stbl3感受态细胞
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Stbl3感受态细胞
Stbl3感受态细胞
保存条件:-80℃
Stbl3感受态细胞基因型
F–mcrB mrr hsdS20(rB–, mB–) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5
λ--leu mtl-1
Stbl3感受态细胞说明
Stbl3感受态细胞来源于HB101 E. coli strain,是慢病毒载体系统推荐使用的菌株,可有效抑制长片段末端重复区的重组,降低低错误重组的概率。
经pUC19检测转化效率达108 cfu/μg DNA。
操作方法
1. 取100 μl冰上融化的Stbl3感受态细胞,加入目的DNA并用指尖轻轻拨打管底混匀(避免用枪吸打),冰上静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm 复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
Stbl3感受态细胞使用注意事项
1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 混入目的DNA时应轻柔操作。
3. Stbl3细胞生长速度快8-10小时可见克隆。
4.若用氨苄抗生素筛选,应使用含100 µg/ml ampicillin的平板。