食品中叶酸的测定原始记录表格
叶酸测定
1.原理
叶酸是酪乳酸杆菌（Lactobacillus casei, L. C,ATCC7469）生长所必需的营养素。在一定条件下，L.C的生长繁殖与培养基中叶酸含量呈正比关系，细菌增殖的量以光密度值计，通过与标准曲线相比较，计算出样品中叶酸的含量。
2.适用范围
参考《Methods of Vitamin Assay》，第4版。本方法适用于各类食物中叶酸的测定。检测限为0.1ng。
3.仪器与设备
（1）恒温培养箱
（2）离心机
（3）高压消毒锅
（4）震荡器
（5）接种针和接种环
（6）分光光度计
4.试剂
除特殊说明外，本实验中所有试剂均为分析纯，水为蒸馏水。
（1）菌种：酪乳酸杆菌（Lactobacillus casei, L.C, ATCC 7469）
（2）磷酸缓冲液(0.05mol/L, pH6.8):称取4.35gNa3PO4·12H2O,10.39gNa2HPO4·7H2O溶解于800ml水中。临用前用约5g抗坏血酸调节pH至6.8。（注：叶酸对光、热敏感，易被氧化破坏，抗坏血酸有助于保护叶酸被氧化。）
（3）鸡胰酶溶液：称取100mg干燥的鸡胰酶（Difco公司）（注：含有叶酸轭合酶，用于水解叶酸多谷氨酸盐），加入20ml磷酸缓冲液制成匀浆，3000rpm离心10min,取上清液备用。临用前现配。
（4）蛋白酶-淀粉酶溶液：分别称取200mg蛋白酶（Sigma公司）和淀粉酶（Sigma公司），加入20ml磷酸缓冲液制成匀浆，离心3000rpm10min,取上清液备用。临用前配制。
（5） 2+8乙醇溶液：量取20ml无水乙醇溶液，加入80ml水混匀。
食品中叶酸的测定方法
中南大学
食品分析课程论文
题目：食品中叶酸的测定方法学生姓名：毛慧悦
所在学院：化学化工学院
专业班级：应用化学1105班
学生学号：1505110706
指导老师: 张泰铭
目录
1叶酸 (1)
1.1叶酸的化学结构 (1)
1.2叶酸的理化性质 (1)
1.3叶酸的作用效果 (2)
2 果蔬中叶酸含量的测定方法 (2)
2.1化学发光测定法 (2)
2.2离子捕获法 (3)
2.3F ENTON试剂氧化-荧光分析法 (3)
2.4催化氧化荧光法 (3)
2.5衍生荧光法 (4)
2.6间接原子吸收光谱法 (4)
3 保健品中叶酸的测定方法 (5)
3.1铽一环丙沙星稀土敏化荧光猝灭法 (5)
3.2表面等离子共振技术（SPR） (5)
3.3高效液相色谱法（HPLC）法 (5)
3.4高分离度快速液相色谱法（RRLC） (6)
3.5氨基硅油修饰碳糊电极阳极伏安法 (6)
3.6发光免疫法 (7)
3.7PEI修饰的量子点作为叶酸荧光探针 (7)
4结论与展望 (7)
4.1结论 (7)
4.2展望 (8)
食品中叶酸的测定方法
毛慧悦
（中南大学，湖南长沙 410012）
摘要：叶酸，又称为维生素B9，是维生素B9的水溶形式。叶酸是一种重要的一碳载体，在核苷酸合成等重要生理代谢功能方面有非常重要的作用。因此叶酸在细胞分裂和生长过程（如婴儿发育、怀孕）中有着重要的作用。叶酸的检测已成为食品研究中的热点，本文从叶酸的结构和检测几个方面展开研究，并重点阐述了果蔬和保健品中叶酸的几种测定方法。
关键词：叶酸；测定方法；果蔬；保健品
Testing of folic acid in foods
【微生物检测】 关于使用微生物方法测定食品中叶酸含量的一点心得
【微生物检测】+关于使用微生物方法测定食品中叶酸含量的一
点心得
