大鼠左肺原位移植模型手术技术改进

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用压力-容积环评价大鼠心功能方法的改进及注意事项

用压力-容积环评价大鼠心功能方法的改进及注意事项

用压力-容积环评价大鼠心功能方法的改进及注意事项刘晓雨;谭文【摘要】Objective To investigate the key factors for PV Loop evaluation in rats and to improve this method. To provide examples of cardiac function measurements obtained from normal rats and from rats with cardiac hypertrophy induced by transverse aortic constriction ( TAC ) . To establish a more reliable method for rats heart measurements. Methods Rats underwent left ventricular catheterization through the right carotid artery. Through adjustments of the position of the pressure⁃volume conductance catheter, the optimal PV Loops and a number of cardiac functional parameters were acquired. The key influencing factors, calibration of volume, position of the catheter in the left ventricle ( LV) and suspension of ventilator were assessed. Results 1. The real volume of left ventricle were acquired by injecting appropriate volume of hypertonic saline through jugular vein, which deducted the parallel conductivities of ventricular wall. 2. To get better PV loops, it’ s important to adjust the position of the catheter in the left ventricle until all of the pressure and volume sensors were located in the ventricle as well as out of touch with the ventricular wall. 3. Suspension the ventilator during the test is conducive to stable and reasonable data acquisition. We further assessed the cardiac functions of healthy rats and rats with cardiac hypertrophy with this improved method, which showed better performances. Conclusions This study we have evaluated the influences of calibration of volume,position of the catheter in the left ventricle ( LV) and ventilator on measurements of rats PV loops, and further improved this method. Moreover, we have validated this method with measurements of cardiac functions of normal rats and cardiac hypertrophic rats.%目的:探讨应用压力⁃容积环( pressure⁃volume loop,PV Loop)评价大鼠心功能过程中的影响因素及方法改进原则,分析主动脉弓缩窄(transverse aortic constriction,TAC)诱导的压力负荷对大鼠心脏功能的影响,从而为大鼠健康或疾病状态下的心功能分析提供更为科学全面的方法。

一种新的大鼠原位肾移植模型的建立

一种新的大鼠原位肾移植模型的建立

1 材 料 和 方 法
11 材 料 .
图 1 自制 勾线 器
12 手 术方 法 .
1- 6 2 1 周龄 雄性 S D大 鼠和 Wi a 大 鼠( 州军 sr t 兰 区 兰州 总医 院实验 动 物 中心 , S YXK( 2 0 .2 1 军) 0 20 6
121 术前 准 备 和 麻 醉 供 、受 体 术 前 6h禁食 , ..
维普资讯
赫 物 J L 主-。 L b rlr A i a a dJ mprt eMe i I .1 a oa y nn l n ( : : o  ̄ o a i dc l a ̄ i e
Ma. 0 .7 I [0 7 1) 2 2
1 1 1 l J
湿 纱 布 包 裹 胃 、肠 置 右 侧 体 外 。游 离左 肾 ,钝性 分 离左 肾动 、静 脉 近 侧 端 ;游 离腹 主 动 脉 和 下 腔 静 脉 ,近 至 腹 腔 干 之 上 和 右 肾 静 脉 下 缘 ,远 至左 肾动 、静 脉 下 05 1 m;除 去 血 管周 围脂 肪 和 .~ . c 0 结缔 组 织 ,分 别 电凝 或 结 扎(. 80丝线 ) 肾动 、静脉 分 支( 肾上 腺 动 、静 脉 和 精 索 血管 ) 结扎 腹 腔 干 , 。 分 离 、 结扎 下 腔 静 脉及 腹 主 动 脉 通 向腰 背 部 的 血 管 ,保 留肠 系 膜 上 动 脉 08 10c .~ . m。分别在 腹 腔 干上 缘腹 主动 脉和 右 肾静脉 下 缘下 腔静 脉处 各留 置

15mm 的
汁 八 4℃ 、 禽 仃 I 豢 2 ml J i 5U/ 的 近 侧 , 溺 高输

卞静 . 端 埂幢
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大鼠原位肝移植模型建立的技术要点

大鼠原位肝移植模型建立的技术要点

大鼠原位肝移植模型建立的技术要点目的探讨大鼠肝移植手术技巧与处理要点, 减少术后并发症,建立稳定的大鼠肝移植模型。

方法Wistar大鼠240只(供受体各120只)行二袖套法原位肝移植。

结果120例大鼠原位肝移植术后48小时存活率88.3 % ,1周存活率86.7%,建立了稳定的大鼠肝移植模型。

结论掌握技术要点与处理方法,是建立稳定的大鼠肝移植模型的保证。

Abstract:ObjectiveTo explore the surgical skills of Orthotopic Liver Transplantation in Rats and reduce the complications. MethodsOrthotopic Liver Transplantation was performed in 240 rats using two-cuff technique.ResultsThe survival rate for 48 hours was 88.3 %, the survival rate for one week was 86.7 %, and established stable liver transplantation model in rats. ConclusionMaster the surgical skills of Liver Transplantation in rats can improve achievement ratio and the steady livability of rats with orthotopic liver transplantation.Key words:Liver transplantation;Model;Rats大鼠原位肝移植是研究免疫耐受、免疫排斥、器官保存、肝脏缺血再灌注损伤等方面常用动物模型,1979年Kamada首次提出了二袖套法建立大鼠肝移植模型,简化了手术方式,提高了生存率[1]。

大鼠原位肝移植模型手术并发症的分析

大鼠原位肝移植模型手术并发症的分析

met w r oewt af lr rt 7 % , a oesiu a e r l epr ns 1. % ) P< .5 .C n ls n We e n eed n i i e a 0 iw s r e st nt ma x e met(2 5 s h au e t m o h hf o i ( 0 0 ) o cui o — d
【 键词 】 原位肝移植 ; 鼠并发症 ; 关 大 分析预防 【 中图分类号 】 R55 【 7 文献标识码 】 A 【 章 编号 】 10 4 6 (080 - 5- 06 7120 )5 35 3 0 0
COM P CAT1 LI 0NS I S N ETTI NG P U THE M ODEL OF ORTHOTOP C VER I LI TRANS ANTAT ON N T ( NG PL I I R A WA
a ai t h ha g so he p t o hy il g t e s c e s r t si nd de ng wih t e c n e ft a h p so o y,h u c s ae wa mprv d g e ty i hef r a x rm e s l o e r al n t m l e pe o i nt.
汪 泳 , 汝胜 , 晓俊 , 宇 周 钱海 鑫
【 要】 目的 摘
分析大 鼠原 位肝 移植 模型建立 中手术并 发症 的发生原 因 , 以制订 防治措施 , 高移植成 功率 。方 法 提

s D大 鼠作为供 、 鼠 , K m d 受 在 a aa等的袖套法大 鼠肝移植 模型的基础上改进 , 施行原位肝移植 7 0例 , 对预实验 中并发症 的发 生 情况进行统计 , 统计在实验 中的并发症发生率 , 并进行对 比分 析。结果 式实验 (2 5 ) P< .5 。结论 1. % ( 0 0 ) 实验 的手术成功率及 大鼠存 活率。 预实验 3 0只大 鼠并发 症发生率 为 7 % , 0 显著高 于正 实验中发现并及 时总结并发 症 的发 生情况 , 通过 改进手术 方法 和技 巧 , 可显著 提高正 式

