第五章 微生物的营养
微生物学第五章 微生物营养与生长.
3. 在实验室中,常用固体平板划线法,稀释涂布平板法或稀释 倾注平板法分离、纯化微生物。
(1) 固体平板划线法, 又称稀释划线法
(plate streaking or dilution streaking): 微生物从接种环上 脱落到琼脂表面, 将接种环灼烧后以 接种区为菌源再次 划线,依次重复3次, 随着划线的进行, 所划之处留下的菌 体细胞量越来越少, 最终留下单个分散 的细胞,通过繁殖 形成单克隆。
远藤氏培养基
碱性复红、亚 硫酸钠
伊红美蓝培养基 伊红、美蓝
酸、乙醛 酸
带金属光泽 深红色菌落
鉴别水中大肠菌群
(2) 选择培养基:根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、 物理因素的抗性而设计。
用于选择培养基的若干抑制剂选择对象一般细菌
G+细菌 G-细菌
乳酸菌
肠道细菌 微球菌
抑制剂及其用量(ug/mL)
(2) 培养基中各营养物之间的浓度配比直接影响微生物的生长繁 殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。 C/N比指的是微生物培养基中所含碳原子的摩尔数与氮原子的摩 尔数之比。
2. 各原料之间不发生化学反应,理化性质相对稳定。
3. 黏度适中,具有适当渗透压。
4. 适宜的pH和氧化还原电势。
1. 按组成的化学成分是否清楚分:
(1) 合成培养基:配制试剂中各成分的量都确切知道的培养基。 如培养细菌的葡萄糖铵盐培养基、培养放线菌的高氏I号培养基 和培养真菌的察氏培养基。
(2) 天然培养基:用一些成分无法准确知道的天然原料制作的培 养基。如培养细菌的牛肉膏蛋白胨培养基,培养酵母菌的麦芽 汁培养基。
微生物的营养和培养基习题整理
第五章微生物的营养和培养基一、选择题1. 大多数微生物的营养类型属于:()A. 光能自养B. 光能异养C. 化能自养D. 化能异养2. 蓝细菌的营养类型属于:()A.光能自养 B. 光能异养C.化能自养 D. 化能异养3. 碳素营养物质的主要功能是:()A. 构成细胞物质B. 提供能量C. A,B 两者4. 占微生物细胞总重量70%-90% 以上的细胞组分是:()A. 碳素物质B. 氮素物质C. 水5. 能用分子氮作氮源的微生物有:()A. 酵母菌B. 蓝细菌C. 苏云金杆菌6. 大肠杆菌属于()型的微生物。
A. 光能无机自养B. 光能有机异养C. 化能无机自养D. 化能有机异养7. 自养型微生物和异养型微生物的主要差别是:()A. 所需能源物质不同B. 所需碳源不同C. 所需氮源不同8. 基团转位和主动运输的主要差别是:()A. 运输中需要各种载体参与B. 需要消耗能量C. 改变了被运输物质的化学结构9. 单纯扩散和促进扩散的主要区别是:()A. 物质运输的浓度梯度不同B. 前者不需能量,后者需要能量C. 前者不需要载体,后者需要载体10. 微生物生长所需要的生长因子(生长因素)是:()A. 微量元素B. 氨基酸和碱基C. 维生素D. B,C二者11. 培养基中使用酵母膏主要为微生物提供:()A. 生长因素B. C 源C. N 源12. 细菌中存在的一种主要运输方式为:()A. 单纯扩散B. 促进扩散C. 主动运输D. 基团转位13. 微生物细胞中的C素含量大约占细胞干重的:()A. 10%B. 30%C. 50% %14. 用牛肉膏作培养基能为微生物提供:()A. C 源B. N 源C. 生长因素D. A,B,C 都提供15. 下列物质可用作生长因子的是()。
A. 葡萄糖B. 纤维素C. NaClD. 叶酸16. 蓝细菌和藻类属于()型的微生物。
A. 光能无机自养B. 光能有机异养C. 化能无机自养D. 化能有机异养17. 某种细菌可利用无机物为电子供体而以有机物为碳源属于()型的微生物。
第5章 微生物的营养
4.核酸 包括DNA(占干重的3%)和RNA (占干重的10%)两大类,与遗传和变异有关。 5.其他化合物 包括一些维生素、生长因 素、色素和某些细菌中的抗菌素等化合物。 (二)矿物质(灰分):占干物质的3%〜10% 左右。 1.大量元素 磷、钾、硫、钙、镁、铁。 2.微量元素 锌、锰、钠、氯、钼、硒、钴、 铜、钨、镍 、硼。 它们一部分参与有机物的组成,一部分则 组成无机盐类。
三、无机盐类(mineral salts)
1.功能 (是微生物生长不可缺少的营养物质):
(1)构成细胞的组成成分;
(2)作为酶的组成成分;
(3)维持酶的作用
(4)调节细胞渗透压、氢离子浓度、氧化还原 电位; (5)某些自养微生物可利用无机盐作为能源 (氧化无机物产生的化学能)。
2.作用及来源
须人为提供
1.蛋白质(50%〜80%)
包括单纯蛋白 (球蛋白、
