张汝根科研成果统计

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教学型高校科研促教学的管理机制研究

这已是不争的事实。
２我国教学型高校科研现状
教学型高校的科研投入比较大，表现在：（）政策投入。学校激励政策明显向科研倾斜。为调动１广大教师的积极性，高校制定了多种激励政策，仔细分析激励条件，基本上是科研取向。如国家级、省级特聘教授，校内特聘岗位，学科带头人等各类拔尖人才的遴选，研成果科几乎是唯一的条件。此外，教师的职称晋升，科研实际上是决定因素；年终考核，科研为 “ 票否决 ” 一，没有科研成果考核则不合格，教学再优秀也于事无补。拔尖人才的遴的导向作用是十分强大的。（）经费投入。高校科研在经费和物质上的投入可谓不２计成本。一所地方高校，仅重点学科建设经费一项每年逾千万，而教学业务费年生均不过５０元，万人学校每年不超过０５０万元。为博士点、硕士点审批，为科研项目立项，学校０设立专项攻关经费。高校内部科研投入名目繁多，有科研设备费，纵、横向课题匹配经费，科研获奖匹配经费，著作论文奖励，校内科研基金和课题立项等。（）精力投入。由于科研在学校发展中的特殊地位与作３用，学校领导的大量精力用来考虑科研工作。由于精神激励与物质激励政策的导向，每一个教师，无论是公共课教师还
教学中心地位没有落实。教学型高校只能有一个中心，即教学中心，教学工作的地位在学校不容置疑。然而，学校学生人数多，教师教学负担重不等于教学就是处在学校中心的位置。现实情况是，在相当多的教学型高校中科研与教学之间存在尖锐的矛盾，教学明显处于下风。由于教学与科研相比本身就处于弱势，加上学校对科研的多方倾斜，科研对教学冲击很大，以教学为中心成了一句空话，具体表现在以

我校六项科研成果获福建省科学技术奖

ｒｂｉ．ａｂｔｓ
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３９
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2010年度国家科技进步奖初评通过项目目录(通用项目)

司，国电科技环保集团山东龙源环
保有限公司，中环（中国）工程有
限公司
江苏省
36 肠功能障碍的治疗
黎介寿，李宁，任建安，李幼生，南京军区南京总医院朱维铭，李秋荣，李元新，赵允召，王新颖，江志伟，王新波，彭南海，倪元红，王革非，范朝刚
江苏省
37 水稻重要种质创新及其应用
钱前，朱旭东，程式华，曾大力，中国水稻研究所杨长登，郭龙彪，李西明，胡慧英，曹立勇，张光恒
耕作关键技术与装备的开发和张学敏，张建中，赵举，赵士杰，古农业大学，内蒙古自治区农牧业治区
应用
王洪兴，阿力戈代·贾库林
机械技术推广站，内蒙古大学，中
国农业大学，宁夏回族自治区农业
机械化技术推广站，新疆维吾尔自
治区农牧业机械化技术推广总站
12 面向节能的复杂配电网监测控张化光，杨东升，孙秋野，王占山，东北大学，辽宁省电力有限公司沈
及应用
田志军，王洪峰，柴文君，周艳君，所
仇华吉，刘文兴
2
20 轻量化整体构件内高压成形技苑世剑，刘钢，王小松，韩聪，
付庄，徐永超
黑龙江省
21 有机废水碳氮硫同步脱除新技王爱杰，任南琪，马放，任立人，哈尔滨工业大学，南昌航空大学，黑龙江省
施诚仁，徐健蓉
上海市
29 多模式部分肝移植关键技术研李宏为，彭承宏，沈柏用，陈拥军，上海交通大学医学院附属瑞金医
究及其临床应用
詹茜，陈皓，邱伟华，邓侠兴，院
周光文，陶然
上海市
30 脊柱畸形三维矫形创新理论与李明，白玉树，朱晓东，杨长伟，上海长海医院
技术及其临床应用
赵颖川，王传锋，苏佳灿，陈自强，

部委级、省科技进步奖成果目录：

西南财经大学1986—2005年荣获部委级、省科技进步奖成果目录：1990年：评当代西方学者对马克思《资本论》的研究（专著）中国经济出版社90.7 主编之一：刘诗白参编：易敏利孙冶方经济科学1990年度著作奖1991年：论劳务总值（论文）《财经科学》88.8 庞皓国家统计局1991年全国统计科学研究优秀成果三等奖资金论（专著）中国金融出版社86.8 曾康霖1991年“光明杯”全国优秀哲学社会科学学术著作二等奖1992年：评当代西方学者对马克思《资本论》的研究（专著）中国经济出版社90.7 主编之一：刘诗白参编：易敏利1992年第二届吴玉章奖金一等奖武陵山区农机科技投入现状分析及对策研究（研究报告）1992农业部科技进步三等奖1993年：深化税制改革与优化资源配置（论文）陈显昭国家税务总局1993年全国税收科学研究优秀成果二等奖武陵山区农机扶贫规划及项目可行性研究（研究报告）谢逢春中国农业部1993年部级科技进步三等奖1994年:重庆市社会科技投入现状分析及对策研究(研究报告) 负责人：黎实主研人员：贾栩重庆市政府1994年重庆市科技三等奖（省级）重庆市社会科技投入现状分析及对策研究(专著) 四川科技出版社1994年负责人：黎实主研人员：贾栩四川省政府1994年四川省科技进步三等奖储备存款大幅增加条件下金融市场的分流作用（论文）殷孟波中国社科院1994年第一届全国青年优秀社会科学成果奖优秀奖我国农业剩余劳动力转移的特点及对策思考（论文）周君玉国家计生委1994年首届中国人口科学优秀成果二等奖大熊猫繁殖期性激素变化规律及人工繁殖的研究（研究报告）彭世媛成都市政府1994年成都市科技进步二等奖（省级）1995年:江油市城区土地定级估价研究(研究报告) 白云升国家土地管理局1995年科学技术进步二等奖双流市城区土地定级估价研究(研究报告) 白云升国家土地管理局1995年科学技术进步三等奖1996年：金库消毒系统中国人民银行1996年度金融科技进步三等奖1997年：现代企业制度论（专著）中国金融出版社96年赵国良1997年中宣部精神文明建设“五个一”工程入选作品奖《中国农业百科全书.农业经济卷》第十分支（工具书）王叔云郑景骥1997年第三届国家图书奖最高奖荣誉奖《中国农业百科全书.农业经济卷》第十分支（工具书）王叔云郑景骥1997年国家新闻出版署第八届全国优秀科技图书一等奖1998年：西藏藏族人口（专著）李永胜周君玉刘家强国家计生委1998年第二届中国人口科学优秀成果二等奖四川藏族人口（专著）李永胜刘家强周君玉国家计生委1998年第二届中国人口科学优秀成果一等奖市场经济与人口流动（论文）周君玉国家计生委1998年第二届中国人口科学优秀成果二等奖中国人口城市化------ 道路、模式与战略选择（专著）刘家强国家计主委1998年第二届中国人口科学优秀成果二等奖论生命表的统计性质与统计检验（论文）李永胜国家统计局1998年第四届全国统计科学技术三等奖中国国内批发物价指数调查统计系统（研究报告）王芸中国人民银行1998年度金融科技进步二等奖对“国有独资、授权经营”现象的反思及改进建议（论文）周殿昆（2）中国社科院1998年蒋一苇企业改革与发展学术基金首届优秀论文奖论男女平等的宪法原则在民事领域内的直接致力（论文）《现代法学》95.6 喻敏中国社科院、共青团中央1998年第二届全国青年优秀社科成果最高奖全闭环矢量控制变频高压调速技术在电梯改造中的开发与应用（研究报告）易良德1998年中国核工业总公司部级科技进步三等奖四川省扶贫投资对策研究(研究报告) 赵曦四川省政府1998年度四川省科学技术进步三等奖四川省个体私营经济发展战略研究（专著）四川人民出版社98年7月主研人员：过杰1998年四川省科技进步三等奖四川省扶贫对策研究（研究报告）主研人员：赵曦1998年四川省科技进步三等奖1999年：评当代西方学者对马克思《资本论》的研究（专著）中国经济出版社90.7 主编：胡代光刘诗白参编：李达昌易敏利全国社科规划办1999年国家社科基金项目优秀成果二等奖二滩经验：我国大型投资项目建设的新路子（研究报告）《经济学家》97年5期刘灿胡小平刘家强中宣部1999年第七届全国精神文明“五个一工程”奖二滩经验：我国大型投资项目建设的新路子（研究报告）《经济学家》97年5期刘灿胡小平刘家强四川省1999年第七届“五个一工程”获奖作品资本经营(专著) 西南财经大学出版社97.12 郭元唏四川省1999年第七届“五个一工程”获奖作品长江流域的环境灾害与经济发展（论文）《世界科技研究与发展》99.4 丁任重中国青年科技论坛一等奖西藏泽当镇、八一镇城区土地定级估价（研究报告）白云升（合作）西藏自治区1999年度科技进步三等奖双流县土地利用总体规划（研究报告）白云升（合作）四川省国土资源厅1999年度科技进步一等奖2000年：社会资金总量分析（专著）西南财经大学出版社99.12 庞皓黎实周光大马骁陈斌国家统计局2000年第五届全国统计科研优秀成果二等奖中国21世纪发展与生育政策研究-----四川省（研究报告）刘家强李永胜国家计生委2000年科技进步二等奖西藏自治区山南地区、林芝地区土地定级估价（研究报告）白云升西藏自治区2000年科技进步三等奖2001年：中小城市土地定级估价模式研究（研究报告）白云升2001年四川省科技进步二等奖四川省双流县土地利用总体规划（研究报告）白云升2001年国土资源部土地利用规划优秀成果二等奖西南财经大学1986—2005荣获四川省社科奖成果目录：西南财经大学荣获1986年四川省第二次哲学社会科学优秀科研成果奖目录共11项，其中1项为参研成果一等奖（1项）1、社会主义所有制研究(专著) 上海人民出版社85年刘诗白二等奖（5项）2、金融理论问题探索(专著) 中国金融出版社85.10 曾康霖3、论社会主义国家与国营企业关系的二重性(论文)《中国社会科学》85.1 赵国良郭元唏4、攀西地区近斯规划方案(内部建议)省攀西国土规划课题组 85年初通过鉴定报省政府和国家计委启用甘永沛周世廉(参研) 何传贵王槐洲王建5、马克思主义政治经济学的产生(专著)上海人民出版社85.8 李善明周成启6、英汉经济词汇(工具书) 中国社会科学出版社84年赖敏贞扬祈熙李森贻谢敏邓本中董庸三等奖（4项）7、论农产品统派购制位的改革(论文) 《财经科学》85.4 王叔云8、关于指导性计划的几个问题(论文) 《财经科学》85.4 雷起荃9、人口经济学概说(专著) 四川人民出版社85.9 吴忠观10、《资本论》难句解(专著) 四川大学出版社85.10主编：刘诗白副主编：林圃杨克强游联璞海宇东荣获1988年四川省第三次哲学社会科学优秀科研成果奖目录(1986—1987)共12项一等奖（1项）：1、资产阶级古典党派货币银行学说(专著) 中国金融出版社86年曾康霖二等奖（1项）：2、中国工业经济结构研究(专著) 四川大学出版社87年吴歧山赵国良三等奖（10项，其中3项为参与）3、对进一步改革的几个问题的思考(论文) 《经济体制改革》86.4郑大平李建勇（参与）张大明张煜任栋（参与）4、中国发展阶段若干问题的研究(系列论文)《中青年经济论坛》86.5 刘军曾巩张大明竺国平5、社会消费经济学(专著)四川科技出版社87年冯天才郑邦才黄理益黄宗捷6、责任会计与财务会计单轨核算法(专著) 西南财经大学出版社87年四川省轻工厅西南财经大学四川省轻工业会计学会主研：税显光（参与）赵邦森张劼许必建李国俊7、货币本质新探(论文) 《南开学报》86.2 曹廷贵8、论《剩余价值理论》的研究起点(系列论文)《经济科学》87.3 《马克思主义研究》87.4 李善明杨致恒9、唐诗论文集续集(专著) 上海古籍出版社87年刘开扬10、人口学100题(工具书) 四川科技出版社87年杨成钢张俊良11、消费经济学(译著) 西南财经大学出版社86年邓本中李兆国李大成12、波浪式发展规律研究（专著）上海人民出版社1987年彭泽农林圃（参与）荣获1990年四川省第四次哲学社会科学优秀科研成果奖目录(1988—1989)共9项，其中1项为参与成果一等奖（1项）：1、中国人口.四川分册(专著)中国财经出版社88年刘洪康赵世利吴忠观马延华二等奖（3项）：2、马克思货币金融学说原理(专著)西南财经大学出版社89年何高著曾康霖曹廷贵喻大康3、财政信贷与宏观经济调节(专著)中国财政经济出版社89年许廷星张合金朱明熙4、广元市经济发展战略研究综合报告(研究报告)《广元建设方略》西南财经大学出版社89年过杰龙光俊崔新桓杨超群丁家学三等奖（5项，其中1项参与）：5、《国民财富的性质和原因的研究》提要(编著)西南财经大学出版社89年柴詠6、财务调节与控制(专著) 西南财经大学出版社88年郭复初7、抗日战争时期国民政府财政经济战略措施研究(专著)西南财经大学出版社88年刘秋篁崔国华刘方健袁运福蒋德辉8、关于缓解当前大中型企业资金紧缺困难的对策建议(内部调研报告)朱凤纪马青青曾康霖（参与）屈信濂舒伯鸾9、建立稳定的粮食供给机制及实现途径(论文)《经济研究》89.4 雷起荃胡小平徐芳葛云伦陈健生荣获1992年四川省第五次哲学社会科学优秀科研成果奖目录(1990—1991)共12项，其中4项为参与成果一等奖（1项）：1、人口理论(专著)西南财经大学出版社91年刘洪康吴忠观周君玉王茂修二等奖（2项）：2、资金论(专著) 中国金融出版社90年曾康霖3、投资膨胀论(专著) 西南财经大学出版社91年张合金三等奖（9项，其中4项为参与）：4、城市土地制度改革研究(专著) 四川人民出版社90年赵怀顺黄荣武冯忠容杨灿智(参著) 廖显赤5、在国有企业内部先搞活一块——通过新质扩张最终搞活国有企业（论文）《中国企业报》91.9 朱芬吉赵国良（参与）6、中国会计管理模式研究(专著)西南财经大学出版社90年毛伯林赵德武7、对成本基本理论若干问题的研究(论文)《90年成本管理论文集》北京经济研究出版社91年林万祥干胜道8、地方财政学(专著)中国经济出版社90年杨学义汪叔九（参与）程谦（参与）9、深化税制改革与优化资源配置(论文) 《财经科学》90.3 陈显昭10、人——企业之本(专著) 西南财经大学出版社91年熊振邦李诗勇左强（参与）郭传贵包庆云11、四川人口地理(专著)西南财经大学出版社90年张芳笠曾祥益张炜刘家强潘林12、学校党的工作(专著) 四川辞书出版社1990年王永锡李春富荣获1994年四川省第六次哲学社会科学优秀科研成果奖目录(1992—1993)共15项，其中3项为参与成果荣誉奖（1顶）：1、中国控海关税收和分配统计（1861—1910）（编著）中华书局92年汤象龙一等奖（1项）：2、产权新论（专著）西南财经大学出版社93年刘诗白二等奖（1项，为参与）：3、中心城市综合改革论（专著）经济科学出版社92年林凌赵国良（参著）郭元唏杨钢周殿昆三等奖（12项，其中2项参与）：4、经济体制改革新思路（专著）西南财经大学出版社92年丁任重5、社会主义市场经济研究（专著）四川人民出版社92年陶武先李健勇（参著）毛志雄6、国家财务论（专著）西南财经大学出版社93年郭复初7、财政效益论（专著）中国财政经济出版社93年汤保全梁宝柱张合金8、工业经济结构学概论（专著）西南财经大学出版社93年李永禄赵国良马明宗龙茂发何永芳9、当代中国经济大辞库（经济卷）（工具书）中国经济出版社93年王永锡甘本佑过杰涂文涛赵磊10、对当前经济增长的若干看法（论文）《经济研究》93.1 赵磊11、不确定性.代理问题和国家资产产权结构选择(论文)《经济研究》92.12杨晓维12、我国市领导问题研究(专著) 成都出版社92年过杰傅定国李劲13、世界政治经济问题研究（专著）成都科技大学出版社1993年张运城张选智马学元侯德芳（参与）乔哲青14、中华人民共和国在事纪年本末(工具书)四川辞书出版社93年周华虎蒋辅义15、我国人口控制综合效果核算(论文) 《统计研究》93.3 肖立见西南财经大学荣获1996年四川省第七次哲学社会科学优秀科研成果奖目录(1994—1995)共19项，其中4项为参与成果荣誉奖（1项）：1、岑参诗集编年笺注(古籍整理) 巴蜀书社95年刘开扬一等奖（1项，为参与）：2、内陆地区改革开放研究(专著)四川大学出版社95年辛文袁文平(参著)二等奖（2项，其中1项为参与）：3、攀钢:中国钢铁工业的骄傲-----攀枝花钢铁公司发展史论(专著)重庆出版社94年刘茂才郭元唏(参著) 杨钢田焱杨静仪4、我国畜产品产加销一体化研究(专著)西南财经大学出版社95年庞皓张新琴胡小平陈健生徐芳三等奖（15项，其中2项为参与）：5、主体经济论(专著) 人民出版社95年涂文涛张智勇6、社会主义市场经济分析----理论政策运用(专著)西南财经大学出版社94年袁文平杨伯华刘灿程民选杨晓维7、剩余价值理论研究(专著)西南财经大学出版社94年李善明柴詠吴忠观杨致恒8、抗日战争时期国民政府财政金融政策(专著)西南财经大学出版社95年崔国华江林旭缪明扬9、市场经济与农业发展(专著) 中国农业出版社95年吕火明10、经济体制改革中的企业分析(专著) 四川科技出版社94年丁任重11、不平衡发展规律在当代(论文) 《世界经济》95.4 刘崇仪12、商品生产分析(专著) 四川科技出版社95年明安联13、审计理论结构研究(专著) 西南财经大学出版社94年蔡春14、国有经营性资产的经营方式和管理体制(专著) 四川人民出版社94年主编：刘诗白副主编：袁文平参编：丁任重易敏利刘灿程民选15、中国企业跨国经营与战略(专著) 中国发展出版社95年段云程16、国家财务独立与财政理论更新(论文) 《经济学家》95.4 郭复初17、关于社会主义市场经济体制下审计基本理论的研究(论文)《现代审计》95.5 彭政张齐新蔡春张仆刘跃明18、锦秀巴蜀向未来(通俗读物)四川人民出版社95年鲁满保张介寿赵国良(参编) 19、行为科学辞典（工具书）西南财经大学出版社1994年甘本佑冯家禄王金顺萧述祖马渝根西南财经大学荣获1998年四川省第八次哲学社会科学优秀科研成果奖目录(1996—1997)共24项，其中4项为参与成果一等奖（1项）：1、《资本经营》（专著）西南财经大学出版社1997年郭元唏二等奖（3项）：2、《中国东西部市场关系与协调发展》（专著）西南财经大学出版社1997年周殿昆3、《论企业资本及资本经营》、《论企业负债经营》、《论企业融资选择》、《论企业固定资产、流动资金转化为消费基金》（系列论文）《金融理论与实际问题探索》论文集经济科学出版社1997年曾康霖曾立向静岚曾立新4、《现代公司制的产权关系和治理结构研究》（专著）西南财经大学出版社1997年刘灿三等奖（20项，其中4项为参与）：5、《现代市场经济的基本运作与社会主义市场经济体制的构建》（专著）四川人民出版社1997年姜凌（党校）傅泽平龙德灿穆良平(参与) 6、《当代资本主义结构性经济危机》（专著）商务印书馆1997年李达昌刘崇仪(参与) 王小琪陈为汉7、《财务通论》（专著）立信会计出版社1997年郭复初冯建赵德武干胜道伍中信8、《产权与市场》（专著）西南财经大学出版社1996年程民选9、《集约化与经济增长》（论文）《管理世界》1996年第3期王永锡丁任重10、《面向市场转换经营机制-----对长虹、嘉陵等5户股份公司的考察报告》（研究报告）四川证券年鉴（1996年）》人民出版社1996年蒋少龙陈永忠刘顺治11、《我国投资基金发展战略研究》（论文）《金融与经济》1997年第8期纪尽善12、《行政费增长预测模型研究》（论文）内部调研报告1997年印周维莲王一宏郭苏娅滕采模刘家新（参与）13、《财会信息失真的成因及对策研究》（论文）《现代审计》1996年第4期吴长林陈贵华李力（参与）纳鹏杰（参与）林俐14、《关于我国粮食供给保障战略的理论思考》（论文）《中国社会科学》1996年第6期胡小平15、《构建成都“中国西部商贸中心”战略研究》（论文）《经济学家》1997年第3期张剑渝许德昌刘灿16、《资阳市城区土地定级估价》（调研报告）内部调研报告1997年6月印白云升朱晓文朱明仓吕月初李世荣17、《建立现代企业制度过程中企业会计若干问题的研究》（论文）《会计研究》1996年第4期毛伯林何世君唐焕道王吾蔡春18、《人民币国际化理论与实践的若干问题》（论文）《世界经济》1997年第4期姜凌19、《现代企业制度与现代会计和现代审计有关问题的探讨》（论文）《经济学家》1996年第4期蔡春20、《经济增长方式转变与财税政策调整》（论文）《财经论丛》1997年第2期刘蓉21、《经济信息利用学》（专著）西南财经大学出版社1997年董健民邓慧智周刊文舒滔蒋敏22、《人口科学辞典》（工具书）西南财经大学出版社1997年吴忠观周君玉封希德方英仁李永胜23、《国有企业工资分配研究》（专著）西南财经大学出版社1996年甘本佑唐小丁胡小平申晓梅李萍24、《我国中小城市发展模式研究》（论文）《经济体制改革》1996年第2期过杰陈永生吴火星西南财经大学荣获2000年四川省第九次哲学社会科学优秀科研成果奖目录(1998—1999)共23项，其中1项为参与成果一等奖（1项）：1．国有资产流失研究（专著）西南财经大学出版社99.12 赵一锦刘军张宁俊吕先锫罗济沙二等奖（5项）2．社会资金总量分析（专著）西南财经大学出版社99.12 庞皓黎实周光大马骁陈斌3．中国财政货币政策协调配合研究（专著）西南财经大学出版社99.12 刘锡良曾康霖陈斌4．投资区位论（专著）西南财经大学出版社99.12 武一5．经济全球化趋势下的南北经济关系（专著）四川人民出版社99.10 姜凌6．中国金融风险研究（专著）西南财经大学出版社99.12 殷孟波三等奖（17项，其中1项为参与）：7．当代跨国公司论（专著）西南财经大学出版社99.7 尹忠明8．语意、辨明与实用主义——普特南哲学研究（专著）西南财经大学出版社98.12 幸强国9．营销决策——企业家的市场思辨与经营方向（专著）西南财经大学出版社98.8 曾国安10．论中国农产品流通体系建设（专著）西南财经大学出版社99.9 刘成玉11．中国西部地区经济发展研究（专著）四川人民出版社99.8 赵曦12．财务专论（专著）立信会计出版社98.8 郭复初冯建伍中信何家明彭韶兵13．中国国有企业制度创新研究（专著）西南财经大学出版社99.8 戴歌新14．荥经经济跨世纪发展战略研究（研究报告）荥经县政府98.12 许德昌等15．四川省农村剩余劳动力转移和城市化问题研究（研究报告）四川省体改委《研究报告》98.7 过杰吴火星王波16．理顺个人收入分配关系的对策研究——一个以公平取向的政策周期的到来（论文）《财经科学》99.5 尹庆双17．实证会计研究方法——评价及其在中国运用前景的展望（论文）《中国会计与财务发展回顾与前瞻》牛津大学出版社99年蔡春18．四川当前经济形势分析及全年经济发展预测（论文）四川省委、省政府采用1999年8月印赵国良等19．优化增值税制度的构想（论文）《中央财经大学学报》99.3 刘蓉20．消费需求制约经济增长的机理及影响（论文）《经济学家》99.5 王裕国21．对侵权行为法中过错问题的再思考（论文）《民商法论丛》第九卷法律出版社98年喻敏22．《民族区域自治法》实施保障问题研究（论文）《西南民族学院学报》98.5岳彩申23．论我国西部市场体系的培育（论文）《四川大学学报》（哲社版）98.4 张克俊陈健生（参与）。

