abo血型鉴定
ABO血型的鉴定
实验ABO血型的鉴定[实验目的] 学会用玻片法鉴定ABO血型，加深理解血型分型的依据。
[实验原理]血型是根据存在于红细胞膜外表面的特异性抗原确定的，这种抗原由遗传基因决定。
血清中的抗体可与红细胞膜上的不同抗原结合，产生凝集反应，最后发生红细胞的溶解。
A凝聚原+ A 凝集素→红细胞凝聚B凝聚原+ B 凝集素→红细胞凝聚ABO血型系统根据受试者红细胞上A、B凝集原的有无和种类，将血型分为A, B, O及AB型。
[实验用品]标准抗A和抗B血清一套，玻片、玻璃蜡笔、碘伏消毒液、牙签、采血针、显微镜等。
[实验方法]1.标记玻片：取干净玻片一张，擦干，不能留有水分，以防溶血；用玻璃蜡笔分别在两端表明A、B字样。
2.滴加血请：在载玻片A、B两端分别滴加标准抗A血清、抗B血清各一滴。
注意切不可混淆。
3.消毒采血：用棉签蘸取碘伏消毒液，消毒左手无名指指腹皮肤。
用消毒采血针垂直刺入消毒处皮肤采血1—2滴，将血液分别滴入标准抗A、抗B血清中，分别用牙签将血液与血清混匀，注意切不可用一根牙签在两侧血清中搅拌。
4.观察反应：静置10~15分钟后用肉眼观察有无凝集现象，肉眼不易分辨时用低倍镜观察。
5.结果判断：根据有无凝集现象判定血型。
（1）只在抗A血清中有凝集反应，则血型为A型；（2）只在抗B血清中有凝集反应，则血型为B型；（3）在抗A及抗B血清中均有凝集反应，则血型为AB型；（4）在抗A及抗B血清中均无凝集反应，则血型为O型。
6.[注意事项]（1）.采血针和皮肤必须严格消毒。
（2）滴加两种标准血清切不可混淆, 移动玻片时切勿将两种标准血清相混。
切不可用一根牙签在两侧血清中搅拌。
（3）注意区别凝集现象，肉眼分辨不清时使用低倍镜进行辨别。
7.实验记录：（1）实验现象：（2）实验结果：。
ABO血型的鉴定
实验步骤
1、在玻片两端分别标明“A”和“B”， 并各滴生理盐水一滴。 2、用75％酒精棉球消毒受测者一 侧耳垂或无名指尖，以采血针刺入 该处皮肤1.5—2mm再用清洁牙签蘸 取少量血液，分别混入玻片上的生 理盐水中，稍加搅拌成混悬液。
3、分别向标明“A”和“B”的两端混悬 液中加入抗A和抗B标准血清一滴并混 匀。 4、静置5-10分钟后观察结果。平置 玻片于光线充足处，后衬白色背景将 玻片轻轻摇动，红细胞结成小片块状 且不能摇散者为凝集；反之，摇动后 为均匀混悬液者为不凝集。根据有无 凝集现象判定血型。
结 果
A型血
抗A血清 抗B血清
B型血
抗A血清 抗B血清
O型血
抗A血清 抗B血清
AB型血
抗A血清 抗B血清
ABO血型的鉴定
实验目的
学会用玻片法测定ABO血型，根据测 定结果确定血型。
Hale Waihona Puke 实验原理用已知的凝集素（标准血清）鉴定出 被检者红细胞膜上未知的凝集原，从 而测出自己的血型。
实验器材
滴管、双凹玻片、牙签、采血针。 抗Ａ标准血清（从Ｂ型血的血清中 获得）、抗Ｂ标准血清（从Ａ型血的 血清中获得）、生理盐水，75%酒精 棉球。
ABO系统血型鉴定(正定型)
ABO系统血型鉴定（正定型）
试验原理：用已知抗体血型试剂，检查红细胞上的未知抗原。
1、20%—30%悬浮红细胞的配制：
取压积红细胞4滴，加1ml生理盐水。
2、正定型—玻片法：
①在正定型玻片两端分别加入待测者的20%—30%悬浮红
细胞各1滴，再加入已知相应抗体血型试剂各2滴。
②摇动玻片数次，5分钟后观察结果。
③如有怀疑者，须做试管法对照和显微镜观察。
3、正定型——试管法：
①取2支小试管分别注明:抗A、抗B。
②分别加入相应血型试剂一滴，再加待检者2~4%红细胞悬
液一滴。
③离心3000rpm/15秒或1000rpm/分钟。
④取出轻轻摇动，肉眼观察有无凝集。
⑤报告方式：待检者XXX红细胞鉴定血型为X型。
鉴定abo血型实验报告
鉴定abo血型实验报告鉴定ABO血型实验报告引言：血型是人体内重要的生物特征之一，对于医学研究和临床诊断具有重要意义。
ABO血型系统是最早被发现和研究的血型系统之一，其鉴定方法简单、可靠，因此被广泛应用于临床实践中。
本文将对ABO血型的鉴定实验进行详细介绍，并分析实验结果。
实验目的：通过实验鉴定被试者的ABO血型，了解被试者血液的抗原和抗体情况，为临床输血和器官移植提供重要参考。
实验原理：ABO血型系统由A、B、O和AB四种血型组成，其中A和B为两种主要的抗原，O为无抗原，AB为两种抗原都有。
在人体的血浆中，会产生相应的抗体，即抗A和抗B抗体。
