保持所需的时间。 下保持所需的时间。
三大类 型: 侧流式、 侧流式、直流式和外流式
垂直流超净工作台
水平单向流洁净工作台
超净台的使用和注意事项
1、使用前先打开紫外灯照射,紫外线照射时间40~60分钟; 使用前先打开紫外灯照射,紫外线照射时间40~60分钟; 40~60分钟 使用中,有机玻璃罩受到污染,严禁用酒精棉球擦拭, 2、使用中,有机玻璃罩受到污染,严禁用酒精棉球擦拭, 请用含水棉布檫拭; 请用含水棉布檫拭; 请保持超净台整洁,不要堆积杂物; 3、请保持超净台整洁,不要堆积杂物; 使用完毕,勿忘关闭煤气开关或酒精灯; 4、使用完毕,勿忘关闭煤气开关或酒精灯; 请做好使用记录。 5、请做好使用记录。 如遇故障,除记录在册外,还应及时与有关人员联系, 6、如遇故障,除记录在册外,还应及时与有关人员联系, 尽早排除故障。 尽早排除故障。 学期开始做无菌试验一次,以保证净化台正常使用。 7、学期开始做无菌试验一次,以保证净化台正常使用。平 时可根据情况,定期做无菌试验, 时可根据情况,定期做无菌试验,以测定净化台是否符 合无菌要求。 合无菌要求。
)、稍微打开一点排气活门 (5)、稍微打开一点排气活门,使锅内 )、稍微打开一点排气活门, 蒸气缓慢排除。 蒸气缓慢排除 (6)、当压力表指针降到零、锅内蒸气 当压力表指针降到零、 当压力表指针降到零 完全排尽时,立即打开锅盖取出物品。 完全排尽时,立即打开锅盖取出物品。 )、最后将高压灭菌器内的剩余水排 (7)、最后将高压灭菌器内的剩余水排 )、 出。
2、高压灭菌锅 、
用途:培养基、生理盐水、废弃物、采样 用途:培养基、生理盐水、废弃物、 纱布、衣物的灭菌。 器、纱布、衣物的灭菌。 种类:手提式、立式、卧式杀菌锅 种类:手提式、立式、
不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器(电热) 全自动高压灭菌器
大型高压蒸汽杀菌锅的基本操作方法
1. 2. 3. 4. 5. 放干消毒锅内的剩余水,加入纯净水至最高水位; 放干消毒锅内的剩余水,加入纯净水至最高水位; 放入物品,关上消毒锅门;冷凝阀开1圈 放入物品,关上消毒锅门;冷凝阀开 圈;消毒钮顺时 针拨至“ 针拨至“关”; 选择所需的杀菌压力0.07、0.11或0.14Mpa后;开启 选择所需的杀菌压力 、 或 后 电源; 电源; 当温度达到100℃左右时就可将消毒钮顺时针拨至 当温度达到 ℃ 消毒”及冷凝阀关至刚好有冷凝水和蒸气冒出为止; “消毒”及冷凝阀关至刚好有冷凝水和蒸气冒出为止; 当消毒室温度达到所需温度时开始计时, 当消毒室温度达到所需温度时开始计时,到时间后关 闸。