西非北部被动陆缘盆地油气地质特征与勘探方向

第１１卷　第２期中　国　地　质　调　查Ｖｏｌ．１１　Ｎｏ．２２０２４年４月ＧＥＯＬＯＧＩＣＡＬＳＵＲＶＥＹＯＦＣＨＩＮＡＡｐｒ．２０２４ｄｏｉ：１０．１９３８８／ｊ．ｚｇｄｚｄｃ．２０２４．０２．０３引用格式：田纳新，王大鹏，郑求根，等．西非北部被动陆缘盆地油气地质特征与勘探方向［Ｊ］．中国地质调查，２０２４，１１（２）：１７－２７．（ＴｉａｎＮＸ，ＷａｎｇＤＰ，ＺｈｅｎｇＱＧ，ｅｔａｌ．ＧｅｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎｄｅｘｐｌｏｒａｔｉｏｎｄｉｒｅｃｔｉｏｎｏｆｏｉｌａｎｄｇａｓｉｎｔｈｅｐａｓｓｉｖｅｃｏｎｔｉｎｅｎｔａｌｍａｒｇｉｎｂａｓｉｎｓｉｎｔｈｅｎｏｒｔｈｅｒｎｐａｒｔｏｆＷｅｓｔＡｆｒｉｃａ［Ｊ］．ＧｅｏｌｏｇｉｃａｌＳｕｒｖｅｙｏｆＣｈｉｎａ，２０２４，１１（２）：１７－２７．）西非北部被动陆缘盆地油气地质特征与勘探方向田纳新１，王大鹏１，郑求根２，杨光庆１（１．中国石化石油勘探开发研究院，北京　１０２２０６；２．中国地质大学（北京），北京　１０００８３）摘要：西非北部盆地勘探程度较低，但资源潜力巨大。

基于板块构造理论，通过结合地震与地质方法的综合研究，分析了西非北部主要地质时期的原型盆地，对比了各盆地的结构特征及其沉积充填差异性，解剖已发现油气藏，建立成藏模式，指出下一步勘探方向。

研究发现：西非北部被动陆缘盆地群经历了前寒武纪—二叠纪前裂陷、三叠纪—早侏罗世裂陷和中侏罗世至今的陆缘３个演化阶段，形成了断陷型、断坳型和坳陷型３个被动陆缘盆地亚类。

断陷型盆地形成单源－构造型成藏模式，勘探目标以裂谷层系的构造成藏组合为主；断坳型盆地可形成双源－双组合型成藏模式，大陆架上的缓坡带以裂谷层系构造圈闭为主，在台地边缘应寻找礁体和内幕岩溶，陡坡带上部的主要勘探目标应为规模较大的滑动－滑塌形成的斜坡扇，下部应关注成熟烃源岩层系内扇体所形成的上白垩统和下白垩统砂岩构造－岩性圈闭；坳陷型盆地以坳陷层系烃源岩为主，主要勘探对象为陡坡下部的浊积砂岩及台地缓坡三角洲砂体，台地边缘礁滩体、台地碳酸盐岩风化壳岩溶和断裂带岩溶也是值得重视的勘探方向。

2009年科技进步奖获奖项目

2009年科技进步奖获奖项目一等奖（17项）1.低渗透油藏增产增注工艺技术研究（长庆油田分公司第二采油厂石道涵金正谦蒋志辉顾燕凌刘运强樊红旗杜春龙何举涛何志英王飞刘小林郭超）2.冬小麦新品种陇育1号（陇东学院农林科技学院张成孟建军刘自成杨虓施万喜乔岩豆新社胡俊仕）3.食用葵良种繁育与示范推广(环县农业技术推广中心刘生瑞陈彦锋吴恩平郭满平王俊辉张锦锋胡爱莲张建军潘巧芝张贵曦刘敏敬缠琴马治勇)4.干旱冷凉山区玉米丰产栽培技术示范(华池县农业技术推广中心李可夫陈继录王玉杰缪会颖方明金王聚荣王琦陶兴忠曹亚锋李建霞郭肖兰)5.正宁县无公害大葱标准化示范区(正宁县蔬菜生产工作站张建峰梁继龙郭治山高占祥王汪洋张华瑞)6.陇东塬区无公害苹果园生态模式研究（陇东学院农林科技学院张玉琴米发杰李登绚王正旭赵爱萍赵晓玲苏雪琴张玉霞张永明任邦来杨艳洲张玉峰张红霞）7.板桥白黄瓜优质高效栽培模式与产业开发研究(合水县蔬菜开发办公室李建军宋恩杰张学斌李军红王福国文惠阁何尚祥李进峰辛仙凤唐亚娟高清龙梁亚丽曹刚)8.岐伯汇考(甘肃省庆阳市中医医院夏小军谢君国张士卿)9.庆阳市新生儿出生缺陷因素研究（庆阳市人民医院李爱萍赵仍萍张瑞英尚宇翔牟小娟黎云李阿丽郭晓红范颖芳）10.先天性心脏病患儿围手术期呼吸功能影响因素及呼吸管理策略（庆阳市人民医院王宏伟白银琪李晖刘晓春段惠萍黄向东葛飞朱小龙）11.健康人与常见慢性病患者耳廓图谱对比研究（甘肃省庆阳市西峰区卫生局李冰晖刘华伟王晓萍龚旺梅刘明仁路莉薛静黄军锋云天斌孙澜芳石永华王磊曹亚红）12.三红止痛喷剂的研制及临床应用研究(庆阳市中医医院任生禄凌峰金军成芳李洁殷建峰荔晓斌曹洁李莉左玉赟吴静华）13.上尿路结石CT值与体外碎石术结石排出率相关性研究(庆阳市人民医院王振运吴金平贾筱君段思栋杨寿辉张志峰罗静赵淑芳曹亚红勾小红郑建龙景琼魏明权)14.庆阳市0-14岁儿童死因流行病学调查及经济损失研究(庆阳市人民医院章贵卿李晓宏虎妍妮杜志荣王文功田小云)15.西峰城区生活饮用水水质五年监测分析及干预措施研究(庆阳市疾病预防控制中心耿慧宝杭小平慕志华尚栋仁王瑾常杰王平王平林罗静何丽丽)16.6BF-100型瓜籽剥壳分离机研制（庆阳市西峰伟力机械厂宋振伟刘畅李伯堂任惠玲肖春友王祺）17.2BP—2型玉米铺膜点播机示范推广（庆阳市农机化技术推广站杨汉卿张建荣刘万里王庆冬韩建军孙丽静李彩霞赵亮高小萍）二等奖（34项）18.环县-元城地区侏罗系成藏规律研究(长庆油田分公司第二采油厂张荣彬李建霆何善斌王丽俄丽华刘美荣余永进李小军王胜华)19.侏罗系油藏污泥调剖技术研究（长庆油田分公司第二采油厂潘宏文马国良张力王小娟李亚洲李庆荣同晓霞南天界赵晓红）20.9GC-50型自走式草灌类收割机（环县海明农技科研有限公司刘清海赵菊莲陈丽莉李德玺张亚萍刘芯利）21.抗疏力技术在黄土高塬上的应用（陇东学院土木工程系甘肃瑞斯抗疏力技术工程有限公司刘万锋胡爱萍金积钧吴彦鹏吴旭谦张振宁史正斌孙波）22.自来水管网终端水质净化器(庆阳市科技开发中心左鹏贵余建明杨亮怀杨德玺王莉萍张仲华张丽霞张新锋)23.旱地冬小麦新品种宁麦5号选育（宁县湘乐镇农技站罗盘杨虓乔培林赵菊莲）24.优质烤烟新品种选育与示范(庆阳市烟草生产管理局李生浩贾兴瑞付金元帅哲元宋彦峰梁菊明李博许新文王军锋)25.优良树种文冠果的开发与栽培技术研究(庆阳市林木种苗管理站席忠诚张宝芝马杰何春艳朱月鹏夏华曹思明李华峰谌军)26.环县无公害荞麦标准化示范区建设(环县农业技术推广中心刘生瑞吴恩平陈彦锋白宏鹏常丽君杜霄樊春霞刘彩琴胡琼艳)27.子午岭林区铅笔柏引种繁育试验示范(华池林业总场南梁林区胡庆峰马德辉田富连念永超王珺郭晋宏田富强)28.董志塬节水灌溉配套技术示范推广（庆阳市星火技术公司马戈华常永旺张占军寇娟霞陈杰金永谋赵晓玲贾佩玲）29.饲用“树篱”形四倍体刺槐造林技术研究（甘肃省庆阳林校庆阳市国营湘乐林业总场罗山府林场戴兴隆白应统刘润元定光凯定明谦贾随太翟晓峰）30.优质紫花苜蓿品种引选及丰产栽培技术研究（陇东学院农林科技学院曹宏章会玲马永祥陈红方刚韩霁光张富忠赵世涛雷耀华）31.重型颅脑损伤大骨瓣减压术前后TCD参数变化的临床研究(甘肃省庆阳市人民医院李争民肖哲王长平江红梅米洁袁永睿闫小勇左万贵)32.庆阳市结核病控制研究(庆阳市疾病预防控制中心曹慧洁尚栋仁曹同民高菁桉胡兴亚李嫣婷石怀禄祁向峰李崇高)33.胆可宁丸治疗急慢性胆囊炎临床研究(庆阳市中医医院王正国王小艳王振萍殷建峰董永军张惠珍赵来峰王浩南红)34.胃大部切除术中灌洗及全程护理的研究(庆阳市人民医院金巧梅杨金玲许改玲张仲金路玲索秀萍谢丽萍张晓琴张志峰) 35.会阴骑跨伤后应激障碍相关研究(庆阳市人民医院吴金平王振运李晓宏杜志荣郑建龙景琼魏明权王春娟段思栋)36.纳洛酮血肿腔内注射治疗外伤性脑内血肿临床研究(庆阳市人民医院肖哲李争民王长平杨丽刘颉米洁袁永睿闫小勇左万贵)37.血清心肌酶谱与老年性肺炎心衰相关性研究（庆阳市人民医院仵燕妮赵文治蔺金军席维岳贺兴峰杨粉琴毛富吉李娟付旭东）38.围手术期应用止血药物与下肢骨折术后深静脉血栓形成的相关性研究(庆城县岐伯中医医院侯世文张建功杨德祥徐国升陈宇宏樊庆玲邓雪宁惠敏)39.痛灵酊在骨关节损伤及痛症中临床应用研究(庆城县人民医院郝建湖刘峰杨德祥邢炜张淑蓉高振东寇治军张明东肖洲) 40.益肾化浊汤治疗早期糖尿病肾病的临床观察(庆阳市老年保健医院张世龙宏亚丽刘改霞徐国升张海宏邓农李永刚王慧郭来运）41.庆阳市城区在校高中、大中专学生心理现状调查及精神心理疾病影响因素研究(庆阳市老年保健医院袁岳鹏袁小红宏亚丽包戈华白衡蔓陈访杰朱瑛张黎明完颜长旭)42.插式分体搬移装卸患者平车的研制与临床应用(庆阳市中医医院唐秀琴朱丽娟任生禄赵淑芳张鑫智左玉赟李洁史春红)43. 微创磁力声控导航系统在股骨交锁髓内钉中的应用研究(庆阳市人民医院路黎明张晓越刘亚琳贺志强魏志芳李永斌兀效儒席彩琴韩绒惠)44.环县乡镇企业职业卫生现状调查及干预措施研究（环县卫生局卫生监督所徐万军耿慧宝苏振琴赵德柱慕克武）45.双蛇饮治疗痹证临床研究（宁县中医医院马俊林张世杰左汉宁惠成新豆建荣刘新科刘改霞赵继祖陈会荣）46.庆阳市十年无偿献血状况分析及对策研究(庆阳市中心血站豆喜娥李克举李飞张飞燕冯文婷张小霞姚小英)47.黑热病实验诊断学及其临床运用研究（环县人民医院蔺金军袁鸿瑞仵燕妮刘明仁魏军龙毛富吉苏学琴）48.新生儿窒息与脐血CO2-CP、血糖水平关系的临床研究(庆城县人民医院刘晓春刘晓妮孙燕段莉萍李彦梅齐彩茸何文璐黄丽杰)49.健康教育方式与糖尿病患者生活质量关系研究（庆阳市人民医院杨金玲许改玲金巧梅席彩琴郭晓琴岳秀梅）50.自制工字型外展支具在髋部骨折护理中的应用(庆阳市人民医院席彩琴张晓越强凌云杨金玲贺志强段惠萍路黎明刘亚琳代凌云)51.蔬菜新品种引进试验示范(庆阳市西峰区农牧局冯建全赵晓玲张占军任惠玲任邦来梁樱刘志锋郭俊华马成哲)三等奖（3项）52.三叠系油藏稳产技术对策研究(长庆油田分公司第二采油厂杜寻社石道涵苏天国李兆明杨文华周小平王联国)53.陇东长6-7资源评价及建产有利区筛选(长庆油田分公司第二采油厂李建霆佟晓华张丽云段小晨余永进俄丽华朱晓燕)54.平荞2号引进试验示范(华池县农业技术推广中心赵彦垠李晓莉庞占琴刘云成封芳琴张彩霞杨焕玲)。