根据抗原和抗体的反应，可以确定被试者的血型。
实验步骤：1. 准备实验材料：包括被试者血液样本、抗A和抗B抗体、试管、滴管等。
2. 取一根滴管，分别滴入被试者血液样本和抗A抗体的混合液，观察是否出现凝集反应。
3. 取另一根滴管，分别滴入被试者血液样本和抗B抗体的混合液，观察是否出现凝集反应。
4. 根据实验结果，判断被试者的血型。
实验结果：在实验过程中，如果被试者的血液与抗A抗体混合后出现凝集反应，同时与抗B抗体混合后未出现凝集反应，则被试者血型为A型；如果与抗B抗体混合后出现凝集反应，同时与抗A抗体混合后未出现凝集反应，则被试者血型为B型；如果与抗A和抗B抗体均未出现凝集反应，则被试者血型为O型；如果与抗A和抗B抗体均出现凝集反应，则被试者血型为AB型。
实验分析：根据实验结果，我们可以得出被试者的ABO血型。
ABO血型的不同会对个体的生理特征和疾病易感性产生影响。
例如，A型血液的个体在某些疾病的发生率上可能会有所不同于B型血液的个体。
因此，在临床诊断和治疗中，了解患者的血型信息非常重要。
实验意义：ABO血型的鉴定不仅可以用于临床输血和器官移植，还可以用于亲子鉴定、疾病易感性研究等领域。
通过了解个体的血型信息，可以更好地进行个体化医疗，提高治疗效果。
结论：通过ABO血型的鉴定实验，我们可以准确地确定被试者的血型，并了解其血液中的抗原和抗体情况。
实验七ABO血型鉴定
实验七、ABO血型鉴定一、实验原理血型是指红细胞膜上特异的抗原（凝集原）类型，常用血型系统有ABO系统、Rh系统。
血清中存在能与红细胞膜上相应抗原发生反应的抗体，称为凝集素。
ABO血型鉴定原理是血清中抗体（或凝集素）与红细胞的相应抗原起反应，产生凝集反应，而后发生血溶现象。
各种血型抗原与抗体分布：血型红细胞抗原（凝集原）血浆中抗体（凝集素）A A 抗BB B 抗AAB AB 无O 无抗A、抗B二、实验步骤1、双凹载玻片加两种血清：黄色抗B；蓝色抗A；2、消毒、采血（灭菌牙签）；3、静置10分钟，观察。
三、实验结果ABO血型系统根据红细胞表面有无特异性抗原（凝集原）A和B来划分的血液类型系统。
根据凝集原A、B的分布把血液分为A、B、AB、0四型。
红细胞上只有凝集原A的为A 型血，其血清中有抗B凝集素；红细胞上只有凝集原B的为B型血，其血清中有抗A的凝集素；红细胞上A、B两种凝集原都有的为AB型血，其血清中无抗A、抗B凝集素；红细胞上A、B两种凝集原皆无者为O型，其血清中抗A、抗B凝集素皆有。
具有凝集原A的红细胞可被抗A凝集素凝集；抗B凝集素可使含凝集原B的红细胞发生凝集。
如上表所示，当与抗A试剂反应为阳性，与抗B反应为阴性时，血型为A；当与抗A试剂反应为阴性，与抗B试剂反应为阳性时，血型为B；当与抗A、抗B试剂反应均为阳性时，血型为AB；而当与抗A、抗B试剂反应均为阴性时，血型则为O。
输血时若血型不合会使输入的红细胞发生凝集，引起血管阻塞和血管内大量溶血，造成严重后果。
所以在输血前必须作血型鉴定。
正常情况下只有ABO血型相同者可以相互输血。
在缺乏同型血源的紧急情况下，因O 型红细胞无凝集原，不会被凝集，可输给任何其他血型的人。
AB型的人，血清中无凝集素，可接受任何型的红细胞。
但是异型输血输入量大时，输入血中的凝集素未能被高度稀释，有可能使受血者的红细胞凝集。
所以大量输血时仍应采用同型血。
实验__人体ABO血型的测定
实验人体ABO血型的测定〔目的与要求〕1、学习辨别血型的方法。
2、观察红细胞凝集现象，掌握ABO血型测定的原理。
〔基本原理〕一、ABO血型系统的分型依据：1、抗原（凝集原）：存在于红细胞膜上。
抗原有两种： A、 B。
2、抗体（凝集素）：存在于血清（血浆）中。
抗体有两种：抗A、抗B。
（解释血清与血浆的区别）。
相对应的一对抗原与抗体相遇时会发生凝集反应。
正常人体内无凝集反应发生，因此可以断定：在正常人体内绝不存在相对应的一对抗原与抗体。
3、分型依据：根据红细胞膜上是否有抗原及抗原的种类划分。
分为A型、B型、AB二、判断方法：已知A型标准血清（抗B）、B型标准血清（抗A），根据是否发生凝集反应判断血型。
有以下几种情况：〔实验器材〕凹槽、一次性刺血针、消毒牙签、A型与B型标准血清、生理盐水、酒精棉球、一次性采血管、记号笔、试管架、小试管、消毒镊子。
〔方法与步骤〕1、清洗所用器材：首先用清水把要用的凹槽、小试管冲洗干净，然后用生理盐水再冲洗几遍，防止发生溶血。
