液相色谱-串联质谱法测定化妆品中米诺地尔含量的不确定度评价

当代化工研究
Modern Chemical Research
156科研开发2020•14液相色谱-串联质谱法测定化妆品中米诺地尔
含量的不确定度评价
*付金凤朱晓雯
(常州市食品药品监督检验中心江苏213001)
摘耍：对《化妆話安全技术规范》(2015年版)中有关米诺地尔含量测定进行不确定度的评估.参考JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》,建立数学模型，考察了分析过程中引入不确定度的主要因素，计算出合成标准不确定度和扩展不确定度.结果表明，标准品称量、标准系列溶液的配制、进样精密度、样品回收率对样品的相对不确定度贡献较大.
关键词：液相色谱-串联质谱法；化妆忌不确定度
中图分类号：T文献标识码：A
Uncertainty Evaluation of Determination of Minoxidil in Cosmetics by Liquid
Chromatography-Tandem Mass Spectrometry
Fu Jinfeng,Zhu Xiaowen
(Changzhou Food and Drug Supervision and Inspection Center,Jiangsu,213001) Abstract z The uncertainty of M inoxidil content determination in"Cosmetic Safety Technical Specification"(2015Edition)was evaluated. Referring to JJF1059.1-2012"Evaluation and E xpression of U ncertainty in Measurement",a mathematical model was established,the main f actors of introducing uncertainty in the analysis process were investigated,and the combined standard uncertainty and expanded uncertainty were calculated. The results show that the weighing of s tandard s ubstance,the p reparation of s tandard s eries solution,the p recision of s ample inlection and the recovery rate of s ample contribute greatly to the relative uncertainty ofsample.
Key words i liquid chromatography-tandem mass spectrometry\cosmetics\uncertainty
1.引言
近年来，部分不法商家为获取利润，盲目追求产品的有效性，向育发类化妆品非法添加米诺地尔，它虽然可以刺激毛囊上皮细胞的增殖和分化，但极容易产生刺激性皮炎、眩晕、过敏、多毛症、血压下降等不良反应⑴。

《化妆品安全技术规范》（2015年版）切中明确规定化妆品中严禁添加此成分。

因此，检测各种育发类产品中是否非法添加米诺地尔，对于化妆品生产质量控制，保障人民生命健康安全具有重要意义。

2.材料与方法
⑴仪器、试剂
Shimadzu LCMS-8050液质联用仪（Shimadzu公司）；XPE105电子天平（d=0.Olmg,Mettler-Toledo公司）；计量检定合格的A级玻璃量器。

米诺地尔标准品（中国食品药品检定研究院，批号100238-201702,纯度99.7%）o
⑵仪器分析条件
色谱柱：Agilent Zorbax Eclipse Plus C18（2.1X 100mm, 3.5um）:流动相：以0.2%甲酸水溶液为流动相A,以含0.2%甲酸的甲醇为流动相B,柱温30°C,流速0.3ml/min,梯度洗脱程序：0-2min：5%-25%B,2-4min：25%-55%B,4~ llmin：55%-80%B,ll-18min：80%-90%B。

以三重四极杆串联质谱仪检测；电喷雾离子源（ESI）,扫描方式：正离子扫描，检测方式：MRM…
⑶标准储备液的制备方法
精密称取米诺地尔标准品10mg（精确到0.00001g）于10mL容量瓶中，加甲醇溶解稀释，定容至刻度，得标准储备液I。

用5mL移液管精密吸取上述溶液，置100mL量瓶中，用90%乙睛稀释定容，得标准储备液II。

用移液管精密吸取标准储备液II lmL,置50mL量瓶中，用90%乙睛稀释至刻度，摇匀，得标准储备液皿。

⑷标准系列溶液的制备方法
用lmL、ImL、5mL、ImL、2mL移液管精密吸取标准储备液III至lOOrnL.50mL、100mL、10mL、lOtnL量瓶中，用ImL、ImL、3mL移液管精密吸取标准储备液II至100mL、50mL、100mL量瓶中，用90%乙睛稀释定容至刻度，摇匀，得标准系列溶液。

⑸供试品溶液的制备方法
精密称取本品lg（精确到0.001g）于10mL容量瓶中，加入ImL饱和氯化钠溶液，涡旋30s后加入乙膳，定容至刻度，涡旋30s,超声提取30min,涡旋lmin,4500rpm离心5min,取上清液经0.45urn微孔滤膜过滤后，滤液作为待测液备用。

⑹测定方法
精密吸取上述标准系列溶液及供试品溶液各5ul,注入高效液相色谱-质谱联用仪，测定峰面积，以标准曲线法计算供试品中相当于米诺地尔标准品的浓度。

3.结果与分析
⑴数学棋型
（»=D・p・V/m
式中：3-化妆品中米诺地尔的质量分数，ng/g；D-样品稀释倍数（不稀释则为1）;P-从标准曲线得到米诺地尔的质量浓度，ng/mL；V-供试品定容体积，mL；旷样品称样
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量，go
⑵供试品制备过程弓I入的不确定度
①供试品称量过程：根据天平计量检定证书，所使用
电子天平的最大允差是土0.0005go称量2次，按正态分布，
取k=V2[3-4],则u(m)=a/k=2X0.0005V2/7.0711X10~40样品
称量5次，称样量分别为1.0012g,0.9998g、1.0033g、
1.0211g, 1.0069g,由称量引起的相对标准不确定度：
u r(m)=u(m)/m,合成相对标准不确定度：
u r(m x)=7[u r(m1)2+U r(m2)2+u r(m3)2+u r(m4)2+u r(m5)2]/5=
0.000703o
②样品稀释过程：实验中使用了10mL(A级)容量瓶，其
容量允差为土0.02ml,按矩形分布，取k=V3,由容量瓶引
入的相对标准不确定度为：0.02/^/10=0.00115。

