EGFRTK背景研究进展及相关酶测试

肺癌是现今世界各国常见的恶性肿瘤，并已成为绝大多数国家癌症死亡的要紧缘故。

其中以非小细胞肺癌(NSCLC)最多见。

目前靶向医治已经成为非小细胞肺癌（NSCLC）临床医治的重要手腕。

易瑞沙（Iressa/吉非替尼/Gefitinib,阿斯利康）和特罗凯（Tarceva/厄罗替尼/Erlotinib，罗氏制药）作为表皮生长因子受体（EGFR）酪氨酸激酶抑制剂(TKI)，是美国FDA批准用于NSCLC靶向医治的要紧药物。

可是，临床实验说明易瑞沙和特罗凯仅对10-30%的NSCLC病人有显著疗效。

进一步的研究发觉EGFR基因突变与NSCLC靶向医治的疗效具有相关性，绝大多数携带EGFR基因突变的病人疗效显著。

大量研究资料表明EGFR基因突变主要集中在酪氨酸激酶区(tyrosine kinase coding domain，18-2l 外显子)，其中19外显子多为框内缺失(746-753)性突变，约占所有突变的45％；21外显子多为替代突变(主要是L858R)，约占所有突变的40％。

目前普遍认为，这两个热点突变可以增强肿瘤细胞对TKI的敏感性，并且可作为TKI治疗的有效预测指标。

因此，检测EGFR基因突变对于指导NSCLC病人临床用药具有重要的参考价值。

（EGFR）是一个170 kDa的跨膜糖受体，由表皮生长因子激活，阻碍细胞的生长和分化。

EGF 或TGF α对EGFR的结合激活受体的激酶活力。

EGFR结尾的酪氨酸残基Tyr 106八、Tyr 114八、和Tyr 1173是EGF结合后发生的自动的要紧位点。

一旦被激活，EGFR1068位和1173位磷酸化的酪氨酸残基就能够介导 Grb2对EGFR的结合。

另外，1173位磷酸化的酪氨酸残基是 SHC在EGFR上的要紧结合位点。

EGFR普遍散布在许多正常和恶性中，其过度表达和自我激活可能与许多的发生进展有关。

目前要紧用于各类上皮源性包括头颈部、、和等的研究。

表皮生长因子受体介导的信号转导途径
表皮生长因子与其受体－表皮生长因子受体结合后可引发一系列细胞内变化，最终使细胞发生分化或增殖。

表皮生长因子受体是一种受体酪氨酸，而受体酪氨酸蛋白激酶→Ras→MAPK途径是表皮生长因子刺激到内的最主要途径。

它由以下成员组成：表皮生长因子受体→含有SH2的接头蛋白(如Grb2)→释放因子(如SOS)→Ras蛋白→MAPKKK(如Raf1)→MAPKK→MAPK→等
EGF受体介导的信号转导进程
表皮生长因子与受体结合后，能够使受体发生化，从而改变了受体的构象，使其中的蛋白酪氨酸激酶活性增强，受体自身的酪氨酸残基发生磷酸化，磷酸化的受体便形成了与含SH2结构域的蛋白分子Grb2结合的位点，致使Grb2与受体的结合。

Grb2中有两个SH3结构域，该部位与一种称为SOS的互换因子结合，使之活性改变，SOS那么进一步活化Ras，激活的Ras作用于MAPK
激活系统，致使ERK的激活。

最后ERK转移到细胞核内，致使某些转录因子的活性改变从而改变基因的表达状态及细胞的增殖与分化进程。

EGFR是原癌基因c-erbB1的表达产物，是表皮生长因子受体（HER）家族成员之一。

该家族包括HER1（erbB1，EGFR）、HER2（erbB2，NEU）、HER3（erbB3）及HER4（erbB4）。

HER家族在细胞生理进程中发挥重要的调剂作用。

EGFR普遍散布于哺乳动物上皮细胞、成纤维细胞、胶质细胞、角质细胞等细胞表面，EGFR信号通路对细胞的生长、增殖和分化等生理进程发挥重要的作用。

EGFR等蛋白酪氨酸激酶功能缺失或其相关信号通路中关键因子的活性或细胞定位异样，均会引发肿瘤、糖尿病、免疫缺点及心血管疾病的发生。

散布
EGFR普遍散布于哺乳动物上皮细胞、成纤维细胞、胶质细胞、角质细胞等细胞表面，EGFR信号通路对细胞的生长、增殖和分化等生理进程发挥重要的作用。

EGFR等蛋白酪氨酸激酶功能缺失或其相关信号通路中关键因子的活性或细胞定位异样，均会引发肿瘤、糖尿病、免疫缺点及心血管疾病的发生。

EGFR研究进展
EGFR的单克隆抗体西妥昔单抗和帕尼单抗的问世大大拓宽了转移性结直肠肿瘤疗效，而当人们意识到利用免疫组织化学技术检测EGFR蛋白表达阳性与应用EGFR单抗医治的疗效并无相关性，便致力于可能的疗效预测标志物的研究。

