影响双抗原夹心ELISA法检测HIV抗体因素研究-论文
ELISA法检测HIV抗体影响因素分析
ELISA法检测HIV抗体影响因素分析作者：李志明来源：《中外医疗》 2011年第5期李志明(滨州市中心血站山东滨州 256600)【摘要】目的探讨ELISA法在检测HIV抗体中的影响因素,提高实验结果准确性。
方法从试剂的准备、样品的采集和储存以及仪器和操作等方面分析每一环节的质量控制对检验结果的准确性所起到的影响。
结果做好试剂的选择和准备,规范操作,做好每一环节的质量控制,在ELISA法检测HIV抗体中非常重要。
结论选择灵敏度高、特异性好的试剂,严格按照试剂说明书要求,注意操作中的诸多影响因素,能有效保证检测结果的准确性。
【关键词】 ELISA法 HIV抗体影响因素【中图分类号】 R187 【文献标识码】 A 【文章编号】 1674-0742(2011)02(b)-0191-02随着艾滋病流行形势的日趋严峻,新发现的感染者数量不断增加,艾滋病检测也显得越来越重要。
目前国内艾滋病初筛试验室检测HIV抗体的方法主要是酶联免疫法(ELISA)。
ELISA法是敏感性高、特异性强、重复性好的试验诊断方法,其试剂具有稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素,既适用于大规模筛查试验,又可以使用于少量标本的检测等优点。
但ELISA法的实验过程中有很多影响因素,如何消除诸多影响因素,保证检测结果的准确性,笔者在实际工作中经长期观察总结,对ELISA法检测HIV抗体影响因素分析如下。
1 试剂的准备《全国艾滋病检测技术规范》(2009版)规定,HIV抗体检测试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册批准,在有效期内的试剂,其中酶联免疫试剂应批批检合格,推荐使用临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。
ELISA多为单纯HIV抗体检测试剂,HIV抗原抗体联合检测试剂可同时检测血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗体。
HIV抗原或抗体被包于固相载体,加入待检样品和酶标记的HIV抗原或抗体,加底物显色,用酶标仪测定结果。
双抗原夹心法检测HIV抗体影响因素研究
关键 词 ： Ｖ 抗体 ； 血 ； 浊 ； ＨＩ 溶 脂 孵育方 式 ； 血清量 ； 育时 间 ； 色终 止后 比色 时 问 孵 显 中图分类 号 ： ４ ． ２ 文献 标 志码 ： Ｒ４ ６ ６ Ａ 文章 编号 ：６ １７ １ （ ０ ０ ０ — ］ 一２ １ ７ — ４ ４ ２ １ ） ３１ ５Ｏ 【
心 法 为第 三 代 Ｅ Ａ 试剂 ， 仅 包 被 抗 原 高度 纯 Ｉｓ Ｉ 不 化， 且采 用重组 和 多肽相 结合 ， 大大提 高 了特异 性 ， 使 漏 检 率 明显 下 降 ， 可 同 时 检 测 ＩＧ，ｇ 抗 并 ｇ ＩＭ 体 ［ 。但 抗体 检 测仍 受多 种 因素影 响 ， 提高 检测 ３ ］ 为 质 量 ， 们对溶 血 、 我 脂浊样 品 、 孵育 方 式 、 清量 、 血 孵 育 时间 、 加终止 液后 比色 时 间等对 试验 的影 响进 行
ｄｏ ： ０ ３９ ９ ． ｓ ｎ．１ ７１ ７ １ ２ １ ０ ． ０ ｉ １ ． ６ ／ｉ ｉｓ ６ — ４ ４． ０ ０． ３ ０４
艾 滋病 （ Ｄ ） 由免疫 缺 陷病 毒 （ Ｖ） ＡＩ Ｓ 是 ＨＩ 引起 的慢 性 传染 病 ， 异 性 ＨＩ 抗 体 检 测是 诊 断 ＨＩ 特 Ｖ Ｖ 感染 的主要 依据 和有 效途 径 。 目前 我 国普遍采 用双 抗 原夹 心法 进行 ＨＩ 抗 体初 筛检 测 ］ 双抗 原夹 Ｖ 。
释 样 品 、 脂 浊 与脂 浊稀 释 样 品 、 种 孵 育 方 式 的 配 对 ｔ 验 ， 均 ＞ ０ ０ ； 同血 清 量 、 同 孵 育 时 间 的 配 对 ｔ 验 ・ 均 非 两 检 Ｐ ．５不 不 检 Ｐ
ｄ ０ ０ 色比 较 Ｐ＞ ０ ０ ， １ １ ， Ｏ ２ ３ ｎ比 较 ， 均 ｄ ０ ０ 结 论 ａ ． ５ 与 ０， ５ ２ ， ５， ０ｍｉ Ｐ ．５ 溶 血 、 浊 样 脂
ELISA法与胶体硒法检测HIV抗体的比较
现代医药卫生２００５年２ｌ卷第２１期
９０．６３％。
３讨论
３．１实验显示两种初筛检测法结果极为相关．检出阳性率差 异无显著性，两种方法结果的符合率为９８．８％，胶体硒法的敏 感性高于ＥＬＩＳＡ。 ３．２ ＥＬＩＳＡ法可用于血清的检测，但不能用于全血的检测，胶 体硒法既可用于血清也可用于全血的检测．还可用于末梢血的 检测。而且全血与血清检测的结果符合率１００％。 ３．３胶体硒法与ＥＬＩＳＡ法比较具有以下优点：胶体硒法灵敏 度高，结果受外界影响小，其敏感性高于ＥＬＩＳＡ水平；自带质 控，操作简单，不需任何仪器设备；观察直观、快速、省时，胶体 硒法一般在血清渗滤过试纸条后即可读结果，而ＥＬＩＳＡ法步骤 繁琐，出结果要ｌ～２小时；胶体硒法可长期保存结果。试剂稳定 可在室温２—３０℃长期保存，而ＥＬＩＳＡ试剂盒必须在２～８℃避光 保存；标本量少的情况用胶体硒法成本低，污染小。 ３．４国内ＨＩＶ感染的临床诊断以血清病毒抗体检测为主，病 毒及相关抗原的检测为辅唧。血清中抗ＨⅣ抗体是判断ＨＩＶ感 染的间接指标。由于ＨＩＶ在体内极难被清除，绝大多数感染将 持续终生，因此体内抗体的检出通常就意味着病毒的存在。胶 体硒法能在短时间内快速检测出艾滋病毒感染者，可作为筛查 ＨＩＶ抗体的重要手段，对一些紧急情况（如公安人员、医务人 员、检验工作者的职业暴露等）下艾滋病的早期发现，对预防 ＨＩＶ传播、对《中国遏制与防制艾滋病行动计划》的实施，保护 人类健康具有现实意义。 ３．５任何一种测试都不能绝对保证样品中没有低浓度的抗体 存在，如窗口期的感染，所以胶体硒法阴性结果也不能排除 ＨＩＶ暴露和感染的可能，同时胶体硒法阳性结果必须用ＥＵＳＡ 法试剂复查后送确诊实验室确认。
发现其他不良反应．是治疗新生儿ＧＥＲ安全有效的药物。
【关键词】新生ＪＬ；胃食管反流；中医治疗；四磨汤
影响HIV抗体初筛检测质控因素的分析_王松菊
[关键词 ] A ID S初筛实验室; H IV 抗体; 检测质量
[中图分类号 ] R 446
[文献标识码 ] B