玻璃仪
器校准温度为20°C,而实验室温度波动范围为20±5°C,水
的膨胀系数为2.1X107/9,按均匀分布，取k=V5,则温差
效应引起的水体积不确定度为5X2.1X1O VV3=O.000606o
则样品稀释过程引入的合成相对标准不确定度为：
u r(v)=V0.001152+0.0006062=0.00130=
(3)标准品溶液配制过程引入的不确定度
①标准品称量过程：根据天平计量检定证书，所使用
的电子天平的最大称量误差为土0.OOOlgo称量两次，按正
态分布，取k=返,贝!)u r(m.)=o.1X2/72=0.1414,称取由天
平引入的相对标准不确定度u”(m)=u r米诺地尔标准
品称样量为10.83mg,由此引入的相对标准不确定度分别为
0.01306o
②标准系列溶液的稀释制备过程：校准溶液配制过程中
使用了一系列的玻璃量具，均为A级，按照矩形分布，取1^=
V3,标准系列溶液的稀释制备过程引入的相对不确定度分
量见表1。

表1标准系列溶液配制引入的不确定度分量表
玻璃量具最大允
差/mL
标准不确
定度
量具校准引
起的相对标
准不确定度
温度变化引
起的相对标
准不确定度
合成相对
标准不确
1OmL量瓶±0.0200.01150.001150.0006060.001300 50mL量瓶±0.0500.02890.0005770.0006060.000837 100mL量瓶±0.1000.05770.0005770.0006060.000837 ImL移液管±0.0070.004040.004040.0006060.00409 2mL移液管±0.0100.005770.002890.0006060.00295 3mL移液管土0.0150.008660.002890.0006060.00295 5mL移液管±0.0150.008660.001730.0006060.00183
标准系列溶液浓度配制过程中引入的相对不确定度分别0.00637、0.00637、0.00522、0.00645、0.00579、0.00481、
0.00481、0.00389,取其中最大值，则u el(v Q)=0.00645o
⑷液质联用仪31入的不确定度“
本研究采用岛津LCMS-8050三重四级杆进行测定，其中SIL-20A自动进样器吸样和LCMS-8050质谱检测器定量最大允差分别为土0.1%和土1%,按照均匀分布，取k=V3,液相和质谱的相对标准不确定度为：u r(lc)=0.1%/V3=O.000577；u(ms)=l%/V3=0.00577,LC-MS/MS测定的相对标准不确定度痴：u r(a)=V u r(l c)2+u r(ms)2=0.00580o
(5)样品前处理引入的不确定度
实验中采用样品加标计算回收率来计算样品前处理引入的偏差，其相对标准不确定度ur(rec)=s/F,,c/VH,样品重复测定6次，平均回收率(F“。

)和标准偏差(s)分别为93.58%,
1.74%,由此引入的相对标准不确定度为0.00759o
⑹合成标准不确定度、扩展不确定度及结果表述
液质联用法测定化妆品中米诺地尔的相对标准不确定度为：
U rel(C x)=V(Ur(m*))2+(u,.(v))2+(w(md)2+(Uz(Vo))2+(Ur(a))2+(u『(rec))2 =0.0175ng/go
测得样品含量为201.5ng/g,则样品的合成标准不确定度为：u(C x)=CXu rel(C i)=3.53ng/g,在95%的置信区间下，取包含因子k=2,则扩展不确定度为：U(C*)=k X u(C*)= 7.05ng/g,样品中米诺地尔含量为201.5±7.05ng/g。

4.结果与讨论
通过对育发类化妆品中非法添加米诺地尔含量测定的不确定度进行考察与分析，发现主要由标准品称量、标准曲线系列溶液的配制、仪器进样精密度及样品回收率引起。

因此，在实际实验过程中，要定期对天平和液质联用仪进行检定和维护保养，对玻璃仪器进行校准，尽量保证仪器有良好的灵敏度及准确性固，同时对实验环境进行严格的质量控制，提高实验结果的准确性和可靠性。

【参考文献】
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[2]国家食晶药晶监督管理总局.化妆晶安全使用规范(2015年版)[S].北京：中国标准出版社,2016.
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[4]Ellison SLR,Williams A.Quantifying uncertainty in analytical measurement.3rd Ed.EURACHEM/CITAC;Guide CG4,2012: 4-31.
[5]任雪冬，刘成雁，林雪征,赵海波.液相色谱-串联质谱法测定畜禽肉中十种磺胺类兽药残留的不确定度评走[J].中国兽药杂志,2011,45(05):20-25.
【作者简介】
付金凤(1988-),女，湖北宜昌人，主管药师，常州市食品药品监督检验中心，研究方向：保健食晶化妆晶分析.
朱晓雯(1989-),女，江苏丹阳人，主管中药师，常州市食晶药晶监督检验中心，研究方向：保健食品化妆品分析.。