肠道原虫检查方法与形态鉴别PPT课件

* 12 ～15 运动活泼，定向。 位于中央。 很少有空泡 。
哈门氏内 5～12 内外质分明,伪足指 一个，较小,多位 细菌
阿米巴 * 1 ～8 状形成慢,运动缓慢 于中央。
定向。
结肠内 20～50 内外质不明显,伪足 一个,易见，染色 细菌、酵母菌和粪
阿米巴 * 20 ～25 足短、钝,不透明, 后可见细胞核大, 渣等；空泡较多。
原虫是由单一细胞构成，属于单细胞真核动物，它 所有的生命活动都是在细胞内完成的。
（一）基本结构 主要有表膜、细胞质和细胞核 1、表膜：包在虫体表面，可保持虫体的完整性，
并参与虫体摄食、排泄、感觉、运动等生理活动，具有 很强的抗原性。
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2、细胞质： 多数原虫分内质与外质两部分
（1）内质：呈细颗粒状，占细胞质的大部分，内含 细胞核、食物泡、伸缩泡等。 （2）外质：分布在虫体表层，透明或有微细颗粒， 运动细胞器是由外质形成。
结肠小袋纤毛虫
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一、检查方 法
常用的有生理盐水直接涂片、碘液染色和 铁苏木素染色、三色酸染色法、固定染色、抗 酸染色法及培养法等。
（一）实验器材 显微镜（10×40）、 显微镜测微尺、
玻片、盖玻片、竹签 、 记号笔等。
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（二）实验试剂 1、0.85%盐水 NaCl 0.85g 蒸馏水加至100ml 2、卢戈氏碘液 碘化钾6.0g, 碘4.0g 蒸馏水至100ml （先用30ml左右蒸馏水溶解碘化钾，再加入 碘混匀溶解后加蒸馏水至100ml，充分混匀后储存 于棕色瓶中）
在新鲜的湿涂片中外表闪光，通常无运动迹象，在未染色的标本中， 其核不可辨认等特点。
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人芽囊原虫形态
该虫大小差异较大，直径4～63μm，多数为6～15μm，形态结 构复杂，体外培养有空泡型、颗粒型、阿米巴型和复分裂型4种类 型虫体,粪便中常见为空泡型。
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空泡型（又称中心体型）
粪便中常见为空泡型 空泡型虫体呈圆形，直径4～15μm，中央见透亮的大
（1）滋养体 椭圆形，前端略尖，后端较钝，虫体甚大，大小50～200×30 ～
100µm，周身有纤毛，呈斜纵排列，能前后运动。胞浆内有2个细胞核， 大核呈肾形，小核呈球形（一般不易见），新鲜粪便可见虫体前、后 端各有一个伸缩泡。
（2）包囊 圆或卵圆形，直径40 ～ 60µm，囊壁厚而透明，呈双层内有核和
形成较慢;运动缓慢, 偏一侧 。
无方向性。
布氏嗜碘 8～20 内外质不明显;伪足 一个,不明显,染色 细菌、酵母菌和
阿米巴 * 12 ～15 宽大透明,形成缓慢 后可见细胞核小,位 粪渣等;有空 泡
无方向性。
于中央。
微小内蜒 6～12 内外质不明显;伪足 一个,不明显,染色 细菌，有空泡。
阿米巴 * 8 ～10 钝圆、透明,形成较 后可见细胞核小,位
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（2）包囊
椭圆形，大小8～12×7～10µm；囊壁较厚，折光性强，细胞质收缩 形成双层壁，与细胞间有明显间隙，可见2-4个细胞核，多偏于一端。囊内 可见鞭毛残体、丝状物及轴柱等，碘染色后呈棕黄色。
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6、 结肠小袋纤毛虫
结肠小袋纤毛虫是人体最大的寄生原虫，寄生宿主广泛，通常认 为猪是人体感染的主要传染源。主要寄生于宿主结肠，引起痢疾。
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（三）操作步
直接涂片法（用于滋养体检测）
标本采集自然排出、无尿液掺混的新鲜粪便（注意保温); 取预温洁净载物玻片一张，加滴37℃预温的生理盐水1滴～2滴; 在保温条件下，用竹签挑取粪便标本可疑部分（如有粘液、血
液应尽可能采取粘液、血液部分），在盐水中涂抹成直径为 1cm粪便薄膜，厚度以透过粪便薄膜能看清字为宜; 盖上盖玻片，置显微镜下观察有无活动的滋养体.