[文章 编号 ] 1001- 7089( 2006) 11- 0702- 01
近年来, 中国艾滋 病流行 已进 入快速 增长 期, 专家估 计艾 滋病病毒 ( H IV )感染者人数达 100万, 其中近 70% 为 静脉注射 毒品途径感染 [ 1]。目前诊断 H IV 感染者和艾滋 病 ( A ID S)患者 的主要依据是检测特 异性 H IV 抗体。 A ID S初筛实验 室是艾滋 病的监测哨点, 特别是强制戒毒所, 其检测对象 为吸毒人 员, 属 于性病、艾滋病感染的高 危人群 [ 2], 其 结果的 正确 性直接 影响 着受检者个 人及 其 家庭 成员、医务 人员, 甚至 社会 的 安全 性。 为进一步提 高 A ID S 初筛 实 验 室 检测 质 量, 最大 限 度 地 减少 H IV 抗体检测可能出现的错误和误差, 现将 几年来检测 工作中 发现的有关影响 H IV 抗体初筛检测质量的因素进行分 析。
2 结果
检测结果见表 1。实验 数据表 明, 两 种方法 均存在着 一定 的假阳性率, 特别是 EL ISA 法。
3 讨论
两种方法检测存在的假阳 性除试剂本身灵 敏度较高 外, 重 复性差, 还受检测人员、标本采 集和处理的方式、诊断试剂、仪
[ 作者单位 ] 浙江省金华市安康医院, 浙江 金华 321019 [ 作者简介 ] 王松菊 ( 1963 - ), 浙江省东阳市 人, 医学学 士, 主管检 验师, 主要从事性病、艾滋病检测, 精神疾病临床基础研究。
表 1 临床症状和体征平均消失时间 ( 周 )
组别
试验组 对照组
采用ELISA方法检测HIV抗体的相关影响因素分析
采用ELISA方法检测HIV抗体的相关影响因素分析目的分析ELISA方法检测HIV抗体的相关影响因素，寻求提高ELISA方法检测HIV抗体准确性的科学方法。
方法将2012年1月-2013年12月本实验室在初筛检测中发现的初筛阳性标本23份，全部上送到市艾滋病确证实验室进行确证实验，对患者基本情况、使用试剂、标本状况、操作过程等影响检测结果的相关因素进行统计分析。
结果上送到市艾滋病确证实验室的23份初筛阳性标本，经过确证实验证实，有21份标本确证阳性，确证符合率91.30%，其余均为阴性，在采用ELISA方法检测HIV抗体的整个过程中，包括病人的基本情况、标本的采集、标本的保存、试剂的准备、样品的加入、酶标孔的孵育、酶标孔的洗涤、显色、结果判断等因素都会影响到检测结果。
结论要提高ELISA法检测HIV抗体的准确度，必须制定严格的标准操作程序并按照标准操作程序进行操作，每次检测都要加入外部质控品，绘制质量控制图。
标签：HIV抗体;ELISA法;影响因素分析酶联免疫吸附试验（ELISA）作为检测HIV抗体最为常用的一种方法，具有特异性强、灵敏度高、操作方便，血清或者血浆样品都可以检测，操作性非常好[1]，不管是批量样品还是单个样品，都可以用该方法进行检测。
本文对ELISA 方法检测HIV抗体的相关影响因素进行分析，希望能够找到提高检测结果准确性的有效方法。
1 资料与方法1.1一般资料本院2012年1月-2013年12月一共检测3148份标本，其中23份标本初筛阳性。
1.2仪器设备酶标仪ST-360;洗板机ST-36W。
1.3试剂厂家北京万泰生物药业股份有限公司，有效期内使用。
1.4方法本实验室发现初筛检测阳性的标本，全部上送到市艾滋病确证实验室进行确证实验，对患者基本情况、试剂厂家、标本采集及保存、操作过程等影响因素进行统计分析。
2 结果上送到市艾滋病确证实验室的23份初筛阳性标本，经过确证实验证实，有21份标本确证阳性，其余均为阴性，确证符合率91.30%。
浅谈ELISA的影响因素
２ ４ 标 本 凝 固不 全 。 ．
２ ５ 冰 冻 保 存 标 本 反复 冻 融 。 ．
作者简介：张玉霞 （ ９ ９ １ ６ 一），中级职称，现 供职于河南省上 蔡县人 民医 院检验科细菌室。
（ 上接第２ 页 ） ７ 血府逐淤连 续２ 稳居榜 首，主要功 能是活血祛淤 、行 年 气 止 痛 、瘀 血 内 阻 、 头痛 胸痛 、 内 热 憋 闷 、 失 眠 多 梦 、 心 悸 征肿 、急躁善怒 ，所 以它的使用率除了儿科外几乎覆盖到全 院所有科 室 。由于 西药 的作用欠 佳 ，脑心通 和血 塞通也 因 其疗效确切 、安全可靠在 治疗 心血 管疾 病尤其是恢复期得到 了广大 医生和 患者的青睐。平消胶囊作用是活血祛瘀、止痛 散 结、清热解 毒、扶 正祛邪，坤复康胶囊活血化瘀、清利湿 热 ，丹 黄 祛 瘀 主要 功 能 是 止 痛 、软 坚 散 结 ；一 方 面 原 因我 院 乳 腺 科 是 全 国乳 腺 示 范专 科 ， 妇 科 也 是 我 院 品 牌 专 科 ； 另 一 方 面 随着 社 会 发 展 ， 人 民 生 活 水 平 的 提 高 ，妇 女 的 自我 保 健 意 识也 不 断提 高 ， 同 时 社 会 压 力 大 、 竞 争 激 烈 、生 活 不 规 律 也 导致 了乳 腺 病 与 妇 科 疾 病 的增 多 。
胃丸与香砂养 胃片，功效相 同但价格却相差很大 ，这样势必 会加重患者的经济 负担 。因此一方面要加大进货监管力度 ， 另一方面医生应以药物经济 学角度 出发 ，选择疗效确切价格 低廉的药品，才能符合高效经济的合 理用药原则 。 这里还要特别提出许多医务人员普遍存在认为 中药注射 剂比西药安全 的现象 ，因此 常常 出现剂量大 、浓度高、疗效 长 等 不 合 理现 象 。 其 实 中成 药特 别 是 中药 注 射 剂 的不 良反 应 已屡 见 报 道 ， 其 主 要 问 题 是化 学 成分 复杂 、制 备 工 艺 有 待 完 善 ， 质 量 标 准 不 够 合 理 ， 临床 疗 效缺 乏观 察等 ， 因此 有 学 者 们提出要加强中药的不 良反应的监测和上市后的再评价 。 作者 认 为应 采取 一 系 列措 施 ，例如 积 极宣 传 合理 用 药知 识 ，改 变中医无毒或少毒的偏见，清除 “ 中药没有不 良反应” “ 是天 然药物 ，没有毒副作用”等误解 。临床 医生应综合分析疾病 的证侯属性和 药物 属性 ，辩证施 治，对症 下药 。加强对临床 药师的培训与重视 ，真 正发挥 临床药师对 临床用药 的监督指 导作用，减少重复用药、超 剂量用药 、配伍不 当，浓度高等 不合理现象，才能更好 的做 到安全、有效 、经济 、合理 的使 用中成药。
浅谈影响ELISA结果因素分析
