川芎嗪对哮喘小鼠p38蛋白激酶及类胰蛋白酶表达的影响

川芎嗪对哮喘小鼠p38蛋白激酶及类胰蛋白酶表达的影响梅永添;黄翠萍;胡克;赵鹏展;肖锦秀;赵景景

【摘要】Objective To investigate the effects of ligustrazine on the expression of p38 mitogen - activated protein kinase (p38MAPK) and tryptase in asthmatic mice. Methods 30 BALB/c mice were randomly divided into 3 groups- control group, asthmatic group and ligustrazine intervention group, with 10 mice in each group. Mice in the asthmatic group and the ligustrazine intervention group were treated with chicken ovalbumin (OVA) and adjuvant (aluminum hydroxide). One hour before mice in the ligustrazine intervention group were exposed to OVA aerosol, 80 mg/kg ligustrazine were given by intraperitoneal injection, while the control group was given intra-peritoneal injection of normal saline for sensitization and inhalation. Within 24 hours after the last challenge, mice were sacrificed to take right middle lobe for lung slices, which were examined histologically. The expression of p38MAPK and tryptase were semi-quantitative de-termied by using immunohistochemistry SP method. Results The pathological changes in the ligustrazine intervention group were better than that of the asthmatic group. The results of immunohistochemical determination showed that lung tissue of mice

p38MAPK ( MOD; 0. 156 ±0.003) and tryptase (MOD; 0.204 ±0.006) in the ligustrazine intervention group less than those of the asthma group [ p38 MAPK MOD: 0. 217 ± 0. 014, tryptase MOD: 0. 239 ± 0. 011 ] (P < 0. 05). Conclusion The results of gustrazine alleviating airway inflammation in

asthma may be achieved by influencing p38 protein kinase signaling pathway and the activation of mast cells.%目的探讨川芎嗪对哮喘小鼠p38蛋白激酶(p38MAPK)及类胰蛋白酶表达的影响.方法将30只BALB/c小鼠随机分为3组:A组(对照组)、B组(哮喘组)及C组(川芎嗪组),每组10只,采用鸡卵清蛋白(OVA)与免疫佐剂(氢氧化铝)腹腔注射致敏及用1％ OVA生理盐水溶液雾化激发的方法制备哮喘小鼠模型,C组小鼠于每次激发前1h腹腔注射川芎嗪(80mg/kg/d),每天1次,持续5d,A组腹腔注射等量生理盐水致敏及雾化吸入.行HE染色镜下观察各组肺组织病理改变,并采用免疫组织化学染色SP法半定量测定行肺组织中

p38MAPK及类胰蛋白酶表达情况.结果 C组小鼠肺组织HE染色病理改变较B组有减轻,且免疫组化结果显示测定C组小鼠肺组织较B组p38MAPK及类胰蛋白酶MOD有降低(P＜0.05).结论川芎嗪减轻哮喘气道炎症,部分机制可能是通过影响

p38蛋白激酶信号通路及肥大细胞活化实现.

【期刊名称】《临床肺科杂志》

【年(卷),期】2011(016)012

【总页数】3页(P1829-1831)

【关键词】哮喘;p38蛋白激酶(p38MAPK);类胰蛋白酶;川芎嗪

【作者】梅永添;黄翠萍;胡克;赵鹏展;肖锦秀;赵景景

【作者单位】430060 湖北武汉,武汉大学人民医院呼吸内科;341000 江西赣州,赣州市人民医院呼吸内科;437100 湖北成宁,威宁学院临床医学院;430060 湖北武汉,武汉大学人民医院呼吸内科;430060 湖北武汉,武汉大学人民医院呼吸内

科;430060 湖北武汉,武汉大学人民医院呼吸内科;430060 湖北武汉,武汉大学人民医院呼吸内科

【正文语种】中文

支气管哮喘是由嗜酸性粒细胞、肥大细胞、淋巴细胞等多种细胞及细胞组分参与的慢性气道炎症性疾病[1，2]。有研究表明p38蛋白激酶可通过介导细胞凋亡、促

进各种细胞因子的合成和炎症细胞的募集等方式在细胞的应激反应和炎症刺激中有重要作用。类胰蛋白酶是肥大细胞活化和脱颗粒的特异性标志[3，4]，在哮喘的发病机制中起重要作用。川芎嗪是活血化淤药物川芎的提取物，其主要成分是2，3，5，6-四甲基吡嗪[5]。本研究通过建立哮喘小鼠模型，观察川芎嗪对于p38蛋白

激酶及类胰蛋白酶表达的影响，为探讨川芎嗪治疗哮喘的机制提供一定的实验依据。材料与方法

一、主要试剂与材料

鸡卵清蛋白(OVA，美国Sigma公司)及氢氧化铝(天津市双船化学试剂厂);盐酸川

芎嗪注射液(浓度为20 mg/ml，批号0011012，郑州卓峰制药有限公司);抗Tryptase单克隆抗体AA1(一抗)及SP试剂盒由福州迈新公司提供;p38MAPK抗

体(美国Santa cruz公司);JSC-A型超声雾化器(辽宁鞍山市电子医疗仪器厂);图像

采集系统及图像分析系统(武汉大学人民医院中心实验室)

二、方法

小鼠哮喘模型的建立和分组 SPF级健康BALB/c小鼠30只(由武汉生物制品研究

所实验动物中心提供，许可证号:SCXK鄂2008-0003)，雌雄各半，体重18±2 g，随机分为对照组、哮喘组和川芎嗪组，每组10只。哮喘组与川芎嗪组以0.2 ml OVA混悬液(含OVA 400 μg+氢氧化铝20 mg)于第0，7，14 d腹腔注射致敏小鼠，第21 d用1%OVA生理盐水溶液雾化激发小鼠，每天1次，每次30 min，

连续5 d，以小鼠出现呼吸急促，口周发绀伴腹式呼吸，打喷嚏，站立不稳，前肢缩抬及二便失禁为激发成功。川芎嗪组小鼠于每次激发前1 h给予川芎嗪(80