木脂素类成分分析30页PPT

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木脂素类成分分析[知识研究]

业界荟萃
18
例复方鱼腥草片中连翘（连翘苷）的鉴别
提取乙醇、70%乙醇分离大孔树脂薄层板硅胶G 展开剂三氯甲烷-甲醇-甲酸（9:1:0.1）显色剂 10%硫酸乙醇溶液（105℃）
业界荟萃
19
四、含量测定（一）变色酸比色法总木脂素
测定具有亚甲二氧基的木脂素
O O
H3CO H3CO
H3CO O
H3CO
O
连翘苷
业界荟萃
O glc OCH3
22
O
OH
OH
H3CO
O
glc O
厚朴酚
业界荟萃
OCH3 OCH3
牛蒡苷
23
H3CO
OCH3
H3CO H3CO
H3CO
OCH3
CH3 CH3
五味子甲素
业界荟萃
五味子醇
HO
CH3O CH3O
HO
OCH3
CH3 OH
CH3
OCH3
24
香砂养胃丸
业界荟萃
4
二、结构特征及理化性质（一）结构特征
组成木脂素的单体 C6-C3
（苯丙素）
业界荟萃
5
木脂素是由两分子苯丙素衍生物聚和而成
结构中除均含有两个苯环外，多数具有醇羟基、酚羟基、甲氧基、亚甲二氧基、醚环及内酯环等含氧取代基。

五味子木脂素类成分HPLC、UPLCQTOFMS分析

一、本文概述

本文旨在通过高效液相色谱（HPLC）和超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用（UPLC-QTOFMS）技术，对五味子木脂素类成分进行深入的分析和研究。五味子作为一种具有悠久药用历史的中药材，其在中医理论中被誉为“五脏之果”，具有滋补强壮、益气生津、敛肺滋肾、止泻涩精等多种药理作用。其木脂素类成分作为五味子药效的主要物质基础，对其进行系统的分离、鉴定和定量分析，对于揭示五味子的药效机制、提高药材质量控制水平以及开发新型药物具有重要的理论和实践意义。

本文将首先对五味子木脂素类成分进行系统的概述，包括其化学结构、生物活性、药理作用等方面的内容。然后，详细介绍HPLC和UPLC-QTOFMS在五味子木脂素类成分分析中的应用原理、实验方法以及数据处理技术。在此基础上，通过实际样品的分析，展示这两种技术在五味子木脂素类成分定性、定量分析中的优势和应用效果。对实验结果进行深入的讨论和总结，为五味子木脂素类成分的深入研究和应用提供有益的参考和借鉴。

二、材料与方法

五味子木脂素类成分标准品（购自中国药品生物制品检定所或者其他可靠来源）。高效液相色谱（HPLC）级甲醇、乙腈（购自Fisher Scientific或等效品牌）。超纯水由Milli-Q纯水系统制备。

高效液相色谱仪（HPLC，如Agilent 1260 Infinity系列或等效型号），配备二极管阵列检测器（DAD）；超高效液相色谱-四极杆/飞行时间质谱联用仪（UPLC-QTOFMS，如Waters Acquity UPLC与SYNAPT G2-Si MS或等效型号）。

