病理专用二甲苯替代剂在组织制片中的应用

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病理专用二甲苯替代剂在组织制片中的应用
在传统的组织制片过程中,组织的透明和染色前后的脱蜡、透明几个环节,普遍采用二甲苯
作为透明剂和脱蜡剂。

由于二甲苯对人体的神经系统、血液系统的毒性大[1],以及易挥发和
废弃液对环境的污染重;目前二甲苯中毒已被卫生部定为百种职业病中的一种[2]。

因此为了
制作优良的组织切片,选择一种无毒、挥发性较小、无环境污染的二甲苯替代剂显得极为关键。

我科一年多来采用了病理专用二甲苯替代剂用于组织制片中的透明、脱蜡,取得了相当
满意的效果,现介绍如下:
1 材料与方法
1.1材料选取我院各种活检和手术病理标本,病理专用二甲苯替代剂(由上海苏海医疗器械
有限公司提供)作为透明剂和脱蜡剂。

1.2方法组织块按常规脱水程序在全自动脱水机中进行固定、脱水、透明、浸蜡,透明剂采
用病理专用二甲苯替代剂(Ⅰ),(Ⅱ)替代二甲苯(Ⅰ)(Ⅱ),时间各为30min;包埋、切片成3~4μm、烤片、脱蜡,脱蜡采用二甲苯替代剂5min×3,其余步骤同常规[3],进行HE 染色、免疫组织化学染色,染色后脱水、透明、封片,透明采用二甲苯替代剂,2min×2(也
可取消此步骤,自然干片),环保中性树胶封片。

2 结果
2.1 组织透明效果好,硬度适中,脱脂效果优于二甲苯,蜡块易切成4μm的连续切片。

2.2脱蜡和染色切片脱蜡优于二甲苯,特别是在低温环境下,脱蜡时间短于二甲苯。

HE染色,核浆染色分明,对比清晰,透明效果好(如图1);免疫组织化学(IHC)染色,抗原保存好,定位准确,无非特异性染色(如图2)。

3 讨论
二甲苯是一种具有芳香气味的易挥发性液体,其对于病理技术人员的神经系统和血液系统的
毒害较大,其废液对环境造成污染;由于属于易制毒化学药品,管制严格。

常见替代剂如TO,其主要成分为松节油,其透明、脱蜡能力弱,易燃易挥发,有特殊臭味,受温度影响大[4];
正丁醇透明时间长,低温下透明效果更差[5]。

我科使用的病理专用二甲苯替代剂,其优点有:(1) 其无色,无异味,无致癌物,无毒性;(2)脱蜡、脱脂效果优于二甲苯,受环境温度影
响小;(3)不易挥发,更换液体时间可以适当延长,制片质量无差异;(4)对组织细胞结构、抗原成分等保存好;HE染色核浆分明,对比清晰;免疫组织化学染色,定位准确、清晰,无非特异性染色。

当然,相对于价格低廉的二甲苯来说,病理专用二甲苯替代剂价格偏高;由于其透明效果优
于二甲苯,可能使组织收缩较快、变硬、变脆,特别是在高于35℃的环境下,可以适当缩短
透明的时间,达到满意的制片效果。

但由于其安全、环保、无毒的特性,为了病理技术人员
的健康和保护环境的需要,完全可以取代二甲苯作为组织制片的透明剂和脱蜡剂。

参考文献
[1] 丁文清,潘小川.室内污染物与白血病关系研究进展[J].环境与健康杂志,2006,23(1):83-84.
[2] Draper TH,Bamiou DE.Auditory neurlpathy in a patient exposed to xylene:case report.J Laryngol Otol.2009:123(4):462-465.
[3] 王伯沄,李玉松,黄高昇等.病理学技术[M].北京:人民卫生出版社,2000:131.
[4] 詹彦平,张云.松节油代替二甲苯透明剂制片探讨[J].实用医技志,2007,14(16):2256.
[5] 陈海滨,董丛丽,潘云.高质量病理切片的一种脱水透明方法[J].大理学院学报,2003,2(3),67-68.
图1 HE 10×10 图2 IHC 10×10 ER+。

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