双波长分光光度法同时测定药物中维生素C和维生素E
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(二) 扫描吸收光谱
ml的标准溶液，在200～300nm范围扫描出维
生素C和维生素E的吸收光谱，并确定1和2，
打印谱图。 (三) 建立工作曲线
以无水乙醇为参比，在波长1和2处分别测定步
骤1配制的8个标准溶液的吸光度。运用UNICO2000数据处理软件系统，分别建立并打印4条工 作曲线。
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
四、实验步骤
(四) 药物中维生素C和维生素E的测定
g 的 含 有 维 生 素 C（ 抗 坏 血 酸 ） 和 维 生 素 E （α—生育酚）的药物，溶于无水乙醇中，并 用无水乙醇定溶于25ml容量瓶中。
用1ml移液管吸取上述溶液于10ml容量瓶，用
无水乙醇稀释至刻度，摇匀。在波长1和2处
分别测定其吸光度。
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
五、操作要点和注意事项
1、正确使用参比溶液校正仪器。
2、每变换一次波长就需用参比溶液校正仪器。
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
六、数据处理
1、打印维生素C和维生素E的吸收光谱图，确定1 和2。
2、分别打印维生素C和维生素E在1和2时的4条 工作曲线，求出4条曲线的斜率
3、计算药物未知液中的维生素C和维生素E的浓度。
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
七、思考题
1、从维生素C和维生素E的结构式解释一个是 “水
溶性”，一个是“脂溶性”的原因。 2、使用本方法测定维生C和维生素E是否灵敏？
解释其原因。
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
三、仪器与试剂
UNICO-2000紫外—可见分光光度计及相应的配套 软 件 ， 石 英 比 色 皿 ( 1 cm)， 容 量 瓶 ( 2 5 ml)， 容 量 瓶 (10ml )，吸量管(10 ml ) 移液管(1ml )。 维生素C储备液（× mol·L-1）维生素E储备液 （×mol·L-1）
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
二、实验原理
朗伯-比耳定律应用于双组分体系，可得到下列 联立方程式：
A k k 总 1
C
1
cC
E
1
cE
A k k 总 2
C
2
cC
c E E
2
上下两个方程式分别为波长1、波长2下总吸
光度、与维生素C浓度及维生E浓度的关系式。 解上述方程即可求维生素C浓度及维生E浓度
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
一、实验目的
1、掌握紫外—可见分光光度计的使用方法。
2、学习在紫外光谱区同时测定双组分体系— —
维生素C和维生素E的方法。
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
二、实验原理
维生素C和维生素E在紫外光区具有不同的最大 吸收波长，维生素C是水溶性的，维生素E是脂 溶性的，但它们都能溶于无水乙醇，可在同一 溶液中利用双组分测定原理同时测定。
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
四、实验步骤
(一) 配置标准溶液 1、分别准确取维生素C于4个25ml容量瓶中， 用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。
2、分别准确取维生素E于4个25ml容量瓶中， 用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
四、实验步骤
ml的标准溶液，在200～300nm范围扫描出维
生素C和维生素E的吸收光谱，并确定1和2，
打印谱图。 (三) 建立工作曲线
以无水乙醇为参比，在波长1和2处分别测定步
骤1配制的8个标准溶液的吸光度。运用UNICO2000数据处理软件系统，分别建立并打印4条工 作曲线。
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
四、实验步骤
(四) 药物中维生素C和维生素E的测定
g 的 含 有 维 生 素 C（ 抗 坏 血 酸 ） 和 维 生 素 E （α—生育酚）的药物，溶于无水乙醇中，并 用无水乙醇定溶于25ml容量瓶中。
用1ml移液管吸取上述溶液于10ml容量瓶，用
无水乙醇稀释至刻度，摇匀。在波长1和2处
分别测定其吸光度。
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
五、操作要点和注意事项
1、正确使用参比溶液校正仪器。
2、每变换一次波长就需用参比溶液校正仪器。
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
六、数据处理
1、打印维生素C和维生素E的吸收光谱图，确定1 和2。
2、分别打印维生素C和维生素E在1和2时的4条 工作曲线，求出4条曲线的斜率
3、计算药物未知液中的维生素C和维生素E的浓度。
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
七、思考题
1、从维生素C和维生素E的结构式解释一个是 “水
溶性”，一个是“脂溶性”的原因。 2、使用本方法测定维生C和维生素E是否灵敏？
解释其原因。
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
三、仪器与试剂
UNICO-2000紫外—可见分光光度计及相应的配套 软 件 ， 石 英 比 色 皿 ( 1 cm)， 容 量 瓶 ( 2 5 ml)， 容 量 瓶 (10ml )，吸量管(10 ml ) 移液管(1ml )。 维生素C储备液（× mol·L-1）维生素E储备液 （×mol·L-1）
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
二、实验原理
朗伯-比耳定律应用于双组分体系，可得到下列 联立方程式：
A k k 总 1
C
1
cC
E
1
cE
A k k 总 2
C
2
cC
c E E
2
上下两个方程式分别为波长1、波长2下总吸
光度、与维生素C浓度及维生E浓度的关系式。 解上述方程即可求维生素C浓度及维生E浓度
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
一、实验目的
1、掌握紫外—可见分光光度计的使用方法。
2、学习在紫外光谱区同时测定双组分体系— —
维生素C和维生素E的方法。
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
二、实验原理
维生素C和维生素E在紫外光区具有不同的最大 吸收波长，维生素C是水溶性的，维生素E是脂 溶性的，但它们都能溶于无水乙醇，可在同一 溶液中利用双组分测定原理同时测定。
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
四、实验步骤
(一) 配置标准溶液 1、分别准确取维生素C于4个25ml容量瓶中， 用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。
2、分别准确取维生素E于4个25ml容量瓶中， 用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。
双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E
四、实验步骤