国际经济与贸易专业建设方案

国际经济与贸易专业建设方案一、基本情况国际经济与贸易专业是我院唯一的经济学科下的一级学科—应用经济学下设的专业，特别是在我国入世后，国际经济与贸易专业已成为经济学科内最热门的专业之一，因此，该专业对我院的专业建设具有举足轻重的地位。

2、该专业国内情况该专业大部分设在经管学院，能独立成为国际经济与贸易学院的较少。

在我省有国际经济与贸易专业的高校主要为哈尔滨工业大学（有硕士点）、哈尔滨商业大学（有硕士点）、黑龙江大学（有硕士点）、哈尔滨理工大学。

在国内具有国际经济与贸易专业本科的院校较多，大部分为新上专业，师资力量除一些文科院校如财经类院校等较强外，其他理工类的院校如辽工大等普遍师资力量薄弱，师生比例超标，处于专业建设的过程中，许多院校采取了专业立项制度，将任务落实到人,取得了较好的效果。

该专业的发展建设是在我国加入世界贸易组织后的背景下进行的，入世后国内掀起了经济发展的热潮，各高校为适应这种形式，都开始加快了经济学科建设的步伐，经济学科门类下的经济学、国际经济与贸易、金融学、财政学专业都成为了当今的热门专业，而其中最热的为国际经济与贸易专业，在高考报考中仅次于生物工程专业，但由于种种历史原因，国内在国际经济与贸易专业具有优势的高校很少，都处于起步发展阶段。

就拿我院为例，我院在2002年申报成功国际经济与贸易专业后，首次招生（2003年）突破13个班达391人，2004年招生突破15个班达450人，同时该专业也成为我院唯一的经济学科门类下的专业，本专业的特点是能很好地适应我国入世的需求，注重学生在掌握本专业系统的理论知识，基本技能及相邻专业基本知识的基础上，加强国际贸易的实践能力和实际动手能力的培养，使学生具有独立获取知识，提出问题、分析问题和解决问题的能力，最终将学生培养成为既能从事本专业又能从事相邻专业工作的复合型、应用型和创新型的人才。

二、建设目标评估合格三、建设内容1、人才培养目标要求学生掌握国际经济与贸易学基本理论和技能，熟悉国际经贸规则和惯例，熟悉中国对外经贸政策和法规。

生物酶完井液的研究及在低渗油气田的应用

种重要手段。通过室内试验优选了酶的种类和酶的质量分数，察了ｐ值对酶解过程的影响，考Ｈ并分析了生物酶
降解聚合物的机理。以疏水缔合聚合物Ａ１生物完井液的增黏剂，过正交试验确定了生物完井液的配方。Ｘ一为通
生物酶完井液的研究及在低渗油气田的应用
于雷，张敬辉，公让，张虹，李斌李
（国石化胜利石油管理局钻井工艺研究院，东东营２７１）中山５０７
摘
要：非射孔完井水平井的滤饼堵塞是影响油井产量的重要因素，用生物酶降解聚合物是清除滤饼的一利
对研制的生物酶完井液进行了钻井液黏度降低率评价、泡滤饼试验和油层保护试验。试验结果表明，浸生物酶对
Hale Waihona Puke 聚合物具有较强的降解作用，生物酶完井液清除滤饼效果良好，渗透率恢复率均达到８以上，５具有良好的油层保
护能力。现场应用表明，生物酶完井液具有良好的解堵作用，以显著提高低渗油气田的单井产量。选择合适的可生物酶可以有效清除不同钻井液的滤饼，高油气层保护效果。提关键词：生物酶生物降解完井液防止地层损害泥饼清除
第４卷第３期Ｏ
２１Ｏ２年５月
石油钻探技术ＰＥＴＲ（ＩＥ）ＵＭＤＲＩＩＮＧＴＥＣＨＮＩＩＩＱＵＥＳ
Ｖｏ．０ＮＯ３１４．

活性氧在密旋链霉菌Act12诱导丹参毛状根中丹参酮积累中的作用

活性氧在密旋链霉菌Act12诱导丹参毛状根中丹参酮积累中的作用作者前期研究成果显示密旋链霉菌Act12可以上调丹参酮生物合成途径上的关键酶基因的表达大幅提高丹参毛状根中丹参酮含量。

该实验则进一步研究了活性氧在Act12诱导丹参毛状根中丹参酮积累的作用。

在继代培养21 d的丹参毛状根中添加Act12不同的诱导子及诱导子组合，分别测定不同收获期毛状根的生物量，毛状根中活性氧积累量，丹参酮类成分的积累量和关键酶基因表达量。

Act12诱导后丹参毛状根中活性氧含量上升，HMGR和DXR基因表达上调，最高分别达到对照的32.4，4.8倍，毛状根中丹参酮积累增加，最高达到对照的10.2倍；加入活性氧抑制剂CAT和SOD后，丹参毛状根中的活性氧含量较Act12处理显著下降，HMGR和DXR基因表达也明显下降，毛状根中丹参酮含量较Act12处理下降了74.6%。

活性氧介导了Act12诱导丹参酮积累，Act12很可能是通过ROS信号通路激活了MV A和MEP途径，从而提高了丹参酮在毛状根中的含量。

标签：丹参毛状根；活性氧；密旋链霉菌Act12；次生代谢；3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶；1-脱氧-D-木酮糖-5磷酸还原异构酶[基金項目] 国家自然科学基金项目（81373908）；陕西省重大产业集群荐项目（2012KTCL02-07）2条代谢途径被认为参与了丹参酮的合成，1条是存在于胞质的甲羟戊酸途径（MV A），1条是存在于质体的2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸（MEP）途径。

3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMGR）是MV A途径上的关键酶，其催化从3-羟基-3-甲基戊二酰到甲羟戊酸的过程；1-脱氧-D-木酮糖-5磷酸还原异构酶（DXR）是DXP途径的上的关键酶，其使1-脱氧-木酮糖-5-磷酸原子重排和还原生成MEP[10-11]。