天然药物化学_第四章_香豆素与木脂素类

愈创木脂酸
叶下珠脂素
来源于菊科植物牛蒡 Arctium lappa L. 的干燥成素果实。扩张血管、降低血压
（二）环木脂素类
环木脂素有苯代四氢萘、苯代二氢萘、苯代萘三种类型。结合位置为8-8’，2-7’。以苯代四氢萘居多。
苯代四氢萘型
苯代二氢萘型
苯代萘型
环木脂素结构中有内酯环时也称为环木脂内酯。如远志中的赛菊芋脂素属于环木脂内酯成分。
七叶苷
补骨脂
补骨脂是豆科植物补骨脂的干燥成熟果实。具有温肾助阳，纳气，止泻的作用。用于阳痿遗精，遗尿尿频，腰膝疼痛，肾虚作喘，五更泄泻；外用治疗白癜风，斑秃。主要含有香豆素类的补骨脂素和异补骨脂素；黄酮类的补骨脂甲素、补骨脂乙素；脂肪油、树脂及多糖。
补骨脂种子粗粉 50% 乙醇浸渍提取
抗肝炎作用。
五味子甲素 R1=R2=R3=R4=CH3
五味子乙素
R1+R2=CH2 R3=R4=CH3
五味子丙素 R1+R2=R3+R4=CH2
（四）聚木脂素类
聚木脂素类为近年来才发现的。是分别由3和4分子苯丙素聚合而成的。如从牛蒡子中获得的拉帕酚A；丹参中主要纤溶活性成分丹参酸乙。
拉帕酚A
在热碱液中内酯环开裂成羧酸盐（或生成酚盐）溶于水中，加酸又重新环合成内酯而析出的性质进行香豆素类化合物的提取、分离和纯化。

木脂素结构性质提取方法及其鉴别

谱图解析
以 2-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-3-甲基-5-丙烯基-7甲氧基-2,3-二氢苯并呋喃 1 为例，进行谱图解析，其分子结构、核磁氢谱见图 2.4、2.5
ChemNMR H-1 Estimation
6.41
H
1.71 6.62
1.34 6.53 3.83
3.73
O OH
5.0
H
6.06 6.52
一、天然产物有效成分分离方法的原理溶剂提取法与水蒸气蒸馏法的原理、操作及其特点二、天然产物有效成分分离与精制天然产物有效成分各种分离方法的原理
1、溶剂提取法
溶剂提取法的原理：溶剂提取法是根据天然产物中各种成分在溶剂中的溶解性质，选用对活性成分溶解度大，对不需要溶出成分溶解度小的溶剂，而将有效成分从药材组织内溶解出来的方法。当溶剂加到天然产物原料（需适当粉碎）中时，溶剂由于扩散、渗透作用逐渐通过细胞壁透入到细胞内，溶解了可溶性物质，而造成细胞内外的浓度差，于是细胞内的浓溶液不断向外扩散，溶剂又不断进入药材组织细胞中，如此多次往返，直至细胞内外溶液浓度达到动态平衡时，将此饱和溶液滤出，继续多次加入新溶剂，就可以把所需要的成分近于完全溶出或大部溶出。
1、溶剂提取法
溶剂的选择：运用溶剂提取法的关键，是选择适当的溶剂。溶剂选择适当，就可以比较顺利地将需要的成分提取出来。选择溶剂要注意以下三点：①溶剂对有效成分溶解度大，对杂质溶解度小；②溶剂不能与中药的成分起化学变化；③溶剂要经济、易得、使用安全等。

香豆素与木脂素ppt课件

10
（2）角形（7、8呋喃骈香豆素型），白芷内酯型
CH3O O
O
O
O
O
OO
O
白芷内酯(异补骨内酯)
存在于白芷、香独活、补骨脂
能显著扩张冠状动脉
11
aflatonxin B1
黄黄曲曲霉霉素素B1 (高毒性)
3. 吡喃香豆素
（1）线型（6,7吡喃骈香豆素)
CH3
花椒内酯
H3C
H3C
O
O
O
（2）角型（7, 8 吡喃骈香豆素）
结晶（可能时混和物）
残渣
乙醇提取
乙醇液
回收分离
进一步分离
香豆素苷类
单体（亲脂性香豆素）
35
2.真空升华或蒸馏法：
例如：橘子油橙皮油素的分离
橘子油
H3C O
O
O
馏出物
加热溶于乙醇乙醇液
残油
H3C
O CH3
放置
粗品
结晶（橙皮油素）
以乙醇、乙醚或石油醚
重结晶
36
3. 色谱法
香豆素的混合物部分最后通过层析的方法才能得到单体。香豆素一般用硅胶吸附层析、氧化铝层析和聚酰胺层析。碱性氧化铝可能使香豆素发生降解，故很少使用。对酚性香豆素强吸附，洗脱剂可用己烷—乙醚、己烷-乙酸乙酯和石油醚—乙酸乙酯的混合溶剂。

