微生物的分离和培养高三生物一轮复习(共30张PPT)
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例3、在培养金黄色葡萄球菌时污染了青霉菌，青 霉菌菌落周围区域内金黄色葡萄球菌不能生存。 下列相关叙述错误的是 （ ）
A．青霉菌和金黄色葡萄球菌之间的关系为竞争
B．要保留金黄色葡萄球菌，可用含高浓度食盐的 培养基进行选择
C．若金黄色葡萄球菌仍然生存，可能发生了抗青 霉素的基因突变
D．补充适合金黄色葡萄球菌的营养能保存该菌
病毒
无细胞结构
原核生物 细菌、蓝藻 原核细胞
微生物的类群
原生生物 单细胞的动植物
如草履虫、单细胞藻类等
真核细胞
真菌 如酵母菌
微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生物
基础知识梳理
一.培养基 (微生物生存的环境和营养物质)
培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微 生物生长繁殖使用的混合营养液。
接触充分，还能大量溶解微生物的代谢产物等优点，广泛用于微生 物的生理、代谢研究以及大规模的工业化生产中。
③半固体培养基：（观察微生物的运动）
加入少量的凝固剂(如0.2％～0.5％的琼脂)而制成的培养基。这种培养 基常用于观察细菌的运动、厌氧菌的分离和菌种鉴定等。
（2）天然培养基和合成培养基
①天然培养基：（工业生产降低成本）
（一）分类：
（1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基、液 体培养基和半固体培养基。
（2）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基 。 （3）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基
。
(1)固体培养基、液体培养基和半固体培养基 ①固体培养基：（观察菌落和分离提纯微生物）
在一般培养温度下呈固体状态的培养基。
。
碳源、氮源、生长因子的比较
来源
常用原料
功能
碳 源
CO2、NaHCO3、糖类 、脂肪酸、花生粉 饼、石油等
糖类
氮 源
N2、NH3、铵盐、硝 酸盐、尿素、牛肉 膏和蛋白胨等
铵盐、硝 酸盐等
构成细胞物质 和一些代谢产 物，有些还是 异养生物的主 要能源物质
合成蛋白质、 核酸以及含氮 的代谢产物
生长 维生素、氨基酸、 因子 碱基
物质。 CO2、NaHCO3、糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等
自养型微生物的碳源为：含碳无机物（无机碳） 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。
⑵来源： ①无机碳源：CO ；NaHCO3；碳酸盐等 例3、在培养金黄色葡萄球菌时污染了青霉菌，青霉菌菌落周围区域内金黄色葡萄球菌不能生存。
2 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污 染培养基。
3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的 培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可 以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止 皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基 溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能 用来培养微生物吗？为什么？
将试管口通过火焰
灼烧接种环，待其冷却后，从第一
区域划线的_______开末始端往第二区
域内划线。重复以上操作，在三、 四、五区域内划线。注意不要将最 后一区的划线与第一区相连。
将平板_倒__置__放
入培养箱中培养 。
.将已_冷___却__的接种环伸入
菌液中蘸取一环菌液
.将试管通过火焰 ，并塞上棉塞
左手将皿盖打开一条缝隙，右手将 沾有菌种的接种环迅速伸入平板内
一类是用天然的固体状物质制成的，如用马铃薯块、麸皮、米糠、豆 饼粉、花生饼粉制成的培养基，酒精厂、酿造厂等常用这种培养基 ；
另一类是在液体中添加凝固剂而制成的，如实验室中常用的琼脂固体 斜面和固体平板培养基。这种培养基广泛用于微生物的分离、鉴定 、保藏、计数及菌落特征的观察等。
②液体培养基或培养液或发酵液：（工业大规模培养 ） 呈液体状态的培养基。液体培养基因营养物质分布均匀，与菌体表面
化70学~7药5℃剂、30min
酒紫8精0外℃、线、氯气15、mi石n 炭酸等
灼烧灭菌
接 金耐 干属种高热用环温灭具、需菌接保种持针干等燥的 物品
， 高1压60蒸～汽17灭0℃菌
1
～培2养小基时，
100KPa、
121℃、15～30min
纯化培养：
由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，就是菌落
㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1.计算：培养基用量
答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基 上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
㈡纯化大肠杆菌：
1.纯化的方法：
（1）平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画
线操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，在数次画 线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的子细胞群体，这就 是菌落。
依配方计算各成分的用量
2.称量：牛10肉00膏m黏l牛稠肉，膏用蛋称白量胨纸培称养取基的配方 牛肉膏、蛋白琼胨易脂吸20潮.0g，要快、加盖
3.溶化：牛肉膏、称量牛纸肉、膏少量5水g 加热溶解 →取纸 →蛋白胨、蛋Na白Cl胨→琼1脂0g →补水定容
4.调pH、分装、封口：N1maocll ／lNa5ogH调制微碱 5.灭菌： 培养基、H培2O养皿定容至1000ml
③为避免周围环境中微生物的污染，实 验操作应在酒精灯火焰附近进行.