这一步是保证实验成功的关键。
2、取凹槽，用记号笔作好标记。
3、在凹槽内分别加入A型与B型标准血清。
4、取小试管，向内加入生理盐水约2ml，放在试管架上备用。
5、采血：用酒精棉球消毒左手无名指指尖，另一名同学用手捏紧已消毒的手指，用一次性刺血针刺破手指取血。
注意：进针速度要快，力度适中，采血时要挤松交替。
当手指尖出现小血滴时，用一次性采血管吸取少许血液放入小试管中制成混悬液，然后再吸取混悬液分别加入A型和B型标准血清中各一滴，用牙签搅动，使每侧的血液与血清混匀。
注意每侧用一支牙签搅动，切勿混用。
6、静置，观察结果：在室温下静置10-15分钟，观察有无凝集现象发生，并判断结果。
注意：这种凝集反应的强度因人而异，如果15分钟后没有出现结果，可以再延长一段时间。
〔注意事项〕1、一定要严格消毒。
2、区别血液的凝集与凝固。
〔作业〕记录你的血型，说明你能接受和输血给何种血型的人，为什么？。
ABO血型鉴定
精品课件
27
（4）观察结果：肉眼观察有无凝集 (或溶血)反应，再用低倍镜观察，判 定阴性、阳性和阳性强度。
凝集判断标准：如红细胞呈均匀分 布，无凝集颗粒，显微镜下红细胞 分散存在，无凝集靠拢现象为阴性； 红细胞出现凝集为阳性。
精品课件
28
【注意事项】
1．所用器材必须干燥清洁、防止溶血；为 避免交叉污染，各器皿均一次性使用为佳。
6. 理论上IgM抗A和抗B与相应红细胞的反 应温度以4℃最强，但为了防止冷凝集现象 的干扰，一般仍在室温(20C～24C)内进 行试验，37C可使反应减弱。
7. 观察结果时应注意红细胞呈特异性凝集、 继发性凝集以及缗钱状形成的区别。
精品课件
30
思考
根据自己的血型，说明你能接受和输血 给何种血型的人，为什么？
ABO血型鉴定
——玻片
输血科
精品课件
1
【基本原理】
常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗 原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原 抗体存在的情况判定血型。常规的方法有： ①正向定型：用已知抗体的标准血清检查红 细胞上未知的抗原。②反向定型：用已知血 型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。结 果判定：凡红细胞出现凝集者为阳性，呈散 在游离状态为阴性。
精品课件
2
一、血型Blood Group/type
血型：是对血液分类的方法，血 细胞（红细胞）膜上存在的特异 抗原性物质的类型。
精品课件
3
血型分类的依据是红细胞表面是否存 在某些可遗传的抗原物质。
红细胞凝集Agglutination：血型不相 容的血液混合后，其中的红细胞聚集 成簇并溶血。
精品课件
17
AB型人大多小时候怕陌生人，很闭塞，但长 大以后善交朋友，交际广泛。AB型人因过于 自信，容易自满，老年时给人感觉很傲慢。 不过他们兼具A型与B型的特质，做事有计划， 但没有耐性，容易冲动，直觉敏锐，不喜欢 墨守成规，性情多变，有时表现极端的个性。 善于待人接物，很注意合情合理性，讨厌口 是心非的人，具有强烈的批评精神。 AB型 是不讲人情，不谈爱情的，男女关系在AB型 看来是件极具单纯的事情，不会像其他血型 的人弄得那样复杂 。
abo血型鉴定方法
abo血型鉴定方法
ABO血型鉴定方法包括以下步骤：
1.准备样本：收集被检测者的血液样本，通常采用静脉采血或指尖采血。
2.制备试剂：制备含有抗A、抗B抗体的试剂。
3.进行试验：将被检测者的血液滴在试剂上。
如果血液中含有抗A抗体，则血液会与抗A抗体反应，试剂变为凝胶状，表示血型为B型；如果血液中含有抗B 抗体，则试剂变为凝胶状，表示血型为A型；如果血液中都不含有抗A或抗B 抗体，则试剂不会发生凝胶反应，表示血型为O型；如果血液中同时含有抗A 和抗B抗体，则试剂会产生凝胶反应，表示血型为AB型。
4.验证结果：对测试结果进行验证，确保准确性。
ABO血型的鉴定
反向定型 标准红细胞+被检查血清 A型红细胞 B型红细胞 C型红细胞
结果判断
+
_
+
_
+
_
A型
-
+
+
+
_
_
B型
+
+
+
_
_
_
_பைடு நூலகம்
_
+
+
_
AB型
_
O型
鉴定方法及评价
1、生理盐水凝集法； 2、微柱凝胶法； 3、血型定型试剂卡法。
1、生理盐水凝集法
• 是临床最常用的方法 • 可以用试管法和玻片法测定 • 玻片法不适用于反定型 • 标准血清来源有两种途径