浅谈影响ELISA结果因素分析ELISA法即酶联免疫吸附测定法，该方法的检测原理主要是通过待测物和酶连接，使得抗原与抗体发生特异反应，通过观察底物和酶颜色的变化得出检测结果，ELISA法根据种类和变化能够分成双抗体夹心法、间接法、竞争法以及捕获法，其中双抗体夹心法主要用于抗原的检测，间接法主要用于抗体的检测，竞争法可用于抗原与抗体的检测，捕获法则用于测定血清中某种抗体亚型的成分[1]。
酶联免疫吸附测定法具有灵敏性高以及特异性高的特点，在临床上应用十分广泛，发挥出十分积极的临床价值，然而存在诸多因素诸如试剂、标本、操作方法以及环境等方面会影响检测结果的准确性，本文主要对影响ELISA结果因素进行分析，并给出针对性的解决措施，具体信息如下。
1 试剂方面的因素ELISA法的检测结果直接受到试剂质量优劣的影响，试剂盒的生产厂家和质量、标记物的免疫活性、抗原抗体的纯度、试剂是否有效与试剂的储存方式等方面均会对ELISA法的检测结果有程度不一的影响[2]。
为避免上述情况影响检测结果的准确性，①在检测过程中需要确保ELISA 试剂盒中阴性对照的质量，从而避免假阴性与假阳性的出现；②抗原的中和必须准确滴定，防止由于抗原浓度过低或者过高影响试剂盒的敏感性而导致假阴现象的发生；③重视试剂的质量，给予完善的室内质控与定期开展室间质量评估；④根据试剂盒的开封时间与保存的状况来实施全点定标，进而保障检测结果的准确性；⑤有研究显示ELISA法的检测结果不准确很大程度上是受到试剂质量的影响，因此生产厂家必须重视试剂的质量，有必要时可通过人新鲜标本方法学来评估试剂的质量。
2 标本方面的因素实验标本对ELISA法的检测结果也具有很大的影响[3]，主要包括内源性与外源性物质干扰。
内源性物质干扰主要包括药物、嗜异性抗体、人抗动物抗体、代谢产物、类风湿因子以及补体等，然而在ELISA法的检测过程中可通过下述方法处理标本来降低内源性物质干扰：①通过将抗原结合片段取代免疫球蛋白（IgG），将结晶片段（即Fc片段）消除，这样能够很大程度降低类风湿因子、嗜异性抗体以及人抗动物抗体对检测结果的干扰；②通过热处理的手段（56℃处理30min，63℃处理10min）与应用乙二胺四乙酸（EDTA）对标本进行稀释与2一巯基乙醇对标本进行稀释，以降低补体与类风湿因子对检测结果的干扰；③在标本中添加阻断剂如10％正常人血清和1％正常动物血清；④若检查发现标本中存在血红蛋白、胆红素以及血脂等成分时，必须重新采血检查[4]。
ELISA法检测乙型肝炎两对半影响因素分析与对策
７５８检验医学与临床２００７年８月第４卷第８期ＬａｂＭｅｄＣｌｉｎ，Ａｕｇｕｓｔ２００７，Ｖｏｌ４，Ｎｏ８复检，结果均为阳性。
２．３将经ＥＬＩＳＡ法检出的弱阳性标本８份再用ＧＩＣＡ法检测，阳性３份，弱阳性３份，阴性２份。
２．４将原来用ＥＩ。
ＩＳＡ法检测为弱阳性，后经ＧＩＣＡ检测为阳性的３份标本作倍比系列稀释后用ＥＬｌＳＡ法再次测定，结果均为阳性。
２．５从用ＥＬＩＳＡ检测为阴性的７５０份标本中，随机抽取８０份用ＧＩＣＡ法复检，结果全部阴性。
３讨论３．１从检测结果得知，ＧＩＣＡ法与ＥＬＩｓＡ法相比较最大的优点是不受抗原过量的影响，因此具有较高的特异性。
用ＧＩＣＡ法对经ＥＬＩＳＡ法测定为弱阳性的标本复检时出现３份标本为阳性，这是因为一方面由于抗原过量的影响在ＥＬＩＳＡ法中出现了“带现象”。
另一方面ＧＩＣＡ法标本在层析过程中，由于抗原抗体的紧密接触而形成了免疫浓缩。
用ＥＬＩＳＡ法测定两对半当遇到凭经验判别疑为“带现象”时，可用ＧｌＣＡ法来佐证，从而避免了系列稀释后再测的烦琐，缩短了报告时间。
３．２用ＧＩＣＡ法对经ＥＬＩＳＡ法检出为弱阳性８份标本进行复检时其结果有２份为阴性。
经两种方法同时测定并比较，ＧＩＣＡ对ＨＢｓＡｇ的最小检出量为２～５ｎｇ／ｍｌ，而ＥＬＩＳＡ对ＨＢｓＡｇ的检出量为１ｎｇ／ｍｌ。
这充分说明了ＧＩＣＡ法由于受肉眼辨色及试条生产工艺等因素的影响，其灵敏度要比成熟的ＥＬＩＳＡ法要低，这与文献报道一致ｎｌｊ。
３．３ＧＩＣＡ法检测ＨＢｓＡｇ方便、快速，随到随测，尤其是解决了涉外婚检人员要求尽快出检验报告的需要。
但为了确保临床用血安全，对献血人员体检的筛查，如时间允许，最好采用ＥＬＩＳＡ法，可提高检出率，同时还降低了检测成本口］。
３．４所用ＧＩＣＡ试条最好采用单独包装，低温保存，从而避免污染、受潮、存放对呈色的影响。
试条一旦开封应及时检测，不能久放，否则会使显色区的反应带和对照带的红色变淡甚至使试条失效，对结果判断带来影响。
ELISA法对乙型肝炎“两对半”检测结果影响因素的分析
生 生 长因 子 受 体 ￣ Ｐ Ｆ ） （ ＤＧ Ｒａ 融合 基 因能 区 分 两 者 ， Ｃ Ｌ阳 其 Ｅ
性 ， Ｉ Ｓ一 般 阴性 ｊ 而 ＨＥ ７。 参 考 文献
［ ］ 王 静 ， 梅 ． 酸 粒 细 胞 白 血 病 １例 ［ ］ 实 用 诊 断 与 治 疗 杂 志 ， １ 王 嗜 Ｊ．
向 左 扩 大 ， 平 软 ， 突 下 轻 压 痛 ， 、 肋 下 未 扪 及 ， 骨 压 腹 剑 肝 脾 胸
痛 。辅 助 检 查 ， Ｂ ４ ． Ｗ Ｃ： ９ ７× １ 。 Ｌ； Ｂ ３ ４ × １ ／ ； Ｏ ／ Ｒ Ｃ： ． ９ ０ Ｌ
粒 细 胞 是 恶 性 增 殖 ， 单 克 隆 增 殖 ， 】 Ｓ的 嗜 酸 性 粒 细 胞 为 而 ＨＥ 为 反 应 性 增 殖 ， 多 克 隆 增 殖 。最 近 ， 现 ＦＰ Ｌ ／ 小 板 衍 为 发 ＩＩ １血
胸 骨 压 痛 ｌ ， 且 Ｃ Ｉ 与 Ｉ Ｓ本 质 的 区 别 是 Ｃ Ｉ 的 嗜 酸 性 ６ 而 ］ Ｅ ＨＥ Ｅ
院前约半年 ， 患者 无 明 显 诱 因 开 始 出 现 头 昏 、 闷 、 胸 四肢 乏 力 ，
活 动 后 心 累 ， 出鼻 血 ２次 ， 身 皮 肤 无 瘀 点 、 斑 ， 发 热 。 曾 全 瘀 无
质 ， 以不 同程 度 影 响 检 测 结 果 。常 见 的干 扰 物 质 有 类 风 湿 因 可
子、 甲胎 蛋 白 因 子 。某 些 自身 抗 体 也 会 影 响 结 果 造 成 假 阳 性 。 ５ 药 物 的影 响 高 效 价 的 乙型 肝 炎 免 疫 球 蛋 白 会 与 ＨＢ Ａｇ形 成 复 合 物 ， ｓ
分离胶 的采血管提取… 。 ２ 试 剂 的 影 响 乙 肝 两 对 半 试 剂 种 类 较 多 ， 同种 类 的试 剂 灵 敏 度 与 特 意 不 性 存 在 一定 的 差 异 。资 料 显 示 ， 同 厂 家 试 剂 的 特 异 性 和 敏 感 不
