临床医学检验临床免疫技术:沉淀反应
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
临床医学检验临床免疫技术:沉淀反应
1、单选免疫固定电泳是下列哪两种技术的结合()
A.区带电泳+免疫沉淀反应
B.区带电泳+免疫凝集反应
C.免疫双扩散+区带电泳
D.免疫单扩散+区带电泳
E.免疫双扩散+(江南博哥)免疫凝集反应
正确答案:A
参考解析:免疫固定电泳技术是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。
检测标本可以是血清、尿液、脑脊液或其他体液。
2、单选琼脂糖作为电泳载体的优点,除外()
A.琼脂糖杂质少
B.在加热后的缓冲液中易融,常温时很快凝固
C.色泽透明、质地均匀
D.不会产生电渗
E.提高了敏感性及反应速度
正确答案:D
参考解析:其特点是提高了敏感性及反应速度,并可将带电性不同的组分区分开。
3、单选下列试验属于沉淀反应的有O
A.肥达反应
B.外斐反应
C.抗链球菌“0”试验
D.免疫比浊
E.梅毒RPR试验
正确答案:D
4、单选单向琼脂扩散法是将相应的O
A.抗体均匀地混入琼脂糖凝胶内制板
B.抗原均匀地混入琼脂糖凝胶内制板
C.补体均匀地混入琼脂糖凝胶内制板
D.抗原抗体复合物均匀地混入琼脂糖凝胶内制板
E.抗原抗体同时均匀地混入琼脂糖凝胶内制板
正确答案:A
参考解析:单向琼脂扩散法是将抗体混入9g/1.琼脂糖,未凝固前倾注成平
板,然后在上打孔,将抗原加入孔中,让其自由扩散,24~48h后可见孔周围出现沉淀环,测定环的直径与待检标本的关系有两种方法:一是Manini曲线,适用大分子抗原和长时间扩散的结果,扩散环直径的平方与抗原浓度是呈线性关系;二是Fahey曲线法,适用于小分子抗原和较短时间扩散结果,浓度对数与扩
散环直径呈线性关系。
5、单选下列关于光学检测原理的叙述何者正确()
A.荧光检测时,激发光与发射光处于同一直线上
B.反射比色检测时,入射光与反射光处于同一直线上
C.透射比浊检测时,入射光与透射光处于同一直线上
D.散射比浊检测时∙,入射光与散射光处于同一直线上
E.磷光计检测时,入射光与发射光处于同一直线上
正确答案:C
参考解析:透射比浊法的基本原理是测定一定体积的溶液通过的光线量,当光线通过时,由于溶液中存在的抗原抗体复合物粒子对光线的反射和吸收,引起透射光的减少,测定的光通量和抗原抗体复合物的量成反比。
透射比浊检测时,入射光与透射光处于同一直线上。
考点:免疫浊度法6、单选下列有关免疫速率散射比浊法说法中错误的是OA.测定方法有终点法和速率法两种
B.终点法是在抗原抗体反应达到平衡时,即复合物形成后作用一定时间,通常是30〜60分钟,复合物浊度不再受时间的影响
C.速率法是测最大反应的速度,即反应达到顶峰时的峰值
D.速率法的灵敏度和特异性都比终点法好
E.终点法必须在聚合产生絮状沉淀之后进行浊度测定正确答案:E
参考解析:终点法是在抗原抗体反应达到平衡时,即复合物形成后作用一定时间,通常是30〜60分钟,复合物浊度不再受时间的影响,但又必须在聚合产生絮状沉淀之前进行浊度测定。
速率法是在抗原抗体结合反应的过程中,在单位时间内两者结合的速度。