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结肠阿米巴（未染色）
碘染色
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结肠内阿米巴包囊
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测微尺测量包囊大小
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3、微小内蜓阿米巴
微小内蜓阿米巴是最常见的小型阿米巴，滋养体寄生 在大肠，在大肠中成囊，成熟包囊污染食物和水源，偶可 引起腹泻。 （1）滋养体：
直径6 ～ 15µm，一般小于10µm，内外浆不明显，伪足 透明，短而钝，运动缓慢，不定向，核膜与核仁间有核丝 连接，核仁大而不规则，位于中心或偏位， （2）包囊：
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精选课件21Βιβλιοθήκη 精选课件（2）包囊：
直径10～20µm，囊壁光滑，透明、折光性强、不着色， 厚约0.5µm，包囊内含1～4个核，成熟包囊内常见1个或多 个两端钝圆的长棒状拟染色体。
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2个核包囊
1个核包囊 3个核包囊
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2、结肠内阿米巴
结肠内阿米巴是非致病性阿米巴，也可引起腹泻，主 要寄生在人体盲肠和结肠，常与溶组织阿米巴共存，是肠 道最常见的共栖原虫。 ➢滋养体：
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3、细胞核
细胞核在内质中，与原虫的生长、繁殖有关，是原虫分类鉴 别的重要依据。分两种类型：
泡状核：圆、椭圆或相类似型状。核染色质颗粒量少，分布不 均，在碱性染料下着色很浅，呈现为泡状核。阿米巴、鞭毛虫 及纤毛虫的小核均属此型。 实质核：形状多样，常见有椭圆形、肾形或马蹄形，核染色质 颗粒量多。纤毛虫的大核属此型。
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阿米巴滋养体示意图
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内质 外质
内外质不明显，仅在伪 足伸出时，才可可见外 质
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阿米巴包囊示意图
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纤毛虫滋养体示意图
肾形，核染 色质颗粒多
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鞭毛虫滋养体示意图
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（二）鉴别要点
1、大小： 最小直径仅2µm，大可达200µm
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直径15 ～ 50µm，运动迟缓，无定向，内外质界限不 明显，仅在伪足形成时才能看见外质，内质呈颗粒状，内 含1个细胞核和许多食物泡，食物泡中含有细菌，不含红 细胞。核仁较大，常偏位。 ➢包囊：
球形，较溶组织阿米巴大，直径10 ～ 30µm，1 ～ 8 个细胞核，偶见成熟包囊超过8个核，细胞质颗粒状，未 成熟包囊常有较大的深棕色的糖原泡，位于核周围。拟染 色体常不清晰，似碎片或草束状，两端尖细。
生活史有滋养体和包囊两个阶段，在粪便中均可查见。
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5、蓝氏贾第鞭毛虫
（1）滋养体：
形似半个倒梨形，前段钝圆，后端尖细，长：9～21µm，宽5～15µm， 厚2～4µm。腹面扁平，背面隆起，胞浆呈颗粒状，腹面前半部至3/4处 凹陷形成左右2个大吸盘，一对椭圆形的核位于吸盘中央，虫体有两条 轴索和4对鞭毛。
空泡，边缘有不规则的月牙结构, “月牙”状间隙内
常见数个闪光颗粒,其他结构难以辨认。
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空泡型（又称中心体型）
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碘染色后的人芽囊原虫
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阿米巴型（又称变形型）
虫体形态不规则，移动缓慢，形似溶组织阿米巴滋养体，可 见伪足。
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碘液玻片法（用于包囊检测）
涂片时用碘液代替生理盐水，制法及注意事项同直接涂片法; 盖上盖玻片，显微镜下观察包囊。
注意事项
涂片的厚度以看清报纸上的字迹为度，太薄易漏查，太厚难以观 察;
因为虫体大小在鉴定上是重要的依据，因此显微镜必须装备有目 镜测微器。
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二、病原形态鉴别
肠道原虫检查方法
赣南医学第一附属医院检验科 2016.9
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常见的肠道原虫主要种类
阿米巴
常见的肠道原虫
主要种类
鞭毛虫
孢子虫 纤毛虫
溶组织内阿米巴原虫 迪斯帕内阿米巴 结肠内阿米巴 哈氏内阿米巴 布氏嗜碘阿米巴 微小内蜒阿米巴
波列基内（波氏）阿米巴