ELISA检测抗-HIV影响因素分析
・８０・牡丹江医学院学报２００８年第２９卷第４期ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＭＵＤＡＮＪＩＡＮＧＭＥＩ）ＩＣＡＩ。
ＣＯｌ，ＬＥＧＥＶ０１．２９ＮＯ．４２００８口服避孕药或妊娠对官颈微腺体的发生有明显的诱导作用，但对孕激素作用的剂量以及刺激所持续的时间尚不明确。
有作者认为官颈微腺体增生是宫颈储备细胞在孕激素的作用下活跃增生并向腺上皮分化的结果。
各文献报道中无孕激素刺激史的患者比例各不相同，本文７例中有仪２例有口服避孕药史，提爪除性激素刺激因素外，尚存在其他的病理机制。
炎症细胞特别是中性粒细胞的出现为宫颈微腺体增生的特征之一，故炎症也可能是病变发牛的另一原因。
宫颈微腺体增牛在组织学上具有较多的形态谱。
其典型镜卜．特点为：病变位置浅表，丰要由紧密聚集的增生腺体组成，腺体大小不一，或町出现囊性扩张，腺体间间质较少，有时腺体可呈背靠背排列；腺上皮胞浆丰富，透亮或嗜伊红性，细胞核一般为圆形或卵圆形，大小较一致，染色质细，核仁不明显，一般不出现核分裂像。
炎细胞浸润也是其特征之。
一Ｏ宫颈微腺体增生比较容易误诊，鉴别诊断包括官颈腺癌，宫颈透明细胞癌，内胚窦癌等恶性肿瘤。
宫颈微腺体增生之所以会与宫颈腺癌产牛混淆是因为病变中部分甚至大部分区域出现了小典型形态改变，如卜皮细胞呈现实性或疏松网状图像，细胞核大小不一，可见到较明显的核仁，显示轻到中度的不典型性，单核分裂像难找到。
与之不同的是，宫颈腺癌的异型性更明显，核分裂较易找到，间时还出现较深的浸润与问质反应。
当不典型宫颈微腺体增生的上皮出现较广泛的透亮胞浆时，可能被误认为官颈透明细胞癌。
虽然两者均可呈现腺管及实性排列，但在透明细胞癌中常常能找到乳头状结构，并且透明细胞癌的透亮的胞浆中富含糖原，不同于前者胞浆内主要含黏液。
ＰＡＳ、消化ＰＡＳ及ＡＢ对鉴别诊断有帮助，透明细胞癌的胞浆中ＰＡＳ阳性，消化ＰＡＳ阴性，ＡＢ偶尔灶性阳性；宫颈微腺体增生的胞浆内ＰＡＳ和消化ＰＡＳ均表达阳性；ＡＢ较广泛阳性。
ELISA法检测HIV抗体需注意的影响因素
中国卫生检验杂志 2011年 6月 第 21卷 第 6 期
Ch inese Journal of H ealth Laboratory T echnology, Jun 2011; V ol 21 N o 6
经验交流
EL ISA 法检测 H IV 抗体需注意的影响因素
陈云钰
( 海南省三亚市疾病预防控制中心 , 海南 三亚 [ 关键词 ] EL ISA 法 ; 检测 ; 影响因素 R 512 . 91 [ 文献标识码 ] C [ 文章编号 ] 1004- 8685( 2011) 06- 1564- 02 572000)
而出现假阳性 [ 1] ; 浑浊或 有沉 淀的的 血清 样品 应先 离心 沉淀 后取上清液检测 , 避免对结果造成影响。短期 ( 1 周 ) 内进行检 测的样品可存放于 2 ~ 8 , 1 周以 上检 测的 样品 应存 放于 - 20 以下 , 尽量避 免血 清 样品 反复 冻融 使抗 体效 价降 低产 生假阴性结果。 3 加样 加样前应先将所 需微 孔板 条于 板架 上 , 必 须保 证板 条放 平 , 以免影响洗板机 的操 作。未 用完 的微 孔板 条须 放入 有干 燥剂的密封袋中 保存。为 了保 证加 样的 准 确性 , 加 样要 用定 期校正且准确度高的微量移液器 , 加样本 ( 或试剂 ) 时 , 应按规 定的量垂直加入 孔底 ( 吸 液后 , 将加 样枪尖 接触 容器 壁 , 去掉 可能形成的液体滴后再加入孔 中 ), 不要使吸 头碰到酶 标板孔 上的已包被的抗原 , 尽 量慢 吸快 放 , 避免 产 生气 泡 , 以保 证正 确的量值 , 并注意不可溅出 , 避免造成交叉污染。 当使用单通道加 样器 手工 加样 时 , 每 次应 更换 吸头 吸取 样本 , 做到一样一吸头 , 吸取不同 的液体 , 也要更换 吸头 ( 即使 是吸取标准品时 ) 。以免发 生污染 或交叉 污染 ( 假 阳性 ) 。用 滴瓶滴加试剂时 , 应先 将滴 瓶摇 匀并 挤去 第一 滴有 气泡 的试 剂后再滴加。试剂 显 色时 先 加 A 液 , 后加 B 液 , 二者 不 要颠 倒 , 前后加入的间隔时间不要超过 10 m in, 若把 A 液 和 B 液先 混和 , 再加样显色 , 需 要求 二者 等体 积混 合。加 样品 稀释 液、 酶结合物应用液、 底物 应用 液及 终止 液时 可用 定量 多道 加液 器 , 使加液过程迅速完成。为防止其 它杂物 掉入孔 内 , 加样后 要用不干胶或胶带纸封好酶标 板 , 防止水分 的蒸发 , 然 后进行 温育。封板膜不能重复使用 , 使用剩 余的不 干胶或 胶带纸 , 放 入备用塑料自封袋中封好。 4 温育 建议采用能够使反应液温度 迅速达 到平衡 的电热 恒温水 浴箱进行温育操作 , 并 将校 正过 的温 度计 插入 水中 校正 温度 为 37 , 如用恒温 箱温育 , 由于恒温箱的构 造使附设温 度计所 检测温度并非真正 酶标 板温 育的温 度 , 建 议放 温度 计于 酶标 板旁 , 保证受温育酶标 板附 近温 度为 37 。 不论采 用何 种方 法 , 都不可将反应板叠加放置 , 以 保证各 板的温 度都能 迅速平 衡。注意放置温育 的温度 和时 间应 严格 按 说明 书操 作 , 力求 准确。 5 洗涤 洗板在 EL ISA 检测中 是较 重要 的环 节 , 洗 板的 合格 与否
双抗原夹心ELISA检测抗HIV的临床诊断价值
Mod Diagn Treat现代诊断与治疗2021Jan32（1）HIV是诱发艾滋病的主要病原体，不仅会破坏机体免疫系统，降低其免疫力，增加各类感染疾病的发生率，还会诱发恶性肿瘤，甚至威胁患者生命安全。
目前，临床针对艾滋病无特效治疗方式，也没有任何能用于预防艾滋病的有效疫苗［1］。
为此，早期检测和诊断显得尤为重要。
由于HIV潜伏期较长且早期症状不显，无法根据症状进行早期判断，必须结合实验室抗HIV抗体变化进行诊断，而ELISA和金标免疫层析实验是最常用的检测方式。
而ELISA又分为多个类型，而使用较多的为双抗原夹心法和间接法。
但针对上述诊断方式在抗HIV中的价值存在较大争议，部分学者认为［2］，金标免疫层析实验准确性相较于ELISA更高。