清蛋白)和复合蛋白(核蛋白、糖蛋白、脂蛋白)
根据功能分:结构蛋白和储备蛋白。
2.糖(10%〜30%) 有一部分构成核糖含于核酸 中,其余为多糖,也有少数单糖。 糖类是一般微生物的重要碳素来源,除供作细 胞构造的重要成分外,也是细胞所需能量的来源。 3.脂类(3%〜7% ,多者可达40%) 胞壁、细胞膜和细胞质中。 多存在与细
第三节 营养物质透过细胞
公认的细胞质膜模型:
疏水的膜蛋白和不连续的脂双层的镶嵌结构。
脂溶性物质顺着细胞膜内外侧 一、单纯扩散(被动扩散) 浓度差转运的过程。 二、促进扩散 非脂溶性物质或亲水性物质 借助细胞膜上的膜蛋白的帮 三、主动运输 主动运输是指物质逆浓度梯度, 助顺浓度梯度或顺电化学浓 在载体的协助下,在能量的作用 1.初级主动运输 度梯度, 不消耗ATP进入膜内 下运进或运出细胞膜的过程。 的一种运输方式。 2.次级主动运输 a.同向运输 b.逆向运输 c.单项运输 Na+ k+
第五章 微生物生长与培养
1.选择和配制培养基的原则和方法
(1)营养物质组成合理,浓度适当,满足菌体 生长需要; (2)在一定条件下,各原料之间不发生化学反 应,理化性质相对稳定; (3)粘度适中,具有适当渗透压; (4)生产中选用的原材料尽量因地制宜,以降 低成本; (5)理化性质适宜,pH、氧化还原电动势也要 满足一定的要求。
样。
在微生物培养和发酵研究中,也需要研究微生物
培养的最佳氮源
生理酸性盐:
微生物代谢后形成酸性物质的某些无
机氮源 如(NH4)2SO4
生理碱性盐: 微生物代谢后产生碱性物质的某些无 机氮源 如 KNO3 生理酸性盐和生理碱性盐具有稳定调节发酵过程中 PH的积极作用。
表 氮源对恶臭假单胞菌 NA-1 菌株生长和酶形成的影响 氮源 硫酸铵 氯化铵 蛋白胨 酵母粉 尿素 谷氨酸 肉汁 硝酸钠 生物量(mg/mL) 1.45 1.33 3.88 4.07 2.53 5.07 3.74 2.62 烟酸羟基化酶活性(unit/mL) 0.002 0.000 0.301 0.288 0.111 0.045 0.371 0.114
②液体好氧培养方法
a. 摇瓶震荡培养箱
b. 台式磁力搅拌不锈钢发酵罐
c. 工业通用型搅拌发酵罐
2.厌氧培养方法
微生物厌氧培养箱
(二)微生物纯培养与混合培养
含有一种以上微生物的培养称作混合培养。自 然环境如土壤和水中,通常栖息着的是许多不同微 生物混杂在一起的群体。 微生物学中将在实验条件下从一个单细胞繁殖得 到的后代称为纯培养。 研究微生物生长通常采用微生物纯培养。
成分中,可以满足微生物生长的需要,一般不需要 额外添加。
第五章微生物营养与培养基答案
一.填空1.培养基应具备微生物生长所需要的六大营养要素是_碳源___、__氮源__、__能源__、___无机盐___、__生长因子__和¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬____水___。
2.碳源物对微生物的功能是__提供碳素来源__和__能量来源__,微生物可用的碳源物质主要有___糖类_、___有机酸_、__脂类_、__烃__、__ CO2及碳酸盐__等。
3.微生物利用的氮源物质主要有_蛋白质_、_铵盐_、_硝酸盐__、_分子氮__、__酰胺_等,而常用的速效N源如__玉米粉__,它有利于___菌体生长___;迟效N源如__黄豆饼粉__、__花生饼粉_,它有利于___代谢产物的形成______。
4.无机盐对微生物的生理功能是__作为酶活性中心的组成部分_、__维持生物大分子和细胞结构的稳定性_____ 、_调节并维持细胞的渗透压平衡__ 和_控制细胞的氧化还原电位和作为某些微生物生长的能源物质等_。
5.微生物的营养类型可分为__光能无机自养型__、__光能有机异养型__、_化能无机自养型和_化能有机异养型_。
微生物类型的可变性有利于_提高微生物对环境条件变化的适应能力_。
6.生长因子主要包括_维生素_、__氨基酸_和__嘌呤及嘧啶_,它们对微生物所起的作用是__作为酶的辅基或辅酶参与新陈代谢_、_维持微生物正常生长_、_为合成核柑、核苷酸和核酸提供原料__。
7.在微生物研究和生长实践中,选用和设计培养基的最基本要求是__选择适宜的营养物质_、_营养物的浓度及配比合适_、_物理、化学条件适宜_、_经济节约_和__精心设计、试验比较_。
8.液体培养基中加入CaCO3的目的通常是为了__调节培养基的pH值___。
9.营养物质进入细胞的方式有__单纯扩散__、__促进扩散__、_主动运输__和___基团移位_,而金黄色葡萄球菌是通过___主动运输__方式运输乳糖,大肠杆菌又是通过_基团移位__方式运输嘌呤和嘧啶的。
6.5第五章微生物的营养和代谢
二、微生物的营养类型
形态结构 微生物的多样性
营养类型
营养物质
需要什么?