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材 料用具与周围的物品相接触.
超净工作台
2.消毒与灭菌：
消毒
ห้องสมุดไป่ตู้
灭菌
较为温和理化方法， 强烈的理化方法，
定义 杀死部分有害菌体
杀死所有微生物
（不包括芽孢、孢子） （包括芽孢、孢子）
煮沸消毒法
方法 巴10氏0℃消、毒5法~6min
70~75℃、30min
②有机碳源：糖类、脂肪酸、蛋白质 另一类是在液体中添加凝固剂而制成的，如实验室中常用的琼脂固体斜面和固体平板培养基。
答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 微生物需要的四大类营养要素物质是：
、花生粉饼、石油等
⑶不同微生物所利用的碳源不同：
a.异养型微生物的碳源为：含碳有机物（有机碳）
b.自养型微生物的碳源为：含碳无机物（无机碳）
⑴概念： 凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。 ⑵来源： ①无机氮源：N2、NH4+氨盐、NO3-硝酸盐、NH3。
②有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸
等
⑶固氮微生物所利用的氮源是： 氮气
培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如: 生长因子(微生物生长不可缺少的微量有机物）如维生素、 某些氨基酸、碱基)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求
A．加入指示剂的鉴别培养基 B．含有蛋白胨的固体培养基 C．没有有机氮的选择培养基 D．营养要素全面的液体培
养基
例2、某同学在做微生物实验时，不小心把原褐固 氮菌和酵母菌混在一起，为了得到纯度较高的酵 母菌，配制好的培养基中应再加入 （ ）A．高 浓度的食盐 B．硝酸盐
C．伊红美蓝溶液 D．青霉素
主要取自动物体液或从动物组织分离提取。其优 点是营养成分丰富，培养效果良好，缺点是成分 复杂，来源受限。天然培养基/液的种类很多， 包括生物性液体（如血清）；组织浸液（如胚胎 浸液）；凝固剂（如血浆）等。
②合成培养基：（菌种的分类，鉴定，营养、代 谢 ，遗传、鉴定和生物测定等定量要求较高的 研究）是通过顺序加入准确称量的高纯度化学试 剂与蒸馏水配制而成的。其所含的成分（包括微 量元素在内）以及他们的量都是确切可知的。
考试说明
【考纲考点】
等级要求
微生物的分离和培养
A
微生物的分离和培养
A
DNA的粗提取与鉴定
B
近五年江苏高考关于本章的考察情况 ：
09 21和23考察DNA的鉴定和提取
10 32考察DNA粗提取的相关探究活动的实验设计 11 19考察DNA的粗提取与鉴定 12 18考察DNA粗提取与鉴定 13 4DNA粗提取与鉴定，18微生物的培养方法
（2）稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后
将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培
养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成 单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌落。
将接种环放在火焰
上灼烧，直到接种
环______烧_ 红
在__火__焰___旁冷
却接种环，并 打开棉塞
酶、核酸等的 组成成分
牛肉膏当中含有肌酸、肌酸酐、多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类 、矿物质类及维生素类。的水溶性物质。
牛肉膏为微生物提供碳源、氮源、能源、磷酸盐和维生素，蛋白胨主 要提供氮源和维生素。
二.无菌技术： 防止外来杂菌的污染
1.无菌范围：
①实验操作空间,操作者的手、衣着消毒 .
