β3－肾上腺素能受体基因过表达促进心肌细胞肥大

β3－肾上腺素能受体基因过表达促进心肌细胞肥大
张慧;王丽;张源;马依彤;杨毅宁;马苗苗
【期刊名称】《实用医学杂志》
【年(卷),期】2016(032)008
【摘要】目的：通过慢病毒转染使心肌细胞过表达β3－肾上腺素能受体（β3-adrenoreceptor ，β3-AR ）基因，研究其对体外培养鼠原代心肌细胞肥大的影响。

方法：体外培养新生 SD 大鼠心室肌细胞，细胞培养24 h后，分别以转染复
数（multiplicity of infection，MOI）20、50、80、100转染只携带绿色荧光蛋白（GFP）慢病毒（空病毒），病毒转染72 h 后，在倒置荧光显微镜下观察绿色
荧光蛋白 GFP 表达情况，以确定最佳转染复数。

心肌细胞以最佳 MOI 值转染携
带β3-AR 基因慢病毒24 h 后，去甲肾上腺素（ norepinephrine ， NE ）诱导
心肌细胞48 h ，建立转染后体外心肌肥厚模型。

蛋白免疫印迹法（ Western
Blot ）检测β3-AR、原癌基因c-myc、c-fos 的蛋白表达水平。

结果：用不同MOI 的慢病毒转染心肌细胞，转染效率不同，以 MOI ＝50转染效率最高； NE
诱导心肌细胞48 h 后，随β3-AR 表达增加，c-myc、c-fos 蛋白水平表达增加（Control 组：0．098±0．012、0．105±0．008 vs NE组：0．174±0．012、0．164±0．015 vs β3-AR 转染组：0．268±0．010、0．325±0．014，P ＜0．05），心肌肥厚加重。

结论：以携带β3-AR 的慢病毒转染心肌细胞可有效增
加β3-AR 表达，随β3-AR表达增加，心肌肥厚加重。

%Objective To investigate the effect of β3-adrenoreceptor (β3-AR)overexpression on cardiac hypertrophy. Method Sprague-Dawley rat neonatal ventricular cardiomyocytes (NRVMs) were isolated and cul-tured in vitro.The infection
of lentiviruswas examined after cardiomyocytes were infected with lentivirus at differ-ent multiplicity of infection (MOI) of 20、50、80 and 100. Fluorescence microscopy was used to observe the ex-pression of GFP and to confirm the best MOI for lentivirus infection. Following the enforced expression of β3-AR by lentivirus, 2uM norepinephrine (NE) was used to treatment the infected cardiomyocytes for 48h. Expressions of β3-AR、c-myc and c-fos protein in cardiomyocytes were detected by Western Blot. Results The results of fluorescence microscopy indicated that the best MOI was 50. The protein level of β3-AR was significantly in-creased in β3-AR overexpression group compared with the control group and the NE treatment group (P < 0.05). Following the treatment of NE , the expressions of c-myc and c-fos were also significantly increased in β3-AR overexpression group compared with the control group (P < 0.05). Conclusion Over-expression of β3-AR can aggravate cardiomyocyte hypertrophy.
【总页数】4页(P1219-1222)
【作者】张慧;王丽;张源;马依彤;杨毅宁;马苗苗
【作者单位】832000 石河子大学医学院第一附属医院心内二科;832000 石河子大学医学院第一附属医院心内二科;832000 石河子大学医学院第一附属医院心内二科;830000 乌鲁木齐市，新疆医科大学第一附属医院心脏中心;830000 乌鲁木齐市，新疆医科大学第一附属医院心脏中心;832000 石河子大学医学院第一附属医院心内二科
【正文语种】中文
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