人血清ABO血型抗体
• 高度特异性； • 高效价； • 高亲和力； • 无冷凝集素； • 无菌。
人ABO血型单克隆抗体
• 来源； • 特异性； • 亲和性； • 效价； • 稳定性； • 无菌； • 灭活补体。
2、微柱凝胶法
• 一种新的免疫学检测方法 • 采用单克隆抗体 • 结果可直接观察，也可用血型分析仪 • 灵敏度高
ABO血型鉴定的原理
• ABO血型鉴定主要利用抗原与抗体之间的反
应来完成，包括正向定型和反向定型，正 向定型是用已知特异性抗体（标准血清） 检查红细胞上的未知抗原，反之反向定型 是利用已知血型的标准红细胞检查血清中 的未知抗体。
ABO血型正向、反向鉴定及结果判断
正向定型
标准血清+被检查红细胞
抗A
抗B 抗AB
3、血型定型试剂卡法
• 利用免疫检测和分子排阻层析原理 • 能同时进行正反向定型和Rh（D）血型鉴定 • 结果重复性好
ABO血型鉴定
ABO血型鉴定
ABO血型鉴定介绍：
ABO血型鉴定即指ABO血型抗原的检测。
ABO血型鉴定正常值：
ABO血型分为A型、B型、O型、AB型。
ABO血型鉴定临床意义：
ABO血型鉴定主要用于：
①临床输血：当循环血量不足或大失血或贫血需进行输血治疗，在输血前必须先选择血型相同的供血者，再进行交叉配血，完全相同后才能输血。
②在皮肤、肾移植等器官移植的时候选择ABO血型相符的供体。
③不孕症和新生儿溶血症病因的分析。
④亲子鉴定等。
ABO血型鉴定注意事项：
取血前注意消毒，取血后注意预防伤口感染。
ABO血型鉴定检查过程：
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ABO血型鉴定
实验步骤
玻片法 • （1） 取玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两 端用笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。 • （2） 细胞悬液制备从指尖或耳垂取血一滴，用棉签将其 涂于玻片上（注意：要用不同的棉签涂）。采血时应注意 先用75％酒精消毒指尖或耳垂。 • （3） 竹签两头分别混合，搅匀。 • （5） 1-2min后观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点 状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼 不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可 见红细胞聚集成团。 • （6） 判断血型 根据被试者红细胞是否被A，B型标准血 清所凝集，判断其血型。
在ABO血型系、O四型。
表 4-3-1-1 ABO 血型中的抗原和抗体 血 型 O A B AB 红细胞膜上所含的抗原 无A和B A B A和B 血清中所含的抗体 抗 A 和抗 B 抗B 抗A 无抗 A 和抗 B
实验器材和药品
• 1．器械采血针，消毒注射器，玻片，竹签，棉球， 记号笔。 • 2．药品标准A血清，标准B血清， 75％酒精。
生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型
血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中， 观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/
和B抗原。
交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清 与红细胞混合，观察有无凝集现象。输血时，一般主要考 虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集；其次才考 虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。前者叫交叉 配血试验的主侧（也叫直接配血），后者叫交叉配血的次 侧（也叫间接配血）。只有主侧和次侧均无凝集，称为 “配血相合”，才能进行输血；如果主侧凝集，称为“配 血不合”或“配血禁忌”，绝对不能输血；如果主侧不凝 集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别 谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。