EGFR信号转导系统下游的例如K-ras、BRAF、PIK3CA的基因突变，和肿瘤抑制基因PTEN的失活都成了研究的热点。

在结直肠癌中，K-ras基因突变率为35%-45%，已成为EGFR单克隆抗体医治转移性结直肠癌的要紧疗效预测标志物。

另外，在K-ras野生型基因的患者中，BRAF、PIK3CA基因突变和PTEN的缺失表达，都可能与EGFR单克隆抗体的耐药有关，但在这些可能的疗效预测标志物被运用到临床实践中前，还需进一步地研究以明确他
们的价值，以期在选择适合同意EGFR单克隆抗体的患者中起到更大的作用，而K-ras 基因突变被作为医治前的疗效预测标志物，那么是开辟了转移性结直肠癌个体化医治的第一步。

EGFR和KRAS基因检测意义
EGFR表达EGFR表达EGFR表达于正常上皮细胞表面，而在一些肿瘤细胞中常过表达，EGFR的过表达和肿瘤细胞的转移、侵润、预后差有关。

EGFR信号通路EGFR 信号通路Shc Grb2 PI3K Sos-1 Ras MEKK-1 Raf MEK mTOR MKK-7 ERK JNK AKT EGFR靶向药物分类EGFR靶向药物分类EGFR突变EGFR突变EGFR酪氨酸激酶区域的突变要紧发生在18－21外EGFR酪氨酸激酶区域的突变要紧发生在18－21外酪氨酸激酶区域的突变要紧发生在18 显子, 其中19和21号外显子突变覆盖突变的90%. 显子, 其中19和21号外显子突变覆盖突变的19 细胞外区域跨膜区域细胞内区域EGFR突变率EGFR突变率100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% NS腺癌NS 腺癌东亚欧美EGFR突变细胞癌基因休克假说EGFR突变细胞—癌基因休克假说突变细胞EGFR基因检测在肺癌中的应用EGFR基因检测在肺癌中的应用检测方式：DNA测序法检测方式检测周期: 检测周期7-10天检测位点：EGFR的18，19，21号外显子检测位点标本要求：标本要求肿瘤组织病理切片，厚度8-10μm, 5-10张，要求肿瘤组织占标本的70%以上支气管镜活检组织，厚度8-10μm，需要10张切片KRAS基因检测KRAS基因检测KRAS蛋白处于EGFR信号通路通路的下游。