营养类型
怎么消耗?
能能营养型
碳源不同
自养型:CO2 异养型:有机物
光能自养型(光能无机营养型)
营 养
光能异养型(光能有机营养型)
类 型 化能自养型(化能无机营养型)
第一节 微生物的营养物质和营养类型
一、微生物的营养
1、微生物营养的概念 微生物营养(nutrition):微生物从环境中摄取生命活动所必需的 能量和物质以满足其生长繁殖需要的一种生理过程,是一切生命 活动的基础。
2、微生物的营养物质及其功能 微生物营养物质:能被微生物吸收利用的物质
水
微生物生长所需的重要成分,在细胞的化学成分中含量最多。 含量(因种类、生活条件和发育时期不同有差异)
半合成培养基:部分天然材料,部分纯化学试剂 优点:配制方便,微生物生长良好 常用:马铃薯蔗糖培养基
根据物理状态不同 固体培养基 凝固体培养基:在液体培养基中,加入凝固剂 琼脂,明胶等 天然固体培养基:固体营养物,如麸皮,米糠等
用途:菌种分离、鉴定、选种、育种、菌种保存 半固体培养基
琼脂0.2%-0.5% 用途:细菌运动的观察,噬菌体效价测定,
选择培养基(selective medium) 定义:根据某种微生物生长的特殊要求或对某些化学、物理因素
的抗性而设计的培养基。 特点:在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质以抑
制不需要的微生物的生长,利于所需要的微生物的生长。 目的:将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来
的培养基。
例如:加青霉素、四环素、链霉素分离酵母菌和霉菌。
第五章微生物的营养
有机氮
氮源
无机氮
作用:合成细胞中的含氮物质;提供生理活动所需的能量。
在缺糖条件下,某些厌氧细菌能以氨基酸为能源物质:三功能营 养物 = 氮源 + 碳源 + 能源
按对氮源的要求不同,微生物可分为:
固氮微生物
利用空气中的N2合成自身所需的氨基酸及蛋白质 代表:根瘤菌、固氮蓝菌、固氮菌
渗透压与等渗培养液
渗透压:恰好能阻止渗透发生的施加于溶液液面上方的额外 压强称为渗透压。与溶液中不能通过半透膜的微粒数目和 温度有关。 指溶液中溶质 微粒对水的吸 引力
半透膜只允许 溶剂通过而不 允许溶质通过。 细胞膜
渗透压与等渗培养液
等渗:胞内外溶质的渗透压相近。 高渗:胞外溶质的渗透压 >胞内。 低渗:胞外溶质的渗透压<胞内。
(2)根据物理状态分类 1)液体培养基 定义:不加凝固剂的的液态培养基。 用途:大规模工业生产及在实验室用于不需要挑选 单克隆的大规模养菌。水处理中的废水即可以看作 液体培养基。
2)半固体培养基 定义:液体培养基中加入0.2-0.7%的凝固剂形成的 培养基。 用途:常用于观察细菌的运动、厌氧菌的分离和菌 种鉴定等。
化能自养型 无机物 (化能无机营养型)
无机物
无机碳
化能异养型 有机物 (化能有机营养型)
有机物
有机碳
绝大多数细菌和全部 真核微生物
以供氢体分:
无机营养型:以无机物为氢供体。 有机营养型:以有机物为供氢体。 以生长因子的需求分: 原养型或野生型:不需要从外界吸收任何生长因子。 营养缺陷型:需要从外界吸收一种或几种生长因子。 以取食方式分: 渗透营养型:通过细胞膜的渗透和选择吸收作用从外界吸收营 养物质。
微生物的营养
微生物的营养1.微生物生长的五大营养要素:碳源、氮源、生长因子、无机盐、水。
2.糖类是最常用的碳源,尤其是葡萄糖。
3.碳源主要用于合成微生物的细胞物质和一些代谢产物,有些碳源还是异养微生物的主要能源物质,因此微生物对碳源的需要量最大。
4.铵盐、硝酸盐等是最常用的氮源,氮源主要用于合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物。
5.生长因子主要包括维生素、氨基酸、和碱基等,他们一般是酶和核酸的组成成分。
6.微生物之所以需要补充生长因子,是因为缺乏合成这些物质所需的酶或合成能力有限。