时光荏苒，下笔之时才猛然惊觉自己已经在微生物检测一线奋斗了6年之久，6年里从懵懂到兴奋，从兴奋到麻木，再从麻木到坦然，6年里有过厌倦，有过迷惘，但是最后都坚持了下来，虽然现在已经不在检测一线工作（还是与检验有关，但是不再进行实验），回想6年来走过的路，还是感慨良多，当初的微生物检测经验也还是宝贵的工作经验积累，这次就先谈谈微生物与维生素的关系，文笔有限，既欢迎志同道合的朋友的点赞，也欢迎各路大神大师的神级吐槽，希望我们可以一起讨论，一起进步~
不知道现在的小伙伴们测试食品中的叶酸、维生素B12和游离生物素都是用什么方法呢？是比较繁琐的传统的微生物方法呢，还是比较简便快速的试剂盒法呢，估计很多小伙伴们都选用试剂盒法了，毕竟时代在进步，检测水平也在不断提升，但是就像电视机的问世并没有取代收音机一样，传统的微生物方法虽然繁琐，耗时较长，但是灵敏度高，不容易漏检，所以还是有它的优势在，所以下面我就着重的跟小伙伴们分享一下使用微生物方法（光密度法）测试食品中叶酸的过程中可能会出现的问题以及一些注意事项，希望能给大家提供一些帮助或者拓宽一下大家的检测思路。
叶酸的测定
叶酸的测定一般常用的有两种方法，分别是GB5413.16-2010和GB5009.211-201 4，前者主要针对的是婴幼儿食品，尤其是婴幼儿乳制品，后者的检测对象比较宽泛，适用于多种类型的食品，比如水果蔬菜等天然食品，还有淀粉含量比较高的米粉类制品，以及叶酸含量较高的营养强化剂等，所以面对不同的样品，要选择合适的标准进行测试。
叶酸的测定方法
叶酸的测定方法
微生物法
1.原理
叶酸是酪乳酸杆菌（Lactobacillus casei, L. C, ATCC 7469）生长所必需的营养素。在一定条件下，L.C的生长繁殖与培养基中叶酸含量呈正比关系，细菌增殖的量以光密度值计，通过与标准曲线相比较，计算出样品中叶酸的含量。
2.适用范围
参考《Methods of Vitamin Assay》，第4版。本方法适用于各类食物中叶酸的测定。检测限为0.1ng。
3.仪器与设备
（1）恒温培养箱
（2）离心机
（3）高压消毒锅
（4）震荡器
（5）接种针和接种环
（6）分光光度计
4.试剂
除特殊说明外，本实验中所有试剂均为分析纯，水为蒸馏水。
（1）菌种：酪乳酸杆菌（Lactobacillus casei, L.C, ATCC 7469）
（2）磷酸缓冲液(0.05mol/L, pH6.8):称取4.35g Na3PO4·12H2O,10.39g Na2HPO4·7H2O溶解于800ml水中。临用前用约5g抗坏血酸调节pH至6.8。（注：叶酸对光、热敏感，易被氧化破坏，抗坏血酸有助于保护叶酸被氧化。）
（3）鸡胰酶溶液：称取100mg干燥的鸡胰酶（Difco公司）（注：含有叶酸轭合酶，用于水解叶酸多谷氨酸盐），加入20ml磷酸缓冲液制成匀浆，3000rpm离心10min,取上清液备用。临用前现配。
（4）蛋白酶-淀粉酶溶液：分别称取200mg蛋白酶（Sigma公司）和淀粉酶（Sigma公司），加入20ml磷酸缓冲液制成匀浆，离心3000rpm 10min,取上清液备用。临用前配制。
小米中叶酸含量的测定原理
小米中叶酸含量的测定原理
小麦中的叶酸是指在小麦籽粒中含有的叶酸物质，属于维生素B群中的一种维生素。叶酸在人体内起到了很重要的作用，它可以帮助维持细胞的正常功能、促进新陈代谢和细胞分化，同时也是胎儿生长和发育所需的重要物质。因此，合理地测定小麦中叶酸的含量对于了解食品的健康性和营养价值具有重要意义。
小麦中叶酸含量的测定通常采用微生物发酵法或高效液相色谱法。
