赖氨酸磷酸氢钙颗粒评价性抽验结果及质量评价

赖氨酸磷酸氢钙颗粒评价性抽验结果及质量评价
咸瑞卿１ꎬ２ꎬ王聪聪２ꎬ巩丽萍２ꎬ石峰２
(１.山东大学药学院ꎬ山东济南２５００１２ꎻ２.山东省食品药品检验研究院ꎬ山东济南２５０１０１)
摘要:目的㊀评价国产赖氨酸磷酸氢钙颗粒质量现状及存在问题ꎬ为提高质量标准及临床用药安全提供参考ꎮ方法㊀对全国范围内抽取的１６７批样品采用法定标准检验与探索性研究结合的方法进项检验ꎬ并对检验结果进行统计分析ꎬ用于风险评估ꎮ结果㊀按法定标准检验ꎬ１６７批样品结果均符合规定ꎻ探索性研究中ꎬ合格率为８３.８％ꎬ不合格项目为干燥失重及未按批准处方投料ꎮ结论㊀本次抽检的赖氨酸磷酸氢钙颗粒整体质量状况差ꎬ现行质量标准存在缺陷ꎬ需进一步完善ꎮ
关键词:赖氨酸磷酸氢钙颗粒ꎻ评价性抽验ꎻ质量评价
中图分类号:Ｒ９２７.１１㊀文献标识码:Ａ㊀文章编号:２０９５－５３７５(２０２０)０４－０２０５－００９
ｄｏｉ:１０.１３５０６/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊｐｒ.２０２０.０４.００５
ＳａｍｐｌｉｎｇｒｅｓｕｌｔｓａｎｄａｓｓｅｓｓｍｅｎｔｑｕａｌｉｔｙｏｆＬｙｓｉｎｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅａｎｄ
ＣａｌｃｉｕｍＨｙｄｒｏｇｅｎＰｈｏｓｐｈａｔｅＧｒａｎｕｌｅｓ
ＸＩＡＮＲｕｉｑｉｎｇ１ꎬ２ꎬＷＡＮＧＣｏｎｇｃｏｎｇ２ꎬＧＯＮＧＬｉｐｉｎｇ２ꎬＳＨＩＦｅｎｇ２
(１.ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＳｈａｎｄｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＪｉｎａｎ２５００１２ꎬＣｈｉｎａꎻ
２.ＳｈａｎｄｏｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌꎬＪｉｎａｎ２５０１０１ꎬＣｈｉｎａ)
Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ㊀ＴｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｓｔａｔｕｓａｎｄｅｘｉｓｔｉｎｇｐｒｏｂｌｅｍｓｏｆＬｙｓｉｎｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅａｎｄＣａｌｃｉｕｍＨｙ￣ｄｒｏｇｅｎＰｈｏｓｐｈａｔｅＧｒａｎｕｌｅｓａｎｄｐｒｏｖｉｄｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｆｏｒｔｈｅｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｆｑｕａｌｉｔｙｓｔａｎｄａｒｄａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓａｆｅｔｙ.Ｍｅｔｈｏｄｓ㊀Ｔｏｔａｌｌｙ１６７ｂａｔｃｈｅｓｏｆｓａｍｐｌｅｓｆｒｏｍａｌｌｏｖｅｒｔｈｅｃｏｕｎｔｒｙｗｅｒｅｅｘａｍｉｎｅｄｂｙｓｔａｔｕｔｏｒｙｔｅｓｔｉｎｇｍｅｔｈｏｄｓｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｔｈｅｅｘｐｌｏｒａｔｏｒｙｒｅｓｅａｒｃｈｍｅｔｈｏｄｓ.ＴｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙａｎａｌｙｚｅｄｆｏｒｅｖａｌｕａｔｉｎｇｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｓｔａｔｕｓｏｆＬｙ￣ｓｉｎｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅａｎｄＣａｌｃｉｕｍＨｙｄｒｏｇｅｎＰｈｏｓｐｈａｔｅＧｒａｎｕｌｅｓ.Ｒｅｓｕｌｔｓ㊀Ａｌｌｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｑｕａｌｉｆｉｅｄａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｓｔａｔｕｔｏｒｙｓｔａｎｄａｒｄ.Ｔｈｅｑｕａｌｉｆｉｅｄｒａｔｅｗａｓ８３.８％ｂｙｅｘｐｌｏｒａｔｏｒｙｒｅｓｅａｒｃｈｍｅｔｈｏｄｓ.Ｔｈｅｕｎｑｕａｌｉｆｉｅｄｉｔｅｍｓｗｅｒｅｌｏｓｓｏｎｄｒｙｉｎｇａｎｄｕｎａｐｐｒｏｖｅｄｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ.Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ㊀ＴｈｅｏｖｅｒａｌｌｑｕａｌｉｔｙｏｆＬｙｓｉｎｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅａｎｄＣａｌｃｉｕｍＨｙｄｒｏｇｅｎＰｈｏｓｐｈａｔｅＧｒａｎｕｌｅｓｗａｓｐｏｏｒ.Ｔｈｅｃｕｒｒｅｎｔｓｔａｔｕｔｏｒｙｓｔａｎｄａｒｄｗａｓｄｅｆｅｃｔｉｖｅｗｈｉｃｈｓｈｏｕｌｄｂｅｆｕｒｔｈｅｒｉｍｐｒｏｖｅｄ.
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＬｙｓｉｎｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅａｎｄＣａｌｃｉｕｍＨｙｄｒｏｇｅｎＰｈｏｓｐｈａｔｅＧｒａｎｕｌｅｓꎻＥｖａｌｕａｔｉｏｎｓａｍｐｌｉｎｇꎻＱｕａｌｉｔｙｅｖａｌｕａｔｉｏｎ