在生理情形下，EGFR信号通路活化后，KRAS蛋白短暂激活，其后迅速失活，KRAS 激活/失活效应是受控的。

而KRAS基因突变时，能够致使EGRF信号通路持续激活，加速肿瘤细胞增殖。

KRAS基因突变KRAS基因突变KRAS基因突变96%发生在第2号外显子的1二、13号密码子。

20% 非小细胞肺癌、30-35%大肠癌患者中存在KRAS基因突变。

KRAS基因检测的重要性基因检测的重要性? K-ras基因能够是正常状态（称为野生型）或异样状态（突变型）。

? K-ras突变型编码异样的蛋白，刺激增进恶性肿瘤细胞的生长和扩散；而且不受上游EGFR的信号阻碍，因此对抗EGFR医治成效差。

KRAS基因检测能够挑选出EGFR靶向医治药物有效的大肠癌患者，帮忙医生选择对肿瘤病人最有效的医治方式，实现肿瘤病人的个体化医治。

目前在欧美国家，大肠癌患者内科医治前已常常规检测KRAS状态，而且成为可否报销相关抗EGFR医治费用的凭据。

KRAS基因- K-ras基因突变发生的时刻基因基因突变发生的时刻? K-ras基因突变发生在肿瘤恶变的初期，并且原发灶和转移灶的K-ras基因高度维持一致。

一样以为，K-ras基因状态可不能因医治而发生转变。

大肠癌患者K-ras基因突变异常的概率为30%－35%。

KRAS基因- K-ras基因检测（K-ras,p21）临床意义? 检测K-ras基因突变是深切了解癌基因的情况、了解各类癌症的进展预后、放化疗疗效的重要指标。

? 基因突变发生在肿瘤恶变的初期，而且原发灶和转移灶的K-ras基因高度维持一致。

一样以为，K-ras基因状态可不能因
治疗而发生转变。

? 基因突变见于20%的非小细胞肺癌(NSCLC)，其中肺腺癌占30%～50%。

KRAS基因检测在大肠癌中的应用KRAS基因检测在大肠癌中的应用检测方式：DNA测序法检测方式检测周期: 检测周期7-10天检测位点：KRAS基因第2外显子的12，13密码子检测位点标本要求：标本要求肿瘤组织病理切片，厚度8-10?m, 5-10张，要求肿瘤组织占标本的70%以上。

肠镜活检组织，厚度8-10?m，需要10张切片。

项目开展情形生物医治研究室于2020年10月开始进行靶向药物特异靶点的基因检测工作，目前已经独立检测60余例，突变率达到27%，为个体化医治提供依据，取得较好的临床疗效，希望更多的临床医生充分利用那个技术平台，实现肿瘤病人的个体化医治。

上皮生长因子受体
（Epidermal Growth Factor Receptor; EGFR）是上皮生长因子（EGF）细胞增殖和信号传导的受体。

EGFR属于ErbB受体家族的一种，该家族包括EGFR (ErbB-1), HER2/c-neu (ErbB-2), Her 3 (ErbB-3) 和Her 4 (ErbB-4)。

EGFR也被称作HER一、ErbB1，突变或过表达一样会引发肿瘤。

EGFR是一种糖蛋白，属于酪氨酸激酶型受体，细胞膜贯通，分子量170Da。

EGFR位于细胞膜表面，靠与配体结合来激活，包括EGF和TGFα（transforming growth factor α）. 激活后，EGFR有单体转化为二聚体-尽管也有证听说明，激活前也存在二聚体。

EGFR还可能和ErbB受体家族的其他成员聚合来激活，例如ErbB2/Her2/neu。

EGFR二聚后能够激活它位于细胞内的激酶通路。

包括Y992, Y1045, Y1068, Y1148 and Y1173等激活位点。

那个自磷酸化能够引导下游的磷酸化，包括MPAK，Akt和JNK通路, 诱导细胞增殖。

受体激活关于皮肤的免疫来讲很重要。

研究说明在许多实体肿瘤中存在EGFR的高表达或异样表达。

EGFR与肿瘤细胞的增殖、血管生成、肿瘤侵袭、转移及细胞凋亡的抑制有关。

其可能机制有：EGFR的高表达引发下游信号传导的增强；突变型EGFR受体或配体表达的增加致使EGFR的持续活化；自分泌环的作用增强；受体下调机制的破坏;异样信号传导通路的激活等。

EGFR的过表达在恶性肿瘤的演进中起重要作用，胶质细胞、肾癌、、前列腺癌、胰腺癌、乳腺癌等组织中都有EGFR的过表达。

对胶质细胞瘤的研究发觉EGFR的高表达要紧与其基因扩增有关。

但有时EGFR表达水平的调剂异样也存在于翻译及翻译后。

EGFR 在肿瘤中的高表达还可能与活化后降解减少有关，一些研究指出c-Src可通过抑制受
体泛素化和内吞作用而上调EGFR水平。

许多肿瘤中有突变型EGFR存在，现已发觉许多种EGFR突变型。

突变型EGFR的作用可能包括：具有配体非依托型受体的细胞持续活化；由于EGFR的某些结构域缺失而致使受体下调机制的破坏；异样信号传导通路的激活；细胞凋亡的抑制等。

突变体的产生是由于EGFR基因的缺失、突变和重排。

EGFR的配体对细胞内信号传导有专门大阻碍。

EGFR的配体通过自分泌形式激活EGFR 增进细胞增殖，他们的共表达往往预示肿瘤预后不良，例如，在乳腺的研究中发觉，TGFα与EGFR共表达，且这种共表达与病人的生存率显著相关。

Kopp等人对结/直肠癌的研究说明肿瘤的自分泌生长是EGFR的过表达及其配体表达一起作用的结果。

另外，对EGFR与肿瘤的血管生成、高侵袭性及转移关系的研究发觉EGFR能够通过Ang-1及VEGF等因子水平的调剂而阻碍肿瘤血管生成。

相关术语说明
表皮生长因子受体
在过去的20连年里，制药公司与生物技术公司一直将表皮生长因子受体（EGFR）作为肿瘤医治的要紧靶点，因为有研究说明阻断EGFR，就能够够使细胞信号传递中断，从而遏制细胞的生长繁衍。