化学成分及分析方法(自学)课件

结构特征与分类
三萜皂苷甾体皂苷
32
三萜皂苷
三萜类化合物与糖结合而成的化合物，多含
COOH。
乌苏烷型
五环三萜皂苷
齐墩果烷型羽扇豆醇型
木栓烷型
三萜皂苷
四环三萜皂苷
羊毛脂烷型达玛烷型大戟烷型葫芦烷型
33
五环三萜皂苷
H
H H
齐墩果烷
H H
H H
羽扇豆烷 34
H H H
乌苏烷
HHH
木栓烷
四环三萜皂苷
甾体
skeleton) 25．胆甾烷（C27）生物碱
茄定碱、浙贝甲素
(alkaloids with the C27-carbon
skeleton of cholestane)
44
分布与活性
分布广泛：100余科植物，如毛茛科、小檗科、防己科、夹竹桃科、豆科、罂粟科、茄科、菊科等。
生物碱是生药中一类重要的有效成分，已有80余种用于临床。
OH
梓醇
理化性质与鉴别
苷类多为无色结晶，味苦，有吸湿性。易溶于水、甲醇，可溶于乙醇、丙酮、正丁醇等。
易水解，如地黄或玄参炮制后变黑。可与酸、碱、氨基酸等呈特殊颜色的反应。
31
五、皂苷类
概念
皂苷 (saponins) 是广泛存在于植物界的一类特殊的苷类，它的水溶液振摇后可生产持久的肥皂样的泡沫，因而得名。

木质素类成分分析

中药名称
主要木脂素成分
中药名称
主要木脂素成分
五味子五味子甲素五味子乙素五味子醇甲五味子醇乙
厚朴厚朴酚、和厚朴酚细辛细辛脂素、芝麻脂素
牛蒡子牛蒡子苷、拉帕酚牛蒡子苷元
刺五加丁香脂素
连翘连翘脂素、连翘脂苷杜仲松脂醇二葡萄糖苷
远志中国远志脂酚
黑芝麻芝麻脂素
二、结构特征及理化性质（一）结构特征
组成木脂素的单体 C6-C3
（苯丙素）
CH2OH
HO OCH3
松柏醇
CH2OH
HO
对羟基桂皮醇
H3CO
HO OCH3
芥子醇
CH2OH
木脂素是由两分子苯丙素衍生物聚和而成
结构中除均含有两个苯环外，多数具有醇羟基、酚羟基、甲氧基、亚甲二氧基、醚环及内酯环等含氧取代基。
二氢愈创木脂素
H3CO
手亚性甲C二氧旋基光LE性acgbraitn反e反应应
例藿香正气水
Ch.P.（2010）
【处方】苍术、陈皮、厚朴（厚朴酚、和厚
朴酚）、白芷、茯苓、大腹皮、生半夏、甘草浸
膏、广藿香油、紫苏叶油
【鉴别】（3）……喷以5%香草醛硫酸溶液
（2）Labat反应亚甲二氧基
木脂素没食子酸硫酸蓝绿色
（没食子酸-硫酸反应）

中药制剂中各类化学成分分析

第一节生物碱类成分分析

1．含生物碱的中药有三尖杉、麻黄（麻黄碱）、黄连（小檗碱）、黄柏（小檗碱）、乌头（乌头碱）、延胡索（延胡索乙素）、粉防已（粉防已碱）、颠茄（莨菪碱、东莨菪碱）、洋金花（莨菪碱、东莨菪碱）、贝母（贝母素甲、乙，贝母碱）、百部等。

2．生物碱定性鉴别：

取分离提取得到的生物碱（麻黄碱）供试品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。吸取供试品溶液2ul，对照品溶液1ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试剂（12:6:3:3:1）为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