7.培养基配制的基本原则:目的要明确,营养要协调,PH要适宜。
8.固体培养基主要用于微生物的分离、计数等;半固体培养基主要用于观察微生物的运动、鉴定菌种等;液体培养基则常用于工业生产。
9.合成培养基成分明确,常用于分类、鉴定等;化学成分不明确的天然物质配成的天然培养基,常用于工业生产。
10.根据培养基的用途,可以将它们分为选择培养基、鉴别培养基。
11.原核生物对抗生素比较敏感;病毒对干扰素比较敏感。
12.金黄色葡萄球菌可在高盐度的培养基上生长,而其他多种细菌则不可以。
13.如果有大肠杆菌,在伊红—美蓝培养基上,其代谢产物就与伊红和美蓝结合,使菌落呈深紫色,并带有金属光泽。
14.在谷氨酸生产中,当培养基中的碳源与氮源的比为4:1时,菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少;当培养基中的碳源与氮源的比为3:1时,菌体繁殖受抑制,但谷氨酸的合成量大增。
15.不同种类的微生物,对C源的需求量差别很大,如甲烷氧化菌只能利用甲烷和甲醇作为C源,而洋葱假单胞杆菌却能利用90多种含C化合物。
16.对于异养微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是C源,又是N源。
如氨基酸对乳酸菌来说既是C源、N源又是能源。
17.生长因子是微生物生长所必需的物质。
18.生长因子包括维生素,氨基酸,碱基等,存于天然物质酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液等。
如谷氨酸发酵生产时添加生物素,即生长因子是生物素。
微生物学 第五章 微生物的营养
第十一授课单元一、教学目的:此章为要求学生掌握的重点内容之一,使学生了解六大营养要素在微生物生命活动中功能和供给形式、微生物的营养类型、营养物质进入细胞的四种主要方式、选用设计培养基的原则、培养基的种类。
本教学单元的教学目的是使学生了解微生物的六类生长要素及其功能, 掌握微生物营养类型特点.通过本章节的学习,了解微生物的营养与微生物发酵工业的关系。
二、教学内容: (第五章微生物的营养第一节微生物的化学组成及营养要求第二节微生物的营养类型)1.微生物细胞的化学组成和营养要求:重点介绍碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水六大营养要素在微生物生命活动中功能和供给形式。
并通过实例介绍如何根据碳源、氮源的不同筛选工业微生物菌种。
2.微生物的营养类型:介绍根据碳源和能源划分的四种营养类型,即光能自养型、光能异养型、化能自养型和化能异养型。
三、教学重点、难点及其处理重点:1. 使学生了解碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水六大营养要素在微生物生命活动中功能和供给形式;主要通过平时常见的培养基为例加以说明。
2. 根据碳源、能源的不同,将微生物分为四种基本营养类型:就微生物而言, 地球上几乎没有不被微生物所利用的一种物质, 但就其一类微生物来说, 它们所需要的营养物质则是有一定范围的. 根据微生物对碳源、能源的不同, 可分为自养微生物和异养微生物两类.自养微生物靠无机营养而活, 利用二氧化碳(或碳酸盐)作为唯一或主要的碳源, 还原二氧化碳为有机物(细胞物质), 所需要的能量来自光或无机物的氧化.异养微生物不能在完全无机物的环境下生长, 主要碳源来自有机物, 但可以固定二氧化碳, 它的合成反应所需要的能量来自有机物的氧化. 例如:光能自养型:以光为能源,以CO2或碳酸盐为唯一或主要碳源光能异养型:以光为能源,但生长需要一定的有机营养物化能自养型:以无机物的氧化获得能量,以CO2或碳酸盐为唯一或主要碳源化能异养型:以有机物的氧化获得能量,生长依赖于有机营养物质难点:根据碳源、能源的不同,将微生物分为四种基本营养类型。
五、微生物的营养和培养基