速率法是测最大反应的速度,即反应达到顶峰时的峰值。
抗原抗体结合反应在几十秒内得血结果,峰值的高低与抗原的量成正比,峰值出现的时间和抗体浓度、抗原抗体的亲和力直接相关。
速率法的灵敏度和特异性都比终点法好。
7、单选沉淀反应中最主要的影响因素O
A.溶液的pH
B.溶液的离子浓度
C.抗体的质量
D.抗原抗体的比例
E.温度
正确答案:D
参考解析:沉淀反应只有在抗原抗体比例合适的时候才能发生。
8、单选两个抗原完全不同时,双扩平板法的沉淀线出现()
A.两条沉淀线相交叉
B.两条弧线完全融合
C.两条沉淀线平行
D.两条弧线不连接
E.两条弧线部分融合
正确答案.A
9、单选.单向免疫扩散是将O
A.抗体混入琼脂板内,然后打孔加入抗原,再进行电泳
B.抗原与抗体均不混入琼脂板内,而是在一定位置打孔后,分别加入
C.抗原混入琼脂板内,然后打孔加入抗体
D.抗体混入琼脂板内,然后打孔加入抗原
E.抗原混入琼脂板内,然后打孔加入抗体,再进行电泳
正确答案:D
10、单宗免疫沉淀法目前应用最广、定量比较准确的是下列哪种方法O
A.免疫比浊法
B.絮状沉淀试验
C.单向扩散试验
D.双向扩散试验
E.棋盘滴定法
正确答案:A
参考解析:免疫比浊法的校正曲线比较稳定,并可进行抗原过量的检测。
11、单选在琼脂板上打两排孔,左侧孔加入待测抗原,右侧孔加入已知抗体,抗原在阴极,抗体在阳极。
通电后,抗原泳向阳极,抗体流向阴极,观察在两者之间或抗体侧形成沉淀线。
本试验采用的是()
A.免疫电泳
B.免疫固定电泳
C.蛋白电泳
D.火箭电泳
E.对流免疫电泳
正确答案:E
参考解析:对流免疫电泳原理是将双向扩散试验与电泳相结合的定向加速免疫扩散技术。
12、单选关于免疫电泳技术临床应用,下列说法错误的是()
A.免疫电泳应用于纯化抗原和抗体成分的分析及正常和异常体液蛋白的识别等方面
B.火箭免疫电泳作为抗原定量只能测定mg/ml以上的含量
C.火箭免疫电泳应用于放射自显影技术
D.免疫固定电泳最常用于M蛋白的鉴定
E.免疫固定电泳可用于脑脊液中寡克隆蛋白的检测及分型
正确答案:B
参考解析:免疫电泳技术临床应用如下:①免疫电泳目前大量应用于纯化抗原和抗体成分的分析及正常和异常体液蛋白的识别等方面。
②火箭免疫电泳作为
抗原定量只能测定ug/ml以上的含量,目前较多应用于放射自显影技术。
③免疫固定电泳最常用于M蛋白的鉴定,此外也用于尿液中本周蛋白的检测及K/入分型、脑脊液中寡克隆蛋白的检测及分型。
13、单选沉淀反应形成的反应现象O
A.肉眼可见
B.肉眼不可见
C.必须用精密仪器测定
D.必须染色才可见
E.经电泳后可见
正确答案:A
参考解析:沉淀反应分两个阶段,第一阶段为抗原抗体发生特异性结合,几秒到几十秒即可完成,出现可溶性小复合物,肉眼不可见。
通常可用散射比浊测定反应结果;第二阶段为形成可见的免疫复合物,约需几十分钟到数小时才能完成。
如沉淀线、沉淀环。
考点:沉淀反应的特点
14、单选免疫电泳技术不包括O
A.对流电泳
B.火箭电泳
C.双扩散
D.免疫固定电泳
E.琼脂平板电泳和双相免疫扩散结合试验
正确答案:C
参考解析:免疫电泳是琼脂平板电泳和双相免疫扩散两种方法的结合。
