植物组织培养实验3课件

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植物组织培养实验(3)课件
实验用具: 天平、烧杯、玻璃棒、量筒、移液枪、三
角瓶、pH试纸、电炉、高压灭菌锅。 无菌室、无菌滤纸、无菌培养皿、烧杯、
解剖刀、镊子、剪刀、酒精灯、酒精棉花、 滴管、记号笔、废液罐、火柴、光照培养 箱。
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(四)实验步骤
配制以下培养基各100ml : MS2:MS+2.0mg/LBA+0.1mg/L NAA MS3:MS+2.0mg/LBA+0.5mg/L NAA MS4:MS+2.0mg/LBA+2.0mg/L NAA 取200ml烧杯3只,标记,各加入4g MS培养基和
1周后观察培养体系有无污染,计算每一个平皿 内染菌外植体数和外植体外的菌落数,分析染 菌原因。
1周后计算每种外植体的愈伤组织诱导率(形成 愈伤组织的外植体数/总接种外植体数×100%)。
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实验报告内容
实验名称 实验目的 实验原理 实验材料和用具 实验步骤 实验结果与分析
(二)实验原理
在一定的条件下,不同器官(根、茎、叶 等)来源的外植体均可以脱分化形成愈伤 组织。
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(三)实验材料和用具
实验材料:黄瓜无菌苗 实验药品: MS、 1mg/ml NAA 、 1mg/ml 6-BA、
1mol/L HCl、1mol/L NaOH、蒸馏水、灯 用酒精、70%酒精、无菌水 。 灭菌培养基:MS1 (MS+1.0mg/LBA+0.5mg/L NAA)
植物组织培养实验(3)课件
灭菌。用高压蒸汽灭菌锅在121℃、 0.1MPa条件 下灭菌15~20min。操作按仪器操作步骤进行。 灭菌后待压力下降到0Pa时取出,凝固后待用。
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4. 接种
进入无菌室,用70%乙醇擦洗双手和工作台面,点燃酒 精灯。
解开三角瓶的绳子,将三角瓶按使用先后顺序排好。
再次消毒双手和工作台面,取出无菌滤纸,用无菌水润 湿。
100ml蒸馏水,加热直至完全溶解。
各加入 1mg/ml 6-BA 200µl,并不断搅拌。
分别加入 1mg/ml NAA 10、50、200µl,并不断 搅拌。
1. 用1mol/L HCl或NaOH调节pH至5.8~6.0。 植物组织培养实验(3)课件
分装。将3种培养基分别分装到4个三角瓶中,做 好标记。
在火焰边打开三角瓶的封口纸,烧灼瓶口和镊子,待镊 子冷却后取出无菌苗,放置在无菌滤纸上。
剪成5~10mm小段(根部去掉部分根尖,叶片去叶缘后 剪成50mm2左右的小片),每平皿接种3~5段(片)。 每组接种8瓶,根、茎段、茎尖、叶各2瓶。
① 光照培养箱25℃暗ຫໍສະໝຸດ Baidu养。
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作业
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