维生素B1检验SOP

GMP管理文件
一、目的：建立维生素B1检验的标准操作规程，保证正确操作。

二、依据：《中国兽药典》（2005版一部）。

三、适用范围：适用于维生素B1的检验。

四、责任者：QC检验员
五、正文：
1．质量标准：（见维生素B1质量标准）。

2．试剂：
2.01 盐酸溶液（9→1000） 2.02 氢氧化钠试液
2.03 铁氰化钾试液 2.04 硝酸银试液
2.05 正丁醇 2.06 硝酸银试液
2.07 稀醋酸 2.08 溴酚蓝指示液
2.09 硝酸银滴定液（0.1mol/L） 2.10 醋酸汞试液
2.11 高氯酸滴定液（0.1mol/L）
3．仪器与用具
3.01 电子天平 3.02 干燥器
3.03 蒸发皿 3.04 电热恒温干燥箱
3.05 紫外分光光度计 3.06 酸式滴定管
4．操作步骤：
4.1 性状
本品为白色结晶或结晶性粉末；有微弱的特臭．味苦；干燥品在空气中迅即吸收约4％的水分。

本品在水中易溶，在乙醇中微溶，在乙醚中不溶。

则判定该项合格。

4.2吸收系数取本品，精密称定，加盐酸溶液（9→1000）溶解并定量稀释制成每1ml约含12.5μg的溶液，照紫外-可见分光光度法（见紫外分光光度法标准操作
规程），在246nm的波长处测定吸光度．吸收系数（E 1%1cm）为406～436。

则判定该项合格。

4.3 鉴别：
4.3.1 取本品约5mg，加氢氧化钠试液2.5ml溶解后，加铁氰化钾试液0.5ml 与正丁醇5ml，强力振摇2分钟．放置使分层，上面的醇层显强烈的蓝色荧光；加酸使成酸性．荧光即消失；再加碱使成碱性，荧光又显出。

4.3.2 本品的水溶液显氯化物的鉴别反应（见一般鉴别标准操作规程）。

4.3.3 结果判定：上述二项均呈正反应，则判定该项合格。

4.4 检查
4.4.1酸度取本品0.50g，加水20ml溶解后，依法测定（见PH值检查法标准操作规程），pH值应为2.8～3.3，则判定该项合格。

4.4.2溶液的澄清应与颜色取本品1.0g，加水10ml溶解后．溶液应澄清光色；如显色，与对照液（取比色用重铬酸钾液0.1ml，加水适量使成10ml）比较，不得更深。

4.4.1 氯化物与溴化物取本品1.0g,置乳钵中,分次加水40ml研细后,滤过,滤液中加少量锌粉使褪色;分取溶液10ml,依次缓缓加氨试液5ml与硝酸银试液5ml,放置5分钟,滤过,滤液移置50ml纳氏比色管中,加水使成40ml,滴加硝酸使遇石蕊试纸显中性反应后,再加硝酸1ml与水适量使成50ml;如发生浑浊,与对照液(取标准氯化钠溶液3.5ml加水至40ml,再加硝酸1ml,硝酸银试液1ml与水适量使成50ml)比较,不得更深(0.014%)则判定该项合格。

4.4.2 硫酸盐硫酸盐取本品 2.0g，依法检查（见硫酸盐检查法标准操作规程），与标准硫酸钾溶液2.0ml制成的对照液比较，不得更浓（0.01％）。

4.4.3 硝酸盐取本品1.0g，加水溶解使成100ml，取1.0ml，加水4.0ml与10％氯化钠溶液0.5ml，摇匀，精密加稀靛胭脂试液〔取靛胭脂试液，加等量的水
稀释。

临用前，量取本液 1.0ml，用水稀释至50ml，照紫外-可见分光光度法（见
紫外分光光度法标准操作规程）．在610nm的波长处测定，吸光度应为0.3-0.4〕
1ml，摇匀．沿管壁缓缓加硫酸5.0ml，立即缓缓振摇1分钟，放置10分钟，与标
准硝酸钾溶液（精密称取在105℃干燥至恒重的硝酸钾81.5mg．置50ml量瓶中，
加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。

每1ml相当于50μg的NO3）0.50ml用同一方法制成的对照液比较，不得更浅（0.25％）。

4.4.4干燥失重取本品，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过
5.0％（见干燥失重检查法标准操作规程）。

计算公式如下:
干燥失重%=(W1－W
2)/(W1－W
)×100%
式中：W1为称量瓶与供试品的重量（g）； W
2
为称量瓶与供试品恒重的重量（g）；
W
为称量瓶恒重的重量（g）。

4.4.5炽灼残渣不得过0.1％（见炽灼残渣检查法标准操作规程）。

炽灼残渣%=(W1－W2)/(W1－W0)×100%
式中 W2：炽灼后坩埚与残渣的重量（g）
Wo：坩锅的重量（g）
W1：供试品与坩埚的重量（g）
4.4.6铁盐取本品1.0g，加水25ml溶解后，依法检查（见铁盐检查法标准操作规程），与标准铁溶液2.0ml制成的对照液比较，不得更深（0.002％）。

4.4.7重金属取本品1.0g，加水25ml溶解后，依法检查（见重金属检查法标准操作规程），含重金属不得过百万分之十。

4.4.8总氯量取本品约0.2g，精密称定，加水20ml溶解后，加稀醋酸2ml与溴酚蓝指示液8～10滴，用硝酸银滴定液（0.1mol/L）滴定至显蓝紫色。

每1ml硝酸银滴定液（0.1mol/L）相当于3.54mg的氯（Cl）。

按干燥品计算，含总氯量应为20.6％～21.2％。

4.5含量测定取本品约0.15g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，加冰醋酸20ml，微热溶解后，密塞，放冷至室温，加醋酸汞试液5ml与喹哪啶红-亚甲蓝混合指示液2滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液显天蓝色，振摇30秒不褪色，并将滴定的结果用空白试验校正。

每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于16.86mg 的C12H17ClN4OS·HCl。

计算公式：
T ×F ×（V-V 空） 干燥失重（％）＝ ×100％ M ×（1-干燥失重）
V ：高氯酸滴定液消耗毫升数；
F ：高氯酸滴定液的实际浓度/高氯酸滴定液的标示浓度； T ：滴定度16.86；
M ：取供试品的重量。

相对偏差=％＋－100
B A B A 结果判定：含
C 12H 17ClN 4OS·HCl 不得少于99.0％。

相对偏差不超过0.3％，则判定
该项合格。