上海海洋大学生物化学期中试卷

上海海洋大学试卷
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一是非题(正确的以“√”表示，错误的以“×”表示，0.5×20=10)
1. 一个有四个Cys 的肽链，根据所形成的二硫键的不同，能得到三种不同立体结构的蛋白质。

对
2. 在酸性条件下，茚三酮与20种氨基酸都能生成紫色化合物。

错
3. 蛋白质分子主链骨架的原子排列总是NCCCNCCC方式的重复。

错
4.NAD+(NADP+)是许多种脱氢酶如乳酸脱氢酶、乙醇脱氢酶等的辅酶。

对
5.肽键和二硫键是蛋白质分子中主要的共价键。

对
6.如果双链DNA中C的含量为碱基总量的20%，则A的含量应为30%。

对
7.酶的最适pH和最适温度都是酶的特征物理常数。

对
8.透析是根据溶解度的不同来分离纯化蛋白质的方法。

错
9.酶是通过降低反应所需的活化能来加快酶促反应速度的。

错
10.蛋白质中所有的氨基酸都是L型的。

错
11.DNA分子中G-C碱基对含量高，其Tm值高。

对
12.蛋白质变性后，其分子质量不变。

对
13.酮式与烯醇式两种互变异构体碱基在细胞中同时存在。

14.蛋白质溶液的光吸收(A)是和蛋白质浓度的对数成正比的。

对
15.tRNA分子含有反密码子环，它能与mRNA上的密码子互补结合。

错
16.绝大多数真核生物mRNA 5’端具有poly(A)，3’端具有帽子结构。

对
17.寡聚蛋白质是具有一、二、三、四级结构的蛋白质。

对
18.构成天然蛋白质的氨基酸，其D－构型和L－型普遍存在。

对
19.Sanger开创的DNA序列分析法不需要任何酶参与，对单链和双链DNA适用。

错
20.对于同一种酶来说，它的比活力越高，其纯度就越低。

错
二选择题(1×
20=20)
1. 下列哪种氨基酸没有遗传密码？
①脯氨酸②瓜氨酸③赖氨酸④色氨酸
2. 下列哪种辅酶的组成中不含腺嘌呤：
①NAD+②NADP+③FAD ④CoQ
3. 携带蛋白质合成所需要遗传信息的RNA是：
①tRNA ②mRNA ③rRNA ④反义RNA
4. Watson-Crick的DNA双链螺旋结构模型表示：
①DNA两条链的走向相反②磷酸-戊糖骨架位于DNA螺旋内侧
③碱基之间共价结合④碱基A和G配对
5. 氨基酸在等电点时应具有的特点是：
①不具正电荷②不具负电荷
③溶解度最大④在电场中不泳动
6. 氨基酸不具有的化学反应是：
①双缩脲反应②茚三酮反应③DNFB反应④甲醛滴定
7. 当具有180个氨基酸残基的蛋白质多肽链形成完整的α-螺旋时，其总长度为：
①27nm ②25nm ③26nm ④12nm
8. 根据酶催化反应的类型，国际酶学委员会把酶分为六大类，其中第三类为：
①氧化还原酶②水解酶③转移酶④裂解酶
9.下面哪一种说法对蛋白质结构的描述是错误的：
①都有一级结构②都有二级结构
③都有三级结构④都有四级结构
10. DNA碱基对主要靠什么键结合：
①范得华力②氢键③疏水作用④盐键
11. 核酸中核苷酸之间的连接方式是：
①2’,3’-磷酸二酯键②2’,5’-磷酸二酯键
③3’,5’-磷酸二酯键④氢键
12. 在丁醇-乙酸-水溶剂系统中进行纸层析时，发现氨基酸的R f值太小，为了使R f值加大，应在：
①层析缸中多加一些展层溶剂；②溶剂系统中加大丁醇的比例；
③溶剂系统中加大乙酸的比例；④溶剂系统中加大水的比例。

13. 乳酸脱氢酶经透析后,其活性大大降低或消失，原因是：
①亚基解聚②酶蛋白变性
③失去辅酶④缺少底物与酶结合所需要的能量
14. 下列哪种氨基酸一般位于球状蛋白质分子的表面？
①亮氨酸②苯丙氨酸③蛋氨酸④天冬氨酸
15. 测得某一样品蛋白质样品的含氮量为0.20g,此样品中约含蛋白质多少?
①2.00g ②1.25g ③3.40g ④1.50g
16. 有机磷农药，作为酶的抑制剂，作用于酶活性中心的：
①巯基②羧基③羟基④氨基
17. 常说的煤气中毒是煤气中的一氧化碳：
①抑制了巯基酶的活性；
②抑制了胆碱酯酶的活性，使乙酰胆碱堆积，从而引起神经中毒；
③与血红蛋白结合后，使其失去运输氧的能力导致患者缺氧；
④抑制了体内所有酶的活性，使代谢紊乱。

