药物的鉴别ppt课件

2019/9/6
# 35
中国药典试样制备方法
• 用于固体——（溴化钾）压片法、糊法 • 用于液体——膜法、溶液法
测定前应录制聚苯乙烯薄膜光谱图，并与标准图谱对照， 以检查仪器性能
2019/9/6
# 36
注意问题：
多晶问题
• 规定样品前处理方法 • 当未规定药用晶型时，可采用对照品，并用适当溶剂并行 重结晶 • 已规定药用晶型的，则应采用相应药用晶型的对照品依法比对
2019/9/6
# 32
光谱鉴别法
1. 紫外鉴别法（UV）
• λmax， λmin • λ-A • λ-吸收系数 • A λ1 /A λ2 • 化学处理后测定产物的光谱特性
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# 33
例 地蒽酚的鉴别试验： 取含量测定项下的溶液扫描240~400nm范围， 在257、289与356nm的波长处有最大吸收。 规定： A257/A289应为1.06~1.10 A356/A289应为0.90~0.94
过化学反应来鉴别药物的真伪。
无机药物→阴离子和阳离子的特殊反应； 有机药物→典型的官能团反应。
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# 17
无机金属盐——
1. 钠盐、钾盐、钙盐的焰色反应
钠离子
取铂丝，
盐酸湿润，
蘸取供试品，
在无色火焰中燃
烧火焰显各离子的特
征色
钾离子
钙离子
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# 18
2. 铵盐
原理：
NH
制剂
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#7
性状 （Description）
定义： 反映药物特有的物理性质，如外观、
溶解度和物理常数等。
外观
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溶解度
物理常数
#8
外观：指药品的外表感观和色泽，包括药物的 聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。
示例1：ChP2010中盐酸氯丙嗪的性状描述：本品为白色或 乳白色结晶性粉末；有微臭，味极苦；有引湿性；遇光渐 变色；水溶液显酸性反应。
2.沉淀生成反应鉴别法 指供试品溶液中加入 适当的试剂溶液，在一定条件下进行反应，生 成不同颜色的沉淀。
• 硝酸银——丙二酰脲类、氯化物、维C • 银镜反应——异烟肼 • 氧化亚铜——葡萄糖 • 铜盐——磺胺类 • 三氯化铁——苯甲酸盐 • 重金属离子——利多卡因 • 生物碱沉淀剂——氮杂环类
2019/9/6
A=-lgT=ECL
E1%1cm=A/(C×L)
C=1%(g/ml)，L=1cm
这两种物理常数可用以区别药品、检
查纯度或测定制剂的含量。
2019/9/6
# 15
鉴别试验
一般鉴 别试验
专属鉴 别试验
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# 16
一般鉴别试验
General identification test
依 据： 某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通
对于一个药物多个吸收峰的峰值相差较大时，采用单一 浓度不易观察到全部吸收峰，可采用两种浓度的供试液 分别测定其最大吸收波长
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# 34
2. 红外光谱法（IR）
特点：专属性强，应用广（固体、液体、气体）
用途：原料药 同类药（其他方法不易区分的 ）
磺胺类、甾体激素类、半合成抗生素
测定方法： 标准图谱对照法（ChP，2010） 对照品比较法（USP,32）
# 10
《中国药典》
溶解度
极易溶解 易溶 溶解 略溶 微溶 极微溶解 几乎不溶或不溶
溶剂体积 (1g/ml)
<1 1～10 10～30 30～100 100～1000 1000～10000
>10000
2019/9/6
# 11
物理常数：用于药品鉴别，反映其纯杂程度。 ChP2010药典收载的物理常数包括：相对密度、
•托烷生物碱类
（硫酸阿托品、氢溴酸山莨菪碱、氢溴酸东莨菪碱）
此类生物碱中具有莨菪酸结构，有Vitali反应，显紫色
水解
发烟硝酸
托烷类
莨菪酸
三硝基衍生物
KOH醇溶液 醌型（紫色）
2019/9/6
# 24
专属鉴别试验
Specific identification test
依 据： 每一种药物化学结构的差异及其所引起的物
# 30
3.荧光反应鉴别法
常用的荧光发射形式： （1）在适当溶剂中药物本身可在可见光下发射荧光
如：硫酸奎宁在稀硫酸溶液中显蓝色荧光 （2）药物与适当试剂反应后发射出荧光
如:药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光； 氯普噻吨加硝酸后用水稀释，在紫外灯下显 绿色荧光。
2019/9/6
# 31
4.气体生成反应鉴别法
所建立的指纹图谱在规定的方法条件下的耐用程度特征图谱主要指有效成分的特征峰谱图山楂叶提取物54一溶液的浓度一溶液的浓度二溶液的温度二溶液的温度三溶液的酸碱度三溶液的酸碱度四试验时间四试验时间五鉴别方法的验证五鉴别方法的验证鉴别试验条件鉴别试验条件55五鉴别方法的验证专属性指其他成分其他药物成分杂质降解产物辅料等存在的情况下采用的鉴别方法能否正确地鉴别出被测物质的特性
#4
2019/9/6
#5
ChP(2010)凡例中对药物鉴别的定义为：
“鉴别项下规定的试验方法”，仅反映该药品某些 物理、化学或生物学等性质的特征，不完全代表 对该药品化学结构的确证”。
2019/9/6
#6
第二节 鉴别试验的项目
鉴别
原料药
性状（description
）
鉴别（identification）
#3
一、鉴别试验的定义与目的
定义——根据药物的分子结构、理化性质，采用 物理、化学或生物学的方法来判断药物的真伪。
目的——判断药物的真伪，是药品质量检验工作 中的首项任务。
药典收载的鉴别试验——均为用来证实贮藏的药 物是否为其所标示的药物
鉴别试验方法应有专属性，一般有2～3条。
2019/9/6
α =[α ]tD×C×L
浓度对比
旋度的影
[ ]tD