ABO血型鉴定的原理
ABO血型鉴定的原理
ABO血型鉴定基于人体的免疫系统对不同血型抗原的反应。
人类的血液中存在着不同种类的血型抗原，其中最为常见的是ABO血型系统的A和B抗原。
根据个体血液中是否含有A和
B抗原，可将人的血型分为A型、B型、AB型和O型四种。
ABO血型的鉴定通常通过两种试剂：抗A血清与抗B血清来
完成。
抗A血清含有针对A抗原的抗体，抗B血清则含有针
对B抗原的抗体。
将这两种试剂分别与待测血液混合后，观
察血液与试剂之间的凝集反应就可以确定血型。
具体而言，如果待测血液中存在A抗原，则加入抗A血清后，血液与试剂会发生凝集现象；如果待测血液中存在B抗原，
则加入抗B血清后，血液与试剂会凝结；如果待测血液中同
时含有A抗原和B抗原，则同时加入抗A血清和抗B血清会
导致血液凝结；而如果待测血液中既没有A抗原也没有B抗原，则不会与抗A血清或抗B血清发生凝集。
此外，在ABO血型鉴定中，还存在一个重要的补体结合试验。
该试验通过观察血液与已知血型的血清的反应，来进一步确认血型鉴定的准确性。
ABO 血型鉴定
ABO 血型鉴定1、实验原理根据红细胞上有或无A 抗原或（和）B 抗原，将血型分为A型、B型、AB型和O型四种。
可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定A B O 血型。
所谓正定型，是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或（和）B抗原；所谓反定型，是用已知A红细胞B红细胞来测定血清中有无相应的抗A或（和）抗B。
2、使用的标本种类和收集方法2.1、受检者5％红细胞悬液红细胞悬液制备：采取受检者的红细胞，经盐水洗涤3次，取压积红细胞1滴加入生理盐水16滴（0.8ml）配成5％的红细胞悬液。
2.2、受检者血清采取受检着静脉血2-3ml，置水浴箱中至完全凝固，3000转/分钟离心5分钟，分离上层血清备用。
2.3、标本接收2.3.1、血型鉴定不接收临床送检标本（除外2.3.2规定内容）。
2.3.2、特殊急诊检验人员无法采血时，接收临床送检标本需登记采血护士姓名及送检护士姓名、并查对标本标签和检验单内容是否相符，如有不符可以拒收标本。
2.4、标本容器要求：洁净一次性塑料试管3、使用的试剂3.1、抗A 、抗B定型试剂（单克隆抗体）3.1.1、批准文号：国药准字S1*******3.1.2、生产厂家：长春生物制品研究所3.1.3、保存条件：2-8℃避光保存，有效期内使用。
2．5 ％A、B及O型试剂红细胞盐水悬液2.5.1、制备方法分别采取已知A、B、O三种血型的红细胞，经盐水洗涤3 次，经盐水洗涤3次，取压积红细胞1滴加入生理盐水16滴（0.8ml）配成5％的红细胞悬液。
2.5.2、保存条件：配制好的5％的红细胞悬液在试管上注明红细胞血型及配制时间，2-8℃避光保存，有效期3天。
4、仪器：4.1、仪器型号：TL80-1型医用离心机4.2、仪器厂家：中国江苏姜岩是田里医疗器械有限公司4.3、许可证号：苏药管械（试）字2001第2030436号4.4、仪器使用具体要求见离心机使用维护程序。
5、操作步骤、报告结果5.1、正定型：取清洁试管2支作好标记，分别加入抗A（蓝色）和抗B（黄色）标准血清各2滴。
ABO 血型鉴定
ABO 血型鉴定测定原理根据红细胞上有或无 A 抗原或／和 B 抗原，将血型分为 A 型、B 型、AB 型及O 型4种。
可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。
所谓正定型，是用已知抗—A 和抗—B 分型血清来测定红细胞上有无相应的A 抗原或／和B抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗—A或／和抗—B。
标本种类及收集要求1 受检者血清.2 EDTA2K抗凝血或未稍取血，受检者血液制成5 ％红细胞盐水悬液使用。
3 标本出现中度溶血者，为不合格标本，不能用于检测。
仪器、试剂、校准品、质控品、以及其他所需物品离心机，显微镜。
抗A、抗B血型定型试剂（单克隆抗体）：长春博德生物技术有限责任公司产品注册号：国药准字S1*******。
包装:抗A、抗B各1支/盒，塑料瓶，规格：10ml/支。