1.微生物发酵法测定叶酸含量
微生物发酵法通过检测微生物对叶酸的生长需求来测定样品中叶酸的含量。测定步骤如下：
步骤一：样品的制备
将小麦样品磨成粉末状，加入适量的盐酸溶液，使得叶酸转化为可溶性的形式。
步骤二：酶解样品
将样品与酶解液一起加热，酶解液中含有催化酶解叶酸的酶。经过酶解，样品中的叶酸会转化为对微生物可利用的形式。
步骤三：微生物培养
将酶解后的样品与微生物菌种共同培养，微生物菌种会对培养基中的叶酸进行吸收和利用。利用微生物的生长情况来判断样品中叶酸的含量。
步骤四：叶酸的测定
将培养液与培养基中的其他成分分离，使用光谱法或生物化学法测定培养液中的叶酸含量。
优点：
微生物发酵法操作简便，结果准确可靠，对于多种样品可以适应。缺点：
微生物发酵法的操作时间较长，需要数天才能得到结果。
2.高效液相色谱法测定叶酸含量
高效液相色谱法通过色谱柱表面的吸附性质，将混合样品中的各种成分分离。测定步骤如下：
步骤一：样品的制备
将小麦样品研磨成粉末状，加入适量的溶剂，使样品中的叶酸溶解。
步骤二：进样和分离
将溶解的小麦样品喷洒到高效液相色谱仪中，经过柱分离，不同物质会在不同时间出现，从而完成物质分离。
饲料中烟酸和叶酸的测定方法提要
饲料中烟酸和叶酸的测定
1.方法提要
目前饲料中都添加有多种维生素，以保证动物健康生长。如果动物完全缺少一种或数种维生素,或者是摄入量不足,某些代谢过程就将受到损害,从而导致生长受阻或者疾病。烟酸又称尼克酸是参与体内酶系统的一种维生素，对机体的碳水化合物、脂肪和蛋白质代谢起主要作用，当肌体缺乏烟酸时则可引起新陈代谢的障碍；叶酸是一种广泛存在于绿色蔬菜中的B族维生素，缺乏叶酸会使得雏鸡生长不良，羽毛不正常，贫血和骨短粗症等。本实验参照GB/T17813-1999《复合预混料中烟酸、叶酸的测定》，对4％蛋鸡产蛋期复合预混料进行测定。
2.试剂及标准溶液配制
2.1试剂
甲醇：色谱纯
冰乙酸：分析纯
三乙胺：分析纯
0.005mol/L己烷磺酸钠溶液
0.1mol/L碳酸钠溶液
提取液：在已装入500mL去离子水的1000mL容量瓶中，加入10mL冰乙酸，
1.3mL三乙胺，去离子水定容至刻度摇匀（PH=3.2）。取850mL上述溶液与150mL 甲醇混合，超声脱气备用。
流动相：在已装入500mL去离子水的1000mL容量瓶中，加入10mL冰乙酸，
1.3mL三乙胺，20mL0.005mol/L己烷磺酸钠溶液，去离子水定容至刻度摇匀，
调PH值至3.2，过0.45μm滤膜。取该溶液750mL与250mL甲醇混合，超声脱气备用。
烟酸和叶酸标准品
2.2标准溶液配制
标准溶液的浓度为1、2、5、10、15、20μg/mL。
3.仪器及工作条件
3.1仪器
3.1.1LC5510高效液相色谱仪（北京东西分析仪器有限公司）。
3.1.2DM-100在线脱气机（北京东西分析仪器有限公司）。
叶酸食品级fcc质量标准
叶酸是一种重要的维生素，对于人体的发育和健康起着至关重要的作用。为了确保叶酸产品的质量和安全性，制定了一系列的质量标准。其中，食品级FCC（Food Chemicals Codex）质量标准是广泛应用于食品行业的一项标准。本文将详细介绍叶酸食品级FCC 质量标准，包括其定义、要求和相关检测方法。
一、叶酸食品级FCC质量标准的定义
叶酸食品级FCC质量标准是指符合食品化学法典（Food Chemicals Codex）规定的叶酸质量要求的产品。该标准包括对叶酸产品的纯度、含量、物理性质、微生物指标等方面的要求。
二、叶酸食品级FCC质量标准的要求