活性氧（reactive oxygen species，ROS）包括超氧阴离子（O2-），过氧化氢（H2O2），羟基自由基（HO·）等。

运用BioID技术筛选水稻GS3互作蛋白

㊀Ｇｕｉｈａｉａ㊀Ｊｕｎ．２０１８，３８（６）：７７１－７８０ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｕｉｈａｉａ－ｊｏｕｒｎａｌ．ｃｏｍＤＯＩ：１０．１１９３１／ｇｕｉｈａｉａ．ｇｘｚｗ２０１８０３０１７引文格式：杜荣裕，周泽娇，冯嘉琳，等．应用ＢｉｏＩＤ技术筛选水稻ＧＳ３互作蛋白［Ｊ］．广西植物，２０１８，３８（６）：７７１－７８０ＤＵＲＹ，ＺＨＯＵＺＪ，ＦＥＮＧＪＬ，ｅｔａｌ．ＳｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎｓｏｆＧＳ３ｉｎｒｉｃｅｕｓｉｎｇＢｉｏＩＤ［Ｊ］．Ｇｕｉｈａｉａ，２０１８，３８（６）：７７１－７８０运用ＢｉｏＩＤ技术筛选水稻ＧＳ３互作蛋白杜荣裕，周泽娇，冯嘉琳，刘㊀赛，阳辉勇，李洪清∗（华南师范大学生命科学学院广东省植物发育生物工程重点实验室，广州５１０６３１）摘㊀要：水稻异源三聚体Ｇ蛋白系统中的非典型γ亚基ＧＳ３，是一个控制籽粒大小的主效数量效应基因座，在调节籽粒大小中发挥负调控因子的功能㊂ＢｉｏＩＤ（ｐｒｏｘｉｍｉｔｙ⁃ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｂｉｏｔｉｎｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ）为邻近蛋白标记技术，其工作原理是生物素连接酶能使其周围的蛋白带上生物素，同时生物素又能和链霉亲和素紧密结合，所以能够利用链霉亲和素偶联的磁珠富集目标蛋白㊂该技术具有灵敏㊁高效和周期短等特点，为筛选互作蛋白提供了新方法㊂为了解析ＧＳ３的蛋白调控网络，该研究以水稻原生质体为材料，采用ＢｉｏＩＤ技术对ＧＳ３在水稻中的互作蛋白进行了筛选㊂Ｗｅｓｔｅｒｎ⁃ｂｌｏｔ结果表明：融合蛋白ＢｉｒＡＧ⁃ＧＳ３在原生质体中成功表达并生物素化ＧＳ３邻近蛋白㊂使用链霉亲和素磁珠富集生物素化后的蛋白，并进行蛋白质谱测序，获得了与ＧＳ３邻近的可能存在直接或间接互作的蛋白㊂将获得的蛋白进行功能富集与注释，并构建蛋白－蛋白互作网络㊂对部分蛋白进行了ＢｉＦＣ验证，发现ＧＳ３可能与ＩＣＬ㊁ＰＰＤＫ㊁ＲＰＮ７和ＲＨ１５发生相互作用，涉及能量代谢的调节㊁种子淀粉物质的储存㊁泛素－蛋白酶体系统以及凋亡途径等生物过程㊂关键词：ＢｉｏＩＤ，ＧＳ３，水稻，籽粒大小，互作蛋白中图分类号：Ｑ９４３㊀㊀文献标识码：Ａ㊀㊀文章编号：１０００⁃３１４２（２０１８）０６⁃０７７１⁃１０ＳｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎｓｏｆＧＳ３ｉｎｒｉｃｅｕｓｉｎｇＢｉｏＩＤＤＵＲｏｎｇｙｕ，ＺＨＯＵＺｅｊｉａｏ，ＦＥＮＧＪｉａｌｉｎ，ＬＩＵＳａｉ，ＹＡＮＧＨｕｉｙｏｎｇ，ＬＩＨｏｎｇｑｉｎｇ∗（ＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｆｏｒＰｌａｎｔＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ＳｃｈｏｏｌｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＳｏｕｔｈＣｈｉｎａＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６３１，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＧＳ３，ｅｎｃｏｄｉｎｇｔｈｅｎｏｎｃａｎｏｎｉｃａｌγｓｕｂｕｎｉｔｏｆｈｅｔｅｒｏｔｒｉｍｅｒｉｃＧｐｒｏｔｅｉｎｓｓｙｓｔｅｍｉｎｒｉｃｅ，ｉｓａｍａｊｏｒｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｔｒａｉｔｌｏｃｕｓｆｏｒｇｒａｉｎｓｉｚｅｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｒｉｃｅｖａｒｉｅｔｉｅｓ，ｓｅｒｖｉｎｇａｓａｎｅｇａｔｉｖｅｒｅｇｕｌａｔｏｒｉｎｓｅｅｄｏｒｏｒｇａｎｓｉｚｅ．Ｎｅｗｌｙ⁃ｄｅｖｅｌｏｐｅｄＢｉｏＩＤ（ｐｒｏｘｉｍｉｔｙ⁃ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｂｉｏｔｉｎｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ）ｓｙｓｔｅｍ，ｗｈｉｃｈｄｅｔｅｃｔｓｐｒｏｘｉｍａｌｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｖｉｖｏ，ｈａｓｂｅｅｎｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙａｐｐｌｉｅｄｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｐｅｃｉｅｓｆｏｒｉｔｓｆｅａｔｕｒｅｓｏｆｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ｈｉｇｈｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙａｎｄｆａｓｔｓｐｅｅｄ．ＡｎｄｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＢｉｏＩＤｉｓｔｈａｔｔｈｅｂｉｏｔｉｎｌｉｇａｓｅ，ｔｈｅｃｏｒｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔ，ｃｏｕｌｄａｔｔａｃｈｂｉｏｔｉｎｔｏｔｈｅｐｒｏｘｉｍａｌｐｒｏｔｅｉｎｓ，ａｎｄｔｈｅｂｉｏｔｉｎａｌｓｏｃｏｎｎｅｃｔｓｔｉｇｈｔｌｙｗｉｔｈｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ，ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｔｈｅｂｅａｄｓｃｏｕｐｌｅｄｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎｃｏｕｌｄｂｅｕｔｉｌｉｚｅｄｆｏｒｅｎｒｉｃｈｉｎｇｔｈｅｔａｒｇｅｔｐｒｏｔｅｉｎｓ．Ｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ，ｗｅｓｃｒｅｅｎｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｔｅｒａｃｔｄｉｒｅｃｔｌｙｏｒｉｎｄｉｒｅｃｔｌｙｗｉｔｈＧＳ３ｉｎｒｉｃｅｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｓｂｙＢｉｏＩＤｍｅｔｈｏｄ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆＷｅｓｔｅｒｎ⁃ｂｌｏｔｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｆｕｓｅｄｐｒｏｔｅｉｎＢｉｒＡＧ⁃ＧＳ３ｅｘｐｒｅｓｓｅｄａｎｄｂｉｏｔｉｎｙｌａｔｅｄｔｈｅｐｒｏｘｉｍａｌｐｒｏｔｅｉｎｓｏｆＧＳ３ｉｎｔｈｅｐｒｏ⁃收稿日期：２０１８－０４－０４基金项目：国家自然科学基金（３１５７１７５９）［ＳｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ（３１５７１７５９）］㊂作者简介：杜荣裕（１９９２－），男，广东汕头人，硕士，主要从事水稻分子生物学研究，（Ｅ⁃ｍａｉｌ）ｄｕｒｙ＠ｍ．ｓｃｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ㊂∗通信作者：李洪清，博士，教授，主要从事水稻基因工程育种研究，（Ｅ⁃ｍａｉｌ）ｈｑｌｉ＠ｓｃｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ㊂ｔｏｐｌａｓｔｓｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ．ＢｉｏｔｉｎｙｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓｗｅｒｅｅｎｒｉｃｈｅｄｂｙｂｅａｄｓｃｏｕｐｌｅｄｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎａｎｄｔｈｅＭａｓｓＳｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙｓｅ⁃ｑｕｅｎｃｉｎｇｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎｉｔ．Ｔｈｅｎ，ｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎｓｈａｓｂｅｅｎａｎｎｏｔａｔｅｄａｎｄｅｎｒｉｃｈｅｄ，ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｐｒｏｔｅｉｎ⁃ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｇｒａｐｈｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．ＳｏｍｅｏｆｔｈｅｃａｎｄｉｄａｔｅｐｒｏｔｅｉｎｓｗｅｒｅｃｏｎｆｉｒｍｅｄｂｙＢｉＦＣ，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇｔｈｅｐｏｓｓｉｂｌｅｉｎｔｅｒ⁃ａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎＩＣＬ，ＰＰＤＫ，ＲＰＮ７ａｎｄＲＨ１５，ａｎｄｔｈｅｅｎｇａｇｅｍｅｎｔｏｆＧＳ３ｉｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｅｎｅｒｇｙｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，ｓｔｏｃｋｏｆｓｔａｒｃｈ，ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ⁃ｐｒｏｔｅａｓｏｍｅｓｙｓｔｅｍａｎｄａｐｏｐｔｏｔｉｃｐａｔｈｗａｙ．Ｔｈｅａｂｏｖｅｒｅｓｕｌｔｓｗｉｌｌｆａｃｉｌｉｔａｔｅｔｈｅｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｒｅｇｕ⁃ｌａｔｉｏｎｎｅｔｗｏｒｋｏｆｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆＧＳ３．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＢｉｏＩＤ，ＧＳ３，ｒｉｃｅ，ｇｒａｉｎｓｉｚｅ，ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎｓ㊀㊀在动植物中，异源三聚体Ｇ蛋白由α㊁β和γ三个亚基组成，是非常重要的信号调节因子㊂在植物中，异源三聚体Ｇ蛋白的信号通路在生长发育与抗逆生理中起着不可替代的作用（Ｓｔａｔｅｃｚｎｙｅｔａｌ，２０１６）㊂相比哺乳动物异源三聚体Ｇ蛋白信号网络，植物异源三聚体Ｇ蛋白家族成员的数量㊁结构，以及其上游受体，下游效应蛋白的成员组成，乃至整个Ｇ蛋白的循环机制都表现出非典型性（Ｔｒｕｓｏｖ＆Ｂｏｔｅｌｌａ，２０１６）㊂在植物中还没有统一的异源三聚体Ｇ蛋白网络模型，如在拟南芥中发现了一个类似哺乳动物的７次跨膜受体类似蛋白ＡｔＲＧＳ，但在水稻中没有找到７次跨膜同源受体蛋白㊂令人意外的是，水稻中发现了一个１１次跨膜受体ＣＯＬＤ１，与异源三聚体Ｇ一起调节Ｃａ２＋通道，抵御严寒（Ｓｔａｔｅｃｚｎｙｅｔａｌ，２０１６）㊂最新观点认为受体类激酶在Ｇ蛋白信号网络中起首要作用（Ｃｈｏｕｄｈｕｒｙ＆Ｐａｎｄｅｙ，２０１６）㊂异源三聚体Ｇ蛋白中的非典型γ亚基ＧＳ３在水稻谷粒大小调节中起着重要作用，在水稻增产方面展现巨大的潜力㊂非典型的γ亚基由Ｎ端一个保守的γ类结构域㊁预测的跨膜域和Ｃ端半胱氨酸富集结构域组成（Ｂｏｔｅｌｌａ，２０１２）㊂ＧＳ３的γ类结构域负调节谷粒大小，而其Ｃ端的尾部又反过来抑制Ｎ端的功能㊂这导致ＧＳ３蛋白的头尾出现了功能上的博弈㊂ＧＳ３头部功能越强，对谷粒长度抑制越明显㊂当ＧＳ３的γ类结构域突变或者缺失，不能与β亚基形成二聚体发挥作用，谷粒最长；完整的ＧＳ３蛋白尾部抑制γ类结构域的负调控功能，减弱基因效应，粒长中等；当只有γ类结构域，基因所起的抑制效应最强，粒长最短（Ｍａｏｅｔａｌ，２０１０）㊂ＢｉｏＩＤ（ｐｒｏｘｉｍｉｔｙ⁃ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｂｉｏｔｉｎｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ）为邻近蛋白标记技术，该方法可以将物理空间上靠近诱饵蛋白附近的蛋白标记上生物素，用以作为蛋白质互作的证据㊂该技术的核心功能组件是生物素连接酶㊂在大肠杆菌中，生物素连接酶ＢｉｒＡ识别的底物具有特异性，其作用的蛋白包含一段特定的氨基酸序列，并将其生物素化㊂如果将ＢｉｒＡ的１１８位进行突变（Ｒ１１８Ｇ，ＢｉｒＡ∗），会极大降低其识别底物的特异性，其作用的蛋白不需要带有特定的氨基酸也能被生物素化（Ｋｗｏｎ＆Ｂｅｃｋｅｔｔ，２０００）㊂ＢｉｏＩＤ最早应用于哺乳动物细胞中（Ｒｏｕｘｅｔａｌ，２０１２）㊂除了应用于动物细胞中，ＢｉｏＩＤ技术也可用于单细胞生物中，如布氏锥充（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａｂｒｕｃｅｉ）㊁刚地弓形虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｇｏｎｄｉｉ）㊁盘基网柄菌（Ｄｉｃｔｙ⁃ｏｓｔｅｌｉｕｍｄｉｓｃｏｉｄｅｕｍ）㊂此外，ＢｉｏＩＤ技术还可用于宿主－病原体系统的研究中，如ＨＩＶ⁃１互作蛋白的研究（Ｖａｒｎａｉｔｅ＆Ｍａｃｎｅｉｌｌ，２０１６）㊂本实验室以水稻原生质体为材料，通过研究影响ＢｉｏＩＤ在植物中应用的多种因素，建立了适合在水稻中使用ＢｉｏＩＤ系统（Ｌｉｎｅｔａｌ，２０１７）㊂ＢｉｏＩＤ技术的操作主要包括以下流程：（１）构建带有融合蛋白ＢｉｒＡＧ的目的蛋白表达载体，并转化植物原生质体，瞬时表达融合ＢｉｒＡＧ的目的蛋白㊂（２）在有生物素的条件下进行孵育，使目的蛋白邻近的其他蛋白被生物素化㊂（３）提取原生质体总蛋白与链霉亲和素磁珠进行共孵育，被生物素化的蛋白即可吸附在磁珠上㊂（４）通过清洗㊁洗脱等步骤获得富集的生物素化蛋白，利用ｗｅｓｔｅｒｎ⁃ｂｌｏｔ以及质谱分析的方法，可以对被生物素化的蛋白进行鉴定（Ｌｉｎｅｔａｌ，２０１７）㊂Ｖａｒｎａｉｔｅ＆Ｍａｃｎｅｉｌｌ（２０１６）研究认为，在诱饵蛋白附近１０ｎｍ范围内的蛋白，包括直接㊁间接相互作用的都会被生物素化而被鉴定出来㊂２７７广㊀西㊀植㊀物３８卷ＧＳ３调控种子大小的功能已经非常明确，但是关于ＧＳ３调控机制的研究比较少见㊂本研究采用ＢｉｏＩＤ方法，一种不同于现有的酵母双杂交的方式，筛选ＧＳ３互作蛋白，为ＧＳ３相关调控网络的研究提供新的思路㊂１㊀材料与方法１．１材料水稻中花１１（Ｏｒｙｚａｓａｔｉｖａ）由本实验室保存㊂ＫＯＤＦＸ聚合酶购自东洋纺（上海）生物科技有限公司㊂限制性内切酶和Ｔ４ＤＮＡ连接酶购自大连ＴａＫａＲａ生物有限公司㊂质粒抽提试剂盒为Ａｘｙｇｅｎ公司产品㊂大肠杆菌感受态菌株ＪＭ１０９为本实验室保存㊂ＢｉｏＩＤ载体由本实验室保存（Ｌｉｎｅｔａｌ，２０１７）㊂引物合成由上海生工生物技术有限公司完成㊂所用链霉亲和素磁珠由Ｓｏｌｕｌｉｎｋ公司提供㊂抗ＢｉｒＡ兔源多抗为ＬｉｆｅＳｐａｎＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅｓ公司生产㊂二抗为辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔抗体，由Ｐｒｏｔｅｉｎｔｅｃｈ公司生产㊂ＲＩＰＡ强蛋白提取液㊁辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素为碧云天公司生产㊂测序由北京睿博兴科生物技术有限公司完成㊂蛋白质谱测序由深圳市微纳菲生物技术有限公司进行㊂１．２方法１．２．１构建水稻ＧＳ３ＢｉｏＩＤ载体㊀提取水稻ＲＮＡ并反转录成ｃＤＮＡ，运用ＰＣＲ技术对ＧＳ３ＣＤＳ进行扩增㊂所用引物为ＧＳ－Ｆ：ＧＡＡＧＡＴＣＴＡＴＧ⁃ＧＣＡＡＴＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＣＣＣＣＧＧＣＣ；ＧＳ－Ｒ：ＧＧＡＣ⁃ＴＡＧＴＴＣＡＣＡＡＧＣＡＧＧＧＧＧＧＧＣＡＧＣＡＡＣＧＡＧＧＧＡＣ㊂下划线标记的序列为引入的ＢｇｌⅡ和ＳｐｅⅠ的酶切位点㊂退火温度为６０ħ，延伸１ｍｉｎ，３５个循环，回收ＰＣＲ产物，进行酶切与纯化㊂ＢｉｏＩＤ的载体如图１所示，用ＢａｍＨⅠ和ＳｐｅⅠ进行双酶切，变性，并与获得的ＧＳ３纯化进行连接，转化大肠杆菌，提取阳性菌株质粒，测序㊂１．２．２水稻原生质体的转化㊀原生质体的转化参照Ｙａｎｇｅｔａｌ（２０１４）的方法，首先将ｐＵｂｉɨＢｉｒＡＧɨＧＳ３转化进４００μＬ水稻原生质体中（原生质体浓度约为２ˑ１０６个㊃Ｌ⁃１），然后转入ｐＵｂｉɨＢｉｒＡＧ作为阳性对照，最后在培养液中加入外源生物素（终浓度为５０μｍｏｌ㊃Ｌ⁃１）培养２４ｈ㊂同理，再转化一组ｐＵｂｉɨＢｉｒＡＧɨＧＳ３，以不加入生物素一组为阴性对照㊂１．２．３蛋白质的提取与鉴定㊀（１）原生质体培养２４ｈ后，用３０００ｒ㊃ｍｉｎ⁃１，３ｍｉｎ收集原生质体；用０．６ｍｏｌ㊃Ｌ⁃１甘露醇洗涤原生质体，再次收集原生质体；加入７００ｍＬＲＩＰＡ强蛋白提取液，剧烈震荡，１３０００ｒ㊃ｍｉｎ⁃１在４ħ下离心２０ｍｉｎ，取上清，于－２０ħ储存备用㊂（２）取１５μＬ的蛋白样品在１２％ＳＤＳ⁃ＰＡＧＥ上分离后，用湿法转膜法将分离的蛋白转至ＰＶＤＦ膜上㊂电转完毕后，使用抗ＢｉｒＡ兔源多抗做一抗，辣根过氧化物酶标记山羊抗兔抗体作为二抗，进行Ｗｅｓｔｅｒｎ⁃ｂｌｏｔ进行分析，观察ＢｉｒＡＧ蛋白表达结果㊂同理，用辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素作为抗体，检测标记上生物素的蛋白㊂１．２．４生物素化蛋白质的富集㊀（１）磁珠处理：涡旋震荡原始磁珠瓶１ｍｉｎ，利于成团的磁珠分散；取２０μＬ磁珠于ＥＰ管中；磁力架上放置２ｍｉｎ，去上清；加入ＲＩＰＡ强１ｍＬ，震荡分散磁珠，室温摇摆５ｍｉｎ；重复以上清洗步骤２次；磁珠与蛋白样品孵育４ħ过夜；２％ＳＤＳ清洗１次，ＲＩＰＡ清洗２次磁珠，将磁珠样品悬浮在ＰＢＳ缓冲液，送往公司进行蛋白质谱测序㊂（２）蛋白质谱测序：参照Ｗｉｓｎｉｅｗｓｋｉｅｔａｌ（２００９）的方法，采用胰蛋白酶处理富集生物素化蛋白的磁珠，将其制成多肽溶液进行ＬＣ⁃ＭＳ／ＭＳ分析（质谱仪型号为ＴｒｉｐｌｅＴＯＦ５６００ＬＣＭＳ（ＡＢＳＣＩＥＸ））㊂采用Ｍａｘｑｕａｎｔ软件进行数据加工处理和检索分析，数据库为Ｕｎｉｐｒｏｔ下物种为Ｏｒｙｚａｓａｔｉｖａｓｕｂｓｐ．ｊａｐｏｎｉｃａ蛋白数据库㊂检索参数设置如下：半胱氨酸烷基化为碘乙酰胺㊁可变修饰为甲硫氨酸氧化和蛋白Ｎ端乙酰化㊁胰蛋白酶酶解，二级质谱匹配容差为０．００４％，多肽假阳性率控制为１％ＦＤＲ，蛋白假阳性率控制为１％㊂１．２．