实验八 邻二氮菲分光光度法测定微量铁

实验八邻二氮菲分光光度法测定微量铁
一、实验目的
2. 掌握邻二氮菲的制备方法及其在测定微量铁中的应用。

3. 理解标准曲线的绘制方法及其在实验中的应用。

二、实验原理
邻二氮菲是一种具有荧光特性的有机物，其分子结构如图1所示。

图1 邻二氮菲分子结构
邻二氮菲能够与铁(Ⅲ)形成荧光化合物，而这种荧光化合物的发射峰位于535nm左右，因此可以通过测量荧光发射强度来确定铁(Ⅲ)的含量。

在实验中，首先要制备邻二氮菲溶液。

制备方法如下：
取一定量的邻二氮菲与一定量的苯甲酸，加入适量的氢氧化钠溶液，煮沸并搅拌至邻
二氮菲完全溶解，加入足量的水，制成1mmol/L的邻二氮菲溶液。

然后测定铁离子溶液的荧光强度，在一定波长下测定它的荧光强度，得到标准曲线。

最后将待测样品溶液与邻二氮菲溶液混合，测定混合溶液荧光强度，并用标准曲线计
算出铁离子的含量。

三、实验步骤
2. 制备标准曲线。

将一定量的FeCl3溶液加入邻二氮菲溶液中，混合均匀后，在
535nm处测定其荧光强度。

重复上述步骤，得到一系列不同浓度的FeCl3溶液荧光强度数据。

3. 测定样品荧光强度。

将待测样品溶液与邻二氮菲溶液混合，混合均匀后，在535nm 处测定其荧光强度。

4. 计算样品中Fe离子的含量。

使用标准曲线计算样品中Fe离子的含量。

四、实验注意事项
1. 实验中所用的器皿应干净，避免污染。

2. 制备邻二氮菲溶液时应注意氢氧化钠的浓度和量，以确保邻二氮菲完全溶解。

3. 实验室应尽量保持安静，避免干扰荧光信号。

4. 注意各种溶液的安全操作，如防止接触皮肤和眼睛。

五、实验结果及分析
利用邻二氮菲分光光度法测定一系列不同浓度的FeCl3标准溶液，得到的测量结果如
下表所示。

所得数据可用图表表示，如下图所示。

根据标准曲线可以得到如下方程：y = 0.2948x + 2.2939，其中y表示荧光强度，x表示FeCl3溶液的浓度。

六、实验总结
本实验通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁，熟悉了邻二氮菲荧光原理及其制备方法，掌握了标准曲线的制备方法和其在实验中的应用。

同时，我们也对实验中的注意事项进行
了总结和分析。

这些知识对我们今后继续进行科学研究和实验操作具有重要的参考价值。