小蓟中有效成分的提取及含量测定方法

小蓟中有效成分的提取及含量测定方法
发表时间：2011-11-03T13:44:03.920Z 来源：《中外健康文摘》2011年第25期供稿作者：惠秋沙[导读] 小蓟中有效成分比较复杂，药理作用和临床应用广泛，现针对小蓟中有效成分的提取及含量测定方法作一综述。

惠秋沙（山东中医药大学山东济南 250014）【摘要】小蓟中有效成分比较复杂，药理作用和临床应用广泛，现针对小蓟中有效成分的提取及含量测定方法作一综述。

【关键词】小蓟有效成分提取含量测定小蓟为菊科植物刺儿菜Cephalanoplos segetum (Bunge) Kitam.的地上部分。

夏、秋二季花开时采割，除去杂质，晒干。

小蓟有抗菌、抗肿瘤、凉血止血、清热消肿、升血压等作用。

小蓟有效成分比较复杂，主要含生物碱、黄酮、三萜以及简单酚酸，带花全草含芸香甙、原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、氯化钾、蒙花甙、刺槐素、酪桉、蒲公英甾醇、φ-蒲公英甾醇乙酸酯，薄公英甾醇，φ-蒲公英甾醇乙酸酯，三十烷醇，β-谷甾醇、豆甾醇[1,2]。

其中止血活性成分有刺槐素-7-鼠李糖苷、芸香苷、咖啡酸、绿原酸、原儿茶醛以及蒲公英甾醇等。

现针对小蓟中现代成分的提取及含量测定方法作一综述。

1 小蓟的主要化学成分 [3] 1.1有机酸原儿茶酸、咖啡酸、绿原酸等。

1.2三萜类化合物 B2谷甾醇、豆甾醇、伪-乙酰蒲公英甾醇、蒲公英甾醇等。

1.3黄酮类芦丁、刺槐素、蒙花苷等。

1.4其他成分酪胺、三十二烷醇、氯化钾等等。

2 小蓟有效成分的提取 2.1索氏提取法 [4]
索氏提取法也是大蓟中黄酮类成分的提取方法之一，精密称取适量药材粉末，置索氏提取器中，加石油醚，回流脱脂，取出过夜晾干。

再用95% 的乙醇在索氏提取器提取，处理提取液即可。

小蓟中总黄酮类成分可用大孔吸附树脂分离纯化 [5]。

2.2热回流提取法
精密称取药材粉末适量，分别置索氏提取器中，加石油醚，回流脱脂，取出过夜晾干。

置烧瓶中，用95%的乙醇热回流提，抽滤，洗涤，合并滤液即得提取液。

水回流提取小蓟中咖啡酸酯类成分，再用大孔吸附树脂对小蓟提取物进行吸附纯化[6]。

2.3乙醇超声提取法
超声提取可以破坏细胞壁，有助于黄酮类化合物的释放与溶出，效率较高。

精密称取适量药材粉末，加95%乙醇定容。

直接超声处理或浸泡24h后超声处理后，加95%乙醇定容。

摇匀，抽滤，取续滤液即可。

陈毓、丁安伟采取超声提取法提取小蓟中的绿原酸[7]。

小蓟中蒙花苷提取方法有甲醇超声提取法、甲醇索氏提取法、甲醇热回流提取法，经比较得出，甲醇超声提取完全，简单易行[8]。

张斌慧采用正交试验法以分光光度法测定提取物中芦丁的含量，优化了小蓟中芦丁的提取工艺[9]。

3 小蓟有效成分的含量测定 3.1高效液相色谱法
高效液相色谱法是小蓟中现代成分含量测定的常用方法。

陈毓、丁安伟采用HPLC法测定小蓟中绿原酸的含量[7]。

色谱条件：Lichrospher C18 色谱柱(200mm×4.6mm,5um)，柱温：30℃，以甲醇-1%醋酸（15:85）为流动相，流速 1.0 mL／min，检测波长327nm。

绿原酸在0.00328-0.02952ug／ul范围内具有良好的线性关系。

经过系统的方法学考察，该方法具有稳定、重复性较好、简便快速、结果准确可靠等特点。

侯坤、许浚、张铁军建立了HPLC法测定小蓟中蒙花苷的含量[8]，采用Diamonsil C18(4.6mm×200mm，5μm)为色谱柱；以甲醇为流动相A，以水(含1%冰乙酸)为流动相B，梯度洗脱；流速1.0mL/min；柱温35℃；进样量20μL；检测波长为327nm。

蒙花苷的浓度0.018～0.18 g/L范围内与峰面积成良好的线性关系，该法简便，快捷，结果准确、重复性好。

高效液相色谱法是小蓟中芦丁成分比较成熟的含量测定方法。

杨瑞瑞，陈毓，张丽，丁安伟等都曾采用[ 10,11,12 ]。

3.2原子吸收光谱法
王乃兴等用原子吸收光谱法测定了小蓟的不同部位( 花、叶、茎、根) 中的宏量元素( Ca、Mg、K) 和微量元素( Cu、Zn、Mn、Cr、Co、Ni、Fe、Pb、Na) 。

