新定洁净区臭氧消毒验证验证方案

洁净区臭氧消毒验证方案编号：SOP-YZ000-J0-00
年月
洁净区臭氧消毒验证方案
目录
1、目的 (4)
2、围 (4)
3、职责 (4)
4、参考文件 (5)
5、缩写说明 (5)
6、系统描述 (6)
7、验证实施前培训 (6)
8、测试列表 (8)
9、安装确认测试 (8)
10、安装确认偏差记录 (9)
11、设备运行确认 (9)
12、运行确认偏差记录 (28)
13、设备性能确认 (28)
14、性能确认偏差记录 (119)
15、结论与评定 (120)
16、验证周期与验证时间 (120)
1.目的
1.1确认臭氧发生器能够正常运行，设备各项性能指标符合设计要求。

1.2通过对在一定的时间洁净区臭氧浓度的测试，验证在预定的消毒程序时间洁净区各洁净间臭氧浓度是否达到标准规定。

1.3通过微生物阳性对照试验，确定在预定的消毒程序时间臭氧对洁净区的消毒效果及消毒周期。

2.围
此方案适用于我公司空调净化系统臭氧消毒的预确认、安装确认、运行确认和性能确认。

3.验证小组及职责
3.1验证小组人员
3.2责任
3.2.1验证小组组长：负责组织项目的具体验证实施、督促验证小组成员按照验证方案的要求做好验证记录、整理验证档案；当漏项或偏差发生时，负责对其评估并报验证领导小组批准；组织相关的验证培训。

对验证方案中验证方法、有关试验标准、验证过程及实施结果符合GMP 规及有关标准进行审核，有关检验记录的审核及项目总结等。

3.2.2验证小组组员：负责按各自的职责围完成验证方案的起草、会审，验证具体的实施，对验证结果进行记录，对实施验证的结果负责。

3.2.3 验证工作中各部门责任
3.2.3.1验证小组：负责验证方案的批准；负责验证数据及结果的审核；负责验证方案的审批；负责验证项目合格证的发放。

3.2.3.2生产技术部：负责支持验证总计划验证步骤中所包括的工作方案。

负责提供各类工艺参数；负责书写或修改制定的SOP，负责保证与验证方案相关的生产技术部门人员接受适当的培训，并有培训记录。

负责拟订与生产工艺有关的设备安装要求，交所验证部门上报审核批准，负责将全部验证相关的原始记录/文件等进行汇编确认，并移交质量保证部，负责各类
验证的具体实施。

3.2.3.3质量部：负责书写和执行验证总计划。

负责组织、协调和监管在验证总计划指导下的各个系统的验证工作。

负责对验证方案中提供的工艺参数要求和相关的SOP进行确认、审核；负责制订中间产品质量标准、检验规程及取样程序；收集各项验证、试验记录，并对试验结果进行分析，交所验证部门上报审核批准。

负责对验证可接受标准的确认，负责维护、颁发、保存全部受控文件，包括验证方案，负责新产品的工艺验证，并将验证资料（复印件）在取得产品批准文号时一起转入生产技术部门。

3.2.3.4工程设备部：负责验证总计划验证步骤中所述的具体方案，负责设施、设备、仪器的安装、调试，并做好相应的记录。

负责建立设备、仪器档案。

负责仪器、仪表的校正。

负责收集设施、设备验证的各项验证文件、试验记录，交所验证部门上报审核批准。

参与清洁验证，负责对验证中相关部分进行确认并与全部原始记录等文件进行汇编确认后移交质量部。

3.2.3.5供应部：负责为验证提供各种物料保障。

4.参考文件
5、缩写说明
IQ 安装确认
OQ 运行确认
PQ 性能确认
6.系统描述
制剂车间洁净区消毒采用的是臭氧消毒。

臭氧是一种广谱高效灭菌剂，具有强烈杀菌消毒作用。

在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧（O
）和单个氧原子（O），后
2
者具有很强的活性，对细菌有极强的氧化作用，臭氧氧化分解了细菌部葡萄糖所必须的酶，
），不存在从而破坏其细胞膜，将它杀死。