５ＢｉＦＣ验证互作蛋白㊀挑选相关的功能基因进行克隆，构建ＢｉＦＣ载体㊂进行原生质体转化，１２ｈ后于ＬＳＭ８００激光共聚焦显微镜下观察荧光㊂所用载体为ｐＳＡＴ６⁃ｃＥＹＦＰ⁃Ｃ１⁃Ｂ⁃（３１０８）和ｐＳＡＴ６⁃ｎＥＹＦＰ⁃Ｃ１⁃（Ｅ２８８４）㊂所用到的引物如下３７７６期杜荣裕等：应用ＢｉｏＩＤ技术筛选水稻ＧＳ３互作蛋白４７７广㊀西㊀植㊀物３８卷表１　蛋白质谱结果Ｔａｂｌｅ１㊀Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｐｒｏｔｅｉｎｓｐｅｃｔｒｕｍｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ名称ＮａｍｅＵｎｉＰｒｏｔ登录号ＵｎｉＰｒｏｔａｃｃｅｓｓｉｏｎ结构分子活性Ｑ８４ＭＱ４Ｑ６Ｚ３８２Ｂ７Ｆ８４５Ｑ６０Ｅ５９Ｑ１０ＭＳ５Ｐ０Ｃ４４６Ｑ６Ｋ８５３ＳｔｒｕｃｔｕｒａｌｍｏｌｅｃｕｌｅａｃｔｉｖｉｔｙＱ６７Ｗ５１Ｑ９ＺＳＴ０Ｑ７ＸＶＺ０Ｐ０Ｃ４４３Ｑ６ＹＳＸ０ＧＴＰ／ＡＴＰ结合ＧＴＰ／ＡＴＰｂｉｎｄｉｎｇＱ６ＹＷ２７Ｑ０ＪＬＳ６（ＲＨＤ３）Ｑ０ＤＸＲ０Ｑ６ＡＴＲ５Ｑ１０ＰＢ３Ｑ９ＳＤＫ４Ｐ４０３９３Ｑ６５４Ｕ５Ｑ４０７２３嘌呤核糖核苷三磷酸绑定ＰｕｒｉｎｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅｂｉｎｄｉｎｇＱ５３ＲＪ５Ｑ７５ＨＪ３Ｑ８４ＺＢ２Ｑ５ＪＫ８４（ＲＨ１５）Ｑ８ＬＱ６８Ｑ７５ＨＴ８Ｑ７ＸＰＹ２Ｑ９ＺＴＳ１Ｑ６ＡＶＡ８（ＰＰＤＫ１）Ｑ５３ＲＭ０Ｑ６Ｋ４Ｑ０小分子结合ＳｍａｌｌｍｏｌｅｃｕｌｅｂｉｎｄｉｎｇＱ６ＡＶ３４Ｑ７Ｆ２Ｘ８Ｐ０Ｃ５０３Ｑ０Ｊ６Ａ９阴离子结合ＡｎｉｏｎｂｉｎｄｉｎｇＱ６ＺＣＦ０Ｑ６７ＶＺ１氧化还原酶ＯｘｉｄｏｒｅｄｕｃｔａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙＱ５ＺＥＤ１Ｐ０４３４Ｂ０４．３５⁃１Ｑ１０ＬＨ０谷氨酸合成酶活性ＧｌｕｔａｍａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙＱ６９ＲＪ０环孢菌素ＣｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎＡｂｉｎｄｉｎｇＱ６５１Ｂ０镁－原卟啉ＩＸ单酯环化酶活性Ｍａｇｎｅｓｉｕｍ⁃ｐｒｏｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎＩＸｍｏｎｏｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒｃｙｃｌａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙＱ９ＳＤＪ２变构酶活性ＥｐｉｍｅｒａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙＱ６ＥＰＱ１叶绿素Ⅱ结合ＣｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｂｉｎｄｉｎｇＰ０Ｃ３５５Ｑ８４ＰＢ５异柠檬酸裂解酶活性ＩｓｏｃｉｔｒａｔｅｌｙａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙＱ６Ｚ６Ｍ４（ＩＣＬ）异构酶活性ＩｓｏｍｅｒａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙＱ５Ｚ９Ｈ９电子转运载体ＥｌｅｃｔｒｏｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒＰ０Ｃ３１９磷酸丙酮酸水合酶ＰｈｏｓｐｈｏｐｙｒｕｖａｔｅｈｙｄｒａｔａｓｅＱ４２９７１离子结合ＩｏｎｂｉｎｄｉｎｇＱ６ＺＨ８４Ｑ６ＡＴ２６Ｑ７ＸＶ８６Ｑ６Ｋ６６９核酮糖－二磷酸羧化酶ｒｉｂｕｌｏｓｅ⁃ｂｉｓｐｈｏｓｐｈａｔｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙＱ６７ＩＵ５结合ＢｉｎｄｉｎｇＱ５Ｗ６Ｊ３Ｑ０ＪＬ４４ＳＧＴ１Ｑ６５７Ｃ０其他分子功能ＯｔｈｅｒＭｏｌｅｃｕｌａｒＦｕｎｃｔｉｏｎＱ１０ＱＷ１Ｑ０ＩＰＬ３Ｑ９ＬＧＱ６未知Ａ０Ａ０Ｐ０ＶＬＴ９Ａ０Ａ０Ｎ７ＫＪＰ５Ａ０Ａ０Ｎ７ＫＫＮ１Ａ０Ａ０Ｐ０ＸＸ９５Ａ０Ａ０Ｐ０Ｗ７Ｋ８ＵｎｋｎｏｗｎＡ０Ａ０Ｎ７ＫＬ３７Ａ０Ａ０Ｐ０Ｗ２Ｒ２Ｐ０Ｃ５０９Ｑ６ＥＴＤ９Ａ０Ａ０Ｐ０ＸＣ８７Ｑ５ＶＳ７９Ａ０Ａ０Ｐ０ＸＢＭ６Ｐ５５８５７Ａ０Ａ０Ｐ０Ｗ３９９Ａ０Ａ０Ｐ０ＷＪＱ６Ｑ６Ｈ６６０Ｑ９４Ｄ８１Ａ０Ａ０Ｐ０ＶＷＷ１Ｑ６５８Ｉ５Ｑ８４ＳＺ１Ａ０Ａ０Ｐ０ＸＷＡ７Ａ０Ａ０Ｐ０ＶＵＭ８Ａ０Ａ０Ｎ７ＫＬＳ７Ｃ６Ｌ６８６Ａ０Ａ０Ｐ０Ｗ２Ｐ０Ａ０Ａ０Ｐ０Ｗ２Ｐ０Ｑ９ＦＴＹ４Ｐ０４３６Ｅ０４．１９Ａ０Ａ０Ｐ０ＶＲＱ０Ａ０Ａ０Ｐ０ＶＲＱ０Ｑ６Ｚ４Ｆ３ＯＳＪＮＢｂ００８４Ｌ０７．１１Ａ０Ａ０Ｎ７ＫＫＢ７Ａ０Ａ０Ｎ７ＫＫＢ７Ａ０Ａ０Ｎ７ＫＭＳ０Ａ０Ａ０Ｎ７ＫＭＳ０Ａ０Ａ０Ｐ０ＹＡＡ５Ａ０Ａ０Ｐ０ＹＡＡ５Ｑ６Ｚ９０１Ｐ０５０１Ｇ０４．４Ｑ８Ｗ４２５（ＲＰＮ７）Ｑ６Ｋ６Ｇ８Ｐ０４８７Ｈ０５．３９Ｑ８４Ｒ３２ＯＳＪＮＢｂ００１６Ｈ１２．１９Ａ０Ａ０Ｐ０ＶＵＮ０Ａ０Ａ０Ｐ０ＶＵＮ０Ｑ８Ｈ０８０ＯＳＪＮＢｂ００５０Ｎ０２．１１Ａ０Ａ０Ｐ０Ｙ３４４Ａ０Ａ０Ｐ０Ｙ３４４Ａ０Ａ０Ｐ０ＶＶＸ９Ａ０Ａ０Ｐ０ＶＶＸ９㊀注：用于ＢｉＦＣ实验的５个蛋白编号已经备注，并用方框标记㊂㊀Ｎｏｔｅ：ＵｎｉｐｒｏｔａｃｃｅｓｓｉｏｎｓｏｆｆｉｖｅｐｒｏｔｅｉｎｓｆｏｒＢｉＦＣａｒｅｆｒａｍｅｄａｎｄｎｏｔｅｄ．图１㊀ｐＵｂｉɨＢｉｒＡＧ载体图谱Ｆｉｇ．１㊀ＰｈｙｓｉｃａｌｍａｐｏｆｐＵｂｉɨＢｉｒＡＧｖｅｃｔｏｒ（下划线标出酶切位点，并标注对应的内切酶）：ＩＣＬ⁃Ｆ㊀ＧＡＡＧＡＴＣＴＡＴＧＴＣＧＴＣＧＣＣＧＴＴＣＴＣＣＧＴＧＣＣ⁃ＡＴＣＴ（ＢｇｌⅡ）；ＩＣＬ⁃Ｒ㊀ＣＧＧＡＡＴＴＣＣＡＴＣＣＴＧＧＡＴＴＴ⁃ＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＴＧＧＣＴ（ＥｃｏＲⅠ）；ＰＰＤＫ１⁃Ｆ㊀ＧＡＡＧ⁃ＡＴＣＴＡＴＧＣＣＧＴＣＧＧＴＴＴＣＧＡＧＧＧＣＣＧＴＧＴＧＣ（ＢｇｌⅡ）；ＰＰＤＫ１⁃Ｒ㊀ＧＣＴＣＴＡＧＡＧＡＧＧＡＧＣＡＣＣＴＧＡＧＣＴＧ⁃ＣＡ⁃ＧＣＴＡＧＣＣＴ（ＸｂａⅠ）；ＲＰＮ７⁃Ｆ㊀ＧＡＡＧＡＴＣＴＡＴＧ⁃ＧＡＣＧＧＣＧＧＣＧＴＡＧＧＣＧＡＧＧＡＡＧＧＧ（ＢｇｌⅡ）；ＲＰＮ７⁃Ｒ㊀ＣＧＧＡＡＴＴＣＣＡＧＧＴＣＡＡＴＧＡＣＴＣＧＴＧＡＴＡＧＣＴＴＣＴＧ（ＥｃｏＲⅠ）；ＲＨＤ３⁃Ｆ㊀ＧＡＡＧＡＴＣＴＡＴＧＧＡＣＧＣＣＴＧＴＴＴ⁃ＴＴＣＡＡＣＡＣＡＧＣＴＴ（ＢｇｌⅡ）；ＲＨＤ３⁃Ｒ㊀ＣＧＧＡＡＴＴＣ⁃ＧＴＧＴＧＣＡＡＴＣＧＧＧＣＴＴＧＡＡＴＡＴＴＣＧＧＧＴ（ＥｃｏＲⅠ）；ＲＨ１５⁃Ｆ㊀ＣＧＡＧＣＴＣＡＡＡＡＴＧＧＧＣＧＡＡＧＣＴＧＡＧＧＴＣ⁃ＡＡＧＧＡＣＡＡＣ（ＳｃａＩ）；ＲＨ１５⁃Ｒ㊀ＧＣＡＧＴＡＣＴＣＧＡＡＧ⁃ＧＣＡＴＡＴＡＴＧＴＣＧＡＡＧＴＡＴＣＡＡＴ（ＸｂａⅠ）㊂２㊀结果与分析２．１ＢｉｒＡＧ⁃ＧＳ３蛋白在水稻原生质体中的蛋白质表达将ｐＵｂｉɨＢｉｒＡＧ质粒转化进原生质体中，加入生物素进行培养，作为阳性对照；将ｐＵｂｉɨＢｉｒＡＧɨＧＳ３质粒转化两份原生质体，一份添加生物素，一份不添加，分别作为实验组和阴性对照组㊂孵育２４ｈ后，提取原生质体总蛋白，使用兔抗ＢｉｒＡ多克隆抗体为一抗进行Ｗｅｓｔｅｒｎ⁃ｂｌｏｔ检测，其中ＢｉｒＡＧ预测大小为３５．２９ｋＤａ，ＢｉｒＡＧ⁃ＧＳ３融合蛋白预测大小约为５９．６２ｋＤａ，与实验结果相符㊂实验结果如图２所示，表明ＢｉｒＡＧ⁃ＧＳ３融合蛋白成功表达㊂２．２ＧＳ３邻近蛋白在水稻原生质体中的生物素化情况取三组蛋白样品，以辣根过氧化物酶标记链霉亲和素进行Ｗｅｓｔｅｒｎ⁃ｂｌｏｔ检测（图３）㊂图３结果显示，阳性对照的ＢｉｒＡＧ组出现多条条带，表示其能够生物素化多种水稻中的蛋白㊂ＢｉｒＡＧ⁃ＧＳ３在没有添加生物素的情况下，只出现一条条带，该条带为水稻内源生物素化的蛋白㊂说明在没有添加生物素的培养液中，ＢｉｒＡＧ⁃ＧＳ３蛋白成功表达但是没有对周围蛋白进行生物素化㊂ＢｉｒＡＧ⁃ＧＳ３在添加生物素的培养液中，条带数增加，并且出现了特有的条带，说明ＢｉｒＡＧ⁃ＧＳ３可以使得邻近蛋白的生物素化㊂这表明ＢｉｒＡＧ⁃ＧＳ３融合蛋白成功生物素化直接或间接相互作用的蛋白㊂２．３ＧＳ３邻近蛋白的质谱鉴定结果各组的生物素化蛋白经过磁珠富集后进行，经过酶切等后续处理，然后进行ＬＣ⁃ＭＳ／ＭＳ分析㊂质谱采集到的原始ｗｉｆｆ图谱文件，采用Ｍａｘｑｕａｎｔ软件进行数据加工处理和检索分析，将获得的蛋白制成韦恩图（图４）㊂经过ＢｉｒＡＧ组和ＧＳ３（－）组的过滤，我们发现实验组ＧＳ３（＋）特有的蛋白有１０１个，将这些蛋白导入网站ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／ＱｕｉｃｋＧＯ，进行基因本体注释（图５）㊂图５结果显５７７６期杜荣裕等：应用ＢｉｏＩＤ技术筛选水稻ＧＳ３互作蛋白注：原生质体转化后，在含有生物素（＋）或不含生物素（－）培养液孵育后，使用Ａｎｔｉ⁃ＢｉｒＡ抗体对其总蛋白进行Ｗｅｓｔｅｒｎ⁃ｂｌｏｔ，检测ＢｉｒＡＧ是否表达成功㊂考马斯亮蓝Ｇ⁃２５０染色用于蛋白载样量监测㊂Ｎｏｔｅ：Ｗｅｓｔｅｒｎ⁃ｂｌｏｔｏｆｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｒｉｃｅｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｓａｆｔｅｒｔｒａｎｓｉｅｎｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＢｉｒＡＧａｎｄＢｉｒＡＧ⁃ＧＳ３，ｗｉｔｈｏｒｗｉｔｈｏｕｔｂｉｏｔｉｎｉｎｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｓｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｓｏｌｕｔｉｏｎ．Ａｎｔｉ⁃ＢｉｒＡａｎｔｉｂｏｄｙｗｅｒｅｕｓｅｄｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＢｉｒＡＧ．ＣｏｏｍａｓｓｉｅＢｒｉｌｌｉａｎｔＢｌｕｅＧ⁃２５０ｓｔａｉｎｉｎｇｗａｓｕｓｅｄｆｏｒｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇｔｈｅｓａｍｐｌｅｌｏａｄｉｎｇａｍｏｕｎｔ．图２㊀ＢｉｒＡＧ和ＢｉｒＡＧ⁃ＧＳ３在原生质体中的蛋白表达情况Ｆｉｇ．２㊀ＰｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＢｉｒＡＧａｎｄＢｉｒＡＧ⁃ＧＳ３ｉｎｒｉｃｅｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｓ示，ＧＳ３邻近蛋白参与多个生物学功能，如多种氮类化合物㊁氨基酸和多肽等的代谢过程㊂细胞组分方面，ＧＳ３邻近蛋白主要集中在细胞质中，在叶绿体中也有富集㊂分子功能方面，ＧＳ３相关蛋白主要有结构分子活性，同时依赖小分子来调节功能，例如结合各类核苷酸㊁阴离子等㊂按照其分子功能，将得到的蛋白进行分类，如表１所示㊂将这些蛋白导入ＳＴＲＩＮＧ网站（ｈｔｔｐ：／／ｓｔｒｉｎｇ⁃ｄｂ．ｏｒｇ，互作蛋白／基因检索工具），构建ＧＳ３邻近蛋白质互作网络（图６）㊂这表明ＧＳ３邻近的蛋白之间也存在许多实验证明的或者计算机预测的相互作用㊂同时可以看出ＧＳ３注：原生质体转化后，在含有生物素（＋）或不含生物素（－）培养液孵育后，使用链霉亲和素－ＨＲＰ对其总蛋白进行Ｗｅｓｔｅｒｎ⁃ｂｌｏｔ，检测生物素化蛋白情况㊂考马斯亮蓝Ｇ⁃２５０染色用于蛋白载样量监测㊂Ｎｏｔｅ：Ｗｅｓｔｅｒｎ⁃ｂｌｏｔｏｆｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｒｉｃｅｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｓａｆｔｅｒｔｒａｎｓｉｅｎｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＢｉｒＡＧａｎｄＢｉｒＡＧ⁃ＧＳ３，ｗｉｔｈｏｒｗｉｔｈｏｕｔｂｉｏｔｉｎｉｎｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｓｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｓｏｌｕｔｉｏｎ．Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ⁃ＨＲＰａｎｔｉｂｏｄｙｗｅｒｅｕｓｅｄｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｂｉｏｔｉｎｙｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｒｉｃｅ．ＣｏｏｍａｓｓｉｅＢｒｉｌｌｉａｎｔＢｌｕｅＧ⁃２５０ｓｔａｉｎｉｎｇｗａｓｕｓｅｄｆｏｒｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇｔｈｅｓａｍｐｌｅｌｏａｄｉｎｇａｍｏｕｎｔ．图３㊀ＢｉｒＡＧ和ＢｉｒＡＧ⁃ＧＳ３融合蛋白在原生质体中的生物素化情况Ｆｉｇ．３㊀ＰｒｏｔｅｉｎｓｂｉｏｔｉｎｙｌａｔｅｄｂｙＢｉｒＡＧａｎｄＢｉｒＡＧ⁃ＧＳ３ｉｎｒｉｃｅｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｓ邻近蛋白在核糖体㊁卟啉和叶绿素代谢，脂肪酸伸长，乙醛酸和二羧酸代谢，光合作用等途径发生富集㊂２．４ＧＳ３与其邻近蛋白互作的检测挑选了ＩＣＬ（Ｉｓｏｃｉｔｒａｔｅｌｙａｓｅ，异柠檬酸盐裂解酶）㊁ＰＰＤＫ１（Ｐｙｒｕｖａｔｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｉｋｉｎａｓｅ１，丙酮酸磷酸双激酶）㊁ＲＰＮ７（２６Ｓ蛋白酶体的非ＡＴＰ酶的调节亚基６，２６Ｓｐｒｏｔｅａｓｏｍｅｎｏｎ⁃ＡＴＰａｓｅｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｓｕｂｕｎｉｔ６）㊁ＲＨ１５（ＤＥＡＤ⁃ｂｏｘＡＴＰ⁃ｄｅｐｅｎｄｅｎｔＲＮＡｈｅｌｉｃａｓｅ１５，ＤＥＡＤ盒ＡＴＰ依赖的ＲＮＡ解旋酶１５）和ＲＨＤ３（ＲＯＯＴＨＡＩＲＤＥＦＥＣＴＩＶＥ３，根毛缺陷蛋６７７广㊀西㊀植㊀物３８卷图４㊀质谱鉴定蛋白韦恩图Ｆｉｇ．４㊀ＳｃｈｅｍａｔｉｃＶｅｎｎｄｉａｇｒａｍｏｆｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｓｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙＭＳ白３），通过双分子荧光互补技术，对过滤后的蛋白进行互作验证㊂５个蛋白编号在表２中已经备注，并用方框标记㊂扩增这５个基因的ＣＤＳ，并构建ＢｉＦＣ表达载体㊂ＢｉＦＣ结果如图７所示，ＩＣＬ㊁ＰＰＤＫ㊁ＲＰＮ７和ＲＨ１５与ＧＳ３蛋白发生互作㊂３㊀讨论与结论通过ＢｉｏＩＤ成功得到了１０１个候选蛋白，本研究挑选了５个进行ＢｉＦＣ初步验证，鉴定到４个可能与ＧＳ３互作的蛋白，分别为ＩＣＬ㊁ＰＰＤＫ㊁ＲＰＮ７和ＲＨ１５，这些蛋白涉及多个植物生长生理过程㊂作为一种快速筛选可能的互作蛋白的方法，ＢｉｏＩＤ不同于酵母双杂交，它可以在细胞中检测到临近蛋白，也可以检测瞬时或弱结合蛋白㊂注：１．有机氮化合物生物合成过程；２．有机氮化合物代谢过程；３．翻译；４．小分子代谢过程；５．肽生物合成过程；６．肽代谢过程；７．酰胺生物合成过程；８．光合作用；９．细胞生物合成过程；１０．细胞酰胺代谢过程；１１．胞质部分；１２．胞浆；１３．质体；１４．叶绿体；１５．核糖体；１６．细胞内；１７．细胞内部分；１８．细胞器；１９．胞内部分；２０．大的核糖体亚基；２１．结构分子活性；２２．核糖体的结构组成；２３．ＧＴＰ结合；２４．鸟核糖核苷结合；２５．鸟苷酸结合；２６．嘌呤核糖核苷三磷酸结合；２７．ｒＲＮＡ结合；２８．ＧＴＰ酶活性；２９．小分子结合；３０．阴离子结合㊂Ｎｏｔｅ：１．Ｏｒｇａｎｏｎｉｔｒｏｇｅｎｃｏｍｐｏｕｎｄｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｐｒｏｃｅｓｓ；２．Ｏｒｇａｎｏｎｉｔｒｏｇｅｎｃｏｍｐｏｕｎｄｍｅｔａｂｏｌｉｃｒｏｃｅｓｓ；３．Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ；４．Ｓｍａｌｌｍｏｌｅｃｕｌｅｍｅｔａｂｏｌｉｃｐｒｏｃｅｓｓ；５．Ｐｅｐｔｉｄｅｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｐｒｏｃｅｓｓ；６．Ｐｅｐｔｉｄｅｍｅｔａｂｏｌｉｃｐｒｏｃｅｓｓ；７．Ａｍｉｄｅｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｐｒｏｃｅｓｓ；８．Ｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；９．Ｃｅｌｌｕｌａｒｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｐｒｏｃｅｓｓ；１０．Ｃｅｌｌｕａｒａｍｉｄｅｍｅｔａｂｏｌｉｃｐｒｏｃｅｓｓ；１１．Ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｐａｒｔ；１２．Ｃｙｔｏｐｌａｓｍ；１３．Ｐｌａｓｔｉｄ；１４．Ｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔ；１５．Ｒｉｂｏｓｏｍｅ；１６．Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕａｒ；１７．Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕａｒｏｒｇａｎｅｌｌｅ；１８．Ｏｒｇａｎｅｌｌｅ；１９．Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｐａｒｔ；２０．Ｌａｒｇｅｒｉｂｏｓｏｍａｌｓｕｂｕｎｉｔ；２１．Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｍｏｌｅｃｕｌｅａｃｔｉｖｉｔｙ；２２．Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｏｆｒｉｂｏｓｏｍｅ；２３．ＧＴＰｂｉｎｄｉｎｇ；２４．Ｇｕａｎｙｌｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｂｉｎｄｉｎｇ；２５．Ｇｕａｎｙｌｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｂｉｎｄｉｎｇ；２６．Ｐｕｒｉｎｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅｂｉｎｄｉｎｇ；２７．ｒＲＮＡｂｉｎｄｉｎｇ；２８．ＧＴＰａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ；２９．Ｓｍａｌｌｍｏｌｅｃｕｌｅｂｉｎｄｉｎｇ；３０．Ａｎｉｏｎｂｉｎｄｉｎｇ．图５㊀基因本体富集Ｆｉｇ．