临床常用免疫学检验课件

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表1. 特异性IgE的分级标准
_______________________________________________________________
RAST分级 sIgE含量(ku/L) sIgE水平
临床意义
O
<0.35
无或不能检出
不过敏
I
0.35-

可疑或轻度
II
0.70-

轻度过敏
Ig 含量因检测方法不同而有差别,各地 区参考值也不相同,在判断结果时应综 合考虑。如有“M 蛋白”,可进一步作 血清或尿液免疫电泳,检测轻链和重链。
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二. 血清总IgE测定 IgE为血清中含量极少的一种免疫球蛋白,
与过敏性疾病和寄生虫感染有关。目前检测 方法有多种,包括 ELISA、间接血凝试验 (indirect hemoagglutination assay IHA )、 RIA、电化学发光法 (electrochemiluminescence immunoassay, ECLIA,)、IFA 等。 〖参考值〗 0.1-150IU/ml
III
3.5-

中度过敏
IV
17.5-
特高(I)
中度到重度
V
50-
特高(II)
重度过敏
VI
>100
特高(III)
特别严重之
过敏
___________________________________________________________________
例如:报告格式:sIgE(d1)81.3ku/L(Ⅴ级)
般男性高于女性;新生儿水平低,青春 期水平最高,30岁以后逐渐下降。不同 种族血清总IgE水平也有差别,混血人种 比白人高3-4倍,黑人水平更高,黄种 人水平也较高。总IgE水平高不一定是过 敏;过敏者总IgE也不一定高。因此,在 评价总IgE结果时要考虑到以上因素。
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三. 特异性IgE抗体(sIgE)的检测 过敏患者的血清中存在着具有
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二、循证检验医学——新世纪检验 诊断高质量发展的新天地
定义 循证医学(evidence-based medicine,EBM)指:在对患者作出新的 医疗决策的过程中,必须审慎、明确和 明智地运用当前所能获得的最佳证据。 这里,“最佳证据”指不仅可以否定迄 今已被视为临床诊断或辅助诊断的“金 标准”,并且其本身也可被未来的更准 确、更有效新证据所取代。
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一. IgG、IgA、IgM测定 免疫球蛋白(Immunoglobulin ,Ig)
是一组具有抗体活性的蛋白。存在于 机体 的血液、体液、外分泌液及某些细胞的膜 上,分为 IgG、IgA、IgM、IgD、和IgE 五 类。其中 IgG、IgA、IgM 含量较多,一般 应用单向免疫扩散法、免疫比浊法和速率 散射比浊法测定。
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1.CAP检测系统 〖原理〗CAP,一个很小的塑料帽状物,其内置有 多孔性、弹性和亲水性的纤维素粒,此粒多孔, 吸咐了更多的变应原,加入血清,血清中的sIgE 就会和变应原结合,再加入酶标抗人IgE,再加入 荧光显色系统,在荧光分光光度计上测定荧光强 度,计算机提供相应软件,自动计算出结果。报 告sIgE含量。
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〖临床意义〗 阳性结果可视为多种sIgE的总
和,比值越大,表明体内sIgE越多, 这可能是某一种变应原的sIgE很高, 也可能是多种变应原sIgE累加的结 果。
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〖注意事项〗 phadiotop中未包括律草花粉及蚕丝,这两种
在我国都是很重要的变应原,如患者只对律草花 粉或蚕丝过敏,phadiotop则为阴性。但如果同时 还合并有其它 变应原过敏,phadiotop仍为阳性。 phadiotop阳性只说明患者对常见的空气中的 变 应原过敏,但对何种变应原过敏,仍需进一步检 查。phadiotop作为过筛实验,可筛出非过敏的患 者,以免进行不必要的特异性变应原检查。由于 phadiotop中包被的是国外的抗原,有时临床诊断 与phadiotop结果有不符的个别现象发生。
变应原特异性的IgE 称之为特异性 IgE,如对牛奶过敏者则有针对牛奶 变应原的IgE;对蒿草花粉过敏者, 则有针对该花粉的IgE,该抗体只 能与该变应原特异性结合。