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和 培养基等器具进行灭菌。
命题趋势
• 由上述的分析可以看出这部分知识在每年的生物 高考题都有出现，且主要集中在对DNA粗提取 与鉴定试验的考察。微生物的知识由于在13年考 试说明中新添加，其考察的知识点主要以微生物 培养和分离的方法知识为主。因此复习备考的过 程中，要注意加强这部分相关知识的学习。
第一讲 微生物的分离和培养
6.倒平板：
约50℃
倒平板
灼烧灭菌，
防止瓶口的微生物污染培养基
防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染
1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用 来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？
答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形 瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板 了。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
（三）培养基的构成
微生物需要的四大类营养要素物质是：
由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，就是菌落 近五年江苏高考关于本章的考察情况： 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染 H2O 定容至1000ml
⑴概念 凡是能为微生物提供所需碳元素的营养 合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物
其优点是营养成分丰富，培养效果良好，缺点是成分复杂，来源受限。
• 学习目标：
①无机氮源：N2、NH4+氨盐、NO3-硝酸盐、NH3。 （2）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。 另一类是在液体中添加凝固剂而制成的，如实验室中常用的琼脂固体斜面和固体平板培养基。 构成细胞物质和一些代谢产物，有些还是异养生物的主要能源物质 H2O 定容至1000ml 培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。 121℃、15～30min 另一类是在液体中添加凝固剂而制成的，如实验室中常用的琼脂固体斜面和固体平板培养基。 在一般培养温度下呈固体状态的培养基。 N2、NH3、铵盐、硝酸盐、尿素、牛肉膏和蛋白胨等 ①实验操作空间,操作者的手、衣着消毒. 从而使后者从含有杂菌的标本中分离出。 ③半固体培养基：（观察微生物的运动） 加入少量的凝固剂(如0. 在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ B．要保留金黄色葡萄球菌，可用含高浓度食盐的培养基进行选择
（3）选择培养基和鉴别培养基： ①选择培养基：配制特点：添加或减少某种化学物质，以 抑制不需要的微生物生长，促进所需微生物的生长。从 而使后者从含有杂菌的标本中分离出。（即筛选你所
需要培养的微生物，令其生长，其余微生物不生长 ）
例如：
(1)基本的培养基通过加青霉素，实现分离纯化酵母菌、霉菌
； （2）加高浓度的食盐分离纯化金黄色葡萄球菌（有高度的耐盐
（二）培养基配制原则：
（1）目的要明确：根据微生物的种类、培养目的等确定配制培
养基的种类，因为不同的微生物对培养物质的需求不同。
（2）营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。 （3）pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同。
细菌pH为：6.5-7.5（偏碱）； 放线菌pH为：7.5-8.5； 真菌pH为：5.0-6.0（偏酸）。
例如：伊红美蓝培养基
（1）用途：伊红美篮培养基一般用于检测饮用水 和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌。
（2）原理：伊红为酸性染料，美篮为碱性染料。 当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成 红色，再与美篮结合形成紫黑色菌落，并带有金 属光泽。
练一练
例1、要将土壤中的自生固氮菌（如原褐固氮菌）与其它细菌 分离出来，应将它们接种到（ ）
，划________三__条至平五行线，盖上皿盖。注
性，可在10~15%NaCl肉汤中生长 ）
（3）无氮培养基可分离纯化固氮菌（固氮细菌 ）。 （4）不含有机碳的培养基可分离纯化自养型细菌如硝化细菌 。
②鉴别培养基：
配制特点：在培养基中加入某种指示剂或化学 药品，以鉴别不同种类的微生物。（即只能鉴
别出你此种微生物是不是你所需要的微生物，而 不能抑制其余种类的微生物生长 ）
A．青霉菌和金黄色葡萄球菌之间的关系为竞争
B．要保留金黄色葡萄球菌，可用含高浓度食盐的 培养基进行选择
C．若金黄色葡萄球菌仍然生存，可能发生了抗青 霉素的基因突变
D．补充适合金黄色葡萄球菌的营养能保存该菌
病毒
无细胞结构
原核生物 细菌、蓝藻 原核细胞
微生物的类群
原生生物 单细胞的动植物
如草履虫、单细胞藻类等
真核细胞
真菌 如酵母菌
微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生物