５㊀Ｅｎｒｉｃｈｅｄｇｅｎｅｏｎｔｏｌｏｇｙ７７７６期杜荣裕等：应用ＢｉｏＩＤ技术筛选水稻ＧＳ３互作蛋白注：圆圈代表基因／蛋白，方框代表ＫＥＧＧ通路或者生物过程㊂颜色由黄色到蓝色逐渐加深，颜色越深，代表Ｐ⁃ｖａｌｕｅ值越大㊂Ｎｏｔｅ：Ｃｉｒｃｌｅｎｏｄｅｓｆｏｒｇｅｎｅｓ／ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ｒｅｃｔａｎｇｌｅｆｏｒＫＥＧＧｐａｔｈｗａｙｏｒｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｃｅｓｓ．Ｐａｔｈｗａｙｉｓｃｏｌｏｒｅｄｗｉｔｈｇｒａｄｉｅｎｔｃｏｌｏｒｆｒｏｍｙｅｌｌｏｗｔｏｂｌｕｅ，ｙｅｌｌｏｗｆｏｒｓｍａｌｌｅｒＰ⁃ｖａｌｕｅ，ｂｌｕｅｆｏｒｂｉｇｇｅｒＰ⁃ｖａｌｕｅ．Ｆｕｌｌｌｉｎｅｓｍｅａｎｋｎｏｗｎｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，ｗｈｉｌｅｔｈｅｄｏｔｔｅｄｌｉｎｅｍｅａｎｓｐｒｅｄｉｃｔｅｄｏｎｅｓ．图６㊀蛋白－蛋白互作网络Ｆｉｇ．６㊀Ｐｒｏｔｅｉｎ⁃ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｇｒａｐｈ图７㊀ＢｉＦＣ验证５个新鉴定的与ＧＳ３互作的蛋白Ｆｉｇ．７㊀ＲｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅＢｉＦＣｒｅｓｕｌｔｓｏｆｆｉｖｅｐｒｏｔｅｉｎｓｐｒｏｘｉｍａｌｔｏＧＳ３ｉｎｒｉｃｅｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｓ㊀㊀ＩＣＬ和ＭＳ（苹果酸合酶，Ｍａｌａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ）是乙醛酸循环中起关键作用的限速酶㊂油料种子通过乙醛酸循环，将脂肪转化为糖，这对种子的萌发㊁萌发后的生长有着重要的意义㊂水稻种子的主要成分是淀粉，所以水稻种子的乙醛酸循环可能参与其他生理反应㊂在缺氧环境下，植物的呼吸作用受到抑制或阻碍，于是通过乙醇发酵途径产生ＮＡＤ＋㊂乙醇发酵途径能产生许多毒性物质，例如乙醛㊂正常有生长情况下，ＩＣＬ和ＭＳ几乎检测不到，而在水淹条件下迅速上升（Ｌｕｅｔａｌ，２００５）㊂该结果预示ＧＳ３可能参与逆境生理㊂ＰＰＤＫ１催化丙酮酸和ＰＥＰ（Ｐｈｏｓｐｈｏｅｎｏｌｐｙｒｕ⁃ｖａｔｅ，磷酸烯醇式丙酮酸）之间的可逆反应㊂其中，丙酮酸为氨基酸和脂肪酸的合成提供碳骨架㊂ＰＥＰ经过羧化反应后形成ＯＡＡ（α酮戊二酸）进入三羧酸循环，能进入糖异生途径㊂此外，ＰＥＰ也能与４－８７７广㊀西㊀植㊀物３８卷磷酸赤藓糖反应形成莽草酸，莽草酸参与木质素㊁生物碱合成，同时也是次生代谢中的重要物种㊂水稻中，ＰＰＤＫ１基因在叶肉细胞中表达量不高，但在籽粒中却大量表达（Ｋａｎｇｅｔａｌ，２００５）㊂Ｃｈａｓｔａｉｎｅｔａｌ（２００６）研究指出，ＰＰＤＫ１是在水稻种子发育过程中而不是在种子发育成熟后发挥功能，其主要通过磷酸化来调控其活性，同时蛋白质降解途径也参与其中㊂ＰＰＤＫ１的表达量或者活性降低，会导致籽粒垩白度增加，粒重减轻（Ｋａｎｇｅｔａｌ，２００５；Ｗａｎｇｅｔａｌ，２０１５）㊂Ｌａｐｐｅｅｔａｌ（２０１８）研究发现，在玉米中ＰＰＤＫ１基因通过调控糖酵解通路，影响胚乳的品质㊂由此可推测，ＧＳ３参与调控胚乳糖代谢途径㊂依赖ＡＴＰ提供的能量，ＤＥＡＤ⁃ｂｏｘＲＮＡ解旋酶（ＲＮＡｈｅｌｉｃａｓｅｓ，ＲＨｓ）几乎参与ＲＮＡ转录到衰变的所有生物过程，在植物的生长发育㊁抗逆反应中起重要作用（Ｌｉｎｄｅｒ＆Ｆｕｌｌｅｒ⁃Ｐａｃｅ，２０１５）㊂在水稻中，凋亡抑蛋白５（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｈｉｂｉｔｏｒ５，ＡＰＩ５）与ＡＩＰ１（ＡＰＩ５⁃ＩＮＴＥＲＡＣＴＩＮＧＰＲＯＴＥＩＮ１）和ＡＩＰ２（ＡＰＩ５⁃ＩＮＴＥＲＡＣＴＩＮＧＰＲＯＴＥＩＮ２）形成一个转录复合物，诱导半胱氨酸蛋白酶１（ＣｙｓｔｅｉｎｅＰｒｏｔｅａｓｅ１，ＣＰ１）的表达㊂ＡＰＩ５⁃ＡＩＰ１／２⁃ＣＰ１调控水稻绒毡层降解过程中的细胞凋亡进程（Ｌｉｅｔａｌ，２０１１）㊂其中，ＡＩＰ１与ＡＩＰ２实质上是ＡＴＰ依赖的ＤＥＡＤ⁃ｂｏｘＲＮＡ解旋酶成员，分别为ＯｓＲＨ５６与ＯｓＲＨ１５㊂在拟南芥中，三聚体Ｇ蛋白的β亚基下游信号网络中，发现包括ＤＥＡＤ⁃ｂｏｘ蛋白在内的ＤＮＡ／ＲＮＡ解旋酶参与其中（Ｋｈａｔｒｉｅｔａｌ，２０１７）㊂在水稻中，Ｇα亚基参与了ＧＡ通路，其突变体ｄｌ发生矮化，而ＯｓＲＨ２和ＯｓＲＨ３４双突变体表现出了类似的表型，这暗示ＤＥＡＤ⁃ｂｏｘ解旋酶可能参与了Ｇ蛋白介导的ＧＡ信号通路（Ｈｕａｎｇｅｔａｌ，２０１６）㊂因此，我们猜想ＡＩＰ２也有可能参与到ＧＳ３下游网络调控㊂泛素－蛋白酶体降解系统（ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ⁃ｐｒｏｔｅａｓｏｍｅｓｙｓｔｅｍ，ＵＰＳ）选择性地降解蛋白质，维持类蛋白质的平衡，由此参与到植物的生长发育与抗逆生理中㊂２６Ｓ蛋白酶体由１个２０Ｓ核心颗粒（ＣＰ）和２个１９Ｓ调节颗粒（ＲＰ）组成㊂ＲＰＮ７是构成１９Ｓ颗粒装配的必要亚基，作为盖子的组成部分（Ｃｏｌｌｉｎｓ＆Ｇｏｌｄｂｅｒｇ，２０１７）㊂在Ｇ蛋白信号网络中，可以发现２６Ｓ蛋白酶体参与其中㊂ＸＬＧ２直接与ＦＬＳ２和ＢＩＫ１相互作用，它与ＡＧＢ１和ＡＧＧ１／２的功能一起减弱蛋白酶介导的对ＢＩＫ１的降解，使其达到最佳的免疫激活（Ｌｉａｎｇｅｔａｌ，２０１６）㊂由此推测，ＧＳ３可能可以参与到泛素－蛋白酶体降解系统，进而传递信号㊂在酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）中，发现泛素连接酶ＳＣＦＵｃｃ１作为代谢开关，调节乙醛酸循环（Ｎａｋａｔｓｕｋａｓａｅｔａｌ，２０１５）㊂结合ＰＰＤＫ１与ＩＣＬ生物学功能，猜测ＧＳ３直接参与糖酵解㊁ＴＣＡ与乙醛酸循环的调节㊂本研究通过ＢｉｏＩＤ技术，成功捕获了ＧＳ３的邻近蛋白，并构建了这些蛋白的互作网络㊂ＢｉＦＣ结果表明在选取的５个ＧＳ３邻近蛋白中，有４个蛋白与之互作，分别为ＩＣＬ㊁ＰＰＤＫ㊁ＲＰＮ７和ＲＨ１５，涉及能量代谢的调节㊁种子淀粉物质的储存㊁泛素－蛋白酶体系统以及凋亡途径等生物过程，为构建植物异源三聚体Ｇ蛋白网路提供了线索，也为水稻的增产提供了新思路㊂由于本研究实验系统采用的是水稻叶肉原生质体，捕获的蛋白可能具有局限性㊂我们正在探索以整株转基因植物为材料进行ＢｉｏＩＤ技术，以便能在不同的组织㊁细胞类型中更全面地筛选目标蛋白的互作蛋白㊂参考文献：ＢＯＴＥＬＬＡＪＲ，２０１２．ＣａｎｈｅｔｅｒｏｔｒｉｍｅｒｉｃＧｐｒｏｔｅｉｎｓｈｅｌｐｔｏｆｅｅｄｔｈｅｗｏｒｌｄ？［Ｊ］．ＴｒｅｎｄｓＰｌａｎｔＳｃｉ，１７（１０）：５６３－５６８．ＣＨＡＳＴＡＩＮＣＪ，ＨＥＣＫＪＷ，ＣＯＬＱＵＨＯＵＮＴＡ，ｅｔａｌ，２００６．Ｐｏｓｔｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｐｙｒｕｖａｔｅ，ｏｒｔｈｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｉｋｉｎａｓｅｉｎｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇｒｉｃｅ（Ｏｒｙｚａｓａｔｉｖａ）ｓｅｅｄｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔａ，２２４（４）：９２４－９３４．ＣＨＯＵＤＨＵＲＹＳＲ，ＰＡＮＤＥＹＳ，２０１６．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｏｆｈｅｔｅｒｏｔｒｉ⁃ｍｅｒｉｃＧ⁃Ｐｒｏｔｅｉｎｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｗｉｔｈｒｅｃｅｐｔｏｒ⁃ｌｉｋｅｋｉｎａｓｅｓｉｎｐｌａｎｔｓ：ａｎａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｔｏｔｈｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｒａｄｉｇｍ？［Ｊ］．ＭｏｌＰｌａｎｔ，９（８）：１０９３－１０９５．ＣＯＬＬＩＮＳＧＡ，ＧＯＬＤＢＥＲＧＡＬ，２０１７．Ｔｈｅｌｏｇｉｃｏｆｔｈｅ２６Ｓｐｒｏｔｅａｓｏｍｅ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ，１６９（５）：７９２－８０６．ＨＵＡＮＧＣＫ，ＳＩＥＹＳ，ＣＨＥＮＹＦ，ｅｔａｌ，２０１６．Ｔｗｏｈｉｇｈｌｙｓｉｍ⁃ｉｌａｒＤＥＡＤｂｏｘｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＯｓＲＨ２ａｎｄＯｓＲＨ３４，ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｔｏｅｕｋａｒｙｏｔｉｃｉｎｉｔｉａｔｉｏｎｆａｃｔｏｒ４ＡＩＩＩ，ｐｌａｙｒｏｌｅｓｏｆｔｈｅｅｘｏｎｊｕｎｃｔｉｏｎｃｏｍｐｌｅｘｉｎｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｇｒｏｗｔｈａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｉｎｒｉｃｅ［Ｊ］．ＪＰｌａｎｔＢｉｏｌ，１６（１）：８４．ＫＡＮＧＨＧ，ＰＡＲＫＳ，ＭＡＴＳＵＯＫＡＭ，ｅｔａｌ，２００５．Ｗｈｉｔｅ⁃ｃｏｒｅｅｎｄｏｓｐｅｒｍｆｌｏｕｒｙｅｎｄｏｓｐｅｒｍ⁃４ｉｎｒｉｃｅｉｓｇｅｎｅｒａｔｅｄｂｙｋｎｏｃｋｏｕｔ９７７６期杜荣裕等：应用ＢｉｏＩＤ技术筛选水稻ＧＳ３互作蛋白ｍｕｔａｔｉｏｎｓｉｎｔｈｅＣ⁃４⁃ｔｙｐｅｐｙｒｕｖａｔｅｏｒｔｈｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｉｋｉｎａｓｅｇｅｎｅ（ＯｓＰＰＤＫＢ）［Ｊ］．ＰｌａｎｔＪ，４２（６）：９０１－９１１．ＫＨＡＴＲＩＮ，ＳＩＮＧＨＳ，ＨＡＫＩＭＮ，ｅｔａｌ，２０１７．ＣｏｍｐａｒａｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐｒｏｆｉｌｉｎｇｏｆＡｔＲＡＤ５ＢａｎｄＡｔＮＤＬ１：ＨｉｎｔｓｔｏｗａｒｄｓａｒｏｌｅｉｎＧｐｒｏｔｅｉｎｍｅｄｉａｔｅｄｓｉｇｎａｌｉｎｇ［Ｊ］．ＧｅｎｅＥｘｐｒＰａｔｔ，２５－２６：１６７－１７４．ＫＷＯＮＫ，ＢＥＣＫＥＴＴＤ，２０００．Ｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆａｃｏｎｓｅｒｖｅｄｓｅｑｕｅｎｃｅｍｏｔｉｆｉｎｂｉｏｔｉｎｈｏｌｏｅｎｚｙｍｅｓｙｎｔｈｅｔａｓｅｓ［Ｊ］．ＰｒｏｔｅｉｎＳｃｉ，９（８）：１５３０－１５３９．ＬＡＰＰＥＲＲ，ＢＡＩＥＲＪＷ，ＢＯＥＨＬＥＩＮＳＫ，ｅｔａｌ，２０１８．Ｆｕｎｃ⁃ｔｉｏｎｓｏｆｍａｉｚｅｇｅｎｅｓｅｎｃｏｄｉｎｇｐｙｒｕｖａｔｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｉｋｉｎａｓｅｉｎｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇｅｎｄｏｓｐｅｒｍ［Ｊ］．ＰｒｏｃＮａｔＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ，１１５（１）：Ｅ２４－Ｅ３３．ＬＩＸ，ＧＡＯＸ，ＷＥＩＹ，ｅｔａｌ，２０１１．ＲｉｃｅＡＰＯＰＴＯＳＩＳＩＮＨＩＢＩ⁃ＴＯＲ５ｃｏｕｐｌｅｄｗｉｔｈｔｗｏＤＥＡＤ⁃Ｂｏｘａｄｅｎｏｓｉｎｅ５ᶄ⁃ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ⁃ｄｅｐｅｎｄｅｎｔＲＮＡｈｅｌｉｃａｓｅｓｒｅｇｕｌａｔｅｓｔａｐｅｔｕｍｄｅ⁃ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＣｅｌｌ，２３（４）：１４１６－１４３４．ＬＩＡＮＧＸ，ＤＩＮＧＰ，ＬＩＡＮＧＫ，ｅｔａｌ，２０１６．Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｈｅｔ⁃ｅｒｏｔｒｉｍｅｒｉｃＧｐｒｏｔｅｉｎｓｒｅｇｕｌａｔｅｉｍｍｕｎｉｔｙｂｙｄｉｒｅｃｔｌｙｃｏｕｐｌｉｎｇｔｏｔｈｅＦＬＳ２ｒｅｃｅｐｔｏｒ［Ｊ］．Ｅｌｉｆｅ，５：ｅ１３５６８．ＬＩＮＱ，ＺＨＯＵＺ，ＬＵＯＷ，ｅｔａｌ，２０１７．Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｐｒｏｘｉｍａｌａｎｄｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｒｉｃｅｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｓｂｙｐｒｏｘｉｍｉｔｙ⁃ｄｅ⁃ｐｅｎｄｅｎｔｂｉｏｔｉｎｙｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＦｒｏｎｔＰｌａｎｔＳｃｉ，８：７４９．ＬＩＮＤＥＲＰ，ＦＵＬＬＥＲ⁃ＰＡＣＥＦ，２０１５．Ｈａｐｐｙｂｉｒｔｈｄａｙ：２５ｙｅａｒｓｏｆＤＥＡＤ⁃ｂｏｘｐｒｏｔｅｉｎｓ［Ｊ］．ＭｅｔｈＭｏｌＢｉｏｌ（Ｃｌｉｆｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．），１２５９：１７－３３．ＬＵＹ，ＷＵＹＲ，ＨＡＮＢ，２００５．Ａｎａｅｒｏｂｉｃｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｉｓｏｃｉｔｒａｔｅｌｙａｓｅａｎｄｍａｌａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅｉｎｓｕｂｍｅｒｇｅｄｒｉｃｅｓｅｅｄｌｉｎｇｓｉｎｄｉｃａｔｅｓｔｈｅｉｍｐｏｒｔａｎｔｍｅｔａｂｏｌｉｃｒｏｌｅｏｆｔｈｅｇｌｙｏｘｙｌａｔｅｃｙｃｌｅ［Ｊ］．ＡｃｔａＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＳｉｎ，３７（６）：４０６－４１４．ＭＡＯＨＬ，ＳＵＮＳＹ，ＹＡＯＪＬ，ｅｔａｌ，２０１０．ＬｉｎｋｉｎｇｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｄｏｍａｉｎｆｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆｔｈｅＧＳ３ｐｒｏｔｅｉｎｔｏｎａｔｕｒａｌｖａｒｉａｔｉｏｎｏｆｇｒａｉｎｓｉｚｅｉｎｒｉｃｅ［Ｊ］．ＰｒｏｃＮａｔＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ，１０７（４５）：１９５７９－１９５８４．ＮＡＫＡＴＳＵＫＡＳＡＫ，ＮＩＳＨＩＭＵＲＡＴ，ＢＹＲＮＥＳＤ，ｅｔａｌ，２０１５．Ｔｈｅｕｂｉｑｕｉｔｉｎｌｉｇａｓｅｓｃｆｕｃｃ１ａｃｔｓａｓａｍｅｔａｂｏｌｉｃｓｗｉｔｃｈｆｏｒｔｈｅｇｌｙｏｘｙｌａｔｅｃｙｃｌｅ［Ｊ］．ＭｏｌＣｅｌｌ，５９（１）：２２－３４．ＲＯＵＸＫＪ，ＫＩＭＤＩ，ＲＡＩＤＡＭ，ｅｔａｌ，２０１２．Ａｐｒｏｍｉｓｃｕｏｕｓｂｉｏｔｉｎｌｉｇａｓｅｆｕｓｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓｐｒｏｘｉｍａｌａｎｄｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｍａｍｍａｌｉａｎｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＪＣｅｌｌＢｉｏｌ，１９６（６）：８０１－８１０．ＳＴＡＴＥＣＺＮＹＤ，ＯＰＰＥＮＨＥＩＭＥＲＪ，ＢＯＭＭＥＲＴＰ，２０１６．Ｇｐｒｏｔｅｉｎｓｉｇｎａｌｉｎｇｉｎｐｌａｎｔｓ：ｍｉｎｕｓｔｉｍｅｓｍｉｎｕｓｅｑｕａｌｓｐｌｕｓ［Ｊ］．ＣｕｒｒＯｐｉｎＰｌａｎｔＢｉｏｌ，３４：１２７－１３５．ＴＲＵＳＯＶＹ，ＢＯＴＥＬＬＡＪＲ，２０１６．ＰｌａｎｔＧ⁃ｐｒｏｔｅｉｎｓｃｏｍｅｏｆａｇｅ：Ｂｒｅａｋｉｎｇｔｈｅｂｏｎｄｗｉｔｈａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｓ［Ｊ］．ＦｒｏｎｔＣｈｅｍ，４（ｒａ８）．ＶＡＲＮＡＩＴＥＲ，ＭＡＣＮＥＩＬＬＳＡ，２０１６．Ｍｅｅｔｔｈｅｎｅｉｇｈｂｏｒｓ：Ｍａｐｐｉｎｇｌｏｃａｌｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｅｒａｃｔｏｍｅｓｂｙｐｒｏｘｉｍｉｔｙ⁃ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｌａｂｅｌｉｎｇｗｉｔｈＢｉｏＩＤ［Ｊ］．Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ，１６（１９）：２５０３－２５１８．ＷＡＮＧＨＹ，ＬＯＣＫＷＯＯＤＳＫ，ＨＯＥＬＴＺＥＬＭＦ，ｅｔａｌ，１９９７．ＴｈｅＲＯＯＴＨＡＩＲＤＥＦＥＣＴＩＶＥ３ｇｅｎｅｅｎｃｏｄｅｓａｎｅｖｏ⁃ｌｕｔｉｏｎａｒｉｌｙｃｏｎｓｅｒｖｅｄｐｒｏｔｅｉｎｗｉｔｈＧＴＰ⁃ｂｉｎｄｉｎｇｍｏｔｉｆｓａｎｄｉｓｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒｒｅｇｕｌａｔｅｄｃｅｌｌｅｎｌａｒｇｅｍｅｎｔｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ［Ｊ］．ＧｅｎｅＤｅｖ，１１（６）：７９９－８１１．ＷＡＮＧＺＭ，ＬＩＨＸ，ＬＩＵＸＦ，ｅｔａｌ，２０１５．Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎｏｆｐｙｒｕｖａｔｅｏｒｔｈｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｉｋｉｎａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｈｉｇｈｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｃｈａｌｋｉｎｅｓｓｉｎｒｉｃｅｇｒａｉｎｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌＢｉｏｃｈｅｍ，８９：７６－８４．ＷＩＳＮＩＥＷＳＫＩＪＲ，ＺＯＵＧＭＡＮＡ，ＮＡＧＡＲＡＪＮ，ｅｔａｌ，２００９．Ｕｎｉｖｅｒｓａｌｓａｍｐｌｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｆｏｒｐｒｏｔｅｏｍｅａ⁃ｎａｌｙｓｉｓ［Ｊ］．ＮａｔＭｅｔｈ，６（５）：３５９－Ｕ３６０．ＹＡＮＧＪＷ，ＦＵＪＸ，ＬＩＪ，ｅｔａｌ，２０１４．Ａｎｏｖｅｌｃｏ⁃ｉｍｍｕｎｏｐｒｅ⁃ｃｉｐｉｔａｔｉｏｎｐｒｏｔｏｃｏｌｂａｓｅｄｏｎｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｔｒａｎｓｉｅｎｔｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓ⁃ｓｉｏｎｆｏｒｓｔｕｄｙｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ⁃ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓｉｎｒｉｃｅ［Ｊ］．Ｐｌ⁃ｍｏｌＢｉｏｌＲｅｐ，３２（１）：１５３－１６１．０８７广㊀西㊀植㊀物３８卷。