成功建立大鼠肾移植模型的体会

成功建立大鼠肾移植模型的体会

肾上腺静脉、肾上腺下动脉
肾上腺静脉从肾
静脉中点上方汇入,取肾或原位肾移植均须将其结 扎切断,但在其深部还有一根肾上腺下动脉,如果结 扎肾上腺静脉过深,易损伤肾上腺下动脉,一旦出 血,很难找到出血点。
2.2
须分离股动静脉,两者均有一长1~1.5 cm的“无分 支段”,且位置表浅,易分离。在无分支段的中点后 方仍各有一极细的小分支(肌支),须分别结扎 切断。 2.8舌下静脉、阴茎背静脉、肠系膜上静脉此类 静脉均较粗大,肉眼易看清,易穿刺,可用于术中术 后注射肝素、补液等。 3术前准备
1994,3(I):24.25. the
mm),膀胱吻合用袖套管可用透明吸氧管制
成(直径5 mm)。基本要求是:吸氧管既要有一定 硬度,又有一定弹性,这样才能扎紧又不会被压扁 变形。具体制作方法是【6 o:将选好的管子放在乙 醚溶液中浸泡约2 h,取出后在室温下晾干10 h,然 后切割成4~5 mm长(用于血管)或6—8 mm长 (用于膀胱),表面用手术刀片刮成粗糙面或雕刻 成环行凹痕,使结扎牢固,不易滑脱。膀胱吻合采 用袖套法,既简便又快捷。
【参考文献】
[1] 吴阶平.吴阶平泌尿外科学[M].山东:山东科学技术出版 社。2004:1867-1868. [2]
Wagner E.The
rat
及摆放器械用。(爹小棉片:将棉球做成扁的圆盘状。 用等渗盐水或林格氏浸湿,冰冻后即可充当肾袋使 用。.术中将供肾置于一块冰棉片上,上覆另一块冰 棉片即可。(多冰块:可用等渗盐水或林格氏液制成. 用于保存供肾、术中供肾降温、肾窝降温等。术中须 将冰块敲碎,不断添加。⑤灌注管:可用麻醉用的硬 膜外导管(直径1 mill)制成。取供肾时将灌注管经 腹主动脉或肾动脉插入作肾灌注用,管径宜细不宜 粗,因肾动脉直径只有1 mm左右。⑥灌注针:注射 室作皮试用的l ml一次性注射器,将针头尖端磨平 后折弯即可。有两种用途,一是可当灌注管用,如取 左肾作单肾移植时,可在细小的肾动脉起始处剪一 小12,将灌注针插入直接灌注,速度快,效果好。如 经腹主动脉插入,可选用7—9号注射针头;二是可 当冲洗管用,作血管吻合前将针头对准血管断端,或 直接插入血管腔内用肝素盐水冲洗,操作方便。⑦ 补液针:选用作皮试用的1 ml注射器针头接10 rIll 注射器即可。也有两种用途:一是经舌下静脉、阴茎 背静脉、肠系膜上静脉注射肝素使供体取肾前肝素 化;二是或经上述静脉注射血液、林格氏液供大鼠术 中术后补液用。 4袖套管的制作和使用 1963年,美国starzl在动物实验的基础上施行 了第l例人类肝移植。1979年Kamada将“套管 法”血管吻合技术应用于大鼠原位肝移植。大大缩 短了门静脉吻合时间H。1。此后袖套管在动物肝 移植、肾移植中得到广泛应用。在血管吻合中,我 们体会到,动脉细小,但管壁弹性好,断端始终张 开,易吻合,而静脉管腔大、管壁薄,在吻合时前后 壁紧贴、难以张开,若用肝素盐水浸泡使其张开 后,管壁又呈白色透明,尤其是当静脉两断端口径 不一时,吻合困难,采用“袖套吻合法”解决了这一 难题。静脉、膀胱均可用袖套管吻合。动脉12径 太细,无法翻卷,宜用缝合法。静脉袖套管可用废 弃的中心静脉留置管上方的注药支管制成(直径

三种不同种属大鼠原位肝移植模型建立的外科技术

三种不同种属大鼠原位肝移植模型建立的外科技术
n i q u e”. W e mo n i t o r e d t he s u r v i v a l r a t e . Res u l t s Th r e e h u nd r e d a n d s i x t y c a s e s o f r a t o r t ho t o pi c l i v e r t r a n s pl a n t a t i o n we r e p e r f o r me d i n t o t a l a n d t h e s uc c e s s f ul r a t e o f t h e mo d e wa s 8 8. 3% .Th e Wi s t x、 a S D a nd Bu fa l o g r o u p o f t h e s u vi r v a l r a t e o f on e we e k a r e r e s pe c t i v e l y 91 . 3% 、 9 0. 6% a n d 8 3. 7% :Th e i r s u vi r v a l r a t e s o f o n e mo nt h a r e r e s pe c t i v e l y 83. 7% 、 8 2. 7% a n d 7 2. 9% . C o nc l us i o ns Th e S O - ph i s t i e a t e d mi e r o s ur g i e a l t e c hn i qu e a n d t he d e l i c a t e s u r g i c a l ma ni p ul a t i o n a x e t he ke y t o p e fo r m r a s u c c e s s f ul r a t o r t h o t o p i c l i v e r t r a ns ‘ pl a n t a t i o n o p e r a io t n. To l e r a n c e t o t h e o p e r a t i o n o f p u r e br e d r a t i s di fe r e n t f r o m hy b r i d. Op er a t i o n a l di fi cu l t y du e t o a na t o my v a r i a t i o n c a n b e o v e r c o me by de l i c a t e s ur g i c l a ma ni pu l a t i o n. Ke y wo r ds: Li v e r Tr a n s p l a nt a t i o n; Mi c r o s u r g e r y; Ra t

动物麻醉技术

动物麻醉技术

--硫酸镁为导泄、利胆、降压、抗惊厥药。口服不易吸收, 并使肠内容物渗透压升高,水分吸收减少,肠容积增大,刺激肠蠕动而泄下。注射给药可使血中Mg2+增加,它能阻止神经末梢释放乙酰胆碱,使骨骼肌松弛。本实验通过不同给药途径对硫酸镁作用的影响。
速眠新麻醉剂
---肾损伤模型
做药理学时,按照“章蕴毅主编.药理学实验指导.人民卫生出版社2007.8北京”实验3,做的。
An animal model of lung transplantation: damage, protection and immune response
---乳腺癌模型
有两条需要大家注意:1、术后肺不张不好处理。2、用大鼠的话,相关抗体偏少可能会给术后的研究带来不利,建议改用小鼠做模型。个人认为,从大鼠向小鼠过度约需一到两周时间。
---30例大鼠肺移植手术成功率为90%,移植后存活率100%,左供肺摘取需时(3±1) min,供肺完成体外套管时间分别为:肺动脉(2.0±0.5) min、肺静脉(3±1) min、支气管(2.0±0.5) min,供受体动静脉和支气管套管吻合时间分别为:肺动脉(4±1) min、肺静脉(8±3) min、支气管(2.0±0.5) min,总手术时间(55±10) min。提示改良的三袖套技术建立大鼠肺移植模型操作供稳定可靠的动物模型。
---煮沸消毒后的水合氯醛溶液可分解为酸性液,注入后可使动物发生酸中毒。因此不能高压灭菌,主要按照以下配置方法我想不会感染的。
其方法如下:
1、溶媒:通常用生理盐水,最好是5~l0%葡萄糖注射液或5%葡萄糖硫酸镁注射液(5%葡萄糖液l00ml加硫酸镁5g)。
2、浓度:高浓度刺激性大,易引起溶血;低浓度则增加注入药液量而加重心肺负担。临床常用浓度为5~10%。