储存要求：2℃～8℃避光保存，主要成分：分泌抗人 A 型和抗人 B 型血型原单抗的杂交瘤细胞培养上清液并补加一定量小鼠腹水抗体。
0.9/%的生理盐水：山东齐都药业有限公司。
操作步骤：试管法1 取洁净小试管(内径10mm×60mm)3支，分别标明抗—A、抗—B和抗—A十B，用滴管分别加抗—A、抗—B 和抗—A 十 B 分型血清各l 滴（约50 ul）于试管底部，再以滴管分别加入受检者5％红细胞盐水悬液1滴，混和。
2 另取洁净小试管(内径10mm×60mm)3 支，分别标明A、B 和O 细胞。
用滴管分别加入受检者血清l 滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和O型5％试剂红细胞悬液l滴，混和。
3 立即以1000r／min离心3 min。
4 将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有无凝集(或溶血)现象。
如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。
5 观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B 或cisAB的发现。
6 凝集强度判断标准4+ 红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。
ABO血型鉴定
③虽然IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以 4℃最强，但为了防止冷凝集现象干扰，一般在 室温20℃～24℃内进行试验，而在37℃条件， 可使反应减弱。
▪ ④幼儿红细胞抗原未发育完全、老年体弱者抗原 性较弱，最好采用试管法鉴定血型。
▪ (2)平板法
①取洁净平板1块，用记号笔划出反应 小格，在左侧注明抗D，中间段注明阴性对 照，右侧注明阳性对照；②将室温盐水反 应的抗D血清各1滴加入上述小格内；③抗 D小格内加入待检者5％红细胞悬液1滴， 阳性对照小格内加入阳性对照红细胞悬液1 滴，阴性对照小格加入阴性对照红细胞悬 液1滴；④用干净玻璃棒搅拌红细胞悬液与 试剂血清充分混合；⑤连续轻轻倾斜转动 平板，一般在2min内观察结果，或按试剂 说明书规定的时间观察结果。
▪ 在我国，RH阴性血型只占千分之三属 于稀有血型。RH阴性A型、B型、O型、AB 型的比例是3：3：3：1。
▪ 二、用品准备
RH试剂血清【抗D】，待检者红 细胞，各型阴、阳性对照红细胞。其他 材料同ABO血型鉴定。
▪ 三、方法操作
盐水介质法
(1)试管法 ①取小试管3支，1支注明抗D， 另1支注明阳性对照，最后1支注明阴性对 照。②将室温盐水反应活性的抗D血清各1 滴加入上述试管内。③抗D试管中加入1滴 5％待检者红细胞(盐水、血清) 悬液，阳性 对照及阴性对照试管中分别加入相应的阳 性红细胞及阴性红细胞悬液1滴；④轻轻混 匀，于3000r/min离心15s；⑤取出轻轻摆 动观察有无凝集。
⑤玻片法反应时间不能少于10min，否则较弱凝集 不能出现，造成假阴性。
⑥正、反定型结果一致才可发报告。
⑦反定型法：先天性免疫球蛋白缺陷，长期大量 应用免疫抑制剂，血型抗体可减弱或消失；血清 中存在自身免疫性抗体、冷凝集素效价增高、多 发性骨髓瘤、免疫球蛋白异常均可造成反定型困 难；新生儿体内可存在母亲输送的血型抗体，且 自身血型抗体效价又低，因而出生6个月以内的 婴儿不宜做反定型。老年人血清中抗体水平大幅 度下降或被检者血清中缺乏抗A及（或）抗B抗 体，可引起假阴性或血型鉴定错误。
abo血型鉴定
（4）观察结果：肉眼观察有无凝集(或溶血)反应，再用低倍镜观察，判定阴性、阳性和阳性强度。① 凝集判断标准：如红细胞呈均匀分布，无凝集颗粒，显微镜下红细胞分散存在，无凝集靠拢现象为阴性；红细胞出现凝集为阳性。②
凝集强弱程度判断标准：有助于发现A、B亚型，类B抗原。在低倍镜下判断标准见表4-1、图4-2。
【目的】 掌握用盐水介质法进行ABO血型系统(ABO group)正定型(direct typing)的原理、操作方法和结果判断。
【原理】 用已知的IgM类特异抗体（标准血清）与被检红细胞在室温条件下、盐水介质中反应，根据红细胞是否出现凝集现象来测定被检红细胞膜上有无与血型抗体相对应的抗原，从而判断和鉴定被检者的血型。
＋
＋
－
.