100
CL
响
指百分浓度
例 维生素C的比旋度测定：“取本品，精密称定，加
水溶解并定量稀释使成每1ml中约含0.10g的溶液，依
法测定，比旋度为+20.5°至+21.5°”。
2019/9/6
# 14
吸收系数
• 在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质 在单位浓度（C）、单位液层厚度（L）时的吸收 度，称为吸收系数（ E和11%cm ε）
•芳香第一胺类
（对乙酰氨基酚、盐酸普鲁卡因、艾司唑仑、硝西泮、奥沙西 泮、磺胺嘧啶）
方法：
1ml稀HCl 0.1mol/L 滴加碱性
供试品
橙黄色到
（50mg）
亚硝酸钠 β -萘酚 猩红色沉淀
R
NH2 NaNO2 ， HCl R
+
_
N N Cl
2019/9/6
NaOH
OH
R
HO NN
(红色）
# 23
馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、 吸收系数、碘值、皂化值、酸值。
2019/9/6
# 12
熔点
定义 -固体→液体的温度 -熔融同时分解的温度 -初融-全熔的一段温度 ChP收载的方法 -第一法：测定易粉碎的固体药品 -第二法：测定不易粉碎的固体药品 -第三法：测定凡士林或其他类似物 要求报告初熔和终熔
• 三氯化铁——酚羟基（紫色） • 重氮化-偶合——芳伯胺基（橙红） • 茜素氟蓝法——有机氟化物（蓝紫色） • 双缩脲——氨基醇结构（蓝紫色） • Vitali反应——托烷生物碱类（深紫色） • 四氮唑——肾上腺皮质激素类（红色或蓝色） • 茚三酮——类似氨基酸结构（蓝紫色）
2019/9/6
# 29
例 溴化新斯的明项下所述：“本品的熔点为171℃~176℃，
熔融时同时分解”。
2019/9/6
# 13
比旋度
• [α]tD 是手性药物特性及其纯度的主要指标
• 在一定波长（589.3nm）与温度（20℃）下 ，偏振光透过长1dm，含旋光性物质1g/1mL的 溶液时
测得的旋光度α，称为比旋度。 注意溶剂、
# 19
典型的官能团反应
• 有机氟化物
（地塞米松、依诺沙星、氧氟沙星、醋酸曲安奈德、醋酸氟轻松、 醋酸氟轻可的松）
茜素氟蓝
氧瓶燃烧
硝酸亚铈
有机氟
无机氟离子
pH4.3
蓝紫色络合物
F- +
O OH
OH
C H2N
+ Ce3+
CH 2 COOH
O
CH COO2H
茜素氟蓝
pH4.3
F Ce OO
O
CH 2 COOH
2019/9/6
#9
溶解度：一定程度上反映了药品的纯度。可供 精制或制备溶液时参考。药品在不同溶剂中的 溶解性能用“极易溶解、易溶、溶解、略溶、微 溶、极微溶解、几乎不溶或不溶”来描述。
例 磺胺嘧啶“在乙醇或丙酮中微溶，在水中几乎不溶； 在氢氧化钠试液中易溶，在稀盐酸中溶解”。
2019/9/6
2019/9/6
# 40
6.质谱法（MS）
• 在高真空状态下将被测物质离子化,按质子的
质荷比(m/z)大小分离进行定性和定量分析
2019/9/6
9-HO-LPT #1664 RT: 9.39 AV: 1 NL: 5.18E6 T: + c sid=-10.00 Q3MS [ 50.00-500.00]
4