大鼠原位肝移植模型的研究进展

大鼠原位肝移植模型的研究进展

症 等几 个方 面仍 需要进 行 大量 的研 究 , 稳定 的 动物 实 验模 型 的建立 就 故
显得 至关 重要 , 是研 究这 些 问题 的有 效 途 径 L 。 与 其 他实 验 动 物 相 比 , 2 ] 大 鼠具 有解 剖结 构类 似 于人 类 , 易 饲养 , 殖 较 快 , 于 观 察 等 优 点 , 容 繁 便 故 大 鼠肝移植 模 型是 目前 基 础 与 临床 中最 常 用 的 动 物模 型。 大 鼠肝 移 植术 式 模 型大 体 的分 型 有大 鼠原 位肝 移 植 ; 鼠异 位 肝移 植 ; 鼠慢 性 大 大 排斥 反 应 的建 立 ; 他 的模 型 ( 体积 式 、 助性 原 位 部分 、 心 跳供 体 其 减 辅 无 等) 3。本 文仅对 大 鼠的原 位 肝移 植实 验研 究 的进 展作 一 综述 L ] 1 大 鼠模 型 的优点 基础 和 临床 的肝移 植模 型 主要 以 鼠为造 模对 象 , 鼠原 位 肝 移植 模 大 型是 目前 最常 用 的动物 模型 。RO TM 主 要有 以下 优 点 : 与 较 大 的实 L ① 验动 物 ( 、 ) 比 , 管肝 移植 实 验在 技术 上更 容 易 实施 , 得 益于 显 狗 猪 相 尽 但 微外 科 的发 展 , 助 手术 显 微 镜 的放 大 , 借 使用 精 细 的 显微 手 术 器械 及 缝 合材 料 ( 管) 对 细小 的组 织 进 行精 细 手术 , R TM 的建 立 成 为 可 套 , 使 OL 能[ 。②有 大批 基 因型 明确 的纯 系 大 鼠 供 我们 选 择 , 近 交 系动 物 、 I ] 如 封 闭群 和杂 交群 等 。③单 克隆 抗 体 可 以 特异 和灵 敏 的 鉴定 大 鼠在 免 疫 排 斥异 以及 免疫 耐受 方面 起重 要作 用 的淋 巴细 胞 , 们 目前 对 大 鼠 的免 疫 人 分子 的认 识越 来越 多 。④ 大 鼠繁 殖 快 ( 娠期 和哺 乳 期 较 短) 成 本 低 、 妊 、 易于饲 养 、 有较 强 的抗 病 能力 , 人 的解 剖结 构 类 似 。⑤ 建 立 的 模 型 具 和 具 有 良好 的重 复性 , 济性 , 经 并发 症与 大 动物 肝脏 移植 基本 相 同 。 2 大 鼠的 麻醉 动物 模型 的建 立是在 动 物 的麻 醉状 态下 进行 的 , 模 型 的建 立 过程 在 中, 凡是 能影 响麻 醉 效果 的 因素 都 会 对 模 型 的存 活 率 和成 功率 造 成影 响I 。由于 每种 动物对 不 同麻 醉药 的 反应 , s ] 以及 不 同剂量 的维 持 效 果不 同, 故在 动物 的麻 醉过 程中 , 应选择 对 动物 机 体影 响较 小 、 作用 持 续 时 间 短, 而且 对实 验结 果影 响小 的 的麻 醉剂 , 而 达到 维 持稳 定 的麻 醉 效 果 。 从 大 鼠原 位 肝移植 模 型 , 麻醉 用药 的选 择 及麻 醉深 度 的掌 握 是保 证 手 术顺 利 进行 的关 键之 一 , 时也 是减 少大 鼠术 中及 围手 术期 死 亡率 的关 键 因 同 素 之一 。目前用 于大 鼠肝 移植 模 型手 术 的麻 醉药 物种 类 较 多 , 要 有 乙 主 醚、 氯胺 酮和 戊 巴比妥 等 , 种麻 醉药 有各 自的优 缺点 和应 用 范 围L 。 每 6 J 2 1 麻 醉药 的使 用情况 : 鼠肝 移植 模 型建 立 过程 中, . 大 目前 主 要使 用 乙醚 和 氯胺酮 两种 麻醉 剂 。乙 醚采 用吸 人 式给 药 , 由于 其对 呼 吸 道 的 刺 激作 用 , 造成呼 吸 困难甚 至 窒息 , 会 因此 在 给药 前 , 行 肌注 阿 托 品 的 要 预 处理 L 。氯胺 酮 , 7 J 化学 名是 2 ( 一氯 苯 基) 一 2 一2甲胺 基 一环 己酮 盐酸 盐 , D mi 9 5年 引入 临床 后 , 自 o n 16 o 至今 仍 是 非 巴 比妥 类 静 脉 麻 醉 药镇 痛 效果 唯 一确定 的麻 醉药 [ 巴 比 妥类 麻 醉 药 目前仍 在 大 鼠 肝 移植 模 型 的建 立 中使 用 。 因其 比较 大 的 肝脏 毒 性 , 严 重 影 响肝 脏 的 功 能和 但 会 实 验结 果 , 故很 少使 用 。彭 勇[ 等 在 用改 进 的二袖 套 法制 作大 鼠模 型的 。 ] 过程 中, 大 鼠随机 分为 对 照 组 、 醚 组 、氯 胺 酮 组 、 合 氯 醛 组 巴 将 乙 水 戊 比妥组 , 观察 每 种麻 醉 剂 的麻 醉 过 程 、 大 鼠 生理 和肝 功 能的 影 响 以及 对 无肝 期 开 始后 的 死亡 率 , 出各 种麻 醉对 肝 移植 大 鼠均有 明显 影 响 , 得 但 乙 醚具有 对生 理 、 功影 响小 , 肝 期 开始后 死 亡率 低 的优 点 , 可作 为 肝 无 故 制作 大 鼠原位 肝 移植模 型 的首 选麻 醉 方法 。 国内外 许 多 文 献报 导 , 氯胺 酮在 大 鼠肝移 植 中的麻 醉多 见 于 供 体 , 受 体 多 用 乙 醚 。就其 原 因 , 而 是 由于大 鼠肝移 植要 经 历无 肝 期 这 一特 殊 过 程 , 肝 ��

大鼠器官移植的手术配合1

大鼠器官移植的手术配合1

·实验研究·大鼠器官移植的手术配合1)Operative coordination in organ transplantation for rats袁 博,宫德正,吴云红,朱 亮,邹 原,关莉莉,吴 琼,高 颖Yuan Bo ,G ong Dezheng ,Wu Yunhong ,et al (Dalian Medical University ,Liaoning 116044China )中图分类号:R47 文献标识码:C doi :10.3969/j.issn.100926493.2009.18.054 文章编号:100926493(2009)6C 21688202 动物模型在促进器官移植的临床应用中起着重要作用。

狗、猪、鼠等动物模型被建立,用来进行器官移植的研究[125]。

由于大鼠遗传背景明确,饲养环境和条件容易控制,其实验结果也具有较强的科学性和可比性,而手术操作难度又比小白鼠小,因此大鼠是器官移植研究中最常用的动物模型,被广泛用于移植物保存,缺血再灌注损伤,免疫药物筛选,移植排斥反应,移植物功能恢复等方面的研究[6210]。

我实验室也成功开展了大鼠小肠移植手术和大鼠肾移植手术,在实践操作中体会到,在具有良好的手术技能的前提下,充分的术前准备、术中配合及术后护理对手术的成功十分重要,现将相关的手术配合注意事项和体会总结如下。