18. 凝胶过滤法分离蛋白质时，从层析柱上先被洗脱下来的是：
①分子量大的②分子量小的
③电荷多的④带电荷少的
19. 从某组织提取液中提纯一种酶，最理想的是酶制品的：
①蛋白质含量最高②活力单位数最高
③比活力最高④K m值最低
20. FAD是下面哪种维生素的衍生物？
①维生素B1 ②维生素B2 ③生物素④泛酸
三填空题(0.5×20=10)
1.用紫外吸收法测定蛋白质含量的依据是所有的蛋白质分子中都含有色氨酸、
酪氨酸和苯丙氨酸三种氨基酸，一般选用280nm波长处测定。

2. tRNA的二级结构呈三叶草形，三级结构的形状像倒L形，3’端保守序列为CAA 。

3. 细胞色素C，血红蛋白的等电点分别为10和7.1，在pH8.5的溶液中它们分
别荷的电性是正电、负电。

4. 生物大分子如蛋白质等的沉降系数用S 表示，其单位是斯维徳贝尔格单位。

5. T. Cech从自我剪切的RNA中发现了具有催化活性的rRNA ，称为核酶，这是对酶概念的重要发展。

6. 写出下列符号的中文名称：
ddNTP 双脱氧核苷三磷酸NADPH 烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸HPLC 高效液相层析
Phe 苯丙氨酸ATP 腺嘌呤核苷三磷酸Trp 色氨酸
TPP 硫胺素焦磷酸SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳
四名词解释(从下列12题中选9题回答，每题2分，2×9=18)
肽键和肽平面，增色效应和减色效应，酶原和酶原的激活，核酸的变性和复性，非竞争性抑制作用，盐溶和盐析，蛋白质的二级结构，别构酶，辅酶和辅基，内含子和外显子，分子杂交，诱导契合
五计算题(从下列8题中任选7题回答，每题6分，7×6=42)
1. 称取25mg蛋白酶粉配置成25ml酶液，从中取出0.1ml，以酪蛋白为底物用Folin-酚比色法测定活力，结果表明每小时产生1500微克酪氨酸。

另取2ml酶液用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.2mg，若以每分钟产生1微克酪氨酸的酶量为一个活力单位，求：(1) 1ml酶液中蛋白的含量及活力单位；(2) 1克酶制剂的总蛋白含量及总活力；(3) 酶的比活力。

2. 有三种氨基酸,其解离常数分别为：
氨基酸pK1(α-COOH) pK2(α-NH3+) pK3(R)
Asp 2.09 9.82 3.86
Lys 2.18 8.95 10.53
Tyr 2.20 9.11 10.07
问: (1)三种氨基酸的等电点分别是多少?
(2)三种氨基酸在pH=7的电场中各向哪个方向移动(绘制电泳图谱)?
3. 有一纯的质粒DNA溶液，共0.5mL，取少量稀释100倍后测得A260为0.330，计算此溶液共有DNA多少微克? (已知DNA的ε(P)为6600；1摩尔磷DNA平均310g)
4.煮沸含OD
260=1.00的DNA溶液，其OD
260
增到1.37表明双链已变成单链。

当
温度降低到25℃时，如果DNA是在0.01mol/LNaCl溶液中，则OD
260
便保持不
变，但如果在0.5mol/LNaCl溶液中，OD
260
便降至1.12。

试解释上述现象。

5. 下列三种DNA中，哪个的T m值最高？哪个的T m值最低？为什么？
A. AAGTTCTCTGAATTA
B. AGTCGTCAATGCATT
C. GGATCTCCAAGTCAT TTCAAGAGACTTAAT TCAGCAGTTACGTAA CCTAGAGGTTCAGTA
6. 向一系列含有不同底物浓度的反应液中加入固定量的酶，反应初速度通过产物形成量来确定。

实验结果见下表：
不同底物浓度时的初速度
[S](mol/L) 5.0⨯10-2 5.0⨯10-3 5.0⨯10-4 5.0⨯10-5 5.0⨯10-6 5.0⨯10-7
ν(μmol/(Lmin)) 25 25 25 20 7.5 0.96
试计算回答下列问题：
(1)在该酶浓度时V
是多少？
max
是多少?
(2)该酶的K
m
(3)当[S]=1.0⨯10-6mol/L和[S]=1.0⨯10-1mol/L时，其速度分别是多少?
7．例举5种分离纯化蛋白质的方法，并说明其原理。

8. 从正常人脑组织中分离出一种短肽，据下列信息推出其一级结构。

(1)在110℃、6mol/L HCl完全水解，经氨基酸组分分析表明有Gly、Leu、Phe、Tyr存在，其比例分别为2:1:1:1；
(2)用FDNB处理后，然后完全水解，经层析分析表明有DNP-Tyr出现；
(3)用胰凝乳蛋白酶处理后，经层析产生Leu、Tyr和一短肽，此短肽经完全水解得Gly：Phe=2：1。