12-2微生物的培养技术及应用【新人教生物一轮复习课前自主预习案】

第十二单元生物技术与工程
课前自主预习案2 微生物的培养技术及应用素能目标★考向导航
基础梳理——系统化
知识点一微生物的基本培养技术
1．培养基
2．无菌技术
3．微生物的纯培养
（1）概念：由繁殖所获得的微生物群体是纯培养物，获得的过程就是纯培养。

（2）过程：包括、灭菌、接种、分离和培养等步骤。

（3）常用方法：法和法。

（4）实例——酵母菌的纯培养
知识点二微生物的选择培养和计数
一、微生物的选择培养
1．实验室中微生物筛选的原理
人为提供有利于生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时其他微生物的生长。

2．稀释涂布平板法
将菌液进行一系列的梯度稀释后，将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养。

（1）系列稀释操作
移液管需要经过灭菌。

操作时，试管口和移液管应离火焰1～2 cm处。

操作过程如下：
（2）涂布平板操作
）培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板，放入
中培养1～2 d。

二、微生物的数量测定
1．稀释涂布平板法
（1）计数原理：当样品的时，培养基表面生长的一个，来源于样品稀释液中的一个活菌。

通过统计平板上的，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

（2）计数标准：为了保证结果准确，一般选择菌落数为的平板进行计数。

（3）计数方法：通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为、适于计数的平板。

在下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出。

（4）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，统计结果一般用来表示。

2．显微镜直接计数法
（1）计数原理：利用特定的或，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。

（2）优点：是一种常用的、的测定微生物数量的方法。

（3）缺点：统计的结果一般是死菌数和活菌数的总和。

三、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
基能过关——问题化
一、判一判（判断正误并找到课本原话）
（一）微生物的基本培养技术
1．微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼可见的菌落。

（选择性必修3 P9正文）（）
2．在培养霉菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性。

（选择性必修3 P10正文）（）3．获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。

（选择性必修3 P10正文）（）4．为了避免周围环境中微生物的污染，接种过程中许多操作都应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行。

（选择性必修3 P10正文）（）
5．由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。

获得纯培养物的过程就是纯培养。

（选择性必修3 P11正文）（）
6．倒平板过程中，将培养基倒入培养皿并盖上皿盖后，立即将培养皿倒置。

（选择性必修3 P12探究·实践）（）
7．培养酵母菌时，可将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入适宜温度的恒温培养箱中培养24～48 h。

（选择性必修3 P12探究·实践）（）
（二）微生物的选择培养和计数
1．菌液的稀释度足够高时，培养基表面会获得单菌落。

（选择性必修3 P18正文）（）2．适于平板计数的菌落数范围为40～300。

（选择性必修3 P18正文）（）
3．稀释涂布平板法计数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。

（选择性必修3 P18
正文）（）
4．稀释涂布平板法计数时，平板上的一个菌落就是一个细菌。

（选择性必修3 P20练习与应用2）（）
二、连一连
1．无菌技术的主要方法及适用对象
2．以下几种选择培养基和鉴别培养基及其应用
三、议一议
【教材易漏拾遗】
1．[选择性必修3 P10正文拓展]消毒和灭菌都能杀死所有的微生物吗？
2．[选择性必修3 P12“探究·实践”]延伸思考：
（1）无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么作用？
（2）为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
（3）在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？
（4）平板划线法在做第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？目的是什么？
3．[选择性必修3 P17图1－7发掘]
（1）涂布平板的所有操作为什么都应在火焰附近进行？
（2）如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析：
①获得图A效果和图B效果的接种方法分别是什么？
②某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成了一片，最可能的原因是什么？应当怎样操作才可避免此种现象？
4．[选择性必修3 P18探究·实践拓展]
（1）分离分解尿素的细菌的选择培养基配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？
（2）为什么只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长？
5．[选择性必修3 P18正文发掘]
（1）为什么测定活菌的数量不能用平板划线法？
（2）利用稀释涂布平板法纯化分解尿素的细菌时，经培养后发现培养基上出现多种菌
落，可能的原因有哪些？
第十二单元生物技术与工程
课前自主预习案2 微生物的培养技术及应用
基础梳理——系统化
【知识点一】
1．氮源无机盐液体培养基鉴别培养基pH氧气
2．化学药剂消毒法干热灭菌湿热灭菌外来杂菌
3．(1)单一个体纯培养物(2)配制培养基(3)平板划线稀释涂布平板(4)高压蒸汽灭菌平板划线倒置未接种
【知识点二】
一、
1．目的菌抑制或阻止
2．(2)培养基表面酒精均匀(3)倒置恒温培养箱
二、
1．(1)稀释度足够高单菌落菌落数(2)30～300
(3)30～300同一稀释度平均值(4)菌落数
2．(1)细菌计数板血细胞计数板(2)快速直观
三、脲酶尿素
基能过关——问题化
一、判一判
(一)微生物的基本培养技术
1．√ 2.× 3.√ 4.√ 5.√ 6.×7.√
(二)微生物的选择培养和计数
1．√ 2.× 3.√ 4.×
二、连一连
1.
2.
三、议一议
1．提示：灭菌可杀死处理材料中的全部微生物(包括芽孢和孢子)，而消毒仅杀死部分微生物(一般不包括芽孢和孢子)。

2．提示：(1)还能有效避免操作者自身被微生物感染。

(2)通过灼烧灭菌，可以防止瓶口的微生物污染培养基。

平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面湿度也比较高，将平板倒置，既可以防止培养基表面的水分过快地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。

(3)不能。

因为空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生，可能会造成污染。

(4)划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。

这样做的目的是将聚集的菌种逐步稀释分散以便获得单个菌落。

3．提示：(1)在酒精灯火焰旁操作可以保证无菌，防止杂菌污染。

(2)①获得图A效果的接种方法为稀释涂布平板法，获得图B效果的接种方法为平板划线法。

②最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灼烧灭菌；采取的措施是增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灼烧灭菌。

4．提示：(1)碳源是葡萄糖，氮源是尿素。

(2)分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可将尿素分解成氨，从而为微生物提供氮源。

5．提示：(1)由于在所划的线中，一般只有最后一次划线的末端才会形成只由一个细菌形成的菌落，而其他一些菌落往往由两个细菌或多个细菌繁殖而成，而在计数时一个菌落对应着一个细菌，这样在划线所得的平板中，菌落数目远低于活菌的实际数值，所以不能用平板划线法测定活菌数量。

(2)出现杂菌污染的可能原因有：培养基制备过程中被杂菌污染；接种过程中，无菌操作不符合要求；系列稀释时，无菌操作不符合要求等。