1 术前准备1.1 实验动物准备 根据不同的实验要求,选择不同的动物性别、年龄、体重、雌性动物是否妊娠、是否哺乳等。

一般宜选用SPF 级雄性大鼠,体重220g ~260g 。

术前首先将大鼠于饲养笼内单独饲养5d ~7d ,在此期间,一方面适应环境与饲养条件,另一方面观察其身体状况是否处于最佳状态,增加营养物质,以便提高手术耐受力。

术前供受体均置于代谢笼内禁食过夜,给予5%糖盐水自由摄取,手术时按照供体体重略小于受体的原则配对,术前给予背部皮下注射10mL 5%葡萄糖生理盐水。

大鼠原位肝移植模型技术的若干改进

大鼠原位肝移植模型技术的若干改进

2 i 肉注射 阿 托 品 00 . 肝 下 下 腔 静 脉 套 0mn肌 .3g
管 长度 3 5mm,内 径 19m . . m. 门静 脉 套 管 长 度 3 2mm, 内 径 16mm. 胆 管 插 管 长 度 5 2m . . . m, 内径 0 7m . m.外 壁 均加 刻 凹槽 .
WA G Q a , I i A i g— u , I i N i L ,R N Ja n L n h a L a X o—yn C E a g A n a , H N G n ,Y N Hog—x n i a (D p.fHp t —bl r ug r,T e1t e l’ o i l u m n , u mi 5 0 1 hn ) eto eao iayS re i y h s P o e S s t K n ig K n n 6 0 1 ,C i p H pa o f g a
s is s o ta h d li t b e a d c n b s d i he e p rme to ie r s l n to n t e rt . u t h w h tt e mo e s sa l n a e u e n t x e i n flv rta p a t in i h as n a
[ 关键词 ]大鼠 ;外科 ;手术 ;肝 移植 [ 中图分类号 ]R 5 . [ 673 文献标 识码 ]A [ 文章 编号 ]10 4 0 (0 7 2— 0 3- 3 0 3— 76 20 )0 0 4 0
I p o e e t n S r i a o e c n q e f Ra m r v m n s o u g c lM d lTe h i u s o t O r h t p c Li e a s l n a i n t o o i v r Tr n p a t to

改良三袖套法建立大鼠原位小肠移植模型

改良三袖套法建立大鼠原位小肠移植模型

改良三袖套法建立大鼠原位小肠移植模型(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)作者:王秀钰,车向明,樊林,何纪恩,林子晶,赵伟【摘要】目的改进血管重建,简化手术操作,建立稳定的大鼠原位小肠移植模型。

方法三袖套法行血管重建:供体肠系膜上动脉所带腹主动脉与受体腹主动脉分段由Cuff套管袖套吻合,供体门静脉与受体左肾静脉由Cuff套管袖套吻合。

结果共进行移植30例,成功27例,手术成功率90%。

供体手术平均耗时(42±5)min,供肠修整耗时(3±1)min,受体手术耗时(65±10)min,热缺血0min,冷缺血(32±3)min,三次套管共耗时(10±1)min,总手术耗时(160±10)min。

结论严格保护供肠与应用三袖套法重建血管,有助于快捷地建立简便稳定、成功率高、并发症少的大鼠节段性原位小肠移植模型。

【关键词】大鼠;小肠移植;原位;血管重建ABSTRACT: Objective To improve the vascular reconstruction technique, simplify the surgery process and establish a stable animal model for small bowel transplantation (SBT) in rats.Methods Reconstruction of vessels with tri cuff technique: Abdominal aorta of the donor attached to the graft was anastomosed to the abdominal aorta of the recipient with two Cuffs separately; the hepatic portal vein of the donor attached to the graft was anastomosed to the left renal vein with a Cuff. Results There were 30 cases of transplantation, 27 of which succeeded with a success rate of 90.0%. The average time of donor operation was (42±5)min, the time for graft chipping was (3±1)min, the time of recipient operation was (65±10)min, the average warm ischemia time was 0min, the average cold ischemia time was (32±3)min, the total time for three times of Cuff anastomosis was (10±1)min, and the total operation time was (160±10)min. Conclusion It is helpful to establish a simple and stable model for SBT in rats by protecting graft intestine strictly and using the tri Cuff technique, with a higher success rate and fewer complications.KEY WORDS: rat; small bowel transplantation; orthotopic; vascular reconstruction小肠移植是治疗终末期肠功能衰竭的理想方法[1]。

改良的血管端端吻合法建立大鼠原位肾移植模型

改良的血管端端吻合法建立大鼠原位肾移植模型

大 鼠作 为 供 体 和 受 体 , 供 鼠 的双 肾作 为供 肾 , 位 低 温 灌 注 , 微 外 科 技 术 行 改 良 的二 定 点 顺 序 缝 合 法 端 端 吻 合 肾 取 原 显
动脉 , 后壁一 壁缝 合法连续缝合 肾静脉 , 前 进行左侧原位异体 肾移植 , 供体输尿管与受体输 尿管端端吻合重 建尿路 。结
中国 实验诊 断学
21 年 2 第 1 卷 02 月 6
第 塑
文 章 编 号 :0 7 2 7 2 1 ) 2 2 9 4 ’ 1 0 —4 8 ( 0 2 0 —0 2 —0
改 良的血 管 端 端 吻合 法 建 立 大 鼠原 位 肾移 植 模 型
刘 皎林 洪澜¨ , 医术 , 崇森 王金 国 王远 涛 王 臧 , ,
(. 1吉林大学白求恩第一医院, 泌尿系统疾病诊治中心, 吉林 长春 102 ;. 3012吉林大学病理生物学教育部重点实验室)
摘要 : 目的 采 用 改 良的 血 管 端 端 吻合 法建 立 一 种 简 单 、 定 、 靠 的 大 鼠 原 位 肾 移 植 模 型 。方 法 利 用 wi a 稳 可 s ̄ t
ln WANG 一 u,t 1 ( e tr f Urlg T e is Hop t l f l t i n U iest , h n c u 3 0 1 a , s e a . C ne o oo y, h rt s i h F a Af i a e t j l n v ri C a g h n1 0 2 , i d o i y
建 立 了 一 种 可 靠 、 功 率 高 、 果 稳 定 的 大 鼠原 位 肾移 植 模 型 。 成 结 关 键 词 : 鼠 ; 脏 移 植 ; 管 吻 合 ; 物 模 型 大 肾 血 动

大鼠原位肝移植模型的手术操作技巧探讨

大鼠原位肝移植模型的手术操作技巧探讨

Jn 2 0 a. 08
大 鼠原位肝移植模型 的手术操 作技巧探讨
宇汝胜 , 汪泳 , 海 鑫 钱
( 州 大学 第 一 附属 医院 普 外 科 , 苏 省 临 床免 疫 学 重 点 实 验 室 , 苏 江 江苏 苏 州 2 5 0 ) 10 6
[ 要 ] 目的 建 立 一 个稳 定 的 大 鼠原 位 肝 移 植 模 型 , 讨 其 手 术 技 巧 。 方 法 摘 探
p r r d h a i o n e a i h s a 1 mi ue ,T e 2 o r n 1 e k u vv l r ts e e e f me ,T e me n t o me f a h p t p a e w s c 1 n t s h 4 h u s a d w e s r ia ae w r 9% 7 a d 5 , r s e t ey Co cu i n Ou mo i e d u l— u me h d a t e h r ce o l t d n 9 % e p ci l, v n ls o r d f d o be c f i t o h s h c a a tr f i e mi
l kd b ie a s n.Reut O e h n rd ad f y css frto htpc l e rnpat i s ee i e n y nrltt tn e sl n u de n o ae a r ooi i rt sln t n w r s t r o t v a ao
o e ai g e h i u s M e h d T e p r t tc nq e . n to s h mo e w s sa l h d i mo i e d u l— u meh d d l a e t bi e w t s h d f d o b ec f i t o .T e ie o h l r f v dnr o o wa p r s d h o g t e b o n l o t wi c l f i .T e n so ss f t e u r h p t v n s e f e t r u h h a d mia a ra u t h od l d h a a t mo i u o h s p a e ai e a c