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sIgE的测定在变态反应体外诊断中占有重要 地位。在呼吸疾病中,过敏性哮喘,过敏性鼻炎, 职业性哮喘等患者血清中均能检出 sIgE。sIgE检 测方法有许多种,目前临床上常用的有ELISA, FEIA,免疫印迹等。随着sIgE测定技术的完善, 此项测定已日趋商品化,开发了各种检测系统, 如CAP过敏原检测系统,Master过敏原检测系统, Px过敏原检测系统等,这些测定系统包括了仪器、 试剂、计算机软件处理系统。国内目前应用最多 的是CAP检测系统。
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循证医学同样也给检验医学带来了发展机遇。 循证检验医学要求检验医师不仅向临床医师解释 检验项目的意义,而且要帮助他们选择正确的检 验项目,合理地利用实验室资源。这是因为有时 候临床医师并不一定熟悉这些新的诊断指标,相 反,过多的检查会提供一些不必要的信息和消耗 不必要的费用,从而干扰诊断、治疗和医疗经济 的合理分配。检验医师还必须使用综合分析方法 对诊断指标进行评价。
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(一)现代检验诊断特点 主要有:①自动化和智能化。②高
质量控制。③微量化标本、多参数分析。 ④流水线检测和床边检测并存。⑤基因 检测前景可喜。
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(二)现代检验诊断面临挑战 虽然现代检验诊断的技术正在长足发
展,但也面临许多挑战。表现在: 1.如何选择日益增多的检验诊断项目? 2.如何选择有多种方法的检验诊断项目? 3.如何判断检验诊断新项目的应用价值? 4.如何合理选择检验诊断项目,降低检验 诊断的费用?
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(3)要结合临床症状,体格检查, 常规化验,当地的实际条件,体内 试验以及体外试验的结果综合考虑, 才能得出比较正确的结论。
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2.吸入物变应原过筛试验(phadiotop)。 〖原理〗 呼吸道变态反应病在临床上很常见,有 些病很难从临床上区别是否过敏,如过敏性鼻炎 和血管运动性鼻炎的临床表现相似,外源性哮喘 和内源性哮喘也有共同之处;在临床工作中首先 要区别是否属于过敏范畴。 血清总IgE测定作为 过敏性疾病的过筛试验曾得到广泛应用,但其特 异性、敏感性均不高,总IgE高并不一定是过敏, 过敏者的总IgE水平也不一定高。过敏与否取决于 sIgE的存在。
临床常用免疫学检验 1. 免疫功能检验 体液免疫 细胞免疫 2. 感染免疫学诊断试验 病毒性肝炎;AIDS;STD;其 它传染病;CRP 3. 自身免疫病的检验 4. 肿瘤标志物检验
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检验医学与临床医学
检验医学(laboratory medicine) 是一门临床学科,它运用不断发展的 自然科学和医学科学技术对患者血液、 尿液和各种体液标本进行检验,并以 发展检验技术、提高检验质量为重点, 达到对患者疾病的诊断、病情观察和 预后判断等目的。
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第一章 免疫功能检验 (Immunological Function Test)
免疫功能检验分为细胞免疫功能检验 和体液免疫功能检验,对于了解患者的免 疫状态,以及细胞的各种功能,为深入研 究和认识机体免疫系统的生理、病理改变, 阐明某些疾病的发病机制和临床诊断与治 疗将提供有利的信息。下面简单介绍临床 常用的一些免疫检验项目。
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目的 主要是①不断弄清疾病的病因 和发病危险因素的证据,为临床诊断 和预防提供最为可靠的依据。②提高 疾病的早期诊断率,继而提高疾病的 治愈率。③改善患者的预后,提高患 者的生存质量。④提高临床医疗管理 和决策水平。⑤精选临床检查和治疗 方案,降低医、患双方的医疗费用, 使患者得到最合理的临床医疗服务。 ⑥促进临床医学教学水平,培养业务 精湛、医德高尚的临床医学人才。
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〖参考值〗 依年龄、性别、地区等因素有 差异。
IgG: 6.94-16.18g/ L IgA: 0.68- 3.78g/ L IgM: 0.60- 2.63g/ L 〖临床意义〗 1. Ig 含量减低:一种或多种Ig 水 平减少,分原发性和继发性。见于各种先 天性或获得性免疫缺陷病。继发性常与免 疫抑制剂应用、射线、蛋白质丢失、营养 不良等有关。也可见于细胞毒药物治疗后。
其中 d1代表屋尘螨。每一过敏原均有代号,可查阅相关资料
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〖临床意义〗 sIgE测定是体外检测变应原的重要手段。其
试验的灵敏度及特异性都很高、特别是对花粉、 螨类、宠物皮屑、牛奶、鸡蛋、坚果等变应原的 sIgE测定,灵敏度和特异性都在90%以上,有的 甚至接近100%。根据sIgE含量可确定患者 变应 原 种类,可评价患者过敏状态,脱敏治疗的疗效, 对哮喘的诊断和鉴别诊断有重要帮助。CAP吸咐变 应原有单价,有多价,如多价霉菌,多价食物 (Fx5E,含6种食物过敏原),多价羽毛等,多价 变应原阳性后,再进一步确定单个变应原成分。