㊀㊀赖氨酸磷酸氢钙颗粒是由盐酸赖氨酸㊁磷酸氢钙和适宜辅料制成的复方制剂ꎬ主要用于生长发育促进以及钙质的补充[１]ꎮ２０１８年ꎬ我们对全国范围内抽取的１６７批赖氨酸磷酸氢钙颗粒进行了法定标准检验ꎬ包括性状㊁鉴别㊁检查及含量测定ꎬ结合探索性研究ꎬ对检验结果进行统计分析ꎬ用于风险评估ꎬ为今后质量标准及临床用药安全的提高提供参考ꎮ１㊀抽样情况
１.１㊀药品剂型㊁规格与包装材料㊀此次抽检的赖氨酸磷酸氢钙颗粒为混悬颗粒ꎬ标示规格均为含盐酸赖氨酸０.１ｇ㊁磷酸氢钙０.１ｇꎬ包装规格均为每袋５ｇꎬ内包装均为药用复合膜ꎮ
１.２㊀药品抽样情况㊀从国家药品监督管理局网站查询ꎬ目前赖氨酸磷酸氢钙颗粒的生产企业共有１６家ꎬ药品批准文号１６个ꎮ本次共抽取１６７批次(１４８个生产批次)ꎬ涉及生产企业１０家ꎬ占总生产企业的６２.５％ꎬ涉及１０个批准文号ꎬ占总文号数的６２.５％ꎬ未涉及的批准文号共有６个ꎬ占总文号数的３７.５％ꎮ企业调研结果显示ꎬ６家企业长期不生产ꎬ存在文号闲置的情况ꎮ本次抽验覆盖２７个省(自
㊀作者简介:咸瑞卿ꎬ男ꎬ副主任药师ꎬ研究方向:生物与医药ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｘｉａｎｒｕｉｑｉｎｇ＠１２６.ｃｏｍ
㊀通信作者:石峰ꎬ男ꎬ副主任药师ꎬ研究方向:药品质量控制ꎬＴｅｌ:０５３１－８１２１６５６３ꎬＥ－ｍａｉｌ:１３９５３１７５１２３＠１３９.ｃｏｍ
治区㊁直辖市)ꎬ来自各类经营企业(８９.２％)㊁医疗单位(０.６％)和生产企业(１０.２％)ꎬ代表性较强ꎬ能较好地反映反应全国赖氨酸磷酸氢钙颗粒质量现状ꎮ
２　法定检验
现行«中国药典»«美国药典»«英国药典»«欧洲药典»«日本药局方»中均未收载赖氨酸磷酸氢钙颗粒的质量标准ꎮ现有１５家企业执行国家标准ꎬ另
１家企业执行注册标准ꎬ两者主要在处方项目上有所差异ꎬ且注册标准另含有其他氨基酸检查㊁溶出度检查及干燥失重３项检查项目ꎮ本次抽样样品均执行国家药品标准ꎬ对１６７批次的赖氨酸磷酸氢钙颗粒按法定质量标准进行检验ꎬ所有项目均符合规定ꎬ合格率为１００％ꎮ
２.１㊀性状㊀１６７批次样品均为类白色或淡黄色颗粒ꎬ味甜ꎬ合格率为１００％ꎮ但不同企业样品颜色存在差异(见图１)ꎬ除与个别企业处方中的柠檬黄色素有关外ꎬ还与颗粒干燥工艺中干燥温度和时间相关ꎬ干温度过高或时间过长会使颗粒颜色加深ꎮ其中Ｊ企业不同批次间颜色差异显著ꎬ说明该企业生产工艺不稳定或不按照批准的处方工艺生产ꎬ结合企业提供的处方工艺资料ꎬ企业可能存在擅自添加着色剂的问题ꎬ需进一步开展探索性研究
ꎮ图１㊀不同企业赖氨酸磷酸氢钙颗粒的外观性状
２.２㊀鉴别㊀本品的鉴别反应均包含以下两项:①化学鉴别:利用茚三酮与α－氨基加热反应产生蓝紫色物质的原理来鉴别赖氨酸ꎻ②化学鉴别:钙盐和磷酸盐鉴别ꎮ１６７批次样品鉴别结果均符合规定ꎮ