将抗原样品在琼脂平板上先进行电泳,使其中的各种成分因电泳迁移率的不同而彼此分开,然后加入抗体做双相免疫扩散,把已分离的各抗原成分与抗体在琼脂中扩散而相遇,在二者比例适当的地方,形成肉眼可见的沉淀弧。
15、单选免疫比浊的基本原则是在反应体系中O
A.保持有电解质溶液
B.保持在37℃进行
C.保持抗原过量
D.保持抗体过量
E.保持抗原抗体比例合适
正确答案:D
参考解析:免疫比浊是在过量的抗体中分别加入递增量的抗原,经一定时间后形成抗原抗体复合物,用浊度计测量反应液体的浊度,并由此推算样品中的抗原含量。
16、单选下列哪一项不是与免疫浊度法测定密切相关的因素()
A.抗原抗体的比例
B.抗体的质量
C.抗原抗体反应的溶液
D.增浊剂的应用
E.佐剂的应用
正确答案:E
参考解析:与免疫浊度法测定密切相关的因素有:抗原抗体的比例,当比例合适时二者充分结合,形成的沉淀最多;抗体的质量,如抗体的特异性、效价、亲和力以及抗体类型等;反应溶液的pH、离子强度等;增浊剂,可促进免疫复合物的形成。
17、单选影响沉淀试验的因素包括O
A.抗原与抗体的比例
B.温度
C.盐浓度
D.以上三项
E.仅B+C
正确答案:D
参考解析:抗原抗体的比例、溶液的温度及离子强度等均影响抗原抗体反应
18、单选关于单向扩散试验检测时的注意点,错误的是O
A.抗血清必须特异性强
B.每次测定都必须做标准曲线
C.应用单克隆抗体测量多态性抗原时,测定值偏高
D.每次测定时必须用质控血清做质控
E.用多克隆抗体测量单克隆病时,测定值偏高
正确答案:C
19、单选沉淀反应中,抗原与抗体的结合价取决于抗原的分子量,一般说来,抗原的分子量与结合价的关系是O
A.抗原分子量越大,结合价越小
B.抗原分子量越大,结合价越大
C.两者没有关系
D.两者呈函数关系
E.抗原结合价为二价
正确答案:B
参考解析:沉淀反应是可溶性抗原与相应抗体在特定条件下特异性结合所出现的沉淀现象。
该反应中,抗原与抗体的结合价取决于抗原的分子量,一般说来,抗原分子量越大,结合价越大。
考点:沉淀反应的特点
20、单选目前常用的鉴定M蛋白类型的方法是O
A.免疫电泳
B.区带电泳
C.免疫对流电泳
D.免疫固定电泳
E.免疫选择电泳
正确答案:D
参考解析:免疫固定电泳最常用于M蛋白的鉴定,此外免疫固定电泳也用于尿液中本周蛋白的检测及κ、入分型,脑脊液中寡克隆蛋白的检测及分型。
21、单选最常用于M蛋白鉴定的电泳技术是()
A.对流免疫电泳
B.免疫固定电泳
C.火箭免疫电泳
D.免疫电泳
E.区带电泳
正确答案:B
参考解析:免疫固定电泳是区带电泳与免疫沉淀反应相结合的技术,血清蛋白质在琼脂糖凝胶上经电泳分离后,将抗血清加于已分离的蛋白质泳道上或将已加抗血清的滤纸贴于其上,常用于M蛋白的鉴定与分型。
22、单选下列有关沉淀反应第二阶段的说法,错误的是O
A.形成可见的免疫复合物
B.出现肉眼可见的沉淀线或沉淀环
C,可用散射比浊测定反直结果
D.几秒钟至几分钟内即完成
E.可用透射比浊测定反应结果
正确答案:D
23、单选对流免疫电泳中,抗体向阴极移动原因是O
A.抗体带正电
B.抗体带负电
C.电渗作用
D.电泳作用
E.抗原带正电
正确答案:C
参考解析:对流免疫电泳的原理是将双向扩散试验与电泳相结合的定向加速的免疫扩散技术。
