第十章 有关生殖与胚胎研究的动物实验方法

讨论： 讨论： 1、剖腹产手术仔鼠的成活率与哪些 因素有关？ 2、对仔鼠按摩刺激有什么作用？ 3、仔鼠正常呼吸后，身体为什么会转 向肉红色？
3、手术器械的准备 1) 将2把眼科剪、2把组织镊、4只培养皿、 把眼科剪、2把组织镊、4 10块纱布、生理盐水经高温灭菌后传入手 10块纱布、生理盐水经高温灭菌后传入手 术隔离器。 2) 将1把手术剪、1把组织镊、3只止血钳 把手术剪、1把组织镊、3 （或血管夹）包好灭菌后备用。 3) 手术前打开手术隔离器的加热设备，将温 度控制在35-37℃ 度控制在35-37℃。
二、小鼠的剖腹产 1、手术隔离器的准备 手术隔离器装配有供2 手术隔离器装配有供2人同时操作的 四只手臂，一个药品消毒传递渡槽和相应 的保温装置。剖腹产手术前按隔离器消毒 灭菌的方法对手术隔离器消毒灭菌，同时 在药物浸泡渡槽中注满0.2%新洁尔灭。 在药物浸泡渡槽中注满0.2%新洁尔灭。
2、动物准备： 1) 选择成年小鼠3雄6雌，按1雄：2雌交配。 选择成年小鼠3 雌，按1雄：2 2) 交配后的第二天起每天上午8：00以前观 交配后的第二天起每天上午8 00以前观 察阴道栓。 3) 以见栓之日为“0”天，第18天下午进行剖 以见栓之日为“ 天，第18 18天下午进行剖 腹产手术。 4) 带奶保姆鼠应提前1—2天配种，在剖腹产 带奶保姆鼠应提前1 手术前1 手术前1 天或当日产下幼仔。
4、剖腹产手术过程 1) 将2%过氧乙酸放在烧杯中加热至35℃。 2%过氧乙酸放在烧杯中加热至35℃ 2) 用脱颈椎法处死妊娠18天的孕鼠。 用脱颈椎法处死妊娠18天的孕鼠。 3) 迅速将处死孕鼠放入2%过氧乙酸烧杯中浸泡1分钟。 迅速将处死孕鼠放入2%过氧乙酸烧杯中浸泡1 4) 在孕鼠腹腔用碘酒消毒。 5) 打开腹腔，找出子宫颈和2个子宫角，分别用止血钳（血管 打开腹腔，找出子宫颈和2 夹）夹住。 6) 用剪刀剪断子宫颈、子宫角，使子宫与母体分离。 7) 将子宫连同止血钳（血管夹）一起放入手术隔离器的药物 灭菌渡槽中。 8) 从隔离器内取出渡槽中的子宫。 9) 用灭菌生理盐水冲洗后放入培养皿中。 10) 一人剪开子宫取出连胎盘仔鼠，一人用纱布擦干仔鼠，并 剪断脐带。 11) 对仔鼠进行按摩，直至仔鼠开始呼吸。 12) 待仔鼠正常呼吸，身体转向肉色后，可将仔鼠传给带奶的 保姆鼠。
二、精液采集与品质检查 • 精子：哺乳动物的精子其形态与结构基本 相似，是具有活动性、含有遗传物质的雄 性细胞，可分为头部、颈部和尾部。 • 精液品质检查： 1、精子密度：每ml精液中所含精子数。 、精子密度：每ml精液中所含精子数。 2、精子活力：精液中呈前进运动精子所占 的百分率。 3、精子形态检查：畸形率和顶体异常率。
• 三、配种鉴定
配种鉴定是掌握怀孕与预测分娩时间的 一项重要工作，除人工辅助交配的实验 动物以外，证明动物已交配过的方法有 阴道涂片法和阴道栓检查法。 • 四、怀孕鉴定 临床检查：试情法、摸胎法 实验室诊断：
第二节 动物的去势、剖腹产
一、动物的去势 指通过人为的方法摘除或破坏实验动物的 生殖腺及其附属器官而使之绝育的方法。 常用手术方法：睾丸摘除术、卵巢摘除术
第十章 有关生殖与胚胎研究、发情与发情鉴定 • 排卵：自发性排卵、诱发性排卵 • 发情周期：发情前期、发情期、发情后期、间情 期 • 发情鉴定： 1、阴道涂片检查法：啮齿类动物常用，主要观察 阴道上皮细胞的变化来判断发情周期。 2、外部观察法：各种动物都可用。 3、试情法 4、阴道检查法：适用于体形较大的动物。