第五章微生物的营养和培养基营养(nutrition):指生物体从外部环境中摄取对其生命活动必需的能量和物质,以满足正常生长和繁殖需要的一种最基本的生理功能。
营养物(nutrient):指具有营养功能的物质,那些能够满足微生物机体生长、繁殖和完成各种生理活动所需的物质。
在微生物学中,它还包括非常规物质形式的光辐射能在内。
第一节微生物的6类营养要素——碳、氢、氧、氮、硫、磷——碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水一、微生物细胞的化学组成1. 化学元素(chemical element)主要元素:碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、镁、钙、铁等;微量元素:锌、锰、钠、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍、硼等。
Eg. 细菌、酵母菌和真菌的碳、氢、氧、氮、磷、硫六种元素的含量就有差别。
硫细菌(sulfur bacteria)、铁细菌(iron bacteria)和海洋细菌(marine bacteria)相对于其他细菌则含有较多的硫、铁和钠、氯等元素, 硅藻(Diatom)需要硅酸来构建富含(SiO2)n的细胞壁。
二、微生物的6类营养要素在元素水平上都需20种左右,且以碳、氢、氧、氮、硫、磷6种元素为主;在营养要素水平上则都在六大类的范围内,即碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水。
微生物、动物、植物之间存在“营养上的统一性”(一)碳源(carbon source)1. 定义一切能满足微生物生长繁殖所需碳元素的营养物,称为碳源。
微生物细胞含碳量约占干重的50%,除水分外,碳源是需要量最大的营养物,又称之为大量营养物(macronutrients)。
碳源谱(spectrum of carbon sources):宝贵的氮源———“C.H.O.N”和“C.H.O.N.X”型,——尽量避免将之作为廉价的碳源使用。
异养微生物在元素水平上的最适碳源———“C.H.O”型微生物能利用的碳源类型大大超过了动物界或植物界所能利用的碳化合物。
微生物的营养和培养基--微生物的六种营养要素
一、微生物的六种营养要素
3 微生物细胞的化学组成 ➢ 化学组成比例:细胞的化学组成也是配制微生物培养基的主要依据;
主要成分
细菌
酵母菌
霉菌
水分 (占细胞鲜重的%)
蛋白质 占 细 碳水化合物 胞 干 脂肪 重 的 核酸 %
无机盐
75~85 50~80 12~28 5~20 10~20 2~30
➢无论从元素水平还是营养要素水平,微生物的营养要求与摄食型的动物(含人类) 和光合自养型的植物都十分接近;生物之间存在“营养上的统一性”。
一、微生物的六种营养要素
5
微生物6大营养要素-碳源
➢碳源(carbon source):凡是提供微生物营养所需的碳元素(碳架)的营养源, 称为碳源; ➢碳源谱:从微生物的整体来看,可利用的碳源物质的范围称碳源谱; ➢碳源作用:
一、微生物的六种营养要素
5 微生物6大营养要素-碳源 ➢实验室配制微生物培养基常用碳源:葡萄糖、 蔗糖、可溶性淀粉;
➢微生物工业发酵中用做碳源的原料: ➢传统种类:糖类(单糖,饴糖)、淀粉(玉米粉、山芋粉、野生植物 淀 粉等)、麸皮、各种米糠等; ➢代粮发酵:纤维素、石油、CO2、H2;
一、微生物的六种营养要素
6 微生物6大营养要素-氮源
➢实验室常用的氮源:有碳酸铵、硝酸盐、硫酸铵、胰酪蛋白、尿素、蛋白胨、牛肉 膏、酵母膏等;
➢生产上常用的氮源:有硝酸盐、铵盐、尿素、氨以及蛋白含量较高的鱼粉、蚕蛹粉、 黄豆饼粉、花生饼份、玉米浆、麸皮等;
一、微生物的六种营养要素
6
微生物6大营养要素-氮源