我们在法定检验中发现现行质量标准存在以下问题:①采用茚三酮显色反应鉴别赖氨酸ꎬ方法的专属性不强ꎬ无法区别其他氨基酸ꎬ需进一步建立专属性强㊁灵敏性高的赖氨酸鉴别方法ꎻ②因磷酸氢钙在
中性水溶液中不溶ꎬ且盐酸赖氨酸的氯离子对磷酸盐鉴别①有干扰ꎬ因此现行赖氨酸磷酸氢钙颗粒各质量标准的磷酸盐和钙盐的方法灵敏低ꎬ鉴别现象不易观察ꎬ需对现行标准进行修订ꎮ
２.３㊀装量差异㊀按«中国药典»２０１５年版(四部)通则０１０４进行检验ꎬ取本品１０袋ꎬ分别精密称定每袋装量并计算平均装量ꎮ单样本Ｋｏｌｍｏｇｏｒｏｖ－ＳｍｉｒｎｏｖＺ(Ｋ－Ｓ)检验表明１６７批样品的装量检测结果呈较好的正态分布ꎬ平均装量分布在４.６１００ｇ~５.２０６０ｇ之间ꎬ装量平均值为４.９９５０ｇ/袋(见图２)ꎬ均符合平均装量ʃ７％的规定限度ꎮ从不同企业的装量差异箱线图(见图３)来看ꎬ各企业的平均装量离散性均较小ꎬ但Ｇ企业出现有１批次较大离异值ꎬ说明该企业颗粒分装工艺稳定性有待提高
ꎮ图２㊀装量统计结果直方图
２.４㊀粒度㊀按«中国药典»２０１５年版(四部)通则０１０４颗粒剂项下的规定ꎬ取本品５袋ꎬ照粒度和粒度分布测定法(第二法双筛分法)测定ꎬ不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过１５％ꎮ经过检验ꎬ１６７批次样品的粒度均符合规定ꎬ样品合格率１００％ꎮ２.５㊀含量测定
２.５.１㊀磷酸氢钙(ＣａＨＰＯ２ ２Ｈ２Ｏ)㊀依据质量标准ꎬ采用ＥＤＴＡ滴定法对１６７批样品的磷酸氢钙进行含量测定ꎬ并对结果进行统计分析(见图４)ꎮ由图可见磷酸氢钙含量分布在９４.６％~１０６.９％之间ꎬ平均含量为９９.７８％ꎬＫ－Ｓ检验表明含量呈良好的正态分布ꎬ均符合９０.０％~１１０.０％的规定ꎮ根据箱线图(见图５)ꎬＡ企业样品含量分布范围较宽ꎬＢ及Ｅ
企业的含量分布相对集中ꎬ但分别有２批及４批样品有较大离异值ꎮ经过对比ꎬ两家企业样品中出现较大离异值的样品平均装量均未有异常离异值ꎬ且这些批样品均属于不同的批次ꎬ说明企业的产品含量均一性仍需要加强控制
ꎮ
图３㊀
装量统计结果箱线图
图４㊀磷酸氢钙含量直方图
２.５.２㊀盐酸赖氨酸(Ｃ６Ｈ１４Ｎ２Ｏ２ ２ＨＣｌ)㊀盐酸赖氨酸含量采用紫外－可见分光光度法进行测定ꎬ结果表明(见图６)盐酸赖氨酸含量分布在９１.３％~１０７.４％之间ꎬ平均含量为９９.０７％ꎬＫ－Ｓ检验表明含量呈良好的正态分布ꎬ１６７批样品结果均符合８５.０％~１１５.０％的标准规定ꎮ根据箱线图(见图７)ꎬ各企
业均未出现较大离异值ꎬＡ企业的样品含量分布范围略宽于其他企业ꎮ
㊀㊀现行国家药品标准采用ＵＶ法(比色法)进行含量测定ꎬ该方法受试剂㊁温度㊁反应时间等因素影响较大ꎬ方法的重现性差㊁专属性不强ꎬ
且限度范围设
图５㊀
磷酸氢钙含量箱线
图６㊀
盐酸赖氨酸含量直方图
图７㊀盐酸赖氨酸含量箱线图
