补肺汤治疗COPD肺气虚证的实验研究

图10 正常对照组肺组织TIMP-2 （免疫组化染色×200）
模型组：
MMP-2、MMP-9、TIMP-1及TIMP-2在大鼠支气管和肺组织中的表达
图11 模型组肺组织MMP-2 （免疫组化染色×200）
图12 模型组肺组织MMP-9 （免疫组化染色×200）
图13 模型组肺组织TIMP-1 （免疫组化染色×200）
图26 补肺汤低剂量组肺组织TIMP-2 （免疫组化染色×200）
桂龙咳喘宁组：
MMP-2、MMP-9、TIMP-1及TIMP-2在大鼠支气管和肺组织中的表达
图27 ห้องสมุดไป่ตู้龙咳喘宁组肺组织MMP-2 （免疫组化染色×200）
图28 桂龙咳喘宁组肺组织MMP-9 （免疫组化染色×200）
图29 桂龙咳喘宁组肺组织 TIMP-1（免疫组化染色×200）
注：与模型组比较：﹡P<0.05, ﹡﹡P<0.01
三.实验研究结论
1.采用烟熏、
气管滴入LPS 双因素复合,能
2 .补肺汤对
COPD肺气虚证 模型大鼠支气管 和肺组织MMP-2、 MMP-9、TIMP1及TIMP-2的表 达有抑制作用 3. 补肺汤对 COPD肺气 虚证模型大 鼠免疫功能 有增强作用。
安徽中医学院第四届“挑战杯”大学生 课 外学术科技 作品竞赛
补肺汤治疗COPD肺气虚证的实验研究
补肺汤治疗COPD肺气虚证的实验研究
1. 研究的目的和意义 2. 实 验 研 究 3. 研究的结果 4. 研究的结论
实验研究的目的及意义
概述：
慢性阻塞性肺部疾病（COPD）是临床常见的慢性呼吸系统疾病，患病 人数多，病死率高。近年来，COPD发病率与死亡率仍然呈上升趋势， 因而引起国内外医学界广泛重视
实验研究
SD大鼠90只
烟熏+脂多糖气管滴入造模
正常组
模型组
补高组
补中组
补低组
桂龙咳喘宁组
生物学特性观察
大体观察 光镜观察
免疫组化法检测
Elisa法检测
一般情况 肺气虚体征
支气管和肺组织 形态学改变
支气管和肺组织中 MMP-2,MMP9,TIMPS-1,TIMPS-2 表达
血清、BALF、 肺组织中IL10、TNF-α的 含量
图30 桂龙咳喘宁组肺组织TIMP-2 （免疫组化染色×200）
Elisa法测定各组大鼠血清、肺组织及BALF中IL-10和TNF-α含 量的变化
表3 各组大鼠学清中IL-10、TNF-a含量变化 1.4
IL-10及TNF-a含量 （ng/L）
1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 IL-10 TNF-a
注：与模型组比较：﹡P<0.05, ﹡﹡P<0.01
正常组：
MMP-2、MMP-9、TIMP-1及TIMP-2在大鼠支气管和肺组织中的表达
图7 正常对照组肺组织MMP-2 （免疫组化染色×200）
图8 正常对照组肺组织MMP-9 （免疫组化染色×200）
图9 正常对照组肺组织TIMP-1 （免疫组化染色×200）
图14 模型组肺组织TIMP-2 （免疫组化染色×200）
补肺汤高剂量组：
MMP-2、MMP-9、TIMP-1及TIMP-2在大鼠支气管和肺组织中的表达
图15 补肺汤高剂量组肺组织MMP-2 （免疫组化染色×200）
图16 补肺汤高剂量组肺组织MMP-9 （免疫组化染色×200）
图17 补肺汤高剂量组肺组织TIM-1 （免疫组化染色×200）
图18 补肺汤高剂量组肺组织TIMP-2 （免疫组化染色×200）
补肺汤中剂量组：
MMP-2、MMP-9、TIMP-1及TIMP-2在大鼠支气管和肺组织中的表达
图19 补肺汤中剂量组肺组织MMP-2 （免疫组化染色×200）
图20 补肺汤中剂量组肺组织MMP-9 （免疫组化染色×200）
图21 补肺汤中剂量组肺组织TIMP-1 （免疫组化染色×200）
制作出基本符
合临床体征的 肺气虚证大鼠 模型
总结论
本实验表明采取烟熏和气管 滴入脂多糖可以成功复制大 鼠COPD肺气虚证模型，导 致大鼠气道炎症反应增强， MMPS和TIMPS表达增多， 补肺汤可以抑制MMPS和 TIMPS的表达，增强COPD 肺气虚大鼠机体的免疫能力
正常对照组 模型组 补肺汤高剂量组 补肺汤中剂量组 补肺汤低剂量组 桂龙咳喘宁组
注：与模型组比较：﹡P<0.05, ﹡﹡P<0.01
表4 各组大鼠肺BALF中IL-10、TNF-a含量变化
IL-10、TNF-a含量（ng/L)
1.8 1.6 1.4 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 IL-10 TNF-α