➢微生物利用氮源的特点: ➢氮源主要不提供能量(除硝化细菌等少数外); ➢最适氮源:NHCO>NH>NO>N2; ➢迟效氮源:蛋白氮必须通过水解之后降解成胨、肽、氨基酸等才能被机体 利用,有利于代谢产物的形成; ➢速效氮源:无机氮源或以蛋白质降解产物形式存在的有机氮源可以直接被 菌体吸收利用,有利于机体的生长; ➢氨基酸异养型微生物(营养缺陷型):有些微生物没有将无机氮合成有机 氮的能力,它们不能把尿素、铵盐等这些无机氮源自行合成他们生长所需的 氨基酸,而需要从外界吸收现成的氨基酸作为氮源才能生长。
微生物的营养
5、无机盐
为微生物细胞生长提供碳、氮源以外的多种 重要元素的物质,多以无机盐的形式供给。
大量元素:P、S、K、Mg、Ca、Na、Fe (微生物生长所需浓度在10-3~10-4mol/L)
NH4+,NO2-,S,H2S,H2和Fe2+等,这类微生物主要有 硫化细菌、硝化细菌、氢细菌与铁细菌,在自然界物质转 换过程中起着重要的作用。
(2)辐射能(光能营养型):光能自养和光能异养微生物 的能源。
4、生长因子
➢ 定义:微生物正常生活不可缺且需要量不大,但微生 物自身不能用简单的碳源或氮源合成,或合成量不足以满 足机体生长需要的有机营养物质。 ➢不同微生物需求的生长因子的种类和数量不同。 ➢主要包括:维生素、碱基、卟啉及其衍生物、甾醇、胺 类、C4~C6的分枝脂肪酸,以及氨基酸营养缺陷突变株所 需要的氨基酸。 ➢作用:主要作为酶的辅基或辅酶参与新陈代谢。
维生素 硫胺素(B1) 吡哆醇(B6) 叶酸 维生素B12
维生素的生理功能
转移的对象 乙醛基 氨基 甲基
羧基,甲基
代谢功能
焦磷酸硫胺素是脱羧酶、转醛 酶、转酮酶的辅基,与a-酮酸 的氧化脱羧和酮基转移有关
磷酸吡哆醛是氨基酸消旋酶、 转氨酶与脱羧酶的辅基,参与 氨基酸的消旋、脱羧和转氨
即辅酶F(四氢叶酸),参与一碳 基的转移,与合成嘌呤、嘧啶、 核甘酸、丝氨酸和甲硫氨酸有 关 钴酰胺辅酶,参与一碳基的转 移,与甲硫氨酸和胸苷酸有关
化能无机营养型无机物* 无机物 CO2 (化能自养型)
硝化细菌,硫化细 菌,铁细菌,氢细菌, 硫磺细菌等
第5章-微生物的营养-PPT课件
第五节 培 养 基
培养基(medium) :由人工配制的,供给微生物生 长繁殖或积累代谢产物所用的营养基质 。 配制培养基的基本原则
适合微生物的营养特点 调配好培养基中各种营养成分比例
第五节 培 养 基
培养基的类型
细菌培养基:营养肉汤(nutrient broth) 放线菌培养基:高氏一号培养基 霉菌培养基:察氏(Czapek)培养基
营养缺陷型(auxotroph):丧失合成一种或多种生 长因子能力的微生物。
第二节 微生物细胞的化学组成
细胞中主要组成元素:碳、氢、氧、氮、磷、硫(占细胞 干重的97%)。
第三节 物质的运输
微生物吸收营养物质,排泄代谢产物,依靠细胞膜完成
对营养物质的要求:分子大小能通过细胞膜
物质运输方式
单纯扩散 促进扩散 主动运输 基团转位
大量元素:硫、磷、钾、钠、钙、镁等 微量元素:铜、锌、锰、钴、钼等
第一节 微生物的营养物质
主要矿质元素的生理功能
P68 表5-1
第一节 微生物的营养物质
生长因子
生长因子(growth factor) :某些微生物不能从普 通的碳源、氮源物质合成,而只有通过外源供给才 能满足机体生长需要的有机物质。 微生物所需的生长因子:维生素、氨基酸和碱基
3.鉴别培养基(differential medium)
4.加富培养基(enrichment medium)
第五节 培 养 基
培养基的类型
1.固体培养基(solid medium)
2.液体培养基(liquid medium)
3.半固体培养基(semisolid medium)
思考题
1.微生物需要哪些营养物质?这些类营养物质 在微生物细胞内的作用是什么? 2.微生物运输营养物质的方式有哪几种? 3.微生物有哪几种营养类型,它们的划分依据 是什么? 4.什么是培养基?配制培养基应遵循哪些原则? 5.按照培养基的用途可分为哪几种培养基?