通电后,在pH8.4缓冲液中带负电荷的蛋白质抗原流向阳极抗体侧,而抗体借电渗作用流向阴极侧,在两者之间或抗体侧形成沉淀线。
24、单选下述抗原抗体反应中,属于沉淀反应的是()
A.火箭电泳
B.补体结合试验
C.免疫妊娠试验
D.肥达反应
E.中和试验
正确答案:A
参考解析:可溶性抗原和相应特异性抗体以合适的比例结合,在反应体系中出现不透明的沉淀物,这种抗原体反应称为沉淀反应。
包括单向免疫扩散、双向免疫扩散、对流免疫电泳、免疫电泳、免疫比浊等
25、单选沉淀反应的反应中,抗原抗体分子比例合适的范围称为O
A.带现象
B.后带
C.前带
D.等价带
E.以上都不对
正确答案:D
参考解析:抗原抗体分子比例合适的范围称为等价带。
26、单选抗体分子在血清中不会发生自然沉淀,主要是因为()
A.抗体分子周围形成水化层
B.抗体分子电荷的相吸作用
C.抗体分子带负电
D.抗体分子不是胶体分子
E.抗原分子带负电
正确答案:A
27、单选对流免疫电泳实质是O
A.定向加速度的免疫双扩散技术
B.定向加速度的免疫单扩散技术
C.区带电泳与免疫双扩散技术
D.区带电泳与免疫单扩散技术
E.琼脂平板电泳
正确答案:A
参考解析:对流免疫电泳是指在适宜缓冲液和电场条件下,抗原和相应抗体在琼脂凝胶中,由于电泳和电渗作用,抗原向正极移动,抗体向负极移动。
将抗原放负极端,抗体放正极端,则抗原抗体相向移动,在两孔之间相遇,在比例合适时形成沉淀线。
28、单选对流免疫电泳的正确描述O
A.抗原分子向负极移动
B.抗体分子向正极移动
C.抗原、抗体相向移动
D.抗体分子不发生移动
E.抗原分子不发生移动
正确答案:C
参考解析:对流免疫电泳时,抗原分子在电场力作用下向正极移动,抗体分子
在电渗力作用下向负极移动,两者相向移动。
29、单选双扩试验平板法中,抗原含量较大,则夏应沉淀线应O
A.靠近抗原孔
B.无沉淀线
C.在两孔中点
D.呈多条沉淀线
E.靠近抗体孔
正确答案:E
30、单选下列有关单向扩散试验平板法的说法错误的是O
A.将抗体或抗血清混入3.0%琼脂糖内
B.将抗原加入孔中,放37℃让其自由扩散
C.24-48小时后可见孔周围出现沉淀环
D.Mancini曲线:适用于大分子抗原的长时间扩散(>48小时)的结果处理
E.Fahey曲线:适用于小分子抗原和较短时间扩散的结果处理
正确答案:A
参考解析:平板法是将抗体或抗血清混入0.9%琼脂糖内,未凝固前倾注成平板,然后在上打孔,将抗原加入孔中,放37C让其自由扩散,24~48小时后可见孔周围出现沉淀环,测定环的直径或面积计算标本中待测抗原的浓度。
31、单选测定免疫浊度,形成浊度的关键是()
A.反应温度
B.PH
C.抗原和抗体的比例
D.抗体的亲和性
E.离子强度
正确答案:C
32、单选沉淀反应的钩状效应现象指的是O
A.抗原过量
B.抗体过量
C.沉淀物显著
D.凝集明显
E.抗原和抗体的比例
正确答案:A
33、单选为了保证抗原抗体在最适比例条件下进行反应,达到最大沉淀反应的效果,采用什么方法选择抗原和抗体的最佳工作浓度O
A.抗原稀释法
B.抗体稀释法
C.有限稀释法
D.梯度稀释法
E.方阵滴定法
正确答案:E