蓝氏贾第鞭毛虫
脆弱双核阿米巴
人毛滴虫
隐孢子虫
人芽囊原虫
形态不一，直径8 ～ 20µm，细胞核较大，核仁约占直 径的1/2，位于核中央，伪足宽大，不吞噬红细胞。细胞 质内有1 ～ 2个糖原泡，为鉴定的重要特征。 （2）包囊
直径5 ～ 20µm，囊壁折光性强，成熟包囊仅1个核， 核仁位于核的一端，，包囊中无拟染色体，但有1个大而 明显的糖原泡，碘染色后，糖原泡呈红棕色团块。
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（三）常见肠道原虫的形态特征
1、溶组织内阿米巴
阿米巴痢疾和阿米巴结肠炎的病原体，寄生在结肠内; 可侵犯肝、肺、脑等器官，引起肠外感染; 生活史发育阶段为：包囊期和滋养体期。
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（1）滋养体
溶组织内阿米巴滋养体具有侵袭性，随时可吞噬RBC；虫体 大小在10～60µm之间，胞浆分为内外两层，外浆透明而均匀、 折光强，内浆呈细颗粒状，当外浆伸出形成伪足作定向运动 时，内浆颗粒即涌入伪足内，使虫体前进。虫体形态多变， 运动活跃，在新鲜脓血便和阿米巴肝脓肿穿刺液中，滋养体 可以每秒5微米的速度活泼运动。
阿米巴 * 6 ～8 折光强，囊壁薄。 很小。
淡棕色，弥散 有呈小点
状。
或小棒状
布氏嗜碘 5～20 圆、卵圆、三角 1个，偶有2个， 大而明显，棕色 无
阿米巴* 10～12 形等，囊壁厚 核仁大,偏一侧。 或红棕色。
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5、蓝氏贾第鞭毛虫
寄生人体小肠、胆囊主要在十二指肠，可引起腹痛、腹泻和吸收不良 等症状，粪便呈水样、量大、恶息、一般无脓血。分布于世界各地，在 旅游者中发病率较高，故又称旅游者腹泻。
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布氏嗜碘阿米巴包囊
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寄生人体肠道的阿米巴滋养体鉴别特征
虫 种 大 小(µm) 伪足与运动
细胞核
内含物
溶组织内 大: 20～60 内外质分明,伪足指 一个,不明显,染色 大滋养体: 红细胞
阿米巴 小: 12～30 形或舌形,形成快, 后可见,细胞核小 小滋养体: 细菌
伸缩泡各1个。新鲜包囊可见囊内有活动的滋养体。寄生人体的滋养体 很少转变为包囊，包囊主要在猪肠内形成。
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结肠小袋纤毛虫滋养体、包囊
食物泡
大核
伸缩泡
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包囊
滋养体
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7.人芽囊原虫
人芽囊原虫广泛分布于世界各地。该虫是寄生在高等灵长类和人类 肠道内可致病的原虫。人芽囊原虫可侵入肠粘膜上皮。临床表现轻重不 一，带虫者可高达44.12%。感染重者可有消化道症状，如腹泻、腹胀、 厌食、恶心、呕吐，甚至出现发烧寒战等。免疫功能正常的患者多数为 自限性。艾滋病患者容易感染人芽囊原虫，而且症状严重，治疗十分困 难。预防应加强卫生宣传教育，注意个人卫生和饮食卫生；粪便无害化 处理，保护水源，杀灭传播媒介昆虫；轻微症状者无需治疗，当大量寄 生或出现严重症状时，可用灭滴灵，亦可用碘化喹宁治疗。
哈门氏内 5～10 圆或椭圆形, 1～4个，染色后 弥散状，棕色 短棒状、碎
阿米巴 * 6～8
可见核仁，其占
粒状，折光
比例较溶组织阿
性强
米巴大。
结肠内 10～30 圆形，折光强， 1～8个, 核仁大 未成熟包囊明 折光性强
阿米巴* 15～25 囊壁厚
多偏位。 显块状，红棕 呈白色。
色。
微小内蜒 5～10 椭圆或长圆形， 1～4个,多数4个，早期偶有， 少见，偶
卵圆形，5 ～ 14µm，囊壁有折光，1 ～ 4个细胞核， 集中在包囊一端，核仁大，常偏于一侧。偶见小而弯曲的 拟染色体。
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碘液染色
铁苏木素染色
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4、布氏嗜碘阿米巴
布氏嗜碘阿米巴是以包囊中独居特征的糖原泡而命名， 人猪均可感染，是猪最常见的阿米巴。滋养体寄生在大肠， 主要通过粪便排出的包囊传播。 （1）滋养体
慢，运动缓慢,无方 于中央。
向性。 35
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寄生人体肠道的阿米巴包囊鉴别特征（碘染色）
虫种 大 小(µm) 形 态
细胞核
糖原块
拟染色体
溶组织内 10～20 圆形，折光性强， 1～4个，清楚 不明显，呈弥 不着色，两
阿米巴 * 12～15 囊壁薄、透明。 核仁居中。 散状，红棕色 端钝圆棒状
中央着色较深
2、运动
运动形式 — 伪足、鞭毛、纤毛 运动速度 — 活泼或缓慢 运动方向 — 定向或不定向
3、细胞核
核数量、形状、位置 核膜厚、薄 核仁大小、形状、位置
4、细胞质
滋养体——界细胞质线是否明显，颗粒细密或粗大；浆内有无吞噬 的红细胞。
包囊 —— 囊壁厚、薄，折光度，细胞质有无纤丝状排列、糖元块 和拟染色体。
伪足：是肉足亚门原虫所特有的临时性运动器，为外质的 暂时性突出部分，常见为叶状，偶可见树根状或网状。 鞭毛：是鞭毛虫纲原虫的运动细胞器官，为外质底下的毛 基体发出的细胞质丝状延伸部分，鞭毛数目因虫种而异。 纤毛：是纤毛虫纲原虫的运动细胞器，结构与鞭毛基本相 似，也是从基体发出，但数量多，短而尖细。 波动膜：是毛滴虫的运动细胞器。