细胞蜡块

2．空气干燥固定 是通过空气蒸发的方法 达到固定目的。最好是 逆着气流方向尽快将涂 片干燥。与湿固定相比， 空气干燥固定有使细胞 增大的趋势（图8-3）。
图8-3 标本固定方法比较 （A. 呈圆形未固定的细胞， B. 平铺在载玻片上， C. 湿固定， D. 空气干燥固定）
四、标本浓缩技术 （一）传统技术 1．离心法和细胞离心法 ①离心法：适用于大 量液体的标本。②细胞离心法：适用于少量液体、中 等量细胞的标本。 2．滤膜过滤法 滤膜过滤法适用于大量液体、 少量细胞的标本。 3．细胞块法 适用于大多数悬液标本。制备方 法有血浆凝血酶法和琼脂法等。
• 细胞学在很多的情况下，仅仅作为筛查或只能给 出倾向性的诊断结果。尤其在针吸细胞学是唯一 诊断手段的情况下，这些缺陷给患者的诊断及后 续治疗带来了相当大的困难，如胸、腹水的细胞 学定性，转移癌与间皮瘤的鉴别等。
• 我科采用北京首都医科大学附属北京友谊医院病 理科余小蒙医师创立的“酒精凝固-甲醛固定法” 细胞蜡块技术（及改进技术）制作FNA细胞蜡块，
三、标本固定 1．湿固定 是通过使细胞的胞质脱水、蛋白质凝 固而达到固定的目的。 常用的固定液为乙醇类液体，常用方法有浸润法 和包被法。 湿固定可引起细胞皱缩，Carnoy固定液（乙醇-氯 仿-冰乙酸固定液）能溶解红细胞，适用于处理明显血 性的标本。聚乙二醇固定液能在涂片表面形成一层保 护性蜡质膜，适用于标本的长途转运和大规模人群筛 检。
穿刺涂片、TCT结合细胞蜡块 在病理诊断中的应用
淮安市第一人民医院 病理科 刘海燕
• 细胞病理学是一种常用的病理学检查方法，与组 织病理学检查相比，传统细针吸取方法（fine needle aspiration, FNA）FNA涂片有着不可忽视的 缺陷：样本量少，并且很难还原组织学结构，不 可重复切片，以及较难进行特殊染色等，这些缺 陷直接影响了病理医生的诊断准确性。
3．细胞核特征 细胞核特征是判断良性与 恶性细胞的关键。正常细胞核体积相对较小，呈 圆形或卵圆形，边界光滑，染色质呈细颗粒状。
涂片上同一类型细胞之间的差别很小，称为 单形性。细胞核变化与特征见表8-5。
4．细胞质特征 细胞质由Golgi体、核糖体、 内质网、线粒体和代谢物等组成，是影响细胞染色 性的重要因素之一。
包埋—切片—显微镜下诊断—报告发出等过程， 对胸腹水做出疾病诊断；
• 注意事项： • 1、送检胸腹水时，容器干净，量尽量多，且新鲜。 • 2、病理开单检查时，采用病理常规申请单，并认
真填写相关病史。
• 总之，这项技术对胸腹水肿瘤细胞学诊断起到很 好效果，得到了临床及患者的认可，目前，科室 已经能够开展此项技术，希望能为临床及患者， 提供更好的服务。
（二）液基细胞学技术 液基细胞学（LBC）技术是一种半自动或全自动
标本处理技术，其优点是： ①涂片上细胞分布均匀、分布范围小、背景清晰。 ②筛检简便、快速。 ③能提高诊断的灵敏度和特异度。 ④能显著降低标本的不满意率。 ⑤可用于原位杂交和免疫细胞化学染色。
LBC技术是对传统技术的有效补充， 但对某些非妇科标本，因LBC涂片缺乏背 景成分，会影响细胞学的诊断。目前，常 用的LBC技术有ThinPrep法和SurePath Prep法。LBC技术与传统技术比较见表8-3。
• 制作的方法： • 1.接到胸腹水后，将其静止沉淀1小时，然后吸取
底部液体置入塑料离心管中; • 2.加入10%福尔马林液5ml，离心3500/5min，倾去
上清液;
• 3.加入10%福尔马林液5ml，离心; • 4.重复1次并静置，等待取材; • 5.取材时用滤纸包裹即可，并通过脱水—浸蜡—
（一）细胞形态学判断的基本原则 1．细胞数量和类型 细胞数量和类型提供了靶 组织或器官的重要信息，足够量的标本是提高结果 可靠性的重要因素。 2．结构特征 在细胞学涂片中常常缺乏结构特 征。正常上皮细胞常保持细胞极性和细胞间黏附性 典型的恶性上皮细胞的极性差，细胞间相互重叠， 有时三维状聚集呈圆形。分化差的癌细胞黏附性更 差，多散在分布。
正常细胞或分化好的肿瘤细胞常见黏液球、泡 沫状微空泡、微绒毛刷状缘和纤毛。邻近细胞会出 现细胞质铸模现象。少数细胞有吞噬现象，见于良 性或恶性疾病，后者更常见。
细胞质变性包括水肿性和空泡样变化等，质膜 完整性丧失使细胞内容物溢出，即细胞溶解。
• 胸腹水病理细胞学制作蜡块技术就是将送检的胸 腹水，通过病理技术流程的处理，制作成细胞学 常规蜡块，将其细胞成分保存在蜡块中，从而切 片进行常规显微镜下诊断，判别细胞的性质、类 型，达到较为精确的肿瘤细胞的诊断。
五、染色方法 Papanicolaou染色法适用于湿固定的涂片。 Romanowsky染色法适用于空气干燥固定的涂片， 在非妇科标本染色中常用。 苏木素和伊红染色法是组织切片最常用的染色 方法，也是许多细胞病理学实验室常用的染色方法。 不同染色技术均适用于妇科或非妇科标本的永 久性染色。
六、细胞病理学诊断 细胞病理学诊断是一个复杂的过程，但不能上有大量保存 良好的细胞时，会提高诊断的准确性，而缺乏背 景资料、涂片不佳、染色模糊等则会导致误诊。
• 临床意义: • 1、增加了细胞涂片的数量、密度，并对细胞做了
很好保存，既能重复多切片，又能辅助肿瘤免疫 组化检测，提高了胸腹水中肿瘤诊断的阳性率。
• 2、查到肿瘤细胞时，对细胞类型能够做很好的分 型，为肿瘤规范治疗提供更多参考依据。
• 3、此项技术较以前脱落细胞学普通涂片准确性更 高，保存更方便，对疾病的诊断更加明确。
其具有操作方便、快捷、微创，可重复切片用于 免疫组化及特殊染色，很好地弥补了传统FNA检
查中的不足，能够方便患者，快捷并更准确地做 出诊断，满足临床诊断需求。
细针穿刺细胞标本的采集 通过穿刺吸取或非吸取法，可从充满液体的 器官或实体性器官中采集细胞标本，如肿瘤、心 包膜腔积液、胸膜腔积液、腹膜腔积液和脑脊液 等。影像学技术能对小而深、移动且难以触摸的 病变部位进行定位，有助于穿刺采集标本。
涂片制备 直接涂片是将新鲜标本直接涂在载玻片上。间 接涂片是将各种液体标本进行浓缩处理后再涂片。 涂片制备方法见图8-1，图8-2。 渗出液、灌洗液和尿液等标本不易黏附在载玻 片上，宜采用蛋白类（如牛血清清蛋白）或离子类 （如多聚赖氨酸）黏附剂，增强细胞和载玻片之间 的黏附力，最大限度的保存标本中的细胞。