结果表明，人体中必需的微量元素Zn、Fe、Mn、Cu等在小蓟中的含量均较高 [13]，此法利于更科学的使用和挖掘小蓟药物使用价值。

高俊、张菊平等采用火焰原子吸收光谱法对小蓟不同部位中Cu、Zn、Fe、Mg、Mn、Ca等6种微量元素的含量进行测定，为小蓟的进一步开发利用和临床指导提供了依据[14]。

3.3分光光度法
用紫外分光光度法对小蓟中咖啡酸酯类成分进行测定[6]，测定波长为327 nm。

标准曲线显示，试样质量浓度在2.66～21.28uL／mL与吸光度呈良好的线性关系。

周兰香、黄阿根、谢凯舟等曾采用分光光度法测定荷叶中的总黄酮[15]。

理论上分光光度法也是小蓟中黄酮类成分的含量测定方法，陈毓等采用分光光度法测定小蓟及小蓟炭中总黄酮含量，在0.008～0.048mg/mL范围呈良好线性关系[16]。

3.4薄层扫描法
薄层扫描法也是小蓟中现代成分的含量测定方法之一，杨海燕、郭耀武、周文序等采用薄层扫描法对小蓟中的芦丁进行含量测定[17-18]，此方法简便、快速、灵敏、准确。

3.5比色法
杨洋、余炼、邓立膏等采用比色法测定柚皮中黄酮的含量[19]，理论上比色法也是小蓟中黄酮类成分的含量测定方法，但未见此类参考文献。

周建青，徐爱列，王国锋采用酚类物质中酚羟基与三氯化铁的显色反应，进行绿原酸含量的比色测定[20]。

4 小结
通过以上的文献检索以及所查资料了解到，小蓟有效成分的研究比较成熟，但有关小蓟的质量控制方面研究报道较少，目前主要参照《中华人民共和国药典》，测定蒙花苷的含量，其不得少于0.70%[21]。

参考文献
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[2] 潘珂,尹永芹,孔令义.小蓟化学成分的研究[J]中国现代中药,2006,8(4):7-9 .
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[4] 倪晓霓,赵宏阳,杭太俊.大蓟、小蓟中黄酮类成分的不同提取方法及含量测定[J]. 江苏药学与临床研究，2005，13(1):33-35.
[5] 杨星昊,刘海,丁安伟. 大孔吸附树脂分离纯化小蓟总黄酮的研究[J].甘肃中医,2005,18(12):47-48.
[6] 许浚等.大孔吸附树脂富集小蓟中咖啡酸酯类成分的研究[J].中草药,2005,36(6): 846-848.
[7] 陈毓,丁安伟. HPLC法测定小蓟中绿原酸的含量[J].天津中医药,2005,2(6): 507-509.
[8] 侯坤,许浚,张铁军. HPLC同时测定小蓟中蒙花苷和绿原酸的含量[J].中国实验方剂学杂志,2010,16(3): 62-64.
[9] 张斌慧.小蓟中芦丁提取工艺的优化[J].中国药师，2006，9(2): 190-191.
[10] 陈毓.高效液相色谱法测定小蓟中芦丁含量[J].中国中医药信息杂,2007,14(12):45 .
[11] 陈毓,张丽,丁安伟.HPLC法测定小蓟中芦丁的含量.中华中医药学会第五届中药炮制学术会议论文集 174-177.
[12] 杨瑞瑞,郭耀武.HPLC法测定小蓟中芦丁的含量[J].现代中医药,2006,26(4) :52-54.
[13] 王乃兴等.小蓟的不同部位中12种金属元素含量分析测定[J].微量元素与健康研究,2008,25(3) :24-25.
[14] 高俊等.火焰原子吸收光谱法测定小蓟中6种微量元素[J].安徽农业科学, 2009 , 37( 18) : 8312- 8313.
[15] 周兰香等.分光光度法与HPLC法测定荷叶总黄酮的研究[J].中草药,2002,33(1):35-37.
[16] 陈毓,饶玉鹏,李锋涛.分光光度法测定小蓟及其小蓟炭总黄酮含量[J]. 畜牧与饲料科学2010,(8) .
[17] 周文序,田珍.中药大蓟、小蓟中柳穿鱼苷和芦丁的薄层扫描法定量分析[J].药物分析杂志, 1994,14(6) : 39240.
[18] 杨海燕等. 薄层扫描法测定小蓟中芦丁含量[J].西北药学杂志,1998, 13(4):155.
[19] 杨洋等.柚皮黄酮的提取工艺及含量测定[J].广西轻工业,2001.
[20] 周建青,徐爱列,王国锋.不同测定方法测定小蓟中绿原酸含量的研究[J].安徽农业科学,2009 , 37(27) .
[21] 国家药典编委会.中华人民共和国药典[M].中国医药科技出版社, 一部.。