置过宽ꎬ不能客观准确的的反映产品的真实含量ꎮ因此ꎬ在探索性研究中需要建立一种专属性更好的含量测定方法ꎬ对产品质量进行进一步的研究ꎬ并合
理设定限度范围ꎮ
３　探索性研究及结果
本次研究紧紧围绕赖氨酸磷酸氢钙颗粒剂存在的安全性㊁有效性问题ꎬ以及现行质量标准存在的科学性与合理性问题ꎬ以企业提供的处方工艺信息资料为依据ꎬ以法定检验突出的质量问题为导向ꎬ结合专题调研㊁文献检索发现的问题ꎬ对影响药品安全性㊁有效性及稳定性等关键因素展开了探索性研究ꎮ
３.１㊀赖氨酸鉴别试验㊀现行赖氨酸磷酸氢钙颗粒质量标准均采用茚三酮显色反应鉴别赖氨酸ꎬ该方法专属性不强ꎬ无法区别其他氨基酸ꎮ针对上述问题ꎬ我们参考文献ꎬ建立了柱前衍生ＨＰＬＣ法鉴别赖氨酸的方法[２－３]ꎮ专属性试验研究显示该方法空白
辅料㊁衍生化试剂及其他氨基酸均无干扰ꎬ方法专属性良好(见图８)ꎮ使用该方法对１６７批次样品进行赖氨酸鉴别ꎬ合格率
１００％ꎮ
图８㊀专属性试验色谱图
３.２㊀有关物质研究㊀现行国家标准中赖氨酸磷酸氢钙颗粒未对有关物质进行控制ꎬ故有必要建立更适宜的方法考察赖氨酸原料及制剂中的有关物质ꎬ
从而保证产品的安全性ꎮ目前ꎬ国内外文献对赖氨酸杂质研究报道较少ꎬ国内外药典仅检查盐酸赖氨酸原料中其他氨基酸含量ꎮ我们根据文献报道ꎬ选择赖氨酸中可能存在的杂质如Ｄ－赖氨酸㊁其他氨基酸及其他杂质ꎬ考察样品中的含量ꎬ必要时建立限度检查ꎮ
３.２.１㊀Ｄ－赖氨酸㊀手性固定相色谱技术是对映异构体分离的一种有效方法[４]ꎮ本研究采用大赛路
手性色谱柱ꎬ以高氯酸水溶液为流动相ꎬ检测波长为２０５ｎｍꎬ对Ｄ－赖氨酸进行分析ꎮ本方法中ꎬＤ－盐酸赖氨酸和Ｌ－盐酸赖氨酸的分离度大于３.０ꎬ检测限均约为０.０２５μｇ(见图９)ꎮ通过该方法ꎬ对９家企业２７批盐酸赖氨酸颗粒进行了测定ꎬ典型样品色谱图见图１０ꎬ均未检出Ｄ－赖氨酸ꎬ合格率为１００％ꎬ因此制剂中无须设定该项限度检查ꎮ
３.２.２㊀其他氨基酸的测定㊀我们采用氨基酸分析仪ꎬ使用茚三酮进行柱后衍生ꎬ胱氨酸检测波长４４０ｎｍꎬ其余均为５７０ｎｍꎬ对其他氨基酸进行测定ꎮ本方法各氨基酸之间分离度大于１.５ꎬ胱氨酸检测限<１６ｐｍｏｌꎬ其他氨基酸<３ｐｍｏｌꎬ
各氨基酸对照品色谱
图９㊀ＤＬ
混合赖氨酸色谱图
图１０㊀Ｄ－赖氨酸检查典型样品色谱图
图见图１１ꎮ通过该方法对９家企业２７批盐酸赖氨酸颗粒进行测定ꎬ典型样品色谱图见图１２ꎬ均未检出其他氨基酸ꎬ合格率为１００％ꎬ因此制剂中无须设定该项限度检查ꎮ
图１１㊀
混合氨基酸对照品色谱图
图１２㊀其他氨基酸检查典型样品色谱图
３.３㊀赖氨酸含量测定㊀高效液相色谱(ＨＰＬＣ)法具有分离度高㊁选择性好等特点ꎬ越来越广泛地应用于氨基酸的分析测定中ꎮ其中ꎬ柱前衍生与ＨＰＬＣ结合已成为氨基酸分离分析的有力工具之一[４－５]ꎮ我们以２ꎬ４－二硝基氟苯为衍生化试剂ꎬ使用甲醇－０.０５ｍｏｌ Ｌ－１醋酸钠缓冲液为流动相ꎬ采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱ꎬ在３６０ｎｍ波长下进行检测ꎬ建立了盐酸赖氨酸磷酸氢钙颗粒中Ｌ－盐酸赖氨酸含量测定方法ꎬ并对１６７批样品的赖氨酸含量进行测定ꎮ从直方图中(见图１３)可以看出ꎬ全部样品的含量分布在９３.２％~１０５.７％之间ꎬ平均含量为