大鼠原位肝移植模型的手术改进及体会

大鼠原位肝移植模型的手术改进及体会
6周 , 窦道 形成 后再 拔 除。 待
术后早期胆道出血与手术过程中操作不当密切 相关 , 主要表 现为 T管 内引 流 出 血性 胆 汁 。腹 腔 镜
下胆 总管 切开 取石 的方 法 有 2种 : 、 道 镜 网篮 取 1胆 石 ,、 2 经剑 突下 切 口用 开 腹 取 石钳 取 石 。有 文 献 报 道在 开腹 手术 时若 使 用 取 石 钳 盲 目取 石 , 道 黏 膜 胆 均有 不 同程 度 的损 伤 和 出 血 J 。在 腹 腔镜 下 用 取 石钳 取 石时 由于 患者 处 于 所 腹 状态 下 , 手术 的操 作
段 , ]术后早期 虽仍有较高并发 症 , 但其并发症 主
要 与术 者 的镜 下 操作 技 术 密 切相 关 , 相信 随着 腹 腔
镜操作技巧的提高, 耐心细致地处理好手术 的每一 环节 , 其早期并发症一定会明显下降。
参 考 文献 :
[ ] 王育 生, 1 郭献庭 , 增辉. 徐 腹腔 镜胆总 管探查术 并发症 的 防治 体会 [ ] 中国内镜杂志 ,0 4 1 ( ):1—3 J. 2 0 ,0 6 2 . [ ] 郭建 平 , 长年 , 2 许 张金燕. 维胆道镜 在胆管结 石症术 中的应 纤 用[ ] 山西医科 大学学报 ,9 9 3 ( J. 19 ,0 增刊) 19—2 . :1 0
置 。引流 管 口一定要 放 置在小 网膜 孔靠 近胆 总管切 口的下方 , 沿右 肝脏 面靠 近 后 腹膜 处 低 位 从 腹 腔 内
管在腹腔 内按常规长度 留置 , 手术结束 时 , 气腹关 闭, 腹腔 内空 问变小 , 而此 时 T管 已在 腹 壁 固定 , 造 成腹 腔 内 T管 行 径过 长 , 曲 , T管 引流 不 畅 , 扭 使 因 此, 以后笔者在进行此项手术时 , 匀在手术结束时外 拉 T管 3c m左 右后再 固定 , 无 T管 扭 曲现象 。 再 腹 腔镜 下 胆 总 管切 开 取 石 , T管 引流 术 与 传 统

大鼠肾移植模型技术的改进

大鼠肾移植模型技术的改进
Po l’ opa o hnzo ,hnzo ea 503 C i ) epe s sil f eghuZ eghuH nn400 , hn H t Z a A s at Obet e T poetem dl o k nyt sl t i ,adpoi ai f es d xeiet o r asl t bt c: jc v oi rv o e f i e a p ao n r d bs rt t yepr n f g tnp . r i m h r d r n a tn n ve so h u m s oa r n n a
Th m p o e n fr tm o e o i ne r n p a t to e i r v me to a d lf r k d y ta s l n a i n
S N J njn C E u — n , U Qn—hn M A h — a, M nl XN i ( eamn oOg r sl t o , U i - , H N G oy g Q igsa , I O Suz i C We - , I GL a u o h i Dpr etf r n a p n tn t h s W itrr t r vd d it o o d d n efrkd y ta s l tto . 11 re a o t d ifro a a en o e d n r Swee t od sa aswe ediie no d n ra o e ine r n p a ain 1e atf e a ra a ne rc v lv i t o o ’ r n o n i n i f h n s o s e d t —ie r s e tv l a atmo e n —o sd e p c iey.A a y l— a t ed n r SWa ni n te d n e’ l d e d te n tmo e h m oe c t — d s me c cof pwih t o o ’ s s p i o e Sb a d ra n a a o s d te t a h oh l h h n h s

大鼠原位肝移植模型制备方法的改进

大鼠原位肝移植模型制备方法的改进

维普资讯
J n e i 2 8a,。4 N 1 孽 d Unv 0 n ~ 12 。 Fi M J 0 J v u a
6 3
大 鼠原位 肝移 植 模 型 制 备方 法 的 改进
邱 明链 ,池 闽辉 ,陈丽红 ,张 国寿 ,曾金 华 ,刘景丰
腹 腔干上方腹 主动脉 ( 1 , 图 A) 同时重 力法 ( 0c 高 4 m
度) 持续 滴注 乳酸 林 格液 ( ~4℃ ,5滴/a ) 立 即 O 4 ri , n
重建肝下下 腔静 脉和 门静 脉 , 内支 架 管 重 建胆 管 , 肝 上下 腔静 脉直接吻合n 。笔者 于 2 0 年 1 - 2 0 ] 06 月 07
摘 要 : 目的 改 进 二 袖 套 法制 备 大 鼠原 位 肝 移 植模 型 的 方 法 。 方 法 1 0只大 鼠行 原 位 肝 移 植 , 原 二 袖 套 2 在 结果 大 鼠原 位 肝 移 植 手 术 时
法 基 础上 改 进切 取 供 肝方 法 , 针法 缝 合 供 、 体 肝 上 下腔 静 脉 , 二 受 出血 点 行 热 止 血 。
断肝下下 腔静 脉及 门静 脉 。门静 脉穿 刺注 入 生理盐 水 2mL驱血 , 显微血 管钳 迅速 阻 断肝 上下 腔静脉后 近肝 离断 , 在左 右 门静 脉 分支 处 剪 断 门静 脉 , 再近 肝 剪 断肝下下 腔静 脉 , 去原肝 。翻转显微 血管钳使 受 移
人麻 醉 。阴茎背静 脉注射肝素生 理盐水 1mL 5 (0u/ mL 。剑突下 3c 横 切 口人 腹 , 断镰 状 韧 带 ,- ) m 离 90 丝线结扎左膈下静 脉 。游离第 一肝 门 , 在胆 总管 分叉 下方 1c m处剪 开 胆总 管 , 人 内支 架 导管 并 结 扎 固 置 定 , 门静脉处 90丝线 结扎 幽 门静 脉 , 离尾 状 叶 , 近 - 游

大鼠原位肝移植手术技巧探讨

大鼠原位肝移植手术技巧探讨

c ud u d rtn h p rt gpo e u ea dsmmai eh iu . to s Ont eb s ftec n e t n lwocf- o l n esa dt eo eai rc d r n u n r etc nq e Meh d z h ai so h v n i a t -u o o
4 的生理盐水 冲淋肝脏 , 脏呈土黄色 , ℃ 待肝 灌注流 出液清
亮时停止灌注 ; 继续用 4℃ 的生理盐水 冲淋肝脏 , 直到肝脏 完整切下 。切断镰 状韧带 至肝 上下腔静 脉 , 断左三 角韧 切
带, 于左膈下 静脉汇 人下 腔静 脉处分 离结 扎左 膈下 静脉 。
肝门区游离胆 总管 , 距肝 门胆 管汇合部 以下 5Il l /n处剪 开 胆总管前壁 , 置人硬膜 外导管 , 约 2I n 50丝 线结扎 固 长 l ,— / l 定, 胆总管远端切 断。 同时 , 结扎 、 切断肝 动脉 。游 离 胃小 弯背腹侧 的尾状叶盘状乳头突 , 结扎 、 断食 管与肝脏之间 切 的交通血管 。切断右三角韧带及肝 后的腹膜组织 , 结扎 、 切
t h i u ,s meo e a i ep o e u e a e n i r v d.Orh tp cl e rn p a tt n Wa e f r d o 0 r t . - c e n q e o p r t r c d r h db e v s mp o e t o o i i rta s l a i Sp ro me n 5 as Re v n o
ln P i g. a R埘 H s ̄ tfS ax dcl iesy, a u n0 0 0 , h a opt h n i ao Mei vr t T i a 3 0 1C i a Un i y n