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根据生物合成中供氢体的性质分
二、营养类型:
依据:能源-氢供体-碳源
1.光能无机营养型 (photolithotroph) 光能自养型(photoautotroph) 2. 光能有机营养型(photoorganotroph) 光能异养型(photoheterotroph) 3. 化能无机营养型(chemolithotroph) 化能自养型(chemoautotroph) 4.化能有机营养型(chemoorganotroph) 化能异养型(chemoheterotroph)
C · · · H O N·X
C• H •O •N 有机碳
C•H• O
C•H C( ? ) 无机碳 C• O C• H• X
CO2
NaHCO3、CaCO3
NaHCO3 、CaCO3
二、氮源(nitrogen source)
凡能提供微生物生长繁殖所需氮元素的营养源,称为氮源。 (一)氮源的作用
1.氮源是构成微生物细胞物质或代谢产物中的氮素来源 2.氮素一般不提供能源,只有少数例外
需用牛肉膏、酵母膏或配制专门的营养液。
1).生长因子自养型微生物(auxoautotrophs) 自养微生物和一些腐生性细菌、霉菌,能自己合成这 类物质,不需外界供给; 2).生长因子异养型微生(auxoheterotrophs) 而有些微生物(根瘤菌、乳酸杆菌等)因缺乏合成这类 物质的能力,必须外界供给才能生长。 3).生长因子过量合成型微生物 少数微生物在其代谢活动过程中,能合成并大量分 泌某些维生素等生长因子。 4).营养缺陷型微生物(nutritional deficiency) •
无机盐及其生理功能
元 素 磷 硫 化合物形式(常 用) KH2PO4, K2HPO4 (NH4)2SO4, Mg 生理功能 核酸、核蛋白、磷脂、辅酶及ATP等高能分 子的成分,作为缓冲系统调节培养基pH 含硫氨基酸(半胱氨酸、甲硫氨酸等)、维生 素的成分,谷胱甘肽可调节胞内氧化还原电 位 己糖磷酸化酶、异柠檬酸脱氢酶、核酸聚合 酶等活性中心组分,叶绿素和细菌叶绿素成 分 某些酶的辅因子,维持酶(如蛋白酶)的稳定 性,芽孢和某些孢子形成所需 细胞运输系统组分,维持细胞渗透压,维持 某些酶的稳定性 某些酶的辅因子,维持细胞渗透压,某些嗜 盐细菌核糖体的稳定因子 细胞色素及某些酶的组分,某些铁细菌的能 源物质,合成叶绿素、白喉毒素所需。
(二)微生物的碳源 凡必需利用有机碳源的微生物,称为异养微生物 凡能利用无机碳源的微生物,则是自养微生物
微生物的碳源谱
类型 元素水平 化合物水平 复杂蛋白质 核酸等 多数氨基酸 简单蛋白质 糖、有机酸 醇、脂类等 烃类 – 培养基原料水平 牛肉膏、蛋白胨 花生饼粉等 一般氨基酸、明胶等 葡萄糖、蔗糖、各种 淀粉、糖蜜等 天然气、石油及其不 同馏份、石蜡油 – CO2
提供合成原料; 调节代谢活动进行; 提供适宜代谢环境;
6种营养要素: 碳源,氮源,能源,生长因子,无机盐和水。
一、碳源(carbon source)
碳源(carbon source):凡是可以作为微生物细胞结构或代谢 产物中碳架来源的营养物质 (一)碳源的作用
1.碳素化合物是构成机体中有机物分子的骨架 2.碳素化合物是大多数微生物的能源 3.构成微生物代谢产物的分子骨架
(二)微生物能利用的氮源 包括蛋白质及其不同程度的降解产物(胨、肽、氨基酸等)、 铵盐、硝酸盐、分子氮、嘌呤、嘧啶、脲、胺、酰胺、氰化 物等。
种类:
无机氮:铵盐、硝酸盐、亚硝酸 盐、尿素、氨、N2等; 有机氮:牛肉膏、蛋白胨、鱼粉、花生饼粉、 黄豆饼粉、玉米浆等。
速效氮源:很快被微生物利用的物质,有利于菌体 生长.如硫铵、玉米浆等。用于发酵前期。 迟效氮源:微生物利用速度较慢的物质,有利于代 谢物质形成。如花生饼粉、黄豆饼粉等。 用于发酵后期。
五、水
水在细胞中的生理功能主要有:
1.微生物细胞的组成成分; 2.是细胞营养物质和代谢产物的溶剂; 3.是细胞中各种生化反应的良好介质; 4.水还能维持微生物细胞的膨压; 5.水具有较高的比热,稳定细胞内环境温度。
水的特性:
①、水是极性分子 ---最好的溶剂、有利于物质的 运输。 ②、水的比热为1 ---有利于保持正常的体温和代谢 速率。 ③、固态水(冰)比液态水的密度低---有利于水生生 物的低温生存。 ④、ph=7---
• 食物中的蛋白质必须经过肠胃道消化,分解成氨基酸才能被人 体吸收利用,人体对蛋白质的需要实际就是对氨基酸的需要。 吸收后的氨基酸只有在数量和种类上都能满足人体需要身体才 能利用它们合成自身的蛋白质。营养学上将氨基酸分为必需氨 基酸和非必需氨基酸两类。
• 必需氨基酸指的是人体自身不能合成或合成速度不能满足人体 需要,必须从食物中摄取的氨基酸。对成人来说,这类氨基酸 有8种,包括赖氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、 缬氨酸、色氨酸和苯丙氨酸。对婴儿来说,组氨酸也是必需氨 基酸。 • 非必需氨基酸并不是说人体不需要这些氨基酸,而是说人体可 以自身合成或由其它氨基酸转化而得到,不一定非从食物直接 摄取不可。这类氨基酸包括谷氨酸、丙氨酸、精氨酸、甘氨酸、 天门冬氨酸、胱氨酸、脯氨酸、丝氨酸和酪氨酸等。有些非必 需氨基酸如胱氨酸和酪氨酸如果供给充裕还可以节省必需氨基 酸中蛋氨酸和苯丙氨酸的需要量。