表皮生长因子受(Epidermal Growth Factor Receptor)
表皮生长因子
抽烟史与健择方案的关系在NSCLC靶向医治中,患者抽烟史可阻碍医治转归,例如表皮生长因子(EGFR)抑制剂医治时,抽烟史(专门是从未抽烟者)是这些药物有效、有生存受益的临床预测指标。

上皮生长因子受体(Epithelial Growth Factor Receptor)
尽管Argos与SpitZ结合的模式和上皮生长因子(EGF)和上皮生长因子受体(EGFR)结合的模式十分相似，但Argos与上皮生长因子受体(EGFR)却无相同的氨基酸序列也无相同的结构。

短语
EGFR inhibitors 因子蒙体克制剂
MDRD eGFR 估量肾小球过滤率
EGFR inhibitor 抑制剂
熟悉EGFR
熟悉EGFR-正常割裂中的EGFR
在配体与表皮生长因子受体（EGFR）结合后，受体发生了二聚作用，二聚作用既包括两个同种受体分子的结合（同源性二聚作用），也包括人类EGF相关性受体（HER）酪氨酸激酶家族中的不同成员的结合（异源性二聚作用）。

二聚作用后是酪氨酸残基的自磷酸化作用。

这
在配体与表皮生长因子受体（EGFR）结合后，受体发生了二聚作用，二聚作用既包括两个同种受体分子的结合（同源性二聚作用），也包括人类EGF相关性受体（HER）酪氨酸激酶家族中的不同成员的结合（异源性二聚作用）。