１００.４８％ꎬ合格率１００％ꎮ对拟定方法(ＨＰＬＣ法)与法定方法(ＵＶ法)测定结果进行比较ꎬ用两种方法含量测定结果整体无显著性差异(见图１４)ꎬ其中拟定方法测定的结果偏差较小ꎬ较法定标准测定值偏高ꎮ拟定方法测定结果具有更好的中位数分布ꎬ数据更加集中ꎬ离群值较明显ꎬ能够更好地区分相同厂家不同批次产品的批间差异ꎮ此外ꎬ结合拟定方法ꎬ建议将本品盐酸赖氨酸(Ｃ６Ｈ１４Ｎ２Ｏ２ ２ＨＣｌ)含量修订为 应为标示量的９０.０％~１１０.０％ ꎮ
３.４㊀颗粒剂干燥失重考察㊀赖氨酸磷酸氢钙颗粒为化学药品颗粒ꎬ根据«中国药典»２０１５年版制剂通则颗粒剂项下要求需检查干燥失重ꎬ现行国家标准ＷＳ－１０００１－(ＨＤ－０３８９)－２００２中干燥失重检查项缺失ꎮ我们对收集的所有颗粒剂样品ꎬ按«中国药典»２０１５年版(四部) 干燥失重检查法 对颗粒剂干燥失重进行测定ꎬ考察各企业工艺稳定性ꎮ
１０家生产企业共１６７批样品的测定结果表明ꎬ干燥失重平均值为０.７６％ꎬ其中Ｉ企业有１批不合格ꎬ合格率为９９.４％ꎮ对数据分析发现有７６.０％的样品干燥失重值小于１.０％ꎬ说明大部分企业的产品干燥工艺选择适宜ꎮ
图１３㊀
盐酸氨酸含量结果直方图
图１４㊀盐酸氨酸含量测定结果对比图
３.５㊀辅料使用合规性考察㊀我们通过处方工艺调研ꎬ发现部分生产企业现行生产处方与所执标准的处方不一致ꎬ且未能提供处方变更或备案的有效证明文件ꎬ存在擅自更改处方ꎬ违规或超限使用辅料的风险ꎬ因此我们选择可能存在风险的着色剂㊁枸橼酸㊁葡萄糖㊁乳糖㊁蔗糖及淀粉等固体制剂常用辅料ꎬ对其使用情况进行了考察ꎮ结果显示ꎬ１６７批次颗粒剂中２５批次检出处方外辅料成分ꎬ不合格率为１５.０％ꎮ
３.５.１㊀着色剂㊀针对法定检验中发现各企业产品甚至同一企业不同产品颜色差异显著ꎬ可能存在违规添加着色剂的问题ꎬ参考文献ꎬ我们建立了液相色谱测定赖氨酸磷酸氢钙颗粒中柠檬黄和日落黄的方法[６]ꎮ前期处方工艺调研显示ꎬ除Ｄ企业生产颗粒处方有柠檬黄外ꎬ其他企业处方中均无柠檬黄ꎮ但Ｊ企业２１批样品中有１５批检出了柠檬黄ꎬ提示该企业可能存在非法添加辅料柠檬黄的行为ꎮ其他企业样品均未检出柠檬黄ꎬ与资料一致ꎮ全部样品均未检出日落黄及阿司帕坦ꎮ
３.５.２㊀枸橼酸㊀我们通过建立的高效液相色谱－二极管阵列检测器测定赖氨酸磷酸氢钙颗粒中枸橼酸含量的方法ꎬ对１６７批样品中的枸橼酸含量进行测定ꎬ并进一步采用高分辨质谱对阳性样品进行确认ꎮ结果发现Ｄ企业有８批次样品检出了枸橼酸(见图１５)ꎬ含量为(０.８５３ʃ０.１８０)ｍｇ ｇ－１ꎬ但该企业提供
