4步提取硒12.5

1 实验原理：渔塘坝土壤硒结合态的分布模式主要是有机结合态硒、元素态硒、交换态.
用以下试剂进行连续提取1.用于检测可溶于水的四价或六价硒2.用于检测吸附和交换态的磷酸盐缓冲剂3.用于检测被吸附的四价硒和可溶的有机硒的NaOH。

4.检测零价的亚硫酸硒5. 用14%的硝酸和70%的高氯酸测定萃取剩下的硒的
我们取其中的四种形态来分析：水溶态、可交换态、有机态、元素态。

1.1硒的水溶形式包括Se(IV), Se(VI),和溶解的有机硒。

1.2 磷酸盐离子(PO3-4)，磷酸盐不仅能使包括含硒的成分植物蛋白质溶解，还能从样品表面吸附Se(IV).
1.3 NaOH能释放残留的硒，用NaOH来提取磷酸缓冲液提取的残留物。

1.4用Na2SO3提取有效溶解的元素硒。

1.5 为了测定提取的移动的总硒，用2 mL 14 N HNO3/70% HClO4 (1:1)混合物(210°C，15 min)将部分试剂氧化，使难溶的Se转变为Se(VI)，加入1mL12 N HCl(110°C for 30 min)将Se(VI)变为Se(IV)，在HG-AAS分析前用10%稀盐酸稀释到25ml。

从A处理过的每个提取的Se(IV) 的浓度将直接测定。

2 实验用品：
附：
0.1M NaOH溶液的配置：称取4.001g于烧杯中，加入约10ml蒸馏水稀释，待固体颗粒溶解后转移到1000ml容量瓶中，用蒸馏水将烧饼冲洗3次，冲洗液转移到容量瓶中，然后定
容。

0.1M K2HPO4-KH2PO4(ph=7)：称取8.7115g K2HPO4于烧杯中，加入约10ml蒸馏水稀释，待固体颗粒溶解后转移到500ml容量瓶中，用蒸馏水将烧饼冲洗3次，冲洗液转移到容量瓶中，然后定容。

称取6.8405g K2HPO4于烧杯中，加入约10ml蒸馏水稀释，待固体颗粒溶解后转移到500ml容量瓶中，用蒸馏水将烧饼冲洗3次，冲洗液转移到容量瓶中，然后定容。

计算公式：m=c*V*Mr=0.1*0.5*174.23=8.7115
m=c*V*Mr=0.1*0.5*136.09=6.8405
1M Na2SO3：称取31.51克的亚硫酸钠于烧杯中，待亚硫酸钠溶解后转移到250ml容量瓶中，然后定容至250ml。

混酸：将25ml14 N的硝酸和12.5ml 70%的高氯酸混合，转移到100ml容量瓶中，定容。

硒标准溶液:将国家标准物质中心的硒标准贮备液(100mg/L)用6%(0.72M)HCI逐级稀释得到。

或者:称取1.000g高纯硒粉，用20mLI:1(V/V)HNO3和水浴加热溶解后，去离子水定容至1000mL，摇匀，制成硒浓度为1mg/mL的硒标准储备液。

使用时用6%(0.72M)的盐酸逐级稀释成1pg/mL和0.1pg/mL等硒标准使用液。

10%HCl:用量筒量取36.5%的浓盐酸27.4ml于100ml容量瓶中，然后用二次水定容。

3 实验步骤：
3.1形态提取
3.1.1 水的提取（复样）
称取土壤样品1.5克装入40ml的聚四氟乙烯的离心管中。

加入25ml的二次水，将试管盖盖好后震荡2小时。

然后用离心机(3000 rpm; 25 min)分离，最后将上清物质转移到60ml 的聚乙烯试管（1号）中。

（注意不要将沉淀倒出，下同。

）
3.1.2 磷酸盐提取
向上步难溶物中加入25ml的0.1mol磷酸盐缓冲剂，然后在震荡台上震荡2小时。

试管离心(3000rpm，25min)，将上浮物质转移到聚乙烯试管中（2号），向离心管中加入10ml的二次水清洗难溶物后，重复震荡和离心，将上浮物质转移到2号聚乙烯试管中。

3.1.3 NaOH的提取
向上步提取难溶物的试管中加入25 mL 0.1 mol/L NaOH，摇动试管使粉末的样品悬浮。

将试管放入90度的水中加热2小时。

加热后，将试管离心(3000 rpm, 25 min)，将上浮物质转移到60ml的聚乙烯试管（3号）中。

用10ml的二次水清洗难溶物后，重复震荡和离心，将上浮物质转移到3号聚乙烯试管中。

3.1.4 亚硫酸钠的提取（复样）
向上步提取后的离心管中加入25 mL 1 mol/L Na2SO3 (用HCl 将pH 调到7.0)，溶解的
样品用超声纳探头(2kHz，2min)，在超声纳声波中停留8小时。

然后离心(3000rpm,25min)，将上清液移入60ml聚乙烯瓶（4号）中。

将沉淀用10ml 二次水清洗，重复震荡和离心，将上清液移入4号聚乙烯试管中。

3.1.5残留态的提取
向上步的难溶物中加入20ml的混酸溶液，然后加入5ml的HF溶液，然后在震荡台上震荡2小时。

试管离心(3000rpm，25min)，将上浮物质转移到60ml聚乙烯试管（5号）中，用10ml二次水洗涤沉淀，重复上面震荡和离心，将上浮物质转移到5号聚乙烯试管中。

3.1.6 测定总硒
分别取上面四步的提取液各3ml于锥形瓶中混合，加入2 mL 14 N HNO3/70% HClO4 (1:1)混合物后加热(210°C，15 min)，再加入1mL 12M HCl (110°C ，30 min)，将消化物转移到25ml的容量瓶中，用10%的稀HCl定容，然后用HG-AAS分析。

3.2 总硒的测定
称取1.5g土壤样品于长颈瓶中，加入15 mL的混酸后加热（210度），待溶液变得透明时加入1 ml的12M HCl然后加热（110度，30min），将消化物转移到25ml的容量瓶中，用10%的稀HCl定容，用HG-AAS来测定硒的总量。

4. 连续提取流程。