3．生物碱含量测定

色谱条件：以十八烷基硅烷键合相硅胶为填充剂；以甲醇-水（50:50）为流动相；流速1.0ml/min；检测波长为254nm；柱温为室温；理论塔板数按盐酸麻黄碱计算应不低于3000. 供试品溶液的制备：取分离提取得到的麻黄碱供试品，加醋酸乙酯制成每1ml含0.1mg的溶液，作为供试品溶液；

对照品溶液的制备：取盐酸麻黄碱对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。

测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。

第二节黄酮类成分分析

1.含黄酮的常用中药有槐米（芦丁，槲皮素）、黄芩（黄芩苷）、葛根（葛根素）、陈皮（橙皮苷）、银杏叶（芦丁、槲皮素）、淫羊霍（淫羊苷霍）等。

木质素成分

第八节其他类型成分分析

木脂素类成分分析

（一）概述

木脂素类（lignans）化合物多为无色结晶、此类成分在TLC鉴别时需喷显色试剂；对于结构中有芳香环的木质素类成分，可直接在紫外光灯下检视；少数具有升华性，可采用微量升华

法进行鉴别。游离木脂素具亲脂性，难溶于水易溶于苯、乙醚、氯仿、乙醇等有机溶剂，成苷后水溶性增加。结构中具有羟基的木脂素，由于羟基的存在，使其具有一定的酸性，可溶于

碱性水溶液，因此，该类木脂素的提取和纯化可采用碱溶酸沉法。

分析中药中木脂素类成分时，常用的提取方法是溶剂法，根据待测成分的溶解性选用适

当的溶剂提取，而后根据待测成分与杂质性质的差异，分析目的物是总木脂素还是单体木脂素，欲使用的分析方法是化学分析法还是仪器分析法等因素选择纯化方法。总之，提取和净化都要以尽量完全提取待测组分、最大限度去除尽杂质为原则，再根据测定方法的特点灵活选择提取和净化方法。

木脂素常有多个手性碳原子或手性中心，其生物活性与手性碳的构型有关，因此在提取、纯化过程中应注意避免酸、碱，以防止其构型改变。

木质素类成分的结构中常有一些官能团，如酚羟基、亚甲二氧基、内酯结构等，可利用这些官能团的性质和颜色反应进行木脂素类成分的检视和含量测定

常用中药连翘、五味子、厚朴、牛蒡子、细辛等含有木脂素类成分。该类成分具有多种生物活性，如五味子所含的木脂素具有补肾、强壮、安神、保肝降酶等作用。厚朴中的木脂素具有松弛肌肉、消炎、止痛之功效。因此，中药中含木脂素类成分时，常选择该中药所含的木脂素类成分作为鉴别、定量依据

《中国药典》（2015年版）中有10个中药材或饮片测定木脂素类成分含量，其中用hPC的10个，同时测定两种或两种以上木脂素成分的有2个；有8个中药材或饮片以木脂素为对照品进行定性鉴别。87个中药制剂测定木脂素含量，其中用HPLC的87个，同时测定两种或两种以上木脂素成分的有49个；有121个中药制剂以木脂素为对照品进行鉴别

复方五仁醇胶囊含药血清中木脂素类成分的UPLC_MS_MS分析_窦志华

RP18 5 m 3. 9 mm 150 mm、Symm etry C18 5 m 3. 9 mm 150 mm 发现前两款柱子的分离效果不好, W aters SunF ireTM C18 4. 6 mm 250 mm 5 m 液相色谱柱分离效果很好, 并且基线平稳, 故我们选择了 W aters SunF ireTM C18 4. 6 mm 250 mm 5 m 液相色谱柱。 3. 4. 8 不同仪器的考察
文章编号: 1001-1528( 2007) 04-0550-05
Analysis of lignans in the serum of rats after oral adm inistration of Compound W urenchun Capsules by UPLC-M S /M S
DOU Zh-i hua1, D ING A n-w e i1* , JU W en- zheng2, LUO L in3
2007年 4月第 29卷第 4期
中成药 Ch inese T rad itiona l P aten tM ed icine
A pril 2007 V o .l 29 N o. 4
循信息量最大化的原则, 选择 280 nm 波长作为本指纹图谱的测定波长。
3. 4. 3 梯度时间的设定 0~ 60 m in采用不同梯度进行洗脱, 使全部峰均