基础知识梳理
一.培养基 (微生物生存的环境和营养物质)
培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微 生物生长繁殖使用的混合营养液。
接触充分，还能大量溶解微生物的代谢产物等优点，广泛用于微生 物的生理、代谢研究以及大规模的工业化生产中。
③半固体培养基：（观察微生物的运动）
加入少量的凝固剂(如0.2％～0.5％的琼脂)而制成的培养基。这种培养 基常用于观察细菌的运动、厌氧菌的分离和菌种鉴定等。
（2）天然培养基和合成培养基
①天然培养基：（工业生产降低成本）
（一）分类：
（1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基、液 体培养基和半固体培养基。
（2）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基 。 （3）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基
。
(1)固体培养基、液体培养基和半固体培养基 ①固体培养基：（观察菌落和分离提纯微生物）
在一般培养温度下呈固体状态的培养基。
。
碳源、氮源、生长因子的比较
来源
常用原料
功能
碳 源
CO2、NaHCO3、糖类 、脂肪酸、花生粉 饼、石油等
糖类
氮 源
N2、NH3、铵盐、硝 酸盐、尿素、牛肉 膏和蛋白胨等
铵盐、硝 酸盐等
构成细胞物质 和一些代谢产 物，有些还是 异养生物的主 要能源物质
合成蛋白质、 核酸以及含氮 的代谢产物
生长 维生素、氨基酸、 因子 碱基
物质。 CO2、NaHCO3、糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等
自养型微生物的碳源为：含碳无机物（无机碳） 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。
⑵来源： ①无机碳源：CO ；NaHCO3；碳酸盐等 例3、在培养金黄色葡萄球菌时污染了青霉菌，青霉菌菌落周围区域内金黄色葡萄球菌不能生存。
2 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污 染培养基。
3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的 培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可 以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止 皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基 溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能 用来培养微生物吗？为什么？
将试管口通过火焰
灼烧接种环，待其冷却后，从第一
区域划线的_______开末始端往第二区
域内划线。重复以上操作，在三、 四、五区域内划线。注意不要将最 后一区的划线与第一区相连。
将平板_倒__置__放
入培养箱中培养 。
.将已_冷___却__的接种环伸入
菌液中蘸取一环菌液
.将试管通过火焰 ，并塞上棉塞
左手将皿盖打开一条缝隙，右手将 沾有菌种的接种环迅速伸入平板内
一类是用天然的固体状物质制成的，如用马铃薯块、麸皮、米糠、豆 饼粉、花生饼粉制成的培养基，酒精厂、酿造厂等常用这种培养基 ；
另一类是在液体中添加凝固剂而制成的，如实验室中常用的琼脂固体 斜面和固体平板培养基。这种培养基广泛用于微生物的分离、鉴定 、保藏、计数及菌落特征的观察等。
②液体培养基或培养液或发酵液：（工业大规模培养 ） 呈液体状态的培养基。液体培养基因营养物质分布均匀，与菌体表面
化70学~7药5℃剂、30min
酒紫8精0外℃、线、氯气15、mi石n 炭酸等
灼烧灭菌
接 金耐 干属种高热用环温灭具、需菌接保种持针干等燥的 物品
， 高1压60蒸～汽17灭0℃菌
1
～培2养小基时，
100KPa、
121℃、15～30min
纯化培养：
由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，就是菌落
㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1.计算：培养基用量
答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基 上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
㈡纯化大肠杆菌：
1.纯化的方法：
（1）平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画
线操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，在数次画 线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的子细胞群体，这就 是菌落。
依配方计算各成分的用量
2.称量：牛10肉00膏m黏l牛稠肉，膏用蛋称白量胨纸培称养取基的配方 牛肉膏、蛋白琼胨易脂吸20潮.0g，要快、加盖
3.溶化：牛肉膏、称量牛纸肉、膏少量5水g 加热溶解 →取纸 →蛋白胨、蛋Na白Cl胨→琼1脂0g →补水定容
4.调pH、分装、封口：N1maocll ／lNa5ogH调制微碱 5.灭菌： 培养基、H培2O养皿定容至1000ml
③为避免周围环境中微生物的污染，实 验操作应在酒精灯火焰附近进行.