1. 纯度要求：叶酸食品级FCC标准要求叶酸产品的纯度达到一定的标准。其中，有机杂质的含量要低于规定的限量，无机盐类的含量也要符合要求。此外，还要求叶酸产品不得含有对人体有害的物质，如重金属等。
2. 含量要求：叶酸食品级FCC标准对叶酸产品的含量有详细的规定。一般来说，叶酸产品的含量应在一定的范围内，并且要与产品标签上所示的含量相符合。
3. 物理性质要求：叶酸食品级FCC标准还对叶酸产品的物理性质进行了要求。例如，叶酸产品的外观应为无色结晶或结晶性粉末，不应有异物。此外，还要求叶酸产品的溶解度、熔点、旋光度等物理性质符合规定。
4. 微生物指标要求：叶酸食品级FCC标准对叶酸产品的微生物指标也有一定的要求。例如，叶酸产品的总菌落数、霉菌和酵母菌的数量都应低于规定的限值。另外，对大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌的检测结果也必须符合相关标准。
三、叶酸食品级FCC质量标准的检测方法
叶酸液相色谱检测方法
叶酸液相色谱检测方法
1. 引言
1.1 背景介绍
叶酸是一种B族维生素，也被称为维生素B9，是人体生长发育和细胞分裂所必需的营养物质。叶酸在体内主要参与DNA和RNA的合成，对胎儿脑部和脊柱的发育具有重要影响。由于人体无法自行合成
叶酸，因此需要通过饮食来摄入。叶酸缺乏可能导致贫血、胎儿神经
管缺陷、心血管疾病等严重健康问题。
为了准确检测叶酸的含量，液相色谱检测方法应运而生。液相色
谱是一种高效、精确的分析方法，通过样品溶液在固定相中的移动速
度差异来分离和检测不同物质。叶酸液相色谱检测方法具有高灵敏度、高准确性、高分辨率的优势，已被广泛应用于食品安全、生物医学等
领域。
本文旨在介绍叶酸的生物学功能、叶酸缺乏的危害、液相色谱检
测方法的原理和步骤，以及叶酸液相色谱检测方法的优势和应用前景，以加深对叶酸及其检测方法的理解。
1.2 研究目的
研究目的是为了建立一种高效、准确、稳定的叶酸液相色谱检测
方法，以满足日益增长的叶酸检测需求。通过对叶酸的生物学功能和
缺乏危害的深入研究，我们可以更好地了解叶酸在人体中的作用和重
要性。探讨液相色谱检测方法的原理和步骤，可以帮助我们更好地理
解该方法的工作机制和操作流程。分析叶酸液相色谱检测方法的优势，可以帮助我们更好地评估该方法在叶酸检测中的作用和价值。最终，
通过探讨叶酸液相色谱检测方法的应用前景和意义，可以为该方法的
推广和应用提供理论支持和指导，为叶酸检测及相关领域的研究和临
床应用提供有益参考。
2. 正文
2.1 叶酸的生物学功能
叶酸是一种维生素B族的重要成员，也被称为维生素B9。它在人体内扮演着多种重要的生物学功能。叶酸在DNA合成过程中起着关键的作用，帮助细胞进行分裂和生长，对胎儿的神经系统发育至关重要。叶酸还参与了氨基酸代谢，并帮助维持正常的红细胞形成。叶酸在蛋
叶酸的测定方法
叶酸的测定方法
微生物法
1.原理
叶酸是酪乳酸杆菌（Lactobacillus casei, L. C, ATCC 7469）生长所必需的营养素。在一定条件下，L.C的生长繁殖与培养基中叶酸含量呈正比关系，细菌增殖的量以光密度值计，通过与标准曲线相比较，计算出样品中叶酸的含量。
2.适用范围
参考《Methods of Vitamin Assay》，第4版。本方法适用于各类食物中叶酸的测定。检测限为0.1ng。
3.仪器与设备
（1）恒温培养箱
（2）离心机
（3）高压消毒锅
（4）震荡器
（5）接种针和接种环
（6）分光光度计
4.试剂
除特殊说明外，本实验中所有试剂均为分析纯，水为蒸馏水。