樟树茎中油细胞和黏液细胞的分布与发育

第 50 卷第 5 期 2014年 5 月
doi： 10．11707 / j．1001-7488．20140520
林业科学
SCIENTIA SILVAE SINICAE
Vol. 50，No. 5 May，2 0 1 4
樟树茎中油细胞和黏液细胞的分布与发育*
李学琴徐有明林汉王昆喜张佳颖董敏张莲花
樟脑樟油是重要的林化产品之一，广泛用于化工和医药行业。油细胞在部分双子叶植物组织中存在，是一种特化的分泌细胞，多呈散生状分布于这类植物各组织中，是芳香油、油脂产生的主要场所（Ｒichter，1981； Fahn，1982；初庆刚等，1998； Mastroberti et al．，2008； Crivellaro et al．，2013）。黏液细胞是一种异形细胞，属于分泌组织之一，是黏质产生、贮存的重要部位（ Fahn，1982； Crivellaro et al．， 2013）。樟属（ Cinnamomum）植物富含樟油、樟脑，与油细胞和黏液细胞的存在有着密切的关系。我国樟科 13 个植物叶肉中油细胞和黏液细胞已有研究（初庆刚等，1999），可分为 4 种类型：只有油细胞分布、只有黏液细胞（腔）分布、油细胞和黏液细胞
（华中农业大学园艺林学学院武汉 430070）
关键词：樟树；油细胞；黏液细胞；生长发育；木材解剖
中图分类号： S781
文献标识码： A
文章编号： 1001 － 7488（ 2014） 05 － 0154 － 05
Development and Distribution of the Oil Cells and Mucilage Cell in Cinnamomum camphora

提升哈尔滨对俄科技合作水平打造资源支柱产业

提升哈尔滨对俄科技合作水平打造资源支柱产业
张汝根
【期刊名称】《全国商情》
【年(卷),期】2009()12
【摘要】俄罗斯是中国最重要的邻国之一,近年来,中俄关系发展迅速,在两国高层
领导人的共同努力下,中国与俄罗斯建立了"面向未来的战略合作伙伴关系",为在新
世纪中进一步发展两国关系确立了宏伟的蓝图,发展中俄经贸关系具有巨大的潜力。

加强和扩大对俄科技合作一直是哈尔滨的重要政策。

本文通过对哈尔滨对俄科技合作的现状进行分析,提出了哈尔滨对俄科技合作的对策,对振兴哈尔滨资源支柱产业
具有十分重要的意义。

【总页数】2页(P6-7)
【关键词】哈尔滨;资源;科技合作
【作者】张汝根
【作者单位】黑龙江科技学院
【正文语种】中文
【中图分类】F127;G322.5
【相关文献】
1.打造国际一流实验平台r推动我国水合物科研水平提升r——国土资源部天然气
水合物重点实验室 [J], 刘昌岭
2.发挥地缘优势提升对俄经贸科技合作水平 [J], 马文彪
3.发挥地缘优势提升对俄经贸科技合作水平 [J], 马文彪
4.打造法治国土提升“双保”水平——钟祥市国土资源局法治创建活动掠影 [J], 王平;姚天春;
5.哈尔滨东安集团应用eHR系统提升人力资源管理水平 [J], ;
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“超强吸水性功能纤维研究”通过市科委验收

“超强吸水性功能纤维研究”通过市科委验收
李占生
【期刊名称】《天津工业大学学报》
【年(卷),期】2005(24)3
【摘要】由我校材料科学与化学工程学院副院长邓新华教授承担的市重点自然科学基金项目“超强吸水性功能纤维研究”于2005年1月15日通过市科委组织的专家验收．
【总页数】1页(P88-88)
【关键词】功能纤维;吸水性;验收;科委;超强;科学基金项目;2005年;工程学院;材料科学;副院长
【作者】李占生
【作者单位】科技处
【正文语种】中文
【中图分类】TQ342.8;G311
【相关文献】
1.超强吸水功能纤维通过验收 [J],
2.“熔融共混纺制高性能中空纤维膜新工艺研究”通过市科委验收 [J], 郭建辉
3.“稀土掺杂氧化铝纳米纤维负载钯催化材料及其应用研究”项目通过市科委验收[J], 郭建辉
4.“超强吸水性功能纤维研究”通过市科委验收 [J], 李占生
5.超强吸水性功能纤维研究将加快实现高吸水材料产业化 [J], 孙妮
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省科委公布1996年省科技进步奖