OH


NH 3

H20
遇红色石 蕊试纸显 蓝色
Hg 2Cl2 2NH3 Hg (黑色) Hg (NH2 )Cl NH4Cl
无机酸根——
氯化物： Cl Ag AgCl (乳白色)
硫酸盐： SO42 Ba2 BaSO4 (白色)
2019/9/6
• 强碱处理——氨气（胺类、酰脲类、酰胺类） • 强酸处理——硫化氢气体（含硫药物） • 直火加热——碘蒸气（含碘药物） • 硫酸水解，加乙醇——醋酸乙酯香味（含醋
酸酯和乙酰胺类）
其他反应： • 使试剂褪色——如维C的靛酚反应；司可巴
比妥钠与溴、碘试液的反应 • 测定生成物熔点——操作繁、费时，应用少
一般鉴别试验 专属鉴别实验
某一类药物
此类药物中的某一 种药物
2019法
2019/9/6
第三节 鉴别方法
化学鉴别法
光谱鉴别法 色谱鉴别法
生物学法
呈色反应鉴别法 沉淀生成反应鉴别法
荧光反应鉴别法 气体生成反应鉴别法
测定生成物的熔点
紫外光谱鉴别法 红外光谱鉴别法
薄层色谱鉴别法 HPLC、GC鉴别法
400
450
500
# 41
Relative Abundance
7. X射线粉末衍射法（波长为0.01～1nm）
结晶物质的鉴别
比较 供试品 已知物质的X射线粉末衍射图
制剂的红外鉴别
• 品种正文中规定预处理方法 • 辅料无干扰，与原料药的标准图比对 • 如辅料干扰不能完全消除，在指纹区可规定3~5个待测成分
的特征吸收峰（cm-1），其误差应小于0.5%
2019/9/6
# 37
4.原子吸收法
利用原子蒸汽可以吸收由该元素作为空心 阴极灯发出的特征谱线，供试液溶液在特征谱 线处的最大吸收和特征谱线强度减弱程度进行 定性、定量分析。
100
427.17
90
80
70
60
50
40
30
20
102.02
59.94
274.21 318.23
10 68.96
129.93 144.95 218.16 246.16
302.22
362.28
0
50
100
150
200
250
300
350
m/z
428.18 432.18
415.17 433.21 473.23
第二章
药物的鉴别试验
（Identification test of drug）
2019/9/6
1
药品检验工作的基本规律
药物的鉴别试验 药物的杂质检查 药物定量分析与分析方法验证
2019/9/6
#2
药物的鉴别试验
概述 鉴别试验的项目 鉴别试验的方法 鉴别试验的条件
2019/9/6
理化学特性的不同，选用特有的灵敏的定性反 应，来鉴别药物的真伪。
例：巴比妥类药物
R1
4 CO
C5
R2
6 CO
NH
3
1 NH
2 CO
甾体激素类药物
C C
2019/9/6
# 25
区别：
• 一般鉴别试验：鉴别不同类别的药物 • 专属鉴别试验：区别同类药物或具有相同
化学结构部分的各个药物单体。
如：母核相同， 取代基不同
C H2N
O
CH 2 COOH
2019/9/6
蓝紫色络合物 # 20
• 有机酸盐
1.水杨酸盐
方法一：
红色配位化合物
水杨酸 + FeCl3
紫色配位化合物
方法二：
稀盐酸
醋酸铵
水杨酸盐
白色沉淀
沉淀溶解
2019/9/6
# 21
2.酒石酸盐
水浴加热 供试品溶液（中性）+ 氨制硝酸银
银镜
2019/9/6
# 22
2019/9/6
# 38
5. 核磁共振法（NMR）
测定供试品指定基团上质子峰的化学位移δ和 偶合常数进行药物的鉴别
2019/9/6
# 39
亚硝酸戊酯的NMR法鉴别（USP法）
• 亚硝酸戊酯（Amyl Nitrite）是3-甲基-1-丁醇和2-甲基-1 -丁醇的亚硝酸酯的混合物
δ约为1ppm处应显示甲基质子的双重峰； δ约为4.8ppm处应显示亚硝基α位的亚甲基质子的多重峰
指纹图谱鉴别法
# 27
化学鉴别法
要求： 反应迅速、现象明显、明确的反应原理
包括：
呈色反应鉴别法、沉淀生成反应鉴别法、 荧光反应鉴别法、气体生成反应鉴别法、 使试剂褪色的鉴别法、测定生成物的熔点
2019/9/6
# 28
1.呈色反应鉴别法 指供试品溶液中加入适当的 试剂溶液，在一定条件下进行反应，生成易 于观测的有色产物。