图4-3 ABO血型鉴定结果判断
（6）报告方式：正定血型（玻片法） X型。
（7）操作示意见图4-4。
图4-4 ABO血型鉴定正定型玻片法操作示意图
表4-1 红细胞凝集强度判断标准
凝集程度
判断标准
4+
红细胞凝集成一大块，血清清晰透明
3+
红细胞凝集数小块，血清尚清晰
2+
红细胞凝块分散成许多小块，周围可见到游离红细胞
1+
肉眼可见大颗粒，周围有较多的游离红细胞
±
镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞
混合凝集外观(mixed field，MF)
镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍呈分散分布
－阴性
镜下未见细胞凝集，红细胞均匀分布
图4-2 红细胞凝集强度判断标准
（5）判断血型结果：按表4-2、图4-3所列的标准判断。
ABO血型鉴定
4.李：加入A . B血清均发生凝集，说明有A . B 抗原， 所以为AB型血。
ABO血型中的抗原抗体
血型
红细胞膜上所含的抗原
血清中所含的抗体
O A B AB
无A和B A B A和B
抗A和抗B 抗B 抗A 无抗A赵 不凝集 钱 凝集 孙 不凝集 李 凝集
A 现象
B
现象 血型
赵
凝集 A型血
钱
不凝集 B型血
孙
不凝集 O型血
李
凝集 AB型血
实验结果分析
ABO血型鉴定
血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中， 红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗 B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产 生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型 血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中， 观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/ 和B抗原。在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B 抗原而分为A、B、AB、O四型。（见表1）
临床输血检验之ABO血型鉴定
01
02
03
04
A型血
红细胞表面存在A抗原，血清 中存在抗B抗体。
B型血
红细胞表面存在B抗原，血清 中存在抗A抗体。
AB型血
红细胞表面同时存在A和B抗 原，血清中无抗A和抗B抗体
。
O型血
红细胞表面无A和B抗原，血 清中存在抗A和抗B抗体。
ABO血型系统的遗传特性
ABO血型遗传是由父母双方各提供一个等位基因所决定的，因此子女的血型取决于父母双方 的血型。
ABO血型系统是人类血型系统中最常 见和最重要的一个，是根据红细胞表 面是否存在A或B抗原而将血液分为四 种类型：A型、B型、AB型和O型。
ABO血型系统的抗原和抗体是天然存 在的，不会因为疾病或药物而改变。
ABO血型系统是由一对等位基因所决 定的，这些等位基因分别被称为A、B 和O。
ABO血型系统的分类
标准化和自动化
01
02
03
标准化操作
制定ABO血型鉴定的标准 化操作流程，确保不同实 验室之间的检测结果具有 可比性和准确性。
自动化设备
研发和推广自动化血型鉴 定设备，减少人为误差， 提高检测效率。
质量控制
加强实验室内部和外部的 质量控制，确保检测结果 的准确性和可靠性。
临床应用前景
个体化医疗
随着个体化医疗的发展， ABO血型鉴定在疾病预测 、诊断和治疗方面的应用 将更加广泛。
2023 WORK SUMMARY
临床输血检验之abo 血型鉴定
REPORTING
目录
• 临床输血检验之abo血型鉴定概述 • ABO血型鉴定的原理和方法 • ABO血型鉴定的临床意义 • ABO血型鉴定的注意事项 • ABO血型鉴定的未来发展
简述abo血型鉴定的基本过程
简述abo血型鉴定的基本过程
Abo血型鉴定是检测各种血液中的抗原物质或抗体物质，从而判断患者究竟是A型血或B型血的一种诊断过程。