而有研究显示［3］，双抗原夹心ELISA诊断阳性率相较于间接ELISA更高。
为进一步了解其诊断可靠性，本研究将三种不同检测方式用于抗HIV诊断中，以此为临床提供借鉴经验。
报道如下。
1资料与方法1.1一般资料25份抗HIV血清由检验科提供，纳入150份对照组血清为2018年1月~2019年6月我院正常体检者，其中男83例，女67例，年龄17~59（37.25±2.61）岁。
25分抗HIV血清中包括2NCU/ml 血清、4NCU/ml血清和室间质评血清。
1.2方法所有标准检验均采用双抗原夹心ELI⁃SA、间接ELISA和金标免疫层析法进行。
ELISA法：双抗原夹心ELISA和间接ELISA需严格按照试剂相关操作说明进行。
金标免疫层析实验：准备金标免疫试纸置入检测血液中，待浸泡10s后观察试纸颜色变化，判断标准如下：阳性：试纸上出现2条红线；阴性：试纸出现1条红线，若试纸标本显示为阴性，则观察者需持续观察至少30min，以此避免因为其他因素影响进而导致其结果受到影响。
1.3统计学处理数据采用SPSS22.0软件进行分析，计数资料用例（百分率）表示，行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
双抗体夹心实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握双抗体夹心法的基本原理和操作步骤。
2. 学习利用ELISA技术检测乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）。
3. 分析实验结果，验证实验方法的有效性和准确性。
二、实验原理双抗体夹心法是一种常用的酶联免疫吸附试验（ELISA）方法，用于检测抗原。
其基本原理是将抗原与抗体结合，形成抗原-抗体复合物，再加入酶标记的抗体，通过显色反应判断抗原含量。
具体步骤如下：1. 将已知抗体包被于固相载体上，形成固相抗体。
2. 加入待测标本，若标本中含有目标抗原，则与固相抗体结合，形成抗原-抗体复合物。
3. 洗涤去除未结合的标本。
4. 加入酶标记的抗体，该抗体能与抗原-抗体复合物中的抗原结合。
5. 再次洗涤去除未结合的酶标记抗体。
6. 加入底物，底物在酶的催化下发生颜色变化，颜色深浅与抗原含量成正比。
三、实验材料1. 乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）标准品2. 乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）单克隆抗体3. 酶标记的二抗（辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG抗体）4. 酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒5. 微孔板6. 仪器：酶标仪、离心机、移液器等四、实验步骤1. 包被抗体：将乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）单克隆抗体稀释后，加入微孔板中，每孔100μl，37℃孵育过夜。
2. 洗涤：弃去孔内液体，用洗涤液洗板3次，甩干。
3. 封闭：加入封闭液，每孔200μl，37℃孵育1小时。
4. 洗涤：弃去孔内液体，用洗涤液洗板3次，甩干。
5. 加样：将待测标本、阳性对照、阴性对照和空白对照分别加入对应的孔中，每孔100μl，37℃孵育1小时。
6. 洗涤：弃去孔内液体，用洗涤液洗板3次，甩干。
7. 加酶标记二抗：将酶标记的二抗稀释后，加入各孔中，每孔100μl，37℃孵育1小时。
8. 洗涤：弃去孔内液体，用洗涤液洗板3次，甩干。
9. 加底物：将底物A液和B液按比例混合，加入各孔中，每孔100μl，37℃孵育15分钟。
探讨ELISA在乙肝检测中的方法学影响因素措施
探讨ELISA在乙肝检测中的方法学影响因素措施发表时间：2018-05-28T14:25:35.843Z 来源：《中国误诊学杂志》2018年第8期作者：付滨丽[导读] 方法学影响应对策略 ELISA检测乙型肝炎免疫标志物，因其简便、灵敏、特异性高，成为基层医院对乙肝诊断的主要手段。
黑龙江省医疗服务管理评论中心 150036摘要：ELISA自1971年问世以来，由于其简便、灵敏、特异性高的、酶标记物有效期长、以及是一种快速、低成本的检测方法，广泛应用于医学和生物学科各个领域。
排除外因操作过程、药物及干扰物、反应温度、离子强等影响因素后。
临床还有不可解释的少见模式或矛盾结果时，我们应该重新认识实验本身的方法学设计上的缺陷。
为我们的检查过程提出如何应对这些缺陷的策略。
关键词：ELISA；乙肝；方法学；影响因素；应对策略 Abstract：since its advent in 1971，ELISA has been widely applied in various fields of medicine and biology because of its simplicity，sensitivity，specificity，long duration of enzyme labeling，and a fast and low-cost detection method. The external factors such as the external cause of operation，drug and interferon，reaction temperature，ion strong and so on were eliminated. When there are unexplained unexplained patterns or conflicting results，we should reunderstand the defects in the methodology design of the experiment itself. The strategy of how to cope with these defects is proposed for our inspection process. The [Key words] ELISA；hepatitis B；methodology；influencing factors；the coping strategies方法学影响应对策略 ELISA检测乙型肝炎免疫标志物，因其简便、灵敏、特异性高，成为基层医院对乙肝诊断的主要手段。
