体外扩增造血干细胞的基础研究郑大中科博生

体外扩增造血干细胞的基础研究郑大中科博生
具中科博生研究表明，近年来,不同实验小组采用不同来源（包括骨髓、外周血和脐血)的造血干/祖细胞在不同细胞因子组合下的扩增进行了大量的实验研究。

结果表明,骨髓或外周血来源的LTC-IC在SCF、IL-3和IL-6因子的支持下只能维持或少量扩增;相反,脐血或胎肝来源的 CD34细胞在含有FL和（或）Tpo 的培养基中可获得几倍的扩增;Petzer 等(1996）研究表明,在SCF、IL-3、IL-6和FL因子组合的支持下,成人骨髓来源的CD34"CD38-细胞可扩增出约50倍的LTC。

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当然,由于扩增的CD34+细胞的来源和亚群不同,以及细胞动力学和检测方法的区别,很难对不同研究小组的扩增策略和效果进行直接的比较。

造血生长因子是否能启动造血干细胞的细胞周期运行,以及这些细胞的增殖是否直接与细胞分化相关尚不得而知。

理论上讲,细胞因子在体外刺激CD34+细胞不会影响干细胞的自我复制潜能,因而就不会扩增这些细胞,而是刺激那些造血干细胞分化的更成熟的造血细胞的大量增殖。

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研究表明,原始的造血干细的对细胞因子的反应取决于细胞所处的细胞周期状态。

经动员的外周血CD34+细煦在 SCF、IL3和FL组合下
培养48h 后观察到,停留在G。

期的细胞保留了在NOD/SCID小鼠体内重建造血的能力,而那些由 G期进人G,期尚未进行细购分裂的细胞则失去了重建造血的潜能。

此外,有实验证明,端粒酶活性较高的,（即更静止的）造血干细胞具有更强的造血重建潜能。

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为了证明与新鲜分离的 CD34"细胞相比,体外扩增的 CD34细胞是否失去了造血干细胞原有的长期稳定植入能力,人们建立了人和动物的体内重建模型。

研究显示,尽管小鼠造血干/祖细胞在SCF、IL-3、IL6、IL-11 因子组合条件下能维持较短期的造血重建能力,但不能长期植入,提示 IL.3和1L1 的加入减弱了体外扩增的造血干/祖细胞的长期造血潜能。

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实验显示,SCF、II-3、IL-6组合使体外扩增的经动员的恒河猴外周血造血干/祖细胞失去了再植能力。

其他报道表明,在一定的造血因子组合下(大量IL1、1L-3 除外),体外扩增的造血干/祖细胞移植后可获得长期植入。

基于上述研究结果,1L1和(或）IL-3在临床体外扩增造血干/祖细胞的应用价值需要深入探讨。

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人们还观察到,随着体外培养时间的延长,扩增后的造血干/祖细胞的再植能力有所下降,因此,体外扩增时间的把握也十分重要,通常认为,体外培养6～10d 是较为合适的时间,最长不超过14d。

中科博生期待大家一起探讨学习。