Abo血型鉴定的基本过程如下：
1. 采集样本：采集血液样本，作为Abo血型鉴定的样本。
2. 抗体和抗原识别：通过识别血液样本中的抗体和抗原来对血型进行判断。
3. 抗体和抗原检测：使用抗原检测抗血清（ABO），A1，B，D等抗原性检测抗体，以及Rh血型的抗体检测。
4. 鉴定结果：最后根据检测结果，我们可以确定患者的Abo血型。
Abo血型鉴定是一个简单的过程，但也有一定的风险，比如出现错误的血液样本，误诊等，因此应该格外小心。
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红细胞ABO血型鉴定
实验原理：
• 抗体分子在相邻的细胞表面抗原决定簇之 间搭桥，使之形成肉B试剂血清 2、5%的A型、B型及O型试剂红细胞悬液 3、受检者血清 4、5%的受检者红细胞悬液
实验方法：
• 5%的受检者红细胞悬液制备：取少量受检 者红细胞（约0.2~0.5 ml）用生理盐水洗涤 3 次，然后加入适量生理盐水调配成 5% 浓 度。
实验方法：
• （一） 玻片法 • 1、 正定型： • （ 1 ）取玻片 1 张，用记号笔在玻片左上角 标记“抗A”，右上角标记“抗B”。 • （2）先按标记分别加试剂血清抗A、抗B各 1滴，再在抗A、抗B血清中各加1滴受检者 红细胞悬液，充分摇动、混合， 10 分钟后 观察结果。
实验方法：
• （二） 试管法： • 1、 正定型： • （ 1 ）取洁净小试管（10mm×60mm ） 2 支，标记 “抗A”“ 抗B” ，用滴管分别加入相应的分型血清各 2 滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者 5% 红 细胞悬液1滴，混合。 • （2） 立即以1000rpm离心1分钟或3000rpm离心 15秒。 • （3） 轻轻扣动试管底部，观察有无凝集（溶血） 现象，如有必要在显微镜下观察凝集。
7.有细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集。
8.血清中有意外抗体，如自身抗Ｉ，常干扰定型。 9.老年人血清中抗体水平大幅度下降。
微柱凝胶血型卡法：
• 微柱凝胶血型卡即可检测红细胞表面的抗 原，又可检测血清中的抗体。
实验结果：
• ABO血型正反定型结果:
• 血 型 • O • A • B • AB 正定型 抗A 抗B — — + — — + + + 反定型 A细胞 B细胞 O细胞 + + — — + — + — — — — —
思考题：
1、 ABO血型正反定型不一致的主要原因有哪些？
一般有技术问题或红细胞和血清本身问题，常见以下几种原因。 1.离心速度及时间不合适。 2.红细胞悬液过浓或过淡，抗原抗体比例不适当，使反应不明显误判为阴性反应。
3.受检者红细胞上抗原位点过少（如亚型）或抗原性减弱（如白血病或恶性肿瘤）等。
4.受检者血清蛋白紊乱（高球蛋白血病）或试验时温度过高，常引起细胞呈缗钱状排列。 5.受检者血清中缺乏应有的抗Ａ或抗Ｂ抗体，如丙种球蛋白缺乏症， 6.各种原因引起的红细胞溶解，误判为不凝集，部分溶血时，可溶性血型物质中和了相应的抗体。
注意事项:
• 1． 试验用血清和试剂红细胞都应标准化。 • 2． 所有试管都要标记，不要依靠用染料标记血清。 • 3． 因盐水反应性（IgM型）抗体属冷反应性抗体，因此试验温度不 要高于室温（20~24摄氏度）。 • 4． 一般应先加血清，然后再加红细胞悬液，以便核实是否漏加血清。 • 5． 要在光亮的背景下观察凝集。 • 6． 观察后立即记录结果。 • 7． 可使用光镜检查小的凝集。 • 8． 应注意观察凝集强度，有助于A、B亚型的发现。
实验方法：
• 2、 反定型： • （1）取洁净小试管（10mm×60mm）3支，分别 标明Ac、Bc、Oc，用滴管分别加入受检者血清1 滴于试管底部，再分别以滴管加入 5% 的 A 型、 B 型及O型试剂红细胞悬液1滴，混合。 • （ 2 ）立即以 1000rpm 离心 1 分钟或 3000rpm 离心 15秒。 • （3）轻轻扣动试管底部，观察有无凝集（溶血） 现象，如有必要在显微镜下观察凝集。