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材 料用具与周围的物品相接触.
超净工作台
2.消毒与灭菌：
消毒
ห้องสมุดไป่ตู้
灭菌
较为温和理化方法， 强烈的理化方法，
定义 杀死部分有害菌体
杀死所有微生物
（不包括芽孢、孢子） （包括芽孢、孢子）
煮沸消毒法
方法 巴10氏0℃消、毒5法~6min
70~75℃、30min
②有机碳源：糖类、脂肪酸、蛋白质 另一类是在液体中添加凝固剂而制成的，如实验室中常用的琼脂固体斜面和固体平板培养基。
答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 微生物需要的四大类营养要素物质是：
、花生粉饼、石油等
⑶不同微生物所利用的碳源不同：
a.异养型微生物的碳源为：含碳有机物（有机碳）
b.自养型微生物的碳源为：含碳无机物（无机碳）
⑴概念： 凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。 ⑵来源： ①无机氮源：N2、NH4+氨盐、NO3-硝酸盐、NH3。
②有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸
等
⑶固氮微生物所利用的氮源是： 氮气
培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如: 生长因子(微生物生长不可缺少的微量有机物）如维生素、 某些氨基酸、碱基)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求
A．加入指示剂的鉴别培养基 B．含有蛋白胨的固体培养基 C．没有有机氮的选择培养基 D．营养要素全面的液体培
养基
例2、某同学在做微生物实验时，不小心把原褐固 氮菌和酵母菌混在一起，为了得到纯度较高的酵 母菌，配制好的培养基中应再加入 （ ）A．高 浓度的食盐 B．硝酸盐
C．伊红美蓝溶液 D．青霉素
主要取自动物体液或从动物组织分离提取。其优 点是营养成分丰富，培养效果良好，缺点是成分 复杂，来源受限。天然培养基/液的种类很多， 包括生物性液体（如血清）；组织浸液（如胚胎 浸液）；凝固剂（如血浆）等。
②合成培养基：（菌种的分类，鉴定，营养、代 谢 ，遗传、鉴定和生物测定等定量要求较高的 研究）是通过顺序加入准确称量的高纯度化学试 剂与蒸馏水配制而成的。其所含的成分（包括微 量元素在内）以及他们的量都是确切可知的。
考试说明
【考纲考点】
等级要求
微生物的分离和培养
A
微生物的分离和培养
A
DNA的粗提取与鉴定
B
近五年江苏高考关于本章的考察情况 ：
09 21和23考察DNA的鉴定和提取
10 32考察DNA粗提取的相关探究活动的实验设计 11 19考察DNA的粗提取与鉴定 12 18考察DNA粗提取与鉴定 13 4DNA粗提取与鉴定，18微生物的培养方法
（2）稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后
将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培
养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成 单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌落。
将接种环放在火焰
上灼烧，直到接种
环______烧_ 红
在__火__焰___旁冷
却接种环，并 打开棉塞
酶、核酸等的 组成成分
牛肉膏当中含有肌酸、肌酸酐、多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类 、矿物质类及维生素类。的水溶性物质。
牛肉膏为微生物提供碳源、氮源、能源、磷酸盐和维生素，蛋白胨主 要提供氮源和维生素。
二.无菌技术： 防止外来杂菌的污染
1.无菌范围：
①实验操作空间,操作者的手、衣着消毒 .
