当归检验标准操作规程

原药材检验标准操作规程
目的：建立一个中药饮片原药材检验标准操作程序，确保检验结果准确可靠。

适用范围：中药原药材。

责任人：质量保证部主任、质量控制部主任、化验员。

标准来源：《中华人民共和国药典》2010年版一部、《安徽省中药饮片炮制规范》。

内容：
1、性状：
取本品适量，放入白瓷盘中，用眼观察，可见以下性状特征：
本品略呈圆柱形，下部有支根3~5条或更多，长15~25cm。

表面黄棕色至棕褐色，具纵皱纹及横长皮孔样突起。

根头（归头）直径1.5~4cm，具环纹，上端圆钝，有紫色或黄绿色的茎和叶鞘的残基；主根（归身）表面凹凸不平；支根（归尾）直径0.3~1cm，上粗下细，多扭曲，有少数须根痕。

质柔韧，断面黄白色或淡黄棕色，皮部厚，有裂隙和多数棕色点状分泌腔，木部色较淡，形成层环黄棕色。

有浓郁的香气，味甘、辛、微苦。

柴性大、干枯无油或断面呈绿褐色者不可供药用。

2、鉴别
主要使用仪器：电子分析天平、电子显微镜、紫外光灯等。

2.1显微鉴别：
2.1.1 试液配制
2.1.1.1 水合氯醛试液：取水合氯醛50克，加水15毫升与甘油10毫升使溶解，即得。

2.1.1.2 甘油醋酸试液：取甘油、醋酸及水各等份混匀，即得。

2.1.1.3 稀甘油：取甘油33毫升，加水稀释至100毫升，再加樟脑一小块或液化苯酚1滴，即得。

2.1.2 供试品制备
2.1.2.1 取本品10g，研细后取少量粉末，置载玻片上，滴加水合氯醛搅拌均匀，置酒精灯上加热透化；加稀甘油数滴，搅拌均匀，分装2~3片，加盖玻片，即得。

2.1.2.2 取研细的粉末少量置载玻片上，加甘油醋酸试液，搅拌均匀，加盖玻片，即得。

2.1.2.3取研细后取少量粉末，置载玻片上，滴加水搅拌均匀，同时滴加少许稀甘油，加盖玻片，即得。

2.1.2.4横切面制备：取供试品欲观察部位，经软化处理后，用徒手切片法切成10~20μm的薄片，选取平整的薄片置载玻片上，滴加水合氯醛试液后，在酒精灯上加热透化，并滴加稀甘油，盖上盖玻片。

2.1.3 置显微镜下观察
可见本品横切面：木栓层为数列细胞。

栓内层窄，有少数油室。

韧皮部宽广，多裂隙，油室及油管类圆形，直径25~160μm，外侧较大，向内渐小，周围分泌细胞6~9个。

形成层成环。

木质部射线宽3~5列细胞；导管单个散在或2~3个相聚，成放射状排列；薄壁细胞含淀粉粒。

粉末淡黄棕色。

韧皮薄壁细胞纺锤形，壁略厚，表面有极微细的斜向交错纹理，有时可见菲薄的横隔。

梯纹导管及网纹导管多见。

直径约至80μm。

有时可见油室碎片。

2.2薄层鉴别
2.2.1取本品粉末0.5g ，加乙醚20ml ，超声处理10 分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml 使溶解，作为供试品溶液。

另取当归对照药材0.5g ，同法制成对照药材溶液。

照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》附录ⅥB) 试验，吸取上述两种溶液各10μl ，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷－乙酸乙
酯(4∶1) 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。

供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

2.2.2取本品粉末3g ，加1% 碳酸氢钠溶液50ml ，超声处理10分钟，离心，取上清液用稀盐酸调节pH 值至2 ～3 ，用乙醚提取2次，每次20ml ，合并醚液，挥干，残渣加甲醇1ml 使溶解，作为供试品溶液。

另取阿魏酸对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg 的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》附录ⅥB) 试验，吸取上述两种溶液各10μl ，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以苯-乙酸乙酯-甲酸(4∶1∶0.1) 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm) 下检视。

供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

3、检查
主要使用仪器：电子分析天平、电热恒温干燥箱、马弗炉、坩埚等。

3.1水分
取供试品适量，适当粉碎，精密称定，置500ml的短颈圆底烧瓶中，加甲苯约200ml，并加入玻璃珠数粒，将仪器各部分连接，自冷凝管顶端加入甲苯，至充满水分测定管的狭细部分。

将烧瓶置电热套中缓缓加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟馏出2滴。

待水分完全馏出，即测定管刻度部分的水量不再增加时，将冷凝管内部先用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸馏5分钟，放冷至室温，拆卸装置，如有水黏附在测定管的管壁上，可用蘸有甲苯的铜丝推下，放置，使水分与甲苯完全分离（可加亚甲蓝粉末少量，使水染成蓝色，以便分离观察）。

检读水量，按下式计算即得。

V
供试品中的含水量（%）＝────────×100％
W
W 样品重（g）
V 水体积（ml）
本品含水量不得过15.0%。

3.2总灰分
取供试品适量，粉碎使能通过二号筛混合均匀后，取3～5g，置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量（准确至0.01g），缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500~600℃，使完全灰化并至恒重。

根据残渣重量，按下式计算即得。

W2－W1
供试品中总灰分的含量（％）＝────────×100％
W
W1坩埚重（g）
W 样品重（g）
W2炽灼残渣与坩埚重之和（g）
本品总灰分不得过7.0％。