多余的氧原子则会自行重新结合成为氧分子（O
2
任何有毒残留物，为无污染消毒剂。

臭氧发生器为固体制剂车间公共设施，按车间工艺布置图安装于车间二楼空调机房。

为固体制剂车间、前处理车间洁净区进行消毒。

臭氧消毒是利用HVAC系统的循环风作为臭氧的载体，即将臭氧发生器生产的臭氧由HVAC系统中的净化风机产生的压力风源，扩散至整个洁净区域，并使空气中的臭氧浓度均匀，即可达到灭菌的目的。

消毒时，打开臭氧发生器，臭氧灭菌浓度在开机40min后，达到10ppm以上。

7.验证实施前培训
7.1本验证方案培训
7.1.1评价方法：检查本验证方案培训记录，确认参与验证人员是否经过了本验证方案培训。

7.1.2接受标准：参与验证人员均经过了本验证方案培训，并了解验证方案中的容与个人职责。

检查结果见下表：（培训记录见附录一）
验证方案培训记录表
确认人：日期：复核人：日期：
7.2基础性培训
7.2.1评价方法：查询培训档案，确认是否对有关操作者进行了相关培训，包括：GMP及药品管理法规培训；安全生产管理规程；微生物基础及微生物污染的防培训；所在岗位设备的操作、清洁、维护保养规程；进出生产洁净区更衣程序的培训；岗位操作规程培训；生产过程质量控制培训。

7.2.2接受标准：上岗操作人员已经接受了相关的知识及操作技术培训，并经过考核合格，培训及考核均在有效期。

7.3健康检查
7.3.1评价方法：查阅生产操作人员的健康档案，考察参加生产操作的所有人员是否进行了健康检查。

7.3.2接受标准：生产操作的人员均进行了规定项目的健康检查，健康证在有效期。

7.4基础性培训与人员健康检查情况结果确认：见下列人员情况评价表
人员情况评价表
确认人：日期：复核人：日期：
8.测试列表
9.预确认
9.1臭氧发生器的选择
9.1.1臭氧的自然半衰期（S）：参比状态下为20min左右；1h衰退率约为62.25%；设计、运用臭氧消毒40min达到相对浓度后，继续维持一段时间（1~1.5小时），即可达到机器、设备和建筑物表面沉降菌的杀灭目的。

9.1.2臭氧消毒的浓度（C）：按臭氧消毒的效率和卫生部1991年12月颁布的《消毒技术规》的标准，对空气中浮游菌，臭氧灭菌的浓度为（2～4）×10-6；对物体表面的沉降菌，臭氧灭菌的浓度为（10～15）×10-6。

9.1.3消毒空间体积（V）：以选择合适的臭氧发生器为前提，设洁净区体积为V
1
，HVAC系统
风管容积为V
2，为保持洁净区正压所补充的新风的臭氧消耗量为V
3。

V 3的确定根据消毒实践，归纳出较可靠的经验公式：V
3
=HVAC系统循环总风量（m3/h）×25%
（假定新风补充量为25%）×10%（保持洁净区正压所补充的新风量）×33.75%（计算应用臭氧半衰率的预算值）
即：V
3≈循环系统总风量×0.944%则消毒空间体积为：V=V
1
+V
2
+V
3
按上述要求，空气中的臭氧浓度（C）应达到10×10-6，折算为19.63mg/m3；
折算公式mg/ m3=M/22.4*ppm*［273/（273+T）］*（Ba/101325）
上式中：M---为气体分子量PPM---为测定的体积浓度值T---温度Ba---压力臭氧发生器工作1h后，臭氧自然衰退率（S）为62.25%；则选择臭氧发生器的臭氧发生量W（mg/h）：
W=CV/（1-S）
现有2台空调机组，分别为固体制剂车间空调，送风量m3/h，控制净化面积m2，洁净标准（D 级）；前处理车间，送风量m3/h，控制净化面积m2，洁净标准（D级）。