木质素类成分分析ppt课件

(二)色谱法单木脂素
1. TLC法吸附剂硅胶G 展开剂三氯甲烷，苯
2. HPLC法
填充剂 C18 流动相乙腈-水，甲醇-水检测器 UV
25
例护肝片
Ch.P. (2010)
【处方】柴胡，茵陈，板蓝根，五味子，猪胆
粉，绿豆
【含量测定】 HPLC法
固定相流动相
C18 甲醇-水(63:37)
5
二氢愈创木脂素
手性C 旋光L性abat反应亚甲二氧基 Ecgrine反应
酚羟基三氯化铁反应 UV 恩施脂素
6
五味子醇
五味子甲素 UV
7
连翘苷 UV
8
厚朴酚
UV
牛蒡苷
9
(二)理化性质 1. 物理性质无色结晶无挥发性有光学活性
10
2. 溶解性
*多数是游离体游离木脂素易溶于有机溶剂具酚羟基木脂素可溶于强碱水溶液
19
(4)三氯化铁反应酚羟基
4. UV 苯环 λmax 250~350nm
20
三、定性鉴别
(一)理化鉴别硫酸反应 Labat反应 Ecgrine反应三氯化铁反应
21
(二) TLC法
薄层板展开剂
硅胶G 苯、三氯甲烷三氯甲烷- 甲醇(9:1)
显色剂
香草醛硫酸
105℃

05-6木质素类成分分析

CH 3 CH 3
五味子醇
OCH3 HO CH 3 OH CH3
五味子甲素 UV
H3CO H3CO O
O
O OCH3
glc
连翘苷 UV
O
OH
OH
H3CO O glc O
OCH3 OCH3
厚朴酚
UV
牛蒡苷
（二）理化性质
1. 物理性质无色结晶无挥发性
有光学Байду номын сангаас性
2. 溶解性
*多数是游离体游离木脂素易溶于有机溶剂具酚羟基木脂素可溶于强碱水溶液 *少数可与糖结合成苷
硫酸反应
Labat反应
Ecgrine反应
三氯化铁反应
（二）TLC法
薄层板硅胶G 展开剂苯、三氯甲烷三氯甲烷-甲醇（9:1）显色剂香草醛硫酸 10%硫酸乙醇溶液碘蒸气 105℃
5%~10%磷钼酸乙醇溶液
例复方鱼腥草片中连翘（连翘苷）的鉴别提取分离乙醇、70%乙醇大孔树脂
薄层板硅胶G
连翘
远志
连翘脂素、连翘脂苷
中国远志脂酚
杜仲
黑芝麻
松脂醇二葡萄糖苷
芝麻脂素
二、结构特征及理化性质（一）结构特征
组成木脂素的单体 C6-C3
（苯丙素）
CH2OH HO OCH3
松柏醇