二聚作用后是酪氨酸残基
的自磷酸化作用。

这些磷酸化的残基是召募适配蛋白和额外的酪氨酸激酶底物的结合位点。

蛋白质在激活的受体复合物中彼此作用刺激ras蛋白，致使磷酸化级联反映的发生和丝裂原激活蛋白（MAP）激酶的激活。

或转录信号传导和激活、磷脂酰肌醇激酶-3（PI3K）-Akt和应激活化蛋白激酶（SAPK）信号传导通路将被激活。

这些信号通路依次触发基因转录，同时操纵细胞增生、分化和生存的通路被激活。

EGFR介导信号通路的特异性和强度取决于激活蛋白的性质和四种EGFR家族成员的水平。

与HER2结合的配体不详，但当HER2和EGFR共表达时，前者常常与配体激活的后者结合形成二聚体。

这种异源性二聚体与EGFR同源性二聚体相较，往往具有更高的再利用率、稳固性和传导信号的能力。

EGFR也能与HER3和HER4发生二聚作用，其产物具有更高的持久性和更强的PI3K活性。

EGFR信号传导通路一旦配体结合的EGFR被内吞入细胞，信号将终止，受体将被降解或再循环到细胞膜表面，这取决于配体的性质。

例如，EGF结合的受体将被降解，而TGF-α结合的受体那么进入再循环。

不同的生长因子会阻碍EGFR信号通路的数量和持续时刻。

EGFR信号通路有多重的生物学作用。

例如，ras-MAPK信号转导通路刺激细胞的割裂和迁移。

EGFR也是多种受体通路的重要介体，起到信号集聚点的作用，能够将信号整和与多样化。

例如，在应激、膜解聚作用和一些非生理性刺激物（包括氧化剂、放射线和烷化剂）的反映中，反向激活能诱导EGFR酪氨酸激酶的磷酸化并随后发生信号的转导。

EGFR家族的成员在正常发育中起了重要的作用，但在人类肿瘤中常常过度表达并失去操纵，具体内容见"恶性肿瘤中的EGFR"。

正确明白得eGFR公式
肾小球滤过率（GFR）是慢性肾脏病（CKD）诊断和分期所依据的重要功能指标。

它不能直接测量，只能用某些物质的肾脏或血浆清除率表示。

临床经常使用内生肌酐清除率（Ccr）估算GFR，但测量Ccr操作繁琐，阻碍因素多，易出误差。

数十年前临床学者即开始尝试开发含肌酐及性别、年龄、身高和体重等因素的GFR估算值（eGFR）公式。

eGFR公式为CKD分期提供了极大便利，但其缺点促令人们不断对其进行完善。

最近发布的美国肾脏病膳食改良实验（MDRD）公式和慢性肾脏病流行病学合作（CKD-EPI）公式确实是尽力的结果。

在MDRD公式本土化进程中，我国和日本为公式添加的种族系数别离为和。

同是黄种人，为何有如此大的不同？是不是有种族之外的阻碍因素？我国和日本肾病学者已开始一起探讨这一话题。

为此，北京大学第一医院左力教授论述了eGFR公式开发历程，并就种族系数的不同性进行评说，希望能帮忙读者正确明白得eGFR公式。

MDRD公式应用
发表于1999年的MDRD原始公式用苦味酸法测量肌酐，用接近GFR真值的碘
（125I）海醇肾脏清除率作为GFR参考值（rGFR）。

用于开发公式的1628例患者平均肌酐mg/dl，rGFR ml/（min・）。

经检测，该公式在美国人群中的准确性和精准性优于既往eGFR公式，取得肾脏病预后生存指南（K/DOQI）的推荐。

为提高准确性，研究者于2006年用更准确的同位素稀释质谱法（IDMS-Traceable）从头测量上述1628例患者的血肌酐水平，将从头表达的MDRD公式用于美国国家健康和营养调查研究（NHANES）人群，取得eGFR<60 ml/（min・）患病率为%。

大量研究证明，上述公式用于GFR正常或接近正常的人群时，所得eGFR将低于rGFR。

2020年研究者将样本量扩大到8254例，平均rGFR 68 ml/（min・），平均肌酐mg/dl，用IDMS-Traceable法测定肌酐，再次修订eGFR公式，取得CKD-EPI公式。

该公式用于NHANES人群，取得eGFR<60 ml/（min・）的患病率为%。

eGFR协作组对公式的改良
由北京大学第一医院肾内科牵头的我国9个肾脏病中心组成eGFR协作组，于2005年对MDRD原始公式进行查验，发觉当rGFR接近正常或较低时，MDRD公式会较rGFR偏低或偏高。

2006年，协作组纳入684例CKD患者，通过添加种族系数对MDRD原始公式进行本土化。

研究采纳双血浆法锝（99mTc）-DTPA血浆清除率作为rGFR，患者平均rGFR 55 ml/（min・）；用苦味酸法测定血浆肌酐，通过线性回归将肌酐标准化为MDRD肌酐，回归斜率，即将eGFR协作组肌酐乘以转化为MDRD肌酐，决定系数为。

将标准化肌酐水平（平均mg/dl）、患者性别和年龄代入MDRD原始公式计算eGFR，以eGFR 为自变量、rGFR为因变量进行线性回归，确信种族系数为。

协作组还发布了与MDRD 原始公式形式相同、无种族系数的eGFR公式：eGFR=175×[肌酐（mg/dl）] ×[年龄(岁)] ×性别(男性=1，女性=。

用其取得北京市人群eGFR< 60 ml/（min・）患病率为%。

日本eGFR公式转变进程
2007年，日本学者开发了适合其民族的eGFR公式。

该公式来自248例CKD患者，利用IDMS-Traceable肌酐方式并校准到MDRD研究方式。

患者来自两组研究，平均血肌酐水平别离为mg/dl和mg/dl，利用菊粉清除率作为rGFR。

一样通过为MDRD原始公式添加种族系数的方式，取得的种族系数为。

该公式估算日本人群eGFR<60 ml/（min・）患病率为20%。

2020年，日本学者将样本量扩大到413例，对种族系数进行调整。

肌酐方式和rGFR方式不变，入选患者平均rGFR 59 ml/（min・），平均肌酐mg/dl，调整后的种族系数为。

美、中、日eGFR相关研究启发
中国和日本为MDRD公式添加的种族系数别离为和。

同为黄种人，为何不同如此之大？
当做立线性回归模型时，咱们假设变量呈线性相关。

若是一个变量的转变完全能
够用另一变量的转变来讲明，那么此回归分析决定系数为1。

通常临床研究不可能达到如此精度。

在上述种族系数调整建模进程中，实际作了如下假设：rGFR= MDRD× 种族系数+ 随机误差。

据此，假设用MDRD原始公式计算出的eGFR与rGFR之间无系统不同，那么全数为随机误差，种族系数是1；假设二者间有系统不同，那么该不同只能由种族系数承担，尽治理想的种族系数是“种族不同”（可能包括躯体组成、饮食不同、乃至基因方面不同），而非其他缘故致使的系统误差。