图22 补肺汤中剂量组肺组织TIMP-2 （免疫组化染色×200）
补肺汤低剂量组：
MMP-2、MMP-9、TIMP-1及TIMP-2在大鼠支气管和肺组织中的表达
图23 补肺汤低剂量组肺组织MMP-2 （免疫组化染色×200）
图24 补肺汤低剂量组肺组织MMP-9 （免疫组化染色×200）
图25 补肺汤低剂量组肺组织TIMP-1 （免疫组化染色×200）
mmp2mmp9timp1及timp2在大鼠支气管和肺组织中的表达图11模型组肺组织mmp2免疫组化染色200图12模型组肺组织mmp9免疫组化染色200图13模型组肺组织timp1免疫组化染色200图14模型组肺组织timp2免疫组化染色200mmp2mmp9timp1及timp2在大鼠支气管和肺组织中的表达图15补肺汤高剂量组肺组织mmp2免疫组化染色200图16补肺汤高剂量组肺组织mmp9免疫组化染色200图17补肺汤高剂量组肺组织tim1免疫组化染色200图18补肺汤高剂量组肺组织timp2免疫组化染色200mmp2mmp9timp1及timp2在大鼠支气管和肺组织中的表达图19补肺汤中剂量组肺组织mmp2免疫组化染色200图20补肺汤中剂量组肺组织mmp9免疫组化染色200图21补肺汤中剂量组肺组织timp1免疫组化染色200图22补肺汤中剂量组肺组织timp2免疫组化染色200补肺汤低剂量组
免疫组化测定MMP-2、MMP-9、TIMP-1及TIMP-2在各组大鼠支气管和肺组织 中的表达
表一
各组大鼠支气管和肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1 及TIMP-2表达阳性面积比较
MMP-2、MMP-9、TIMP-1、 TIMP-2表达阳性面积
2000 1500 1000 500 0 MMP-2 MMP-9 TIMP-1 TIMP-2 正常对照组 模型组 补肺汤高剂量组 补肺汤中剂量组 补肺汤低剂量组 桂龙咳喘宁组
数据分析处理、推断结论
实验结果
光镜观察各组大鼠肺组织形态结构特点
图1 正常对照组肺组织 （HE染色×200）
图2 模型组肺组织 （HE染色×200）
图3 补肺汤高剂量组肺组织 （HE染色×200）
图4 补肺汤中剂量组肺组织 （HE染色×200）
图5 补肺汤低剂量组肺组织 （HE染色×200）
图6 桂龙咳喘宁组肺组织 （HE染色×200）
注：与模型组比较：﹡P<0.05, ﹡﹡P<0.01
表2 各组大鼠支气管和肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1及 TIMP-2表达平均光密度比较
MMP-2、MMP-9、TIMP-1及 TIMP-2表达平均光密度
250 200 150 100 50 0 MMP-2 MMP-9 TIMP-1 TIMP-2 正常对照组 模型组 补肺汤高剂量组 补肺汤中剂量组 补肺汤低剂量组 桂龙咳喘宁组
临床研究发现，肺气虚证是COPD最常见的证型，它直接影响COPD的发 生和发展，其盛衰与COPD病情轻重一致，且贯穿于COPD的整个病程之 中。COPD肺气虚证主要表现有反复咳嗽，气短，易感，多汗，倦怠等症 状，且病情迁延反复，对健康危害甚大
现代医学对COPD肺气虚证的治疗目前国内外均无突破性进展。近年来， 多采用中医药治疗COPD肺气虚证。补肺汤由人参、黄芪、熟地黄、五味 子、紫菀、桑白皮等药物组成，具有补肺、敛肺、清肺的功效，临床常用 来治疗肺气虚证患者，具有较好的疗效
正常对照组 模型组 补肺汤高剂量组 补肺汤中剂量组 补肺汤低剂量组 桂龙咳喘宁组
注：与模型组比较：﹡P<0.05, ﹡﹡P<0.01
表5 大鼠肺组织中IL-10、TNF-a含量变化
IL-10、TNF-a含量（ng/L）
1.4 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 IL-10 TNF-α 正常对照组 模型组 补肺汤高剂量组 补肺汤中剂量组 补肺汤低剂量组 桂龙咳喘宁组
目的及意义：
本课题通过建立COPD肺气虚证病证结合实验动物模型, 观察补肺 汤对COPD肺气虚证模型大鼠支气管和肺组织中基质金属蛋白酶 和金属蛋白酶组织抑制因子的表达以及免疫功能的影响。
同时探讨补肺汤治疗COPD肺气虚证的作用及其机制。为建立 COPD肺气虚证较为客观定量化评估标准，为临床防治COPD肺气 虚证和进一步研究COPD肺气虚证的实质提供依据和基础。