（1）菌种：酪乳酸杆菌（Lactobacillus casei, L.C, ATCC 7469）
（2）磷酸缓冲液(0.05mol/L, pH6.8):称取4.35g Na3PO4·12H2O,10.39g Na2HPO4·7H2O溶解于800ml水中。临用前用约5g抗坏血酸调节pH至6.8。（注：叶酸对光、热敏感，易被氧化破坏，抗坏血酸有助于保护叶酸被氧化。）（3）鸡胰酶溶液：称取100mg干燥的鸡胰酶（Difco公司）（注：含有叶酸轭合酶，用于水解叶酸多谷氨酸盐），加入20ml磷酸缓冲液制成匀浆，3000rpm离心10min,取上清液备用。临用前现配。
（4）蛋白酶-淀粉酶溶液：分别称取200mg蛋白酶（Sigma公司）和淀粉酶（Sigma公司），加入20ml磷酸缓冲液制成匀浆，离心3000rpm 10min,取上清液备用。临用前配制。
外标法测定叶酸片中叶酸含量
情拥况有之一 提美出渠拒付
货款已经支付或 计算有错误的款项
代销、寄销、赊 销商品的款项
验货付款，经查验货 物与合同规定或与发 货清单不符的款项
1 托收承付拒付理由
任务7 托收承付业务
六、拒付期限
验单承付
验货承付
开户银行发出承付通知的次日 算起，3日内出具拒绝证明， 连同有关单证邮寄收款人开户 银行转交收款人。
通知开户行付款
A
付款人在付款期内，未向银行提出异议，银行视作同意付款。
B
付款否认可以提前向银行表示承付，并通知银行提前付款，银行应立
即办理划款。
C 付款人在承付期满日银行营业终了时，如无足额资金支付，其不足部 分即为逾期未付款项。
D
付款人如果发现有合同规定不符的情况，可以在承付期内提出全部或 部分拒付，并填制“拒绝付款理由书”
测定过程演示3
打开工作站，设置分析方法。 等基线平衡后，用微量注射器量取定量环体积的3-5倍的叶酸 标样，在上述分析条件下进样。 在相同的条件下，对叶酸样品进行测定，记录标样与样品的 色谱峰面积和保留时间。 记录下样品名对应的文件名，同时打印出经优化的色谱图和 分析结果
学生实训
要求每位学生独立完成，独立处理数据，合理安排时间。 叶酸的定性问题：一般可采用标准物质进行保留时间的对照来定性。 在标样和试样溶液的配制过程中，称量需采用减量法。 本项目中叶酸的定量采用外标法。 色谱柱的个体差异很大，即使是同一厂家的同种型号的色谱柱，性能 也会有差异。因此，色谱条件（主要是指流动相的配比）应根据所用色 谱柱的实际情况作适当的调整。 本项目的测定需使用电炉，操作时要注意用电安全；同时配制氨水溶 液应在通风柜中进行。
食品中叶酸的不确定度评定报告
食品中叶酸的不确定度评定报告
测量不确定度是表征合理赋予被测量之值的分散性，与测量结果相联系的参数，其决定了测量结果的使用价值。本分析方法根据GB5009.211-2014 《食品安全国家标准食品中叶酸的测定》的方法，建立叶酸的测定方法，进行不确定度的测量和评定，以期为评定测量结果质量提供科学依据。
1 材料与方法
1.1材料与试剂
1.2材料与试剂
叶酸标准品：SUPELCO 500mg/瓶。叶酸标准品：纯度≥99%。
氢氧化钠分析纯
无水乙醇色谱纯
叶酸测定培养基
MRS培养基
鼠李糖乳杆菌（ATCC 7469）
1.3 仪器与设备
分析天平:万分之一天平梅特勒-托利多仪器有限公司编号:Y-024 精确度0.0001g。
酶标仪：美国伯腾仪器有限公司Y-012
超声波振荡器：湖南湘仪实验仪器开发有限公司F-038
电热恒温培养箱：北京市永光明医疗仪器厂36℃±1℃ Y-003