在计算种族系数时，以下因素可能致使偏大或偏小。

rGFR的系统不同MDRD研究利用碘海醇皮下注射，计算4个时段平均rGFR；我国采纳双血浆法99mTc-DTPA血浆清除率；日本采纳持续静脉点滴菊粉，计算3个时段菊粉清除率均值。

这三种rGFR存在系统不同：CKD-EPI公式计算的人群平均rGFR为68 ml/（min・），平均肌酐mg/dl；日本平均rGFR 59 ml/（min・），平均肌酐mg/dl。

日本的平均肌酐比美国低mg/dl，而相应rGFR却也低9 ml/（min・）。

由于日本血肌酐是跟MDRD研究校准过的，这种rGFR之间的不同只能用rGFR系统误差来讲明。

日本rGFR偏低，固然计算的种族系数<。

肌酐方式的系统不同我国和日本的肌酐都校准到MDRD研究的方式，但需要把我国的肌酐乘以才能转化为MDRD肌酐值。

假设eGFR协作组测定的肌酐为mg/dl，转变成MDRD肌酐就成了mg/dl。

那个庞大的系统误差令人联想到是不是存在因校准带来系统误差，例如标本转运、冻融、测量进程等。

若是用在中国国内测量的肌酐值直接套入加中国系数的MDRD方程，取得的eGFR 高于GFR真值。

若是利用加种族系数的方程，那么第一需把肌酐校准到MDRD研究的方式，可直接将肌酐乘以，再套用加种族系数的方程。

咱们不建议如此做，事实上直接利用公式eGFR=175×[肌酐(mg/dl)]×[年龄(岁)]× 性别(男性=1，女性=更方便。

由于不同实验室存在系统误差，若是用该公式进行人群研究，建议第一将肌酐水平校准到eGFR协作组方式，不然取得的eGFR下降患病率不同较大。

但如果是将公式用于个体患者和临床决策，就没有必要进行这种复杂校准。

rGFR散布的系统不同原始MDRD研究的rGFR平均值为ml/（min・），据此NHANES的eGFR降低患病率为%；CKD-EPI研究rGFR均值为68 ml/（min・），据此NHANES的eGFR降低患病率为%。

这说明用于研发公式的患者rGFR散布对eGFR公式的最终形式有专门大阻碍。

当rGFR包括初期CKD或健康者较少时，研发的公式不适用于健康人群。

MDRD公式和日本修订公式的rGFR均包括较少的初期CKD患者，日本公式乃至还包括急性肾衰竭患者。

因此用于社区人群调查时，eGFR <60 ml/（min ・）患病率将被高估。

rGFR散布不同致使的公式形式不同不但阻碍对人群eGFR降低患病率的估量，也会致使种族系数误差。

如何使eGFR更接近真值是个难题，需要证明不同的rGFR是不是有系统不同，并计算其大小。

另外，在用肌酐估量eGFR公式时，是不是存在“真正的”种族系数、种族系数是多少。

EGFR（epithelial growth factor receptor，表皮生长因子受体）本身具有酷氨酶激酶活性，一旦与表皮生长因子（EGF）组合可启动细胞核内的有关基因，从而增进细胞割裂增殖。

胃癌、乳腺癌、膀胱癌和头颈部鳞癌的EGFR表达增高。

EGFR是原癌基因c-erbB1的表达产物，是表皮生长因子受体（HER）家族成员之一。

该家族包括HER1（erbB1，EGFR）、HER2（erbB2，NEU）、HER3（erbB3）及HER4（erbB4）。

HER家族在细胞生理进程中发挥重要的调剂作用。

试剂盒：
人表皮生长因子受体(EGFR)ELISA试剂盒
本试剂盒仅供研究利用。

药品名称：
通用名：人表皮生长因子受体(EGFR)酶联免疫分析试剂盒
利用目的：
本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中表皮生长因子受体(EGFR)含量。

实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人表皮生长因子受体(EGFR)水平。

用纯化的人抗
-EGFR抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入表皮生长因子受体(EGFR)再与HRP标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，通过完全洗涤后加底物TMB 显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的表皮生长因子受体呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人表皮生长因子受体(EGFR)浓度。

试剂盒组成
标本要求
1．标本搜集后及早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

假设不能马上进行实验，可将标本放于-20℃保留，但应幸免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤：
1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中别离加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl别离加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔别离加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl别离加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中别离加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl别离加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中别离加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中别离取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔别离加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。

（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度别离为6μg/L，4μg/L ，2μg/L，1μg/L，μg/L）。

2.加样：别离设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。

在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽可能不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。