3.3酸不溶灰分
取上项所得的灰分，在坩埚中小心加入稀盐酸约10ml，用表面皿覆盖坩埚，置水浴上加热10分钟，表面皿用热水5ml冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。

滤渣连同滤纸移置同一坩埚中，干燥，炽灼至恒重。

根据残渣重量，按下式计算即得。

W2－W1
供试品中酸不溶灰分的含量（％）＝────────×100％
W
W1坩埚重（g）
W 样品重（g）
W2炽灼后残渣与坩埚重之和（g）
本品酸不溶灰分不得过2.0％。

3.4二氧化硫残留量
按中国药典2010 年版第一增补本附录二氧化硫残留量测定法测定，取本品细粉10g，精密称定，置于两颈圆底烧瓶中，加水300ml—400 ml（应加水至没过氮气导气管的下端），取6mol/L盐酸10ml加入带刻度的分液漏斗中连接分液漏斗，并导入氮气至瓶底，。

锥形瓶内加水125ml和淀粉指示液1 ml作为吸收液，置于磁力搅拌器上不断搅拌。

连接回流冷凝管，在冷凝管上部连接导气管，
将导气管插入250ml锥形瓶底部，开通氮气，调节氮气流量为0.2L/min，打开带刻度的分液漏斗的活塞，使盐酸流入烧瓶。

加热圆底烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸约3分钟后开始用0.01mol/l, 的碘滴定液滴定，吸收液置于磁力搅拌器上不断搅拌，至吸收液显蓝色或蓝紫色，持续30秒不消失，并将滴定的结果用空白校正，每1毫升的碘滴定液(0.01mol/l)相当于0.6406mg的二氧化硫。

本品二氧化硫量不得过150mg/kg。

4、浸出物
主要使用仪器：电子分析天平、电热恒温干燥箱、水浴锅、蒸发皿等。

取供试品适量，粉碎使能通过二号筛，并混合均匀后，取约2～4g，精密称定，置100～250ml的锥形瓶中，精密加70%乙醇50～100ml，密塞，称定重量，静置1小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1小时。

放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。

以干燥品按下式计算即得。

（W2－W1）×2
供试品中醇溶性浸出物的含量（%）＝────────×100％
W×（1－W4）
W 样品重（g）
W1蒸发皿重（g）
W2残渣与蒸发皿重之和（g）
W4 供试品的含水量（%）。

本品浸出物不得少于45.0%。

5、含量测定
主要使用仪器：电子分析天平、挥发油测定器、高效液相色谱仪等。

照挥发油测定法（《中华人民共和国药典》附录ⅩD）测定。

5.1.1仪器装置A为1000ml(或500ml、2000ml)的硬质圆底烧瓶，上接挥发油测定器B，B的上端连接回流冷凝管C。

以上各部均用玻璃磨口连接。

测定器
B应具有0.1ml的刻度（图如《中国药典》2005版《中华人民共和国药典》附录57页ⅩD挥法油测定法项下所示）。

全部仪器应充分洗净，并检查接合部分是否严密，以防挥发油逸出。

注：装置中挥发油测定器的支管分岔处应与基准线平行。

5.1.2测定法
取水约300ml与玻璃珠数粒，置烧瓶中，连接挥发油测定器。

自测定器上端加水使充满刻度部分，并溢流入烧瓶时为止，再用移液管加入二甲苯1ml，然后连接回流冷凝管。

将烧瓶内容物加热至沸腾，并继续蒸馏，其速度以保持冷凝管的中部呈冷却状态为度。

30分钟后，停止加热，放置15分钟以上，读取二甲苯的容积。

取供试品适量(约相当于含挥发油0.5～1.0ml)，称定重量(准确至0.01g)，置烧瓶中，加水300～500ml（或适量）与玻璃珠数粒，振摇混合后，连接挥发油测定器与回流冷凝管。

自冷凝管上端加水使充满挥发油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶时为止。

置电热套中或用其他适宜方法缓缓加热至沸，并保持微沸约5小时，至测定器中油量不再增加，停止加热，放置片刻，开启测定器下端的活塞，将水缓缓放出，至油层上端到达刻度0线上面5mm处为止。

放置1小时以上，再开启活塞使油层下降至其上端恰与刻度0线平齐，自油层量中减去二甲苯量，即为挥发油量，按下式计算即得。

V－V1
供试品中挥发油的含量（%）＝────────—×100％
G
V 二甲苯和挥发油体积(ml)
V1二甲苯蒸出体积(ml)
G 供试品重量(g)
本品含挥发油不得少于0.4%（ml/g）。

5.2照高效液相色谱法（《中华人民共和国药典》附录ⅥD）测定。

5.2.1色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈—0.085% 磷酸溶液（17∶83）为流动相；检测波长为316nm ；柱温35 ℃。

理论板数按阿魏酸峰计算应不低于5000 。

5.2.2对照品溶液的制备精密称取阿魏酸对照品适量，置棕色量瓶中，加70% 甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取3ml ，置50ml 棕色量瓶中，加70% 甲醇至刻度，摇匀，即得（每1ml中含阿魏酸12μg ）。

5.2.3供试品溶液的制备取本品粉末（过三号筛）0.2g ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇20ml ，密塞，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用70% 甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液滤过，取续滤液，即得。

5.2.4测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl ，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品以干燥品计算即得含量：
A x×C R×V x
供试品的含量（％）＝────────——×100％
A R×G×（1－W）×106
A x 供试品的峰面积或峰高。

V x 供试品的体积(ml)
C R 对照品的浓度
A R 对照品的峰面积或峰高
G 供试品的重量(g)
W 供试品的含水量(%)
本品含阿魏酸（C 10 H 10 O 4）不得少于0.050% 。