第四章香豆素和木脂素

• 大孔树脂色谱
2011-4-9
• 高速逆流色谱
西安医学院药学院
23
四、鉴定 • 色谱鉴定 • 硅胶薄层色谱，展开剂：苯-甲醇，氯仿甲醇，硅胶薄层色谱，展开剂：甲醇氯仿-甲醇甲醇，甲醇， • • 显色剂：显色剂： • 紫外光下呈暗斑 • 通用显色剂：通用显色剂： • ①1%茴香醛浓硫酸试剂，110℃加热分钟；茴香醛浓硫酸试剂， ℃加热5分钟分钟；茴香醛浓硫酸试剂 • ②5%磷钼酸乙醇溶液，120℃加热至斑点明显出现；磷钼酸乙醇溶液， ℃加热至斑点明显出现；磷钼酸乙醇溶液 • ③10%硫酸乙醇溶液，110℃加热5分钟；硫酸乙醇溶液， ℃加热分钟；硫酸乙醇溶液分钟
Emerson试剂试剂反应试剂
4-氨基安替比林氨基安替比林 -铁氰化钾铁氰化钾
红色
2011-4-9
西安医学院药学院
9
三、提取与分离
（一）溶剂提取法
1、游离香豆素的提取：用低极性有机溶剂如苯、乙醚、乙游离香豆素的提取：用低极性有机溶剂如苯、乙醚、酸乙酯等提取；酸乙酯等提取； 2、苷：用水、醇等溶剂加热提取；用水、醇等溶剂加热提取； 3、系统溶剂法提取：用石油醚、苯、醋酸乙酯、丙酮和甲系统溶剂法提取：用石油醚、醋酸乙酯、醇顺次提取；醇顺次提取；
厚朴酚
西安医学院药学院
和厚朴酚

中草药中各类化学成分提取分离方法 ppt课件

1.聚酰胺的吸附原理：通过分子中的酰胺羰基与酚类、黄酮类化合物的酚羟基，或酰胺键上的游离胺基与醌类、脂肪酸上的羰基形成氢键缔合而产生吸附。
2020/4/12
H2C NH
OC CH2
H2C CH2
HN CO
H2C
CH2 OC
NH H2C
CH2 H2C
CO HN
CH2
固定相
2020/4/12
O
中草药中各类化学成分
提取分离方法
• 中草药中各类化学成分简介
一、有效成分
1.碱性化合物：
生物碱 O
O
N+OH -
OCH3
小檗碱
OCH3
2020/4/12
2.酸性化合物： • 结构中含有酚羟基的化合物 ——黄酮、醌类、苯丙素（香豆素、
木脂素）及其苷类 • 结构中含有羧基的化合物 ——有机酸、葡萄糖醛酸
2020/4/12
• 极性不完全等同于亲水性
• 亲水性强，则极性强；极性强，则亲水性并不一定强。
OH
OH
HO
O
OH
HO
O
OH
A OH OH O
B
OH
OH O
亲水性A>B
极性 B>A
2020/4/12
• 吸附柱色谱用于物质的分离： 1.选用极性小的溶剂装柱和溶解样品

5 木脂素

羟基7位多见甲氧基异戊烯氧基苯骈a吡喃酮环上有无取代7羟基与68异戊烯基成环情况简单香豆素呋喃香豆素其他香豆素环合降解环合不降解类型基本母核代表化合物简单香豆素仅苯环一侧有取代基伞形花内酯7oh香豆素瑞香内酯78二oh香豆素七叶内酯67二oh香豆素七叶苷7oh6o葡萄糖苷滨蒿内酯67二och蛇床子素7och呋喃香豆素补故脂内酯母核结构佛手苷内酯5och花椒毒内酯8och欧前胡内酯8异戊烯氧基紫花前胡内酯未降解的二氢香豆素当归素白芷内酯母核结构虎耳草素56异佛手苷内酯5och呋喃香豆素线型67呋喃香豆素ohohohoh紫花前胡醇白花前胡丙素其他香豆素a吡喃酮环上有取代香豆素二聚体三聚体异香豆素茵陈内酯一性状游离香豆素
第五章苯丙素类化合物
是指基本母核具有一个或几个C6 — C3单元的天然有机化合物类群。广义包括：简单苯丙素类——苯丙烯、苯丙醇、苯丙酸类（1分子C6 — C3单元）香豆素类（1分子C6 — C3 单元）木脂素类（2分子C6 — C3 单元）木质素类（多分子C6 — C3 单元）黄酮类（ C6 — C3— C6 单元，另章介绍）
OMe MeO HO OMe OMe MeO MeO OMe
含义:
丁香酚
ａ—细辛醚
β—细辛醚（苯丙烯）
MeO glc
1 6
CH2OH
CHO
glc O OMe
紫丁香苷（苯丙醇）桂皮醛（苯丙醛）