参考解析:为了保证抗原抗体在最适比例条件下进行反应,达到最大沉淀反应
的效果,就必须对抗原和抗体最佳工作浓度做出选择。
将抗原稀释法和抗体稀
释法结合起来就是方阵滴定法,又称为棋盘格法。
34、单选目前凝胶内沉淀反应中最常用的凝胶是O
A.Percoll
B.Ficoll-Hypaque
C.琼脂和琼脂糖
D.聚丙烯酰胺凝胶
E.淀粉
正确答案:C
35、单选下列有关沉淀反应第一阶段的说法,哪项是错误的()
A.抗原抗体的特异性结合
B.几秒钟至几分钟内即完成
C.可用散射比浊测定反应结果
D.出现肉眼可见的沉淀线或沉淀环
E.肉眼见不到免疫复合物
正确答案:D
36、单选对流免疫电泳的沉淀线出现在抗原抗体之间且靠近抗原孔可说明O
Λ.抗原强阳性
B.抗原弱阳性
C.抗原阴性
D.抗体弱阳性
E.抗体阴性
正确答案:B
37、单选抗原抗体比例不合适出现的沉淀现象称为()
A.前带
B.后带
C.等价带
D.带现象
E.前后带
正确答案:D
参考解析:抗原抗体特异性反应时,生成结合物的量与反应物的浓度有关,当抗原抗体分子比例合适时,结合充分,沉淀物形成快而多,称为抗原抗体反应等价;若抗原或抗体极度过剩时,则无沉淀形成,称为带现象;抗体过量时称为前带,抗原过剩时,称为后带。
38、单选不是免疫比浊试验中伪浊度形成的原因O
A.高血脂标本
B.标本反复冻融
C高效价抗体(>1:200)
D低效价抗体(<1:20)
E.试剂污染
正确答案:C
39、单选实验:在琼脂板上相距5mm打双排孔,A排加入粗提纯人血清IgG,B排加入兔抗人血清抗体,放入湿盒内,置37C温育48小时后,A排和B排之间可见多条沉淀线。
此免疫学方法为O
A.单向扩散试验
B.双向扩散试验
C.絮状沉淀试验
D.凝胶凝集试验
E.双向凝集试验
正确答案:B
参考解析:双向扩散试验是抗原抗体在琼脂内各自向对方扩散,在最适当的比例初形成抗原抗体沉淀线,再根据沉淀线的位置、形状及比对关系,对抗原或抗体作出定性分析。
40、单选抗原抗体形成明显沉淀物的条件是()
A.抗体多于抗原
B.抗原多于抗体
C.不必考虑抗原抗体的比例
D.抗原抗体比例合适
E.抗原抗体一样多
正确答案:D
41、单选双向琼脂扩散试验中,假如抗原抗体含量相同,但抗原的分子量比抗体大,则沉淀线应O
A.靠近抗原孔,且弧线弯向抗原侧
B.靠近抗原孔,且弧线弯向抗体侧
C.靠近抗体孔,且弧线弯向抗体侧
D.靠近抗体孔,且弧线弯向抗原侧
E.居于抗原孔和抗体孔中间,且弧线弯向抗原侧
正确答案:E
42、单选环状沉淀试验中要求O
A.抗原澄清
B.抗体澄清
C.抗原和抗体都必须澄清
D.对抗原和抗体没有特别要求
E.抗原比重大于抗血清
正确答案:C
参考解析:环状沉淀试验:在一定内径(1.5-2.Omm)的玻璃管中先加入抗血清,再沿管壁加入抗原溶液,因抗血清比重大于抗原,故在两者交界处形成清晰界面,此处抗原抗体生成物在一定时间内形成白色环为阳性。
要求:抗原抗体溶液澄清。
适用于微量抗原测定。
考点:环状沉淀试验
43、单选免疫电泳不能用于O
A.抗原或抗体的成分分析
B.无丙种球蛋白血症患者体液中蛋白质分析
C.多发性骨髓瘤患者体液中蛋白质分析
D.抗原蛋白定量
E.多发性骨髓瘤血清M蛋白检测和鉴定
正确答案:D。