高压蒸汽灭菌器：121℃（0.10MPa-0.12MPa）Y-010
离心机：转速≥3000r/min 湖南湘仪实验仪器开发有限公司Y-033
1.4方法简述
1.4.1准确称取固体试样1g，精确至0.001g。转入100ml锥形瓶中，加入80ml氢氧化钠乙醇溶液，具塞，超声4h至试样完全溶解或分散，用水定容至刻度。
根据试样中叶酸含量用水对试样提取液进行适当的稀释，使试样稀释液中叶酸含量在0.2ng/ml-0.6ng/ml范围内。所用试管使用前洗刷干净，沸水浴30min，沥干后放入盐酸浸泡液中浸泡2小时，经170±2℃烘干3h后使用。
1.4.2试样和酶空白系列管
食品中维生素的测定
实验数据应进行复核和处理，确保数据的准确性和 可靠性。
06
食品中维生素测定实验案例分析
案例一：蔬菜中维生素C的测定
01
实Fra Baidu bibliotek原理
维生素C具有还原性，可以通过氧化还原滴定法进行测定。常用的氧化
剂有碘酸钾、溴酸钾等，常用的滴定剂有氢氧化钠、硫酸等。
02 03
实验步骤
取适量蔬菜样品，经过洗涤、破碎、过滤等步骤，得到待测液；加入氧 化剂进行氧化处理，使维生素C完全氧化；用滴定剂进行滴定，记录滴 定数据；根据滴定数据计算维生素C的含量。
脂溶性维生素
包括维生素A、D、E和K，它们溶 于脂肪，可以在体内储存，但储存 过量可能导致中毒。
维生素的作用
水溶性维生素
参与能量代谢、免疫功能维持、神经 递质合成等生理过程，对维持人体正 常生理功能至关重要。
脂溶性维生素
参与钙磷吸收、骨骼形成、视觉功能 、血液凝固等生理过程，对维持人体 正常生理功能至关重要。
色谱分析法
总结词
分离效果好、灵敏度高
详细描述
色谱分析法是一种分离和测定相结合的方法，通过特定的色谱柱将维生素与其他物质分离，再通过检 测器测定维生素的含量。该方法分离效果好，灵敏度高，适用于复杂基质中维生素的测定。
电化学分析法
总结词
灵敏度高、仪器简单
详细描述
_国标《食品中叶酸的测定》的标准曲线绘制与计算
[基金项目] 浙江省卫生高层次创新人才培养、浙江省151人才
培养、浙江省医学科学院青年基金
[作者简介] 唐靓(1979-),男,本科,助理研究员,主要从事微
生物检测与研究工作。
＊通讯联系人,E-m a i l :w y 3333@163.c o m
【经验交流】
国标《食品中叶酸的测定》的标准曲线绘制与计算
唐靓,李跃中,王晗,陆明旸,李昉贇,王茵
＊
(浙江省医学科学院,杭州 310013)
[关键词] 微生物法;叶酸;标准曲线;E X C E L
[中图分类号] R 155.5 [文献标识码] C [文章编号] 1004-8685(2009)07-1682-02 中华人民共和国国家标准G B /T 5009.211-2008《食品中叶酸的测定》于2008-11-21发布,2009-03-01正式实施[1]。
标准7.6结果计算中说明:以标准系列管叶酸含量为横坐标、透光率为纵坐标,绘制标准曲线。从标准曲线查得试样管或酶空白管中叶酸的相应含量,如果每个试样的三支试样管中有两支叶酸含量落在0.20～1.0n g 范围内,则可继续进行计算。1 标准曲线建立
笔者参与标准的起草,对微生物法测定食品中叶酸含量的准确度、精密度和重复性做了验证与评价。在实验过程中,发现干酪乳杆菌A T C C 7469标准管的O D 值随着叶酸浓度增加而增长趋缓,略呈S 形。若使用线性方程,数据点分布在方程两侧,求得的叶酸浓度不准确(见表1与图1)。
表1 叶酸标准系列管的O D 值
C (n g )0.00.050.10.20.3O .