探讨双抗原夹心法检测HIV抗体的影响因素
探讨双抗原夹心法检测HIV抗体的影响因素摘要】目的：探讨双抗原夹心法检测HIV抗体的影响因素。
方法：以双抗原夹心法对HIV抗体进行检测，分析在不同血清、不同孵育方式、不同血清量、不同孵育时间及显色终止后不同时间段比色对测定结果造成的影响。
结果：对HIV抗体的影响因素主要包括不同血清量、不同孵育时间及加终止液后不同时间段比色。
结论：双抗原夹心法检测HIV抗体时的主要影响因素包括血清量减少、孵育时间缩短及加终止液后的比色时间延长等。
【关键词】双抗原夹心法；HIV抗体；影响因素【中图分类号】R37 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）01-0149-02艾滋病又称为获得性免疫缺陷综合征，该病由免疫缺陷病毒引起，临床上以特异性HIV抗体诊断作为HIV感染的主要依据[1-2]。
在本次调查中我院旨在重点分析双抗原夹心法检测HIV抗体的影响因素。
现报告如下。
1.材料与方法1.1 试剂与仪器试剂：HIV抗体第三代（双抗原夹心法）诊断试剂盒，HIV抗体质控血清，由北京万泰有限公司生产提供。
仪器：RT-6100酶标分析仪，RT—300自动洗板机，Hw1型电热恒温水浴箱。
1.2 方法1.2.1样品来源：阴性抗体来源于健康体检者，阳性抗体来自于我市疾控中心，并经灭活处理。
1.2.2非溶血、溶血稀释样品的制备：取HIV阴性样品，处理后分离非溶血血清与溶血血清，后用该血清对HIV抗体阳性血清进行倍比稀释，测定溶血样品Hb 浓度，同时对非溶血样品与溶血样品的相关情况进行比较。
1.2.3非脂浊、脂浊稀释样品的制备：取HIV阴性样品，处理后得到非脂浊、脂浊血清，后用该血清对HIV抗体阳性血清进行倍比稀释，测定各样品TG含量，同时对非脂浊、脂浊稀释样品的相关情况进行比较。
1.2.4 HIV抗体阳性样品的制备：取若干HIV阴性样品，离心分离血清，后于各血清内加入不同量的HIV抗体阳性血清，稀释成不同浓度的HIV抗体阳性样品。
双抗夹心法酶联免疫吸附试验影响因素探析
双抗夹心法酶联免疫吸附试验影响因素探析何莉;孙海;胡松;莫春芬;郭慧杰;赖翼;刘阳;邹强;罗兴燕【摘要】Objective To explore and analyze the influence of blocking of bovine serum albumin ,tween 20 and its concentration ,sample adding mode of sample and detecting antibody and incubating temperature on the detection results of the double antibody sandwich enzyme‐linked immunosorbent assay .Methods Detecting human IL‐1Ra cy‐tokines by the double antibody sandwich enzyme‐linked immunosorbent assay was used as a model to measure the in‐fluence of the closur e condition ,tween 20 and its different concentrations ,separated incubation and co‐incubation of sample and detecting antibody ,incubation temperature on the relation between standard substance concentration and OD value .Results R2 was 0 .995 7 when the enzyme‐link was not closed ,the concentration of tween 20 was 0 .05%and incubating temperature was 37℃ ;R2 by blocking BSA was 0 .981 1 ;when the concentration of tween 20 was 0 .005% or 0 .5% ,R2 was 0 .991 5 and 0 .986 8 respectively ;R2 when the sample and the detection antibody were in‐cubated together for 1 h or 2 h was 0 .964 5 and 0 .874 2 respectively ;R2 was 0 .996 1 when incubating at 25 ℃ .Con‐clusion The BSA blocking step does not improve the detection sensitivity for low concentration samples ;the sample , detection antibody and enzyme diluent must contain Tween 20 and the concentration less than0 .05% is most appro‐priate;the co‐incubation of sample and detection antibody could affect the detection of the high concentration of sam‐ple;the enzy me‐linked detection sensitivity has no difference under the conditions of incubation temperature of 37 ℃and 25 ℃ ,but the background of OD value could be reduced in incubation at 25 ℃ .%目的：探析双抗夹心法酶联免疫吸附试验中牛血清清蛋白封闭，吐温20及浓度，样品与检测抗体的加样方式及孵育温度对酶联免疫吸附试验检测结果的影响。