采用外置式臭氧发生器，用管线连到每台空调机组上，使用时，同时对每台空调台机组控制的洁净区进行消毒。

（按固体制剂车间和前处理车间两台空调机组同时开启计算）
洁净室体积为V
1；HVAC系统风管体积为V
2
，V
3
为保持洁净室正压所补充的新风的臭氧量。

消毒空间体积为：V=V
1+V
2
+V
3
式中V
3
=HVAC系统循环总风量（m3/h）×25%(新风补充量) ×10%(保持洁净区正压需补充的新风量) ×37.75%(计算应用臭氧半衰期的预算值)≈循环系统总风量×0.944%。

固体制剂车间：V
1=987.55m3；V
2
=27.5m3；V
3
=25000×0.944%=236m3；
V=V
1+V
2
+V
3
=987.55m3+27.5 m3+236m3=1251.05 m3。

前处理车间：V
1=961.83 m3；V
2
=27.5m3；V
3
=25000×0.944%=236m3；
V=V1+V2+V3=961.83m3+27.5m3+236m3=1225.33m3。

消毒空间体积V=1251.05+1225.33=2476.38 m3。

空气中的臭氧浓度（C）应达到10×10-6，折算为19.63mg/m3.臭氧发生器工作1h后，臭氧自然衰退率（S）为62.25%；则选择臭氧发生器的臭氧发生量W（mg/h）：W=CV/（1-S）W===128771.76mg/h≈130g/h
以上计算结果表明，两台空调机组控制的净化面积所需的臭氧最大量是130g/h，因此，一台臭氧发生量为130 g/h的臭氧发生器，即能满足要求。

现我公司选择的设备的臭氧发生器
技术参数
6.2设备技术性能及厂家信息
设备名称臭氧发生器设备型号
生产厂家总功率Kw
电源（V/HZ）臭氧产量（g/h）
气量（m3/h）冷却水流量
出厂编号重量
出厂日期年月安装地点生产车间二楼空调机房9、安装确认测试
安装确认是对欲安装设备的规格、安装条件（或场所）、安装过程及安装后进行确认。

目的是证实所供应的设备规格应符合要求，设备所应有的技术资料齐全（操作指南、制造和设计标准等），并确认安装条件（或场所）及整个安装过程符合设计规要求。

工程设备部安装完成后，填写设备安装记录。

9.1文件确认
资料名称存放处
确认人：日期：复核人：日期：
9.2安装确认
确认人：日期：复核人：日期：
10、安装确认偏差记录
记录安装确认方案执行过程中产生的每个偏差。

在安装确认方案执行过程中产生的偏差必须按照《偏差管理规程》进行管理。

确认人：
日期： 复核人： 日期：
设备的安装确认表
11.设备运行确认： 11.1运行确认所需文件
确认人：日期：复核人：日期：
11.2运行验证所需仪器及其校验
确认人：日期：复核人：日期：
11.3 运行确认
11.3.1目的：确认洁净区在臭氧发生器正常消毒时间2.5小时，臭氧浓度符合设计要求。

11.3.2合格标准
11.3.2.1臭氧发生器各步程序运行正常，与操作说明书相符；
11.3.2.2臭氧浓度：在臭氧发生器开启后40min洁净室臭氧浓度≥19.63mg/m3（10ppm），且所有洁净区域中臭氧浓度均≥19.63mg/m3（10ppm）。

11.3.2.3消毒时间：所有洁净区域臭氧浓度达到20mg/m3时开始计时，直到臭氧发生器停止工作臭氧浓度降至19.63mg/m3（10ppm）时终止，时间应≥60min。