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〖适应征〗 (1)临床怀疑过敏性疾病,支气管哮喘 等; (2)不适宜作皮内试验的患者; (3)脱敏治疗的病人观察疗效。 (4)抗组胺等对症治疗药物影响皮肤反 应者; (5)皮试可能发生危险者;
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(6)不能用于皮试的变应原 ,如毒 素,非水溶性或高度致敏性物质; (7)食物过敏,皮试结果不可靠者。 (8)皮试结果可疑者。 〖方法〗 RAST FEIA 〖参考值〗CAP系统结果报告。一般 报告sIgE含量。单位ku/L。正常人 <0.35ku/L,为阳性。sIgE的分级标 准见表。
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现行传统医学是以经验医学为主, 而 EBM则要求选用最新的、经过临 床研究机构科学评价过的、更为准 确的新证据,而不采用尚未经过严 格评价的、目前仍处于基础医学研 究阶段的所谓“新证据”。
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概念:循证检验医学 (evidence- based laboratory medicine,EBLM)就是按照 循证医学“以当前最佳证据 为基础”的原则,用临床流 行病学的方法学规范检验医 学的研究、设计和文献评价, 其任务是向临床医师提供反 映患者真实情况的检验证据。
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2. Ig含量增高: (1) 多克隆性增高,见于各种慢性 感染、慢性肝病、某些自身免疫病,如 SLE、RA、SS等;也见于寄生虫疾病、 结节病等。 (2) 单克隆性增高,又称 “M”蛋 白,主要见于免疫增殖性疾病,如多发 性骨髓瘤、重链病、轻链病,巨球蛋白 血症等。
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〖注意事项〗 Ig水平与年龄、性别有一定的关系,
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〖临床意义〗 1. IgE增高:见于IgE型多发性骨
髓瘤、特应性哮喘、特应性皮炎、过敏 性鼻炎、寄生虫感染、热带嗜酸细胞增 多症、SLE、RA及某些霉菌病等。
2. IgE减低:一般无意义。可见于 原发性无丙种球蛋白血症、恶性肿瘤及 细胞毒药物治疗后。
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〖注意事项〗 年龄、性别均可影响总IgE水平。一
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phadiotop是根据变应原吸附原理, 将空气中90%以上的最为常见的变应 原吸咐到CAP上。患者血清中只要有 针对其中之一种变应原的sIgE,即可 呈阳性反应。据此可测知患者是否为 吸入物变应原过敏者。
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与sIgE测定不同的是所用CAP为特制的, 内含多种吸入物变应原。结果报告不是含 量,而是比值,即待测血清吸光度与参考 血清吸光度之比。 〖参考值〗 正常人为阴性,当待测血清 吸光度大于参考血清吸光度时报告为阳性。 根据比值,可将 phadiotop 阳性者分为 四个等级。弱阳性1-;阳性2-;强阳性 20-;特强阳性40-。
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〖注意事项〗 (1) 有明显的地域性,该法所使用 的均系进口产品生产国的与我国的不 一定完全符合。我国常见的 变应原 , 国外不一定有。因此,评价结果应注 意区别。
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(2)某些小分子的变应原 ,sIgE 测定的灵敏度不高,如青霉素降解 物,对这些变应原 ,如测不出 sIgE并不除外过敏的可能性。
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一些专家认为,目前应用的实验室检查 项目,在临床应用前并未给予充分的评价。 Jaeshke等认为,判断一项诊断试验是否 有用的最终标准是:试验是否增加了有用 的诊断信息。Burke认为,如果一项试验主 要用于筛检,其敏感性一定要高,但易出 现假阳性。任何新的检验只有在充分评价 其可靠性、准确性后才能用于临床实践。 而现实是,由于制造商的热情提供试剂、 临床医师和检验人员的欣然接受,许多新 检验项目在未被评价充分之前,就已被积 极的推向了临床应用。
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