的生产处方无枸橼酸ꎬ提示该企业存在擅自添加辅料行为ꎮ其他企业均未检出枸橼酸ꎬ与提供的生产处方一致ꎮ
３.５.３㊀葡萄糖㊁蔗糖及乳糖含量考察㊀参考文献ꎬ我们建立了高效液相色谱－示差折光法对赖氨酸磷酸氢钙颗粒中葡萄糖㊁蔗糖及乳糖含量考察[７]ꎮ对检验结果及企业处方进行分析ꎬ结果显示Ｆ企业抽检的４批样品中两批样品的总糖量分别为６０４和６０３ｍｇ ｇ－１ꎬ低于其执行处方中蔗糖的处方量(８００ｍｇ ｇ－１)ꎬ而另外两批次总糖含量与处方量基本一致ꎮ结合这两批次装量差异均符合规定ꎬ进一步分析ꎬ该企业这两批次产品中添加了约２０％的其他辅料成分ꎬ存在违规使用辅料的风险ꎮ其他各生产企业糖含量均与处方一致ꎮ
３.５.４㊀淀粉㊀通过葡萄糖㊁蔗糖及乳糖含量考察发现Ｇ企业生产的两批产品糖含量显著偏低ꎬ并且在化学鉴别和溶出度考察试验中均出现大量酸不溶性沉淀ꎬ与另外有两批次产品存在显著性差异ꎬ提示该企业可能存在改变工艺处方㊁擅自改变辅料的问题ꎮ
我们进一步对颗粒剂中酸不溶物进行研究ꎬ化学鉴别显示该沉淀灼烧可燃ꎬ水中加热呈半透明糊状ꎬ加碘试液变ꎬ初步推断该辅料可能为淀粉ꎮ拉曼光谱具有快速简单的特点ꎬ广泛应用于药物分析领域[８]ꎮ因此ꎬ我们进一步采用拉曼光谱进行分析ꎬ通过搜库比对两批次样品(见图１６Ａ)均与淀粉的拉曼光谱(见图１６Ｂ)高度相似ꎬ相似度０.９９ꎬ因此判断两批次样品中添加了淀粉ꎬ约占处方总量的２０％ꎬ这与糖含量测定结果相一致ꎬ提示该企业产品批间差异显著存在变更处方中辅料情况ꎮ
３.６㊀近红外光谱快检方法研究㊀近红外光谱分析技术近年来发展迅速ꎬ具有简单㊁快速和重现性好等优点ꎬ是药品的快速检测的有效方法[９]ꎮ此次我们将收集到的１０家企业的１６７批颗粒剂样品进行近
红外光谱扫描ꎮ大于等于３批的样品建立一致性检验模型ꎬ小于３批的样品建立相关系数模型ꎮ并用其他企业相同剂型相同规格的样本进行验证ꎮ结果发现Ｇ企业颗粒剂建立的一致性检验模型通过了
验证(见图１７)ꎬ其余９家企业都不能通过验证ꎬ结果不理想ꎮ建立的相关系数模型ꎬ都能将其他企业的样本有效地区分ꎬ模型通过验证
ꎮ
图１５㊀Ｄ
企业典型样品一级质谱和二级质谱图
图１６㊀Ｇ企业产品(Ａ)与可溶性淀粉(Ｂ)拉曼光谱图
图１７㊀Ｇ企业近红外一致性检验模型验证㊀㊀此外ꎬ在以Ｅ等企业样本作为参照光谱分别建立一致性模型ꎬ用Ｆ企业的４批样本作为验证光谱进行验证时发现ꎬ４批次样品中有２批均区分良好ꎬ而另外２批无法有效区分(见图１８Ａ)ꎮ进一步以Ｆ企业均区分良好的２批作为参照光谱建立一致性模型ꎬ无法有效区分的２批样本光谱作为验证光谱进行验证ꎬ结果发现参照光谱和验证光谱区分良好(见图１８Ｂ)ꎬ说明辽Ｆ企业不同批次检样品处方工艺存在显著差异ꎬ与辅料使用合规性研究中发现的Ｆ企业２批次颗粒剂中糖的含量仅为处方量的７５％ꎬ且添加有占处方总量２０％淀粉的结果相一致ꎮ
图１８㊀Ｆ企业近红外一致性模型比较图
４　总结