水的可利用性
• 用水活度表示 • 水活度αw(water activity)=P/Po P: 溶液的蒸汽压 Po:纯水的蒸汽压 • 在常温常压下,纯水的aw为1.00
几种溶液的水活度值
一些微生物生长所需的最低aw值
0.97-0.96革兰氏阴性杆菌 假单胞菌属(Pseudomonas) 不动杆菌属(Acinetoacter) 大肠埃希氏菌(E.coli)0.97
微生物细胞的化学组成
微生物细胞中各种有机物和元素的含量(干重%)
成分 碳 氮 蛋白质 糖类 脂类 细菌 48(46-52) 12.5(10-14) 55(50-60) 9(6-15) 7(5-10) 酵母 48(46-52) 7.5(6-8.5) 40(35-45) 38(30-45) 8(5-10) 真菌 48(45-55) 6(4-7) 32(25-40) 49(40-55) 8(5-10)
微生物的氮源谱
类 型 元素水平 化合物水平 培养基原料水平 牛肉膏、酵母膏、饼粕粉、蚕 蛹粉等
N•C•H•O•X 有 机 氮
复杂蛋白质、核酸等
N•C•H•O
尿素、一般氨基酸、简 单蛋白质等
尿素、蛋白胨、明胶等
N•H
NH3、铵盐等 硝酸盐等 N2
(NH4)2SO4等 KNO3等 空气
无 机 氮
N•O N
0.93-0.80霉菌 黑根霉(Rhizopus nigricans)0.93 扩展青霉(Penicillium expansum)0.77 展青霉(Penicillium patullum)0.80 黄曲霉(Aspergillus flavus) 0.90 黑曲霉(Aspergillus niger)0.84
核酸
灰分 磷 硫、镁 钾、钙 钠、铁 锌、铜、锰
23(15-25)
6(4-10)
8(5-10)
6(4-10) 1.0-2.5 0.3-1.0 0.1-0.5
5(2-8)
6(4-10)
0.01-0.1 南京农业大学 食品院食品微生物组 0.001-0.01
第一节
微生物的营养要求
营养物质的功能: 提供能量;
0.95-0.91大多数细菌 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) 梭菌属(Clostridium) 微细菌属(Microbacterium)0.95 乳杆菌属(Lactobacillus) 链球菌属(Streptococcus)0.94
0.90-0.86革兰氏阴性球菌 微球菌属(Micrococcus) 0.90 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)0.86 0.94-0.87酵母菌产朊假丝酵母(Candida utilis) 酿酒酵母(Candida utilis)0.94 德巴利酵母属(Debaryomyces)0.94
原养型(prototroph)(wild type) 营养缺陷型(auxotroph) 渗透营养型(osmotroph)
6.以摄食方式分 7.以摄取死或活有机 物分
吞噬营养型(phagocytosis) 腐生(saprophytism) 寄生(parasitism)
一、分类原则:
按能量来源分 根据微生物生长所需碳源物质的性质分
镁
MgSO4
钙 钠 钾 铁
CaCl2,Ca(NO3)2 NaCl KH2PO4,K2HPO4 Fe SO4
微量元素与生理功能
元素 锌 锰 钼 硒 钴 铜 钨 生理功能 存在于乙醇脱氢酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、醛 缩酶、RNA与DNA聚合酶中 存在于过氧化物歧化酶、柠檬酸合成酶中 存在于硝酸盐还原酶、固氮酶、甲酸脱氢酶中 存在于甘氨酸还原酶、甲酸脱氢酶中 存在于谷氨酸变位酶中 存在于细胞色素氧化酶中 存在于甲酸脱氢酶中
第五章
微生物的营养
第一节 微生物的营养要求
第二节 微生物的营养类型
第三节 培养基 第四节 营养物质进入细胞
营养物质(nutrient):那些能够满足微生物机体生长、繁 殖和完成各种生理活动所需的物质
营养(nutrition):微生物获得和利用营养物质的过程
营养物质是微生物生存的物质基础,而营养是 生物维持和延续其生命形式的一种生理过程。
镍
存在于脲酶中,为氢细菌生长所必需
四、生长因子(growth factor)
生长因子为一类对微生物正常代谢必不可少且不能用简 单的碳源或氮源自行合成的有机物。 广义的生长因子包括:维生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶碱及其 衍生物、卟啉及其衍生物、甾醇、胺类、一些脂肪酸等。 狭义的生长因子:一般仅指维生素。 生长因子的主要功能: 提供微生物细胞重要化学物质、辅因子的组分和参与代谢。