溶血对双抗原夹心法检测HIV抗体的影响
溶血对双抗原夹心法检测HIV抗体的影响摘要】目的：研究溶血对双抗原夹心法检测HIV抗体的影响。
方法：采用自身模拟前后对照实验，收集24例HIV抗体阴性献血员血清，将每份血清均分为2份，将其中一份人工溶血为游离血红蛋白＜60mmol/L,60-110mmol/L,＞110mmol/L 三组，每组均为8份，所有血清均加入同等剂量的HIV强阳性血清，搅拌均匀后，采用双抗原夹心法对溶血前后HIV抗体进行检测，统计分析溶血及不同溶血程度对HIV抗体的影响。
结果：24份HIV抗体阴性的非溶血和溶血样品的前后A值（吸光度）无显著差异（P＞0.05）。
结论：溶血对双抗原夹心法检测HIV抗体无明显影响。
【关键词】溶血；双抗原夹心法；HIV抗体【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）36-0125-01艾滋病（AIDS）是由于人类免疫缺陷病毒（HIV）感染所导致的一种传播速度快、波及范围大、死亡率极高的一种慢性传染性疾病。
该病特异性的HIV抗体检测是诊断艾滋病感染的主要途径和根本依据，因此，采用科学合理准确高效的诊断方法对于该病的治疗和预防具有重要意义[1]。
ELISA法因其具有操作简单、试剂稳定、灵敏度高、特异性强等优点而成为我国HIV抗体筛选的主要方法之一[2]。
临床工作中，常遇到溶血性样本的检测，笔者就溶血与对HIV抗体检测影响进行了分析。
1.材料与方法1.1 正常标本：采用本院血站提供的正常献血员（HbsAg（-）、抗-HIV（-）、抗-HCV（-）、抗-TP（-））全血24份，采用离心机离心后血清无可视的脂血、溶血、黄疸等。
1.2 不同溶血程度标本制备上述标本随机均分为A,B,C三组，每份再均均分为2份，其中一份采用反复冻融、物理振荡等做成不同程度溶血，采用邻联甲苯胺法测定游离血红蛋白浓度，使得3组游离血红蛋白浓度分别为＜60mmol/L,60`110mmol/L,＞110mmol/L。
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双抗 原夹 心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法测 Ｏ Ｄ值 初 筛检 测 ＨＩ Ｖ抗 体 ， 具体 操作 及结 果判断均严格按各检 测试 剂盒使用 方法说 明。每次
２ 结 果
后随机分发 给 １ ５个市 、 县的 Ｈ Ｉ Ｖ抗体初 筛检 测实验 室 ， 每 一
实 验 室 一组 盲样 标 本 ， 要 求 ５天 内报 告 检 测结 果 。
１ ． ２ 试 剂
２ ． １ 领取 盲样单位 、 所用试剂 、 仪 器及 Ｏ Ｄ值 领取 盲样单 位 、 所用试剂 及 Ｏ Ｄ值 列表 ｌ ： １ —５号为 各单 位所领 盲样编 号 。数字后 ＋表示 Ｈ Ｉ Ｖ抗 体初 筛 阳性 ， 一表示
著影响 。英科新创试 剂 ： 人员 、 大部分批号 、 时 间对 Ｏ Ｄ值无显著影响 ， 只一批号试剂 Ｏ Ｄ值重复性差 。英科新创 、 荷兰 梅 里埃 、 珠海丽珠 、 河南 华美 、 上海科华 、 郑州安 图 、 北 京 万泰试剂 对 Ｏ Ｄ值有些 有显 著影响 ， 有 些无显 著影 响。结论 ： 不 同 种、 同种不同批 号、 同种同批号试剂 ， 不同仪 器 、 人 员、 时问操作双抗原夹心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法初 筛检测 Ｈ Ｉ Ｖ抗 体的阴 、 阳性结 果无 显 著差异 ， 但对 Ｏ Ｄ值有 不问程度影响。
员、 仪器 、 时 问操作 ， 观察试剂 、 人员 、 时问 、 仪器对 Ｈ Ｉ Ｖ抗体 初
筛 检 测 是 否有 显 著影 响 。
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 标 本
１ ． ３
主 要 仪 器
￥ ３ ３ ６酶标仪及 其配 套洗 板 机。Ｅ—Ｌ ｉ ｚ ａ Ｍ ａ ｔ 一３ ０ ０ ０酶标
０ ． ０ Ｈ ０ ７— ０ ． ０ Ｈ ０ ７— ０ ． ０ Ｈ ０ ２— ２ ． ８ ２＋
１ ． ５ ７＋
２ ． ０ ３ｌ＋ １ ． ７ ３ ６＋ ０ ． ９３ ５＋ ０ ． １ ０ ５—
１ ． ９ ０ ７＋ １ ． ６ ４ ５＋
１ ．１ ３ ９＋ ２ ． ４７ ＋
２ ０ Ｈ ０ ６ ｌ １ ０ ７ 上 海 科 华 批 号 有效期
２ ０ ０ ７ １ １ ０ ６
２ ． ９ ５ ８＋ ３ ． ６ ９ ６＋ ２ ． ３ ０ ６＋ ０ ． ０ ３ ６—
２ ． ８ ７＋ ３ ． ２ ３ ２＋ ２ ． ５ ２ ６＋
３ ． ２ ４ ７＋
市血站
上海科华批号 ２ ０ ０ ６ １ ０ １ ７有效期 ２ ０ ０ ７ １ ０ １ ６
０ ． ０ ０ １一
２ ． ９ ９＋
２ ． ９ ９＋
２ ． ９ ９＋ ２ ． ９ ８＋ ３． ０ ０ Ｈ ０＋ ２ ． ０ ８ ４＋ １ ． ９ ５ ６＋ １ ． １ ６ ８＋ １ ． ９ ４＋ １ ． ９ ９＋ ２ ． ２ ４＋
市 中 心 医 院
２ ０ Ｈ ０ ６ ｌ ０ｌ ７ 上 海科 华 批 号 有效 期 ２ ０ ７ １ ０ １ ６
将 日常 检 测 中经 免疫 印迹 法 （ ＷＢ ） 确证为 Ｈ １ Ｖ一１型 抗 体
阳性血清多人份 、 等体积？ 昆 合 为 １种标 本 ， 用经 ＷＢ法确证 为 Ｈ Ｉ Ｖ１ ／ ２型抗体阴性 的单人 份血 清 稀释 前 者为 ４种 不 同的 标 本， 共 ５种标本 。采用郑 州安 图酶标 仪 （ Ａ ｎ ｔ ｈ ｏ ｓ ２ ０ １ ０ ） 及其 配 套洗 板机 ， 人类 免 疫 缺 陷病 毒 （ ＨＩ Ｖ） １＋２型抗 体 酶联 免 疫 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ）诊 断 试 剂 盒 （ 双抗 原夹 心法 ） ： 上 海科 华 ： 批 号
号： 批号 ２ ０ ０ ６ ０ ５ ６ ６ ０ ４有 效期 ２ ０ ０ ７ ０ ５ ２ ６ ； 批号 ２ ０ ０ ６ １ １ ５ ８ ０ ８有 效
［ 作 者简介 ］ 张 帅清（ １ ９ ６ ５一） ， 女， 硕 十， 副主任 检验 师， 主要 从
事艾滋病检测工作 。
维普资讯
检测 都同时带 内部 和外 部 对 照质 量 控 制血 清 ， 进行 Ｌ ｅ ｖ ｅ ｙ—