两套袖法大鼠原位肝移植模型的建立及改进

两套袖法大鼠原位肝移植模型的建立及改进

两套袖法大鼠原位肝移植模型的建立及改进作者:李军,窦科峰,赵青川,张洪涛,孔亚林,张福琴【关键词】原位肝移植Establishment and improvement of rat orthotopic liver transplantation model with twocuff technique【Abstract】 AIM: To improve the model of rat orthotopic liver transplantation and study the rates of success and longterm survival of the model. METHODS: On the basis of twocuff technique of Kamada, weve improved the techniques of separating, perfusing donor liver, the shearing and anastomosis of the superior and inferior caval veins, the bile duct anastomosis, and so on. RESULTS: Operation had been performed 80 times with improved techniques and 92 times with conventional techniques. In contrast to conventional techniques, the improved techniques reduced the average time of donor operation and that of recipients to (±)min and (±) min(P<), elevated 48hour survival rate to %(73/80) and 1week survival rate to %(70/80)(P<). CONCLUSION: The improved techniques have raised the quality of donor liver and the success rate of the model.【Keywords】 orthotopic liver transplantation; rat; model; improvement【摘要】目的: 改进两套袖法大鼠原位肝移植模型,研究其手术成功率和远期存活率. 方法:在Kamada两套袖法基础上,着重对供肝分离、灌注、肝上下腔静脉切取,肝上下腔静脉吻合,胆管吻合等手术方法作了进一步改进. 结果:改进方法共施行手术80次,与以往92次传统手术法相比,供体手术时间(±)min和受体手术时间(±) min缩短(P<),48 h存活率% (73/80)和1 wk存活率% (70/80)明显提高(P<). 结论:改进的两套袖法大鼠原位肝移植能明显提高供肝的质量和受体手术成功率.【关键词】原位肝移植;大鼠;模型;改进0引言大鼠原位肝移植是肝移植基础研究的理想模型. 1973年,Lee等首次提出“缝合法”大鼠原位肝移植[1],此后,二套袖法(门脉、肝下下腔静脉套袖吻合)、三套袖法(门脉、肝上下腔静脉、肝下下腔静脉均用套袖吻合) 及各种改良方法相继出现[2-4]. 目前,二套袖法因成功率高已成为主要建模方法,但由于操作复杂,影响成功的因素多,故而难以推广应用. 我们在传统二套袖法基础上进行改进, 成功建立了模型,降低了其制作难度,并提高了手术成功率.1材料和方法材料雄性SD大鼠160只,体质量200~250 g(购于第四军医大学实验动物中心) , 受体体质量略重于供体(30 g左右),供、受体术前12 h禁食. 自制聚乙烯袖套:门脉袖套内径~ mm,肝下下腔静脉袖套内径~ mm,胆管插管由硬膜外麻醉管制成,长~ mm. 双极电凝器, 上海手术器械厂显微外科手术器械包,乙醚麻醉筒,清洁手术.方法供体手术术前肌注阿托品~ mg,乙醚吸入麻醉,仰卧位,背部垫1 mL注射器作为腰桥. 取上腹部大十字切口,上至剑突,下至耻骨联合,左右至腋后线. 进腹后, 暂不分离肝脏. 将肠管推向左下腹,暴露第一肝门及肝下下腔静脉. 将尾状叶推向左侧,显露右肾上腺,电灼切断肾上腺静脉. 分离右肾静脉与肝下下腔静脉. 结扎切断右肾蒂,下腔静脉游离完成. 游离胆管,尽量保留周围组织,以防术后缺血坏死,在肝管汇合部远端 cm处剪开胆总管前壁,向近端插入支撑管,丝线结扎并保留. 插管前可用显微镊轻扩胆管,注意插入不要过深,以防堵塞盘状乳头叶胆管. 于下腔静脉远端注射2 mL肝素生理盐水(25 U/mL)全身肝素化. 结扎切断幽门静脉,在门脉左侧结扎肝固有动脉. 阻断肠系膜上静脉远端,近端插入自制灌注管,立即用0~4℃肝素生理盐水(5 U/mL)经输液器匀速灌注. 剪开下腔静脉远端及肝上下腔静脉胸段,使灌注液顺利流出,同时向肝脏淋撒0~4℃生理盐水降温. 待肝脏变成土黄色后,剪断肝下下腔静脉、门静脉,残端尽量留长. 由下向上剪断肝周韧带,直至肝上下腔静脉. 靠肝脏缝扎膈肌静脉,略微分离肝上下腔静脉后方组织,轻轻下牵肝脏,“一剪法”剪下肝上下腔静脉,使其不带隔肌组织.供肝修整供肝置于0~4℃生理盐水中. 选取口径合适套管,管柄统一置于血管前壁用以定位,将门静脉牵入套管中,血管夹固定套管和血管,夹柄部固定. 外翻血管套在袖套上,丝线固定. 操作中注意避免血管扭转. 同法处理肝下下腔静脉. 肝上下腔静脉无需修整,在其左右侧角各缝吊80缝线,备吻合时用. 修整完毕后置4℃冰箱中保存.受体手术术前处置同供体. 取上腹部弧形切口,电灼切开肌肉. 剪断肝周韧带, 缝扎左膈静脉,电灼离断肝食管间血管及右肾上腺静脉,适当分离肝下下腔静脉至右肾静脉汇入处. 于胆管汇合处上方切断肝管,将左肝管于汇入处斜行剪除. 切断肝动脉. 分离门脉至幽门静脉处. 阻断肝下下腔、门静脉. 于门脉左右分支处穿刺,推平衡盐2 mL驱血,至肝脏变为土黄色. 用自制血管夹连带部分膈肌阻断肝上下腔静脉. 下牵肝脏,剪断肝上下腔,保留足够长度残端. 剪断门脉时保留左右分支,肝下下腔残端保留部分肝组织. 取出肝脏,撤除麻醉,原位放入供肝,肝前、后放湿沙布. 将肝上下腔两侧吊线与受体静脉左右两端内进外出缝合打结,然后从左至右连续外翻缝合肝上下腔后壁,至右侧角打结,同理缝合静脉前壁. 显露第一肝门,于受体门脉左右分支缝牵引线,向头侧牵开,于分支汇合处剪开其前壁,松血管夹排除少量血液,供肝门脉套入受体门脉中,丝线固定,套入同时冲洗吻合口. 开放门脉,肝上下腔静脉,结束无肝期. 温生理盐水腹腔复温. 此时肝脏迅速充血,肠管淤血减轻,数分钟即可见胆汁流出. 若有局部灌注不良区可通过按摩手段改善. 同法完成肝下下腔吻合. 用1∶5~7的碳酸氢钠和乳酸林格液2 mL在肝下下腔和左肾静脉分叉平面下方注入补液,可以稀释血液并对抗无肝期造成的酸中毒,还可以增加血容量[5]. 冲洗胆管支撑管及受体胆管,供肝胆管结扎线向下牵引固定后,支撑管套入受体胆管中,供受体胆管结扎线拉拢打结. 大膜覆盖胆管吻合处. 冲洗腹腔,全层连续缝合腹壁切口. 术后光照6 h保暖,定期皮下补充平衡盐. 24 h后可随意进食.