荧光分光光度计法测定叶酸的含量
荧光分光光度法测定食品中叶酸的含量
叶酸〔1〕是一种重要的B 族维生素,其化学名称为蝶酰谷氨酸。叶酸的测定方法主要有微生物法〔2〕、HPLC 法〔3〕、荧光法和放射免疫法〔4〕等。国标法〔5〕测定叶酸是微生物法,选用的菌种可利用培养基中叶酸单谷氨酸和双谷氨酸盐进行生长,灵敏度较高,但是检测需要的时间较长。由于食品成分复杂,试样处理烦琐费时,而测定的是叶酸盐活性,需制备各种培养基和菌种,步骤多且试剂用量大,微生物法叶酸衍生物繁多,标准品来源有限,存在多种干扰因素,分析方法受到限制。本文采用超声波提取荧光分光光度法测定食品中的叶酸含量,方法简便、快速,取得满意结果。现报告如下。
1 材料和方法
111 原理
叶酸中具有吡嗪- 嘧啶环,它具有特殊的吸收光谱及氧化还原特性。在紫外光的照射下产生强的兰色荧光。其荧光强度与标准溶液浓度成线形关系,用磷酸缓冲溶液超声波提取品中的叶酸,提取液经净化后除去其他荧光物质,测定其荧光强度,通过与标准曲线比较,求出样品中叶酸的含量。
112 试剂
(1) 叶酸标准贮备液(100μg/ ml) :准确称取10mg 叶酸标准品(CHEMSERVICE 公司,纯度> 98 %) ,加入几滴氢氧化钠溶液助溶,用蒸馏水定容至100.00 ml 。
(2) 叶酸标准工作液(2μg/ ml) :准确吸取2.00 ml 叶酸标准贮备液,用水定容至100.00 ml 。(3) 20 %冰乙酸溶液。
(4) 磷酸缓冲溶液:pH = 6.8 。
(5) 4 %高锰酸钾溶液。
(6) 3 %H2O2 。
叶酸铁质复方软胶囊中叶酸的含量测定
西北药学杂志 2008 年 12 月 第 23 卷 第 6 期
叶酸铁质复方软胶囊中叶酸的含量 测定
杨仲儒1 , 孟方兵1, 2 , 朱妙飞1 ( 1. 杭州 海王 生 物工 程 有限
公司研发部, 浙江 杭州 311101; 2. 东 方药 林药 业有 限公 司, 广东 广州 510515)
º 曾考虑用药典叶酸项下含量测定的 pH 为 6 的流动相进行检测, 发现对照品与供试品峰对称性较 差, 当改用 pH 值为 3 的流动相 后, 情况 得以改善。
36 4
西北药学杂志 2008 年 12 月 第 23 卷 第 6 期
原因可能是当供试品溶液进入 pH 为 6 的流动相后, 有一部分叶酸解离所致[ 2] 。
长 260 nm。结果 叶酸在 0. 062~ 0. 619 g# L- 1 质量浓度范围
内线性关系良好, r = 0. 999 5, 平均回收率为 100. 7% , RSD 为
1. 2% ( n = 9)。结论 方法操作简便, 结果准 确, 可用 于叶酸
铁质复方软胶囊 中叶酸的检测。
关键词: 叶酸铁质复方软胶囊; 叶酸; 含量测定
图 1 HP LC 图 A252O2甲基维斯阿米醇苷对照品; B2升麻素苷对照品; C2华山前胡供试品; 1252O2甲基维斯阿米醇苷; 22升麻素苷