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和 培养基等器具进行灭菌。
命题趋势
• 由上述的分析可以看出这部分知识在每年的生物 高考题都有出现，且主要集中在对DNA粗提取 与鉴定试验的考察。微生物的知识由于在13年考 试说明中新添加，其考察的知识点主要以微生物 培养和分离的方法知识为主。因此复习备考的过 程中，要注意加强这部分相关知识的学习。
第一讲 微生物的分离和培养
6.倒平板：
约50℃
倒平板
灼烧灭菌，
防止瓶口的微生物污染培养基
防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染
1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用 来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？
答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形 瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板 了。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
（三）培养基的构成
微生物需要的四大类营养要素物质是：
由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，就是菌落 近五年江苏高考关于本章的考察情况： 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染 H2O 定容至1000ml
⑴概念 凡是能为微生物提供所需碳元素的营养 合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物
其优点是营养成分丰富，培养效果良好，缺点是成分复杂，来源受限。
• 学习目标：
①无机氮源：N2、NH4+氨盐、NO3-硝酸盐、NH3。 （2）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。 另一类是在液体中添加凝固剂而制成的，如实验室中常用的琼脂固体斜面和固体平板培养基。 构成细胞物质和一些代谢产物，有些还是异养生物的主要能源物质 H2O 定容至1000ml 培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。 121℃、15～30min 另一类是在液体中添加凝固剂而制成的，如实验室中常用的琼脂固体斜面和固体平板培养基。 在一般培养温度下呈固体状态的培养基。 N2、NH3、铵盐、硝酸盐、尿素、牛肉膏和蛋白胨等 ①实验操作空间,操作者的手、衣着消毒. 从而使后者从含有杂菌的标本中分离出。 ③半固体培养基：（观察微生物的运动） 加入少量的凝固剂(如0. 在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ B．要保留金黄色葡萄球菌，可用含高浓度食盐的培养基进行选择
（3）选择培养基和鉴别培养基： ①选择培养基：配制特点：添加或减少某种化学物质，以 抑制不需要的微生物生长，促进所需微生物的生长。从 而使后者从含有杂菌的标本中分离出。（即筛选你所
需要培养的微生物，令其生长，其余微生物不生长 ）
例如：
(1)基本的培养基通过加青霉素，实现分离纯化酵母菌、霉菌
； （2）加高浓度的食盐分离纯化金黄色葡萄球菌（有高度的耐盐
（二）培养基配制原则：
（1）目的要明确：根据微生物的种类、培养目的等确定配制培
养基的种类，因为不同的微生物对培养物质的需求不同。
（2）营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。 （3）pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同。
细菌pH为：6.5-7.5（偏碱）； 放线菌pH为：7.5-8.5； 真菌pH为：5.0-6.0（偏酸）。
例如：伊红美蓝培养基
（1）用途：伊红美篮培养基一般用于检测饮用水 和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌。
（2）原理：伊红为酸性染料，美篮为碱性染料。 当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成 红色，再与美篮结合形成紫黑色菌落，并带有金 属光泽。
练一练
例1、要将土壤中的自生固氮菌（如原褐固氮菌）与其它细菌 分离出来，应将它们接种到（ ）
，划________三__条至平五行线，盖上皿盖。注
性，可在10~15%NaCl肉汤中生长 ）
（3）无氮培养基可分离纯化固氮菌（固氮细菌 ）。 （4）不含有机碳的培养基可分离纯化自养型细菌如硝化细菌 。
②鉴别培养基：
配制特点：在培养基中加入某种指示剂或化学 药品，以鉴别不同种类的微生物。（即只能鉴
别出你此种微生物是不是你所需要的微生物，而 不能抑制其余种类的微生物生长 ）