４.１㊀总体评价㊀通过本次抽检的１６７批次赖氨酸磷酸氢钙颗粒ꎬ结合现行标准检验㊁探索性研究及综合评分的结果表明ꎬ赖氨酸磷酸氢钙颗粒整体质量状况 差 ꎮ现行标准存在鉴别方法不可行㊁鉴别及含量测定方法专属性差㊁主要控制项目缺失(干燥失重)㊁限度设置不合理等问题ꎬ质量标准总体评价为 差 ꎮ本次评价抽验发现的问题主要集中在质量标准㊁处方工艺等方面ꎬ可能对药品质量的安全性㊁有效性及稳定性产生不同程度的影响ꎮ４.１.１㊀质量标准问题㊀本品种按法定标准检验ꎬ合格率均为１００％ꎬ按照探索性研究方法检验ꎬ合格率为８３.８％ꎬ不合格项目为干燥失重和不按处方投料ꎬ提示颗粒剂现行质量标准不能满足质量控制的要求ꎮ目前质量标准存在问题有:①现行标准缺少颗粒剂溶出度㊁干燥失重等主要控制项目ꎻ②赖氨酸鉴别与含量测定的方法专属性差㊁重现性差ꎬ无法区别其他氨基酸ꎬ测定结果不能客观反映产品中的真实含量ꎻ③颗粒剂中钙盐㊁磷酸盐鉴别方法存在干扰且灵敏度不高ꎻ④颗粒剂盐酸赖氨酸限度过宽ꎬ不能有效控制产品质量ꎮ
４.１.２㊀违规违法生产问题㊀本次结合法定检验及探索性研究结果ꎬ发现以下违规违法生产问题:①Ｇ企业颗粒剂执行标准为ＷＳ－１０００１－(ＨＤ－０３８９)－２００２ꎬ但其生产处方中原料投料量仅为标准处方量的２０％ꎬ按照其说明书的用法用量ꎬ有效剂量偏低ꎻ②Ｊ企业２１批颗粒剂中１５批检出柠檬黄ꎬ与提供的生产处方不一致ꎬ擅自添加着色剂ꎻ③Ｄ企业８批颗粒剂中均检出枸橼酸ꎬ与提供的生产处方不一致ꎬ擅自添加矫味剂或抗氧剂ꎻ④Ｆ企业４批颗粒剂中２批检出淀粉ꎬ含量高达２０％ꎬ提示该企业产品批间差异显著ꎬ擅自采用淀粉替代部分蔗糖投料ꎮ
４.１.３㊀其他问题㊀此外我们还发现以下几个其他问题:①Ｉ企业和Ｊ企业产品包装说明书不规范ꎻ②Ｉ企业１批颗粒剂微生物限度不合格ꎬ１批干燥失重不合格ꎻ③盐酸赖氨酸㊁磷酸氢钙与蔗糖均为粗品经精制获得ꎬ粗品生产过程不在药品监管范围内ꎬ起始原料的质量不可控ꎮ
４.２㊀解决问题的建议㊀针对本次抽检发现的问题我们提出以下几点建议:①建议现(下转第２３２页)
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(上接第２１２页)行标准修订鉴别检查㊁增订缺失项目㊁采用专属性强㊁灵敏度高的鉴别和含量测定方法ꎬ设定合理的含量限度范围ꎻ②建议企业严格按照批准的处方工艺进行生产ꎬ不得擅自变更辅料ꎻ加强生产工艺质量控制ꎬ降低微生物污染风险ꎻ③建议企业加强包装材料质量控制ꎬ规范使用包装及说明书ꎻ
④建议监管部门对存在问题的生产企业进行检查ꎬ以督促企业严格执行ＧＭＰ及«药品管理法»的相关规定ꎻ⑤建议监管部门加强原辅料粗品的质量监管ꎬ开展原辅材料质量控制㊁工艺控制㊁产品质量检测及产品储存环境质量控制水平专项检查ꎮ
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