Ｊ ｅ ｎ ｎ ｉ ｎ ｇ ｓ 氏 质 控 图法 或 即 刻 法 监 控 检 测 过 程 Ｊ 。 采 用 秩 和 统
期２ ０ ０ ７ ０ ５ ２ ６ ， 检 测这 ５种标 本 Ｏ Ｄ值 。分装 各标本 ２ ． ５ ｍ ｌ于
２ ． ９ ９＋
０ ． ２ ｌ ０ ． １ ９ ４ ０ ． １ ６ ９ ０ ． １ ５ ０， ｌ ５ ０ ． ８ ０ Ｈ ０ ０ ． １ ９ ６ ０ ． １ ９ ８ ０ ． １ ３ｌ
１ ． １ ２ ２
２ ． ９８＋
２ ． ９ ８＋
１ ． ４ ５＋
中国卫生检验杂志 ２ ０ ０ ８年 ２月 第 ｌ ８卷 第 ２期
Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｊ ｏ ｕ ｎａ ｒ ｌ ｏ ｆ Ｈ ｅ ａ ｌ ｔ ｈ Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， Ｆ ｅ ｂ ２ ０ ０ ８； Ｖ ｏ ｌ １ ８ Ｎ ｏ ２
维普资讯
中 闰 卫 生 榆验 杂 志 ２ ０ ０ ８年 ２门 第 １ ８卷 第 ２期
Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｊ ｏ ｎ ｉ ＇ ｈ ａ ｌ『 ） ｆ ｔ ｔ ｅ ａ ｌ ｔ ｈ Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ （ ’ ｒ ｙ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｌ Ｉ ｈ ｌ Ｉ ｌ ｇ Ｙ ， Ｆ ｅ ｂ ２ ０ ０ ８ ； Ｖ ｏ ｌ １ ８ Ｎ ｏ ２
塑料冷冻管 中， 制 成 每 组 含 ５个 不 同标 本 的相 同 的 １ ５组 盲 样 ， 采用单盲方式随机编 号 （ 只有编 号者知 道 ） ， 一 ３ ０ ℃保存 ２ ４ ｈ
计方法 比较 ： 不 同种 、 同种不 同批 号 、 同种 同批号 试剂 ， 不 同仪 器、 人员 、 时间检测 、 Ｏ Ｄ值 是否 有显著差异。
仪及 其 配 套 洗 板 机 。Ａ ｎ ｔ ｈ ｏ ｓ ２ ０ １ ０酶 标 仪 及 其 配 套 洗 板 机 。美 国海 霸 ｍ ｉ ｃ ｒ ｏ ｒ ｅ ａ ｄ ｅ ｒ ４酶 标 仪 及 其 配 套 洗 板 机 。 微 量 移 液 器 、 水 浴箱 、 定 时钟 。
１ ． ４ 方 法
Ｍａ ｔ 一３ ０ ０ ０酶 标仪 及 配套 洗板 机 ， 卢 氏疾 控 中心 为美 国海 霸 （ ｍ ｉ ｃ ｒ ｏ ｒ ｅ ａ ｄ ｅ ｒ ４ ） 酶 标仪 及 配 套洗 板 机 ， 义 马 总 院为郑 州安 图 （ Ａ ｎ ｔ ｈ ｏ ｓ ２ ０ １ ０ ） 酶标仪 及其配套洗板 机 ， 卢 氏医院为 ￥ ３ ３ ６酶标 仪及其配套洗板 机。其 它单 位所 用仪器没有统计 。
河 南华 美试 剂 ： 批号 、 人员 、 时 对 Ｏ Ｄ值 有 显 著 影 响 ． ．郑 州 安 图 、 北京 万泰试 剂 ： 批号 、 人员 、 时 间对 Ｏ Ｄ值无显 著影 响，
另郑州 安图试剂 ： 仪器对 ＯＤ值 也无显 著影响。上海科华试剂 ： 仪器 、 人员 、 时问对 Ｏ Ｄ值无显 著影响 ， 批 号对 Ｏ Ｄ值 有显
２ ００ ８０ ３１１。
双 抗 原 夹心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法 测 血 清 （ 血浆 ） Ｏ Ｄ值 进 行 Ｈ Ｉ Ｖ抗 体 初 筛 的 检测 ， 受 众 多 因 素 影 响 … 。本 研 究 分 别 采 用 不 同 种 、 同 种 不 同批 号 、 同 种 同批 号 的 双 抗 原夹 心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ试 剂 盒 ， 不 同 人
［ 关键词 ］ 影响 ； 双 抗 原 夹心 Ｅ １ Ｉ Ｓ Ａ； Ｏ Ｄ； 试剂 ； 种； 批号； 仪 器； 人 员； 时 间 ［ 中图分类号 ］ Ｒ ４ ４ ６ ． ６ １ ［ 文献标识码 ］ Ｂ ［ 文章编号 ］ １ ０ ０ ４—８ ６ ８ ５ （ ２ ０ ０ ８ ） ０ ２— ０ ３ ４ ３ —０ ４ 期２ ０ ０ ７ ０ ０ ２ ３ ； 批号 ２ ０ ０ ６ ０ ５ １ ５有 效 期 ２ ０ ０ ７ ０ ５ ２ ６ 。上 海 科 华 ５种 批 号： 批号２ ０ ０ ６ １ ０ １ ７有 效 期 ２ ０ ０ ７ １ ０ １ ６ ； 批号 ２ ０ ０ ６ １ １ ０ ７有 效 期 ２ ０ ０ ７ １ １ ０ ６ ： 批号 ２ ０ ０ ６ １ ０ ２有 效 期 ２ ０ ０ ７ １ ０ ０ １ ； 批号 ２ ０ ０ ７ ０ １ ２ ８有 效 期２ ０ ０ ８ ０ １ ３ ０ ； 批号 ２ ０ ０ ７ ０ １ ０ ３有 效 期 ２ ０ ０ ８ ０ １ ０ ２ 。荷 兰 梅 里 埃 批 号Ａ ４ ７ Ｋ Ａ有效 期 ２ ０ ０ ７ ９ ３ ０ 。珠 海 丽 珠 批 号 ２ ０ ０ ７ ０ ３ １ ２有 效 期
Ｈ Ｉ Ｖ抗 体 初 筛 阴 性 。 所 用 主 要 仪 器 ： 灵 宝 第 一 医 院 为 Ｅ—Ｌ ｉ ｚ ａ
双抗 原夹心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法初 筛检测 ＨＩ Ｖ抗体 试剂盒 ： 河 南华
美 ２种 批 号 ： 批号 ２ ０ ０ ６ ０ ６ １ ２有 效 ２ ０ ０ ７ ０ ６ １ ４ ； 批 号： ２ ０ ０ ６ ０ ６ １ ５有 效期 ２ ０ ０ ７ ０ ６ １ ４ 。 郑 州 安 图 ３种 批 号 ： 批号 ２ ０ ０ ６ １ ０ １ ６有 效 期 ２ ０ ０ ７ １ ０ １ ６ ； 批号２ ０ ０ ６ １ ２ １ ０有 效 期 ２ ０ ０ ７ １ ２ ０ ９ ； 批号 ２ ０ ０ ７ １ ０ ８有 效 期 ２ ０ ０ ８ １ ０ ７ 。北 京 万 泰 ２种 批 号 ： 批号 ２ ０ ０ ７ ０ １ ０ １有 效 期 ２ ０ ０ ８ ０ １ ０ ５ ； 批号 ２ ０ ０ ６ ０ ８ ０ ７有 效 期 ２ ０ ０ ８ ０ ９ ２ ２品评价 】
影响双抗原 夹心Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法 检测Ｈ Ｉ Ｖ 抗体因 素研究