统计学处理:采用SPSS 统计软件分析数据,各组资料数据用x±s表示,均数间比较采用u检验,存活率间采用χ2检验.P<表示差异有显著性.图1“一剪法”供肝切取示意图(略)图2改进的胆管修剪法示意图(略)2结果按照以上改进方法共行80次手术. 供体手术时间(±)min,受体手术需(±)min,供肝热缺血0 min,冷缺血(±) min,修肝需(±) min,安装袖套(±) min. 肝上下腔静脉吻合(±)min,门脉和肝下下腔静脉吻合各需(±)min, 无肝期(±)min,胆管吻合(±)min. 48 h存活率%(73/80),1 wk存活率%(70/80). 术后48 h内死亡为手术失败, 共计7例. 肝上下腔吻合口出血3例, 门脉袖套脱落出血及血栓各1例, 胆道支撑管脱出1例, 肺栓塞1例. 术后第3天肺部感染死亡1例, 第5日胆管坏死、胆漏2例. 其余均存活1 wk以上. 以往采用Kamada 传统方法共行92次手术,供体手术(±) min,受体手术(±)min,48 h存活率%(72/92),1 wk存活率%(68/92). 两组供、受体手术时间及存活率间差异显著(P<).3讨论本实验通过改进原有方法,明显提高了模型成功率,总结如下:①采用类似人肝移植手术切口,供体采用上腹部大十字切口,受体采用上腹部弧形切口. 术野显露充分,无需腹壁牵开器,能很好的满足手术需要. ②大鼠肝脏质地娇嫩,过多翻动亦可引起损伤. 提高供肝质量关键之一在于减少术中翻动. 目前切肝时多先游离肝周组织,然后灌注. 我们在取肝时先不游离,肝脏保持原位灌洗. 切肝时利用下腔静脉远端和胆管结扎线作牵引,不触及肝脏,由下向上锐性剪取,因而减小了损伤机会,供肝质量明显提高. ③直接、简便快速的灌洗是获得良好供肝的重要保证. 我们采用门脉灌洗法. 经肝下下腔远端行全身肝素化,为减少热缺血时间,幽门静脉、脾静脉及肝动脉待灌洗前再结扎,同时用冰盐水使肝脏迅速降温. 灌注管用小儿头皮针塑料管,前端剪成斜面制成,经输液器匀速灌注,液面高度距操作台40 cm,灌注速度约40~50滴/min(<3 mL/min),共约10~20 mL盐水. 目前亦有学者采用经腹主动脉灌注,认为可起到双重灌注效果[6]. 我们也试用过该法,但因操作较复杂,明显增加热缺血时间,供肝质量未见明显改善. ④传统供肝切取均保留隔肌,待后修整. 我们处理肝上下腔时略微分离其后组织,轻轻下牵肝脏,眼科剪紧贴隔肌“一剪法”剪下肝上下腔,使其不带隔肌环(图1). 此法切取后肝上下腔可保留足够长度,残端整齐,吻合口有足够大小,无需修整,明显缩短了修肝及冷缺血时间,同时也保证了高质量的吻合. ⑤供肝修整. 修肝的关键在于避免血管扭曲. 静脉周围组织应尽量剥干净,以防上套管后管腔狭窄. 根据右肾静脉、幽门静脉结扎线位置辩明血管方向. 套管柄统一置于血管前方定位. 上完套管后向其内推少量盐水,血管应充盈良好,无扭曲等. ⑥受体自身输血. 大鼠血容量少,出血总量超过2~3 mL者术后极难存活. 为避免切肝后回心血量骤减,阻断肝上下腔静脉前,在门静脉左右分支处穿刺推注平衡盐液2 mL,可驱使1~2 mL肝内血液进入体循环,类似于自体血液回输,可补充血容量,增加手术耐受性,利于防止血栓形成. ⑦肝上下腔吻合是受体存活的关键,决定了无肝期的长短. 无肝期超过26 min则难以存活. 高质量吻合的前提在于充分的术野显露. 大鼠膈下空间小而深,不利显露. 我们用注射器作为腰桥,使其背部弓起,肝下垫纱布,稍向下牵,同时通过调整肝上阻断钳位置来保证静脉端的对合. 采取不保留隔肌环连续外翻法吻合静脉前后壁,边距约1 mm,针距约2 mm,针脚均匀,保证静脉内膜光整. 左右侧角是术后出血的常见部位,应多缝几针加强. 本实验术后出血率仅为%. 有学者也采用带膈肌环的静脉吻合[7],但缝合时进出针困难,吻合后内膜欠光整,狭窄、阻塞等发生较多. ⑧门脉及肝下下腔吻合. 注意静脉吻合口的准备,受体门脉应保留左右分支,肝下下腔应保留少量肝组织(静脉口可自动张开),吻合时辨清方向,先将静脉左右角缝线牵引,向头侧牵开固定,松血管夹排除少量血液及血栓,然后牵开其前壁,夹住套管柄套入,同时淋撒肝素生理盐水,以防气泡进入. ⑨胆道重建. 大鼠胆管细,吻合难度大. 传统法吻合口位于胆总管处,位置低,开口小,术后插管易脱出. 我们在供肝切取时于供体左肝管汇入处斜行剪开,在此进行吻合,提高了吻合口的位置,且扩大了胆管开口,提高了吻合速度及成功率,避免了反复插管对胆道的损伤(图2). 吻合完成后,可按Tanaka 等[8]的方法,将胆管支架管用大膜覆盖后再固定在门脉袖套上,可避免术后胆总管滑脱或扭曲成角造成的梗阻及胆漏. 总之, 高质量的供肝获取,熟练的吻合技术,尽量缩短无肝期是决定成败的关键. 改进的术式操作简便,成功率高,大大方便了其普及应用.【参考文献】[1] Lee S, Charters AC, Chandler JG, et al. A technique for orthotopic liver transplantation in the rat[J].Transplantation,1973,16(6):664-669.[2] Kamada N,Calne RY. Orthotopic liver transplantation in the rat. Techniques using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage [J].Transplantation,1979,28(1):47-50.[3] Inoue S, Tahara K, Shimizu H, et al. Rat liver transplantation for total vascular reconstruction, using a suture method[J]. Microsurgery,20XX,23(5):470-475.[4] Tan F, Chen Z, Zhao Y, et al. Novel technique for suprahepatic vena cava reconstruction in rat orthotopic liver transplantation [J]. Microsurgery, 20XX,25(7):556-560.[5]刘金彪,郑树国,张玉君,等. 提高大鼠原位肝移植手术质量的技巧和注意事项[J]. 中华器官移植植杂志,20XX, 26(8): 500-502.[6]马毅,何晓顺,陈规划.大鼠原位肝移植模型的手术技巧及并发症的预防[J].中华显微外科杂志,20XX,26(1):45-47.[7]徐峰,杨甲梅,阚彤,等. 改良Kamada法大鼠原位肝移植模型的建立[J]. 中华肝胆外科杂志,20XX,7(12):758-759.[8] Tanaka H, Hashizume K, Enosawa S, et al. Successful transplantation of a 20% partial liver graft in rats: A technical innovation[J]. J Surg Res, 20XX,110(2):409-412。

脂质体介导报告基因Lac-Z导入大鼠原位移植肺细胞的实验研究.

脂质体介导报告基因Lac-Z导入大鼠原位移植肺细胞的实验研究.