省科委公布1996年省科技进步奖
罗洪
【期刊名称】《湖北造纸》
【年(卷),期】1996(000)004
【摘要】一九九六年度湖北省科技进步奖已于7月中旬揭晓,其中:由华中农业大学,湖北省轻工业科学研究设计院、郧县科委共同承担的研究项目龙须草高产载培与制浆性能研究获二等奖;由湖北省轻工业科学研究设计院、湖北省造纸公司、恩施市民族造纸厂共同承担的研究项目全麦草A级卫生纸(不加柔软剂)获三等奖;由
【总页数】1页(P41-41)
【作者】罗洪
【作者单位】湖北省轻工业科研设计院
【正文语种】中文
【中图分类】F426.8
【相关文献】
1.广东省科委公布一九九八年度广东省科学技术进步奖、自然科学奖获奖项目 [J], 张彩虹;
2.广东省科委公布1996年度授奖项目 [J], 道昉;
3.吉林省计委系统1996年度科技进步奖评选揭晓 [J],
4.怎样申报湖北省科技进步奖励项目——湖北省科委成果处负责同志答本刊记者问[J], 无
5.1996年“山东省农业机械化科技进步奖”评审结果(征求意见) [J],
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微生物的导电功能再获力证

微生物的导电功能再获力证
佚名
【期刊名称】《纳米科技》
【年(卷),期】2014(011)005
【摘要】美国马萨诸塞大学的科学家团队在最新一期的《自然·纳米科技》上报告称，他们用静电驱动显微镜（EFM）证明，电荷确实会沿着微生物的纳米导线蔓延，正如电子能在高导电性人工材料碳纳米管中流动一样。

这个团队曾提出，一种名为“地杆菌属（Geobacter）”的微生物能够产生细微的电流导线（即微生物纳米导线），但这一科学假设长期以来陷入争论和质疑之中。

【总页数】1页(P89-89)
【正文语种】中文
【中图分类】TB383
【相关文献】
1.导电聚合物修饰微生物燃料电池阳极的研究进展 [J], 钟登杰;廖新荣;刘雅琦
2.导电水凝胶包埋大肠杆菌制备微生物传感器 [J], 邢达杰;马仲强;周蓉;
3.聚苯胺/Fe-N-还原石墨烯改性导电膜耦合膜生物反应器/微生物燃料电池污水处理研究 [J], 李益华;李晖
4.我国每年消耗300万吨野生渔业资源,如何拯救?新形势下酶解鱼溶浆再获行业力证 [J], 庞涛
5.中国石油三次采油技术再获突破化学驱微生物驱将造福老油区 [J],
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MTT实验检测重组人角质细胞生长因子-2诱导不同细胞系增殖的差异

MTT实验检测重组人角质细胞生长因子-2诱导不同细胞系增殖的差异孙卫国;王芳;刘农乐;丁红梅;李邦印;李少华;邵宁生【期刊名称】《生物技术通讯》【年(卷),期】2011(022)002【摘要】目的:用MTT法检测重组人角质细胞生长因子-2(rhKGF-2)诱导不同细胞系增殖的差异,建立验证rhKGF-2生物活性的细胞模型.方法:利用载体pBV220-KGF-2原核表达和纯化rhKGF-2,然后用MTT法分别检测rhKGF-2诱导大鼠气管上皮细胞RTE、大鼠小肠上皮细胞IEC-6、小鼠成纤维细胞NIH/3T3和人喉癌细胞Hep-2增殖的能力.结果:rhKGF-2具有强促Hep-2细胞增殖的生物活性,面对RTE细胞、IEC-6细胞、NIH/3T3细胞的诱导增殖作用不明显.结论:在体外,rhKGF-2具有较强的诱导Hep-2细胞增殖的作用.本研究为确立验证rhKGF-2生物活性的细胞模型的选择提供了实验依据.%Objective: To detect the proliferation disparity of different cell lines by recombinant human keratinocyte growth factor-2 (rhKGF-2) stimulation with MTT experiment and to establish the cell sample to identify rhKGF-2 bioactivity. Methods: After expression and purification of rhKGF-2 in prokaryotic system, RTE cell, IEC6 cell, NIH/3T3 cell and Hep-2 cell were prepared to verify the ability of rhKGF-2 to stimulate proliferation of cell lines with MTT experiment. Results: rhKGF-2 had a strong biological activity of promoting Hep-2 cellto proliferate, but to RTE cell, IEC-6 cell and NIH/3T3 cell, its funcation of inducing proliferation was not obvious. Conclusion: rhKGF-2 can induceproliferation of Hep-2 cells in vitro, this study provided a cell model for the establishment of verification rhKGF-2 biological activity.【总页数】4页(P225-228)【作者】孙卫国;王芳;刘农乐;丁红梅;李邦印;李少华;邵宁生【作者单位】解放军第309医院,结核病研究所,北京,100091;军事医学科学院,基础医学研究所,北京,100850;军事医学科学院,基础医学研究所,北京,100850;军事医学科学院,基础医学研究所,北京,100850;解放军第309医院,结核病研究所,北京,100091;军事医学科学院,基础医学研究所,北京,100850;军事医学科学院,基础医学研究所,北京,100850【正文语种】中文【中图分类】Q25;Q78【相关文献】1.不同物理和化学因素对重组人角质细胞生长因子2稳定性的影响 [J], 周鑫;王晓杰;田海山;唐禄;焦悦;朱家楠;王莘;李校堃2.碱性成纤维细胞生长因子与猴骨髓间充质干细胞增殖及向神经元前体细胞分化:不同质量浓度对诱导剂隐丹参酮作用有差异吗? [J], 刘晓刚;邓宇斌;蔡辉3.重组人表皮生长因子对体外培养人角质细胞增殖的影响 [J], 郭文平;赵阳;卢小梅;张亚楼;阿孜古丽4.人角质细胞生长因子2在不同原核表达系统中的表达差异 [J], 孙卫国;张灵霞;熊志红;刘艳华;程小星5.重组人角质细胞生长因子异构体抑制兔角膜基质细胞增殖分化的研究 [J], 李薇;周远大因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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张汝根科研成果统计一、.教研论文作者1.高校应如何提高素质教育水平《航空教育》2003.5. 张汝根2.依靠课堂教学模式的改革来提高素质教育水平《中国教育研究》2003.8. 张汝根3.入世后，应如何看待我国高校的双语教学《中国现代教育研究》2003.10. 张汝根4.高等理工院校国际经济与贸易专业发展的思考《中国当代教育研究》2004.1 张汝根5.现代教育技术对我国高等教育教学的影响《中国教学纵横》2004.1. 张汝根6.国际贸易模拟实验室建设探讨《中国教学纵横》2004.2. 张汝根7.面对网络教学的构建如何实施创新教育《现代远距离教育》2004.2. 张汝根8.入世后，我国的高等教育也应与国际接轨《教育科技探索与实践》2004.7. 张汝根9.试析高等教育的大众化《教育科技探索与实践》2004.8. 张汝根10.当今国际企业管理的新趋势《国际学术论坛》2004.6. 张汝根11.大学课堂教学的现状与评价原则探讨《中国现代教育学报》2004.8. 张汝根12.对高等理工院校开展双语教学的思考《中国现代教育学报》2004.8. 张汝根13.国际经济与贸易专业双语教学模式的实践与探讨《中国教学纵横》2004.7. 张汝根14.入世形势下，如何实现企业的可持续发展《教育科技探索与实践》2004.10. 张汝根15.高等教育应满足社会经济发展的需要《中华教育创新杂志》2004.6. 张汝根16.入世后，外贸企业应如何与“狼”共舞《中国教育与教学杂志》2004.8. 张汝根17.面对WTO应如何提高我国高等教育的国际竞争力《中华优质教育》2004.6. 张汝根18.试析我国高校的双语教学《中华优质教育》2004.6. 张汝根19.高校应如何培养大学生的创新能力《中华优质教育》2004.7. 张汝根20.运用现代教育技术，深化高等教育改革《现代远距离教育》2005.1. 张汝根21.《国际贸易》课程实施双语教学的探讨《科教导刊》2006.6. 张汝根22.基于提高大学生动手能力的国际贸易专业教学改革模式的探讨《高等教育论丛》2007.4. 张汝根23.教学型高校学科专业建设协调发展探讨《高等教育论丛》2007.3. 张汝根.孙永波24.加强实践教学，培养国际贸易专业学生动手实践能力《黑龙江科技信息》2007.10.王莉.张汝根25.国际贸易专业实训练教学体系的构建《中国教育与发展》2007.6. 刘黎明.籍丹宁.张汝根26.基于提高大学生应用能力的《国际商法》教学改革的思考《活力》2007.5 .张振山.张汝根27.高校国际贸易专业应用型人才培养模式的构建《高等教育论丛》 2008.4. 张汝根28.Thinking about bilingual teaching of international economy and trade major in higher collegesof science and technology 第八届中国高校国际学术研讨会论文集2008.11. 张汝根29.国际贸易实务课程开展开放式实验教学的思考《实验室研究与探索》2009.12. 张汝根二.、科研论文1.WTO下，我国企业如何应对技术贸易壁垒《技术经济》2003.5. 张汝根2.面对WTO，如何在绿色营销中实现企业的可持续发展《技术经济》2003.7. 张汝根3.入世后，“中国制造”面临的挑战及应对策略《技术经济》2003.10. 张汝根4.“中国制造”应如何提高自身的国际竞争力《对外经贸实务》2002.9. 张汝根5.入世后，我国企业如何应对反倾销《经济师》2003.12. 张汝根6.入世后，我国国有企业存在的问题及对策《煤矿机械》2003.8. 张汝根7.入世后，经济全球化对我国的挑战及应对策略《煤矿机械》2003.12. 张汝根8.入世后，我国国有企业跨国并购存在的问题及对策《矿业工程》2003.5. 张汝根9.中国企业应如何走出去《煤炭技术》.2003.1. 张汝根10.入世后，我国专业外贸公司的出路《煤炭技术》.2003.4. 张汝根11.试论我国企业如何参与国际战略联盟的问题《中国矿业》2003.12 张汝根12.试论WTO争端解决机制及应对策略《矿山机械》2004.1. 张汝根13.试析绿色浪潮下的我国产品出口《矿山机械》2004.4 张汝根14.试析当今国际贸易发展的特点和趋势《技术经济》2004.5. 张汝根15.诌议我国企业如何应对反倾销《经济师》2004.1. 张汝根16.绿色贸易壁垒对我国农产品出口贸易的影响及对策《农村经济》2003.12. 张汝根17.入世后，如何培育我国企业的核心竞争力《江苏煤炭》2004.1. 张汝根18.我国绿色产品出口存在的问题及对策《技术经济》2004.5. 张汝根19.绿色营销-企业可持续发展的必然选择《矿山机械》2004.9 张汝根20.我国出口企业实行绿色营销的动因及对策《矿山机械》2004.10 张汝根21.试析当今的绿色贸易壁垒《矿山机械》2004.11. 张汝根22.当今制约我国对外贸易发展的瓶颈-科学技术《矿山机械》2004.12. 张汝根23.试论入世后我国矿业资源型城市煤炭出口的可持续发展《矿山机械》2004.9. 张汝根24.面对WTO 积极发展应世农业《中国教育与教学杂志》2004.9. 张汝根25.全面提高教育教学质量的体会和做法《中国科学学报》张汝根26.提高大学生素质教育水平的思考《中国教育研究与创新》2004.6. 张汝根27.我国企业采取绿色营销的博奕分析《生态经济》2005.12. 张汝根28.进出贸易模拟实验室建设探讨《实验室研究与探索》2005.12. 张汝根29.当前我国国有采煤机企业存在的问题及对策机械设计与制造》2006.7. 张汝根30.21世纪我国矿业资源型城市的可持续发展之路《矿冶工程》2006.8. 张汝根31.绿色消费与绿色营销的互动关系及启示《生态经济》2007.10. 张汝根32.无配俄时代中美欧纺织品贸易现状及我国对策《生态经济》2007.12. 张汝根33.试论我国教学型高校的科技管理模式《科技管理研究》2007.9. 张汝根34.加强实验教学，培养应用型国际贸易专业人才《实验室研究与探索》2007.7. 张汝根35.基于赶超理论的国际贸易技术传递效应及开放政策分析《中国科技产业》2007.9 .张汝根36.跨国公司对外直接投资综合评价研究《中国科技产业》2007.12. 张汝根37.试析东北国有企业的融资模式选择《中国矿业》2007.5. 张汝根38.黑龙江省煤炭资源型工业基地存在的问题及振兴策略研究《中国矿业》2007.9 . 张汝根39.加强中俄经贸合作促进东北区域经济迅速发展《税务与经济》2007.1. 张汝根40.我国农业实施气候保险的探讨《财会月刊》2007.8. 张汝根41.我国石油对外贸易存在的问题及发展对策《生态经济》2008.6. 张汝根42.试析我国产品出口遭遇国外技术贸易壁垒的成因及对策《生态经济》2008.8 张汝根43. 国际贸易技术传递效应分析及启示《科技管理研究》2008.9 张汝根44..我国煤炭资源国际化发展战略探讨《洁净煤技术》2008.5. 张汝根45.黑龙江煤炭工业对俄经贸合作的优势分析《中国矿业》2008.8. 张汝根46.试析中俄能源合作的问题及对策《中国矿业》2008.11. 张汝根47.入世对我国农业的影响及对策《中国科技产业》2008.10. 张汝根48.企业绿色营销绩效评价及应用《中国科技产业》2008.7. 张汝根49.环境资源政府财政投入研究《中国科技产业》2008.8.张汝根50.基于AHP法的煤炭企业自组织能力评价《中国科技产业》2008.5.张汝根51.黑龙江省产业结构与经济增长的关系及思考《中国科技产业》2009.1. 张汝根52.资源型城市经济转型经验及启示《生态经济》2008.12. 张汝根51.我国石油供需趋势预测及发展对策分析《中国矿业》2009.3. 张汝根52.黑龙江省扩大对俄经贸合作的思考《中国科技产业》2009.4. 张汝根53..国际电子商务的税收困难及对策《中国科技产业》2009.5. 张汝根54.金融海啸下我国出口发展模式的思考《生态经济》2009.6. 张汝根55. 我国能源安全及国际战略选择《生态经济》2009.8. 张汝根56. 跨国公司国际技术转移效应分析及政策启示《科技管理研究》2009.6 张汝根57. 基于科学发展观的国际技术进步效应及发展战略探讨《科技管理研究》2009.8 张汝根58.论科学发展观视野下的我国科技创新《科技管理研究》2009.9 张汝根59.刚性就业效应下的我国技术创新障碍及对策2009.10 张汝根60. 试析中俄能源合作的困难及对策《中国矿业》2009.7. 张汝根61.国际电子商务的税收困难及对策《中国科技产业》2009.5. 张汝根62.我国煤炭企业生产代价及解决对策《洁净煤技术》2009.3. 张汝根三、.主持和参与的项目立项：立项单位：负责人：1.国际经济与贸易专业应用型人才培养模式的实践与研究黑龙江省教育科学规划办张汝根2008年6月结题。

该项目已获得黑龙江省优秀教育科研成果二等奖。

2.提高大学生动手能力，培养应用型人才的实践研究黑龙江省新世纪高等教育教学改革工程项目张汝根2008年1月结题。

该项目已获得2009年黑龙江科技学院优秀教学成果二等奖。

3.国际贸易双语课程建设与研究黑龙江省高教学会十一五规划课题张汝根2007年6月结题。

该项目已获得2008年黑龙江省高教学会优秀教学成果三等奖。

4.黑龙江省煤炭工业对俄科技合作的模式研究(编号:GC09D507) 黑龙江省科技厅软科学攻关项目张汝根5.黑龙江省煤炭工业对俄经贸合作的实证研究中国煤炭工业协会科学技术研究项目张汝根6.黑龙江省煤炭工业对俄经贸合作的实证研究黑龙江省教育厅人文社科项目张汝根7.天津港保税区呁昊国际贸易有限公司电子外贸销售系统软件开发企业委托张汝根8.国际经济与贸易专业应用型人才培养模式的实践与研究黑龙江科技学院项目张汝根9.矿业资源型城市出口可持续发展的模式研究鸡西市社科联张汝根10.鸡西市对外贸易可持续发展模式研究鸡西市社科联张汝根11.入世对我国出口贸易的影响及对策鸡西市社科联张汝根12..以绿色产品引导我省企业产品出口的模式研究院内基金张汝根13.证卷交易计算机统计系统设计鸡西市科技局张汝根（3）14.国际贸易专业实训教学体系研究黑龙江省新世纪高等教育教学改革工程项目张汝根（3）2008年12月结题。

该项目已获得2009年黑龙江省优秀教学成果一等奖。