11.3.2.4臭氧灭菌后，臭氧浓度衰减至安全标准0.15ppm 所需的时间应≤30min。

11.3.3试验条件
环境温度16～28℃；相对湿度45～65%；室无外界强气流，无强烈照射或其他热辐射。

消毒时关闭新风口和回风排放阀门，使整个被消毒的洁净区空气通过净化系统风管形成循环，臭氧发生器开始工作。

11.3.4试验用仪器
臭氧浓度检测仪：；
11.3.5臭氧浓度测试方法：
a、割断检测管的两端封口，将检测管插在采样器的进气口上，将采样器手柄拉至第二档位采样100ml，待检测管中指示剂变色终止，即可从白色柱所致刻度，读出臭氧体积浓度(ppm)数据。

b、臭氧检测浓度单位mg/m3与ppm的关系及换算公式
质量浓度（mg/m3）=臭氧分子量（M）/22.4(标准状态下气体的摩尔体积B)×体积浓度(ppm) ×（273/(273+T)）×（Ba/101325）
c、每一测试点应同时测试两个平行样；
d、测试时检测人员应戴防毒口罩，防止臭氧中毒。

11.3.6臭氧浓度－时间分布测试。

11.3.6.1测试地点：选取距离空调箱送风口最远且送风口分布最稀少房间进行测试（喷雾干燥制粒室）。

11.3.6.2测试方案：臭氧发生器开启时开始测试，每10分钟测试一次；发生器开启40min后，此时臭氧浓度呈缓慢上升，近似平台；连续监测2h；臭氧发生器关闭，空调送风时测试一次，15min后测试一次，连续监测1h（监测在空调送新风时臭氧浓度的衰减）。

11.3.6.3运行确认—臭氧浓度时间分布测试（固体制剂车间）
11.3.6.4运行确认—臭氧浓度时间分布测试（前处理车间）
11.3.7臭氧浓度――空间分布测试。

11.3.7.1测试地点：选取关键房间（固体制剂车间：；；；；；；）（前处理：；；）进行测试。

11.3.7.2测试方案：从臭氧发生器开启40min后依次测试。

11.3.7.3运行确认—臭氧浓度空间分布测试（制剂车间）
11.3.7.4运行确认—臭氧浓度空间分布测试（前处理车间）
11.4性能确认
11.4.1目的：确认预定的臭氧消毒程序在洁净区空间消毒后，微生物杀灭率≥90%。

11.4.2金黄色葡萄球菌阳性试验
a 、生物指示剂的制备：取金黄色葡萄球菌制备菌液；培养48小时候，稀释成1200个/ml 。

临用前在营养琼脂培养基平皿中加入1ml 上述菌液，并使之再培养基表面均匀分布。

b 、选取关键房间（1、2、3、4）进行测试。

每个房间放置2碟。

c 、臭氧发生器开启的同时打开注有菌液的培养皿上盖，至臭氧消毒程序结束。

d 、把培养皿放入37 ℃恒温箱中培养48 h ，进行菌落计算。

同时以未经臭氧处理的培养皿做空白对照。

e 、计算杀灭率：
%100%⨯-=
数
消毒前对照组平均菌落消毒后平均菌落数
数消毒前对照组平均菌落）灭杀率（
f 、微生物阳性试验和臭氧浓度测试同步进行；
g 、上述试验应连续进行三次，确认灭菌过程的重现性。

附件5.性能确认-微生物阳性试验记录 11.4.3消毒周期的确认
11.4.3.1方法：每15天对D 级洁净区进行一次臭氧消毒，分别在第一天、第5天、第10天和第15天选取关键房间（制剂车间：1；2；3；4；）（前处理车间：5；6）进行微生物检测，连续进行三周检测全部合格，可确定消毒周期15天为有效。

11.4.3.2合格标准：菌落数≤100个/皿。

11.4.3.3性能确认-消毒周期确认（固体制剂车间）
11.4.3.4性能确认-消毒周期确认（前处理车间）
11.5性能确认偏差记录
记录性能确认方案执行过程中产生的每个偏差。

在性能确认方案执行过程中产生的偏差必须按照《偏差管理规程》进行管理。

确认人：日期：复核人：日期：
设备的性能确认表
12.结论与评定：
评价人：评价日期：
13.验证周期及验证时间安排
13.1设备发生改变（如关键设备或系统的改动）必须重新验证。

13.2设备更新或大修。

13.3根据验证结果确定系统再验证周期，并在验证报告中规定。

13.4验证小组于2016年3月01日～2016年4月20日实施验证工作。