脂质体介导报告基因Lac-Z导入大鼠原位移植肺细胞的实验研究陈少杰Ξ,倪一鸣,张羽中,冯强(浙江大学医学院附属第一医院心胸外科,浙江 310003)【摘要】 目的 通过体外途径的脂质体介导将报告基因(Lac-Z基因)转入移植肺并表达,证明将外源基因转入移植肺进行基因治疗的可行性。

方法 首先建立大鼠左肺原位移植模型和经肺静脉逆行灌注技术。

然后将18只S D大鼠随机分为转基因组、脂质体组和空白对照组,每组各6只。

转基因组经肺静脉将质粒载体DNA(PS V-β-gal)/脂质体Lipofectin R○ (DOT M A/DOPE)复合物灌注入移植肺;脂质体组和空白对照组则分别灌注脂质体和019%生理盐水。

手术1d以后获取肺脏,冰冻切片,经X-gal组织化学染色检测Lac-Z基因的转染和表达情况。

结果 转基因组3例都检测到Lac-Z基因的表达。

其表达位于气管上皮细胞和肺泡上皮细胞内,呈点片状兰斑。

而脂质体组和空白对照组则均未检测到Lac-Z基因的表达。

结论 以质粒表达载体PS V-β-gal/脂质体Lipofectin R○ 复合物的形式,经肺血管(静脉逆行)灌注方式,把外源基因转入移植肺是可行的。

本实验为进一步开展大鼠肺移植术后缺血-再灌注损伤、免疫排斥反应和感染的功能性基因治疗实验研究的可行性提供了依据。

[关键词] 大鼠;肺移植;质粒;脂质体;转基因Experimental Study of ex vivo Liposome-mediated G ene T fer in Orthotopic R at Left Lung T ransplantationCHEN Shao-jie,NI Yi-ming,ZH ANG Chong,et al.Division of Thoracic-cardiovascular Surgery,The First A ffiliated H ospital of Zhejiang U2 niversity School of Medicine,Hangzhou310003,China【Abstract】 Objective T o determine the feasibility of ex viv o lipos ome-mediated gene trans fer(Lac-Z gene)to lung is ografts and to get expression.Methods An orthotopic rat left lung transplant m odel was developed with the use of a m odification of the“cu ff”technique.18S D rats were divided into three groups randomly.G ene trans fer group(group1):PS V-β-gal/lipos ome(Lipofectin R○ )com plex was trans fered into the donor left lung via the left pulm onary vein route at the time of lung harvesting.Lipos ome group(group2)and C ontrol group(group3): G rafts underwent the same procedure but received lipos ome and019%saline s olution respectively.D onor lungs were harvested one day after trans2 plantation.The transgene expression of Lac-Z gene was detected by histochemical staining.R esults T ransgene expression ofβ-gal in group1 was detected in bronchial epithelial cells and alveolar epithelial cells.But no expression ofβ-gal was found in groups2and3.Conclusion Ex vi2 v o plasmid vector/lipos ome com plex-mediated gene trans fer to lung is ografts via the left pulm onary vein route is feasible.This study provides the scientific proof to the feasibility of functional gene therapy of com plications such as ischemia-reper fusion injury,rejection and in fection after rat lung transplantation.【key w ords】 Rat;Lung transplantation;Plasmid;Lipos ome;G ene trans fer 肺移植已成为某些终末期肺部疾病,如慢性阻塞性肺疾病(C OPD),抗胰蛋白酶缺乏性肺气肿,囊性肺纤维化,特发性肺纤维化,原发性肺动脉高压及某些类型艾森曼格(E isenmenger)综合征等唯一有效的治疗手段[1~3]。

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大 鼠左肺原位 移植模 型手术技术 改进 *
张 俊 , 王 胜 , 王建 军 , 汪文 东, 丁静 民 , 王 家顺△
华 中科 技 大学 同济 医 学 院 附 属 协 和 医 院 胸 外 科 , 汉 武 4 0 2 30 2
摘要 : 的 目
探 讨 建 立 更 简 便 有 效 的 பைடு நூலகம் 鼠左 肺 原 位 移 植 模 型 。 方 法
Fo t a e r t r a om l i i d i o d r y m l a s we e r nd y d vde nt ono nd r cpintgr ups ra e i e o .Ra u r ns 1 nt ton m od l r s a ihe y U tl ng ta p a a i e s we e e t bls d b — sng i pr e uf e hni e Re uls I e i i n ou 2 a i as d e du i e a in, nd t e r mai n 1 i m ov d c ft c qu . s t n r c p e tgr p, nm l id rng op r to a h e nig ope a i e e 8 r tonsw r
a c mp ih d s c e s u l . e me n o e a i e t f r cp e t s 3 c o l e u c s f l Th a p r t i s y v me o e i in s wa ( 4 mi . lt e 1 a s s r i e v r 3 a s a t r 5± ) n A1 h r t u vv d o e 0 d y fe 8
l ng ta pan a i n. h r w a no i fc nt if r nc i t b o d a a l i be o e n a t r lpp n t e iht — u r ns l t to T e e s sgniia d fe e e n he l o g s nayss f r a d fe ci i g h rg hi l lICo l so Thi e h S m o e sm pl a d a UT. ncu i n s m t od i r i e n pplc bl a a s l s i e, nd c n be us d o sa ih r tl ng t a — ia e. nd t ke e s tm a a e t e tbls a u r ns pa ai o 1 l nt ton m de. Ke r s l g t a s a a i a m a y wo d un r n plnt ton; ni lmode ; c ft c i ue l uf e hn q
方 法 具 有 操 作 简 单 , 功 率 高 , 术 时 间短 的特 点 , 用 于 建 立 大 鼠左 肺 原 位 移 植 模 型 。 成 手 可
关 键 词 : 移 植 ; 动 物 模 型 ; 套 管 技 术 肺
中 图分 类 号 : 3 R3 2 DOI 1 . 8 0 j is . 6 20 4 . 0 0 0 . 2 : 0 3 7 /.s n 1 7 - 7 1 2 1 . 3 0 2
第3 9卷第 3 第 3 1 期 8 页
21 0 0年 6月
华 中科 技 大 学 学 报 ( 学 版 ) 医
Ac a M e t d Uni i v Sc Te h o u z o g c n lH a h n
Vo . 9 NO 3 P.3 13 . 81
J ne u . 2 1 00
Ab ta t Obe t e To e tbih mo esmp ea d efcier to t o o i ln r n p a tto d l n rt. t o s src jci v sa l r i l n fe tv a rh tpc u g ta s 1na in mo e i as Meh d s
Z a gJ n, a g S e g, a gJa j n e l h n u W n h n W n in t u a
De a t n f Th r ccSu g r Un o s ia , o g i e c lColge p rme t oa i r e y, in Ho p t l T n j dia le , o M Hu z o g Un v riy o in ea d Teh oo y, u a 3 0 2, ia a h n ie st f Sce c n c n lg W h n 4 0 2 Ch n
将 4 0只 雄 性 S 大 鼠 随 机 分 成 供 、 体 2组 , D 受
采 用 手 术 技 术 改 进 的 三 套 管 法 建 立 大 鼠左 肺 原位 移植 模 型 。结 果
2例 手 术 死 亡 ,8例 手 术 获 得 成 功 , 体 手 术 时 间 平 1 受
均 (5 ) n术 后 均 存 活 3 3 ±4 mi , 0 d以 上 , 断 大 鼠 的 右 肺 门前 后 行 动 脉 血 气 分 析 , 果 无 明显 差 异 ( 阻 结 P> 0 0 ) . 5 。结 论 该
I pr v d S r ia c n q e f r Es a ls m o e u g c lTe h i u o t b ihm e to a r h t pi n fR tO t o o c
Pu m o r a s a t tO o e i g Cu f l na y Tr n pl n a i n M d l Us n f s
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