胃癌HER2判读及评分

584
11.1对比13.8
0.74 0.60, 0.91
61 70 159 256 15
7.2 对比 10.6 对比 8.7 10.2 10.8 对比 12.3 12.3 对比 17.9 17.7 对比 17.5
0.92 1.24 0.75 0.58 0.83
0.48, 1.76 0.70, 2.20 0.51, 1.11 0.41, 0.81 0.20, 3.38
N=560 可估值 IHC 0 和 IHC 1+ 亚群主要由低水平
100
IHC 3+ 亚群主要由高水平 扩增病例组成
扩增病例组成
90
80 70 60 50 40
患者 (%)
30
20
10 0
0–<2 2–4 >4 0–<2 2–4 >4 0–<2 2–4 >4 0–<2 2–4 >4
IHC 0
FISH 比： 0–<2 = 无扩增；2–4 = 低水平扩增；>4 = 高水平扩增
• 采用 IHC 和 FISH 进行评估 • 将检测为 IHC 3+ 或 FISH+ 的患者进行随机分组
Van Cutsem E, et al. J Clin Oncol 2009;27:Abstract 4509. Bang YJ, et al. J Clin Oncol 2009;27:Abstract 4556.
图片摘自 Rüschoff J 等人 2010 年的资料，获得 Springer 允许。
胃癌IHC染色范例：手术标本
IHC 3+ 染色范例
图片由 F. Hoffmann-La Roche Ltd. 提供
IHC 3+ 染色范例
图片由 Ventana 提供。
IHC 2+ 染色范例
图片由 F. Hoffmann-La Roche Ltd. 提供
Bang YJ, et al. J Clin Oncol 2009;27:Abstract 4556.
IHC 1+
IHC 2+
IHC 3+
不同 HER2 状态的总体存活率
亚群
N 中位 OS （月） 风险 比 95% 置信区间
全部 预先计划的分析
IHC 0/FISH+ IHC 1+/FISH+ IHC 2+/FISH+ IHC 3+/FISH+ IHC 3+/FISH–
IHC: 评分标准
IHC 0 无反应 (40 倍) 肿瘤特异性细胞膜染色 （明显、细胞间）
完整、基底外侧或侧膜染色
IHC 1+
难以察觉 (40 倍)
染色强度 （可见清晰的细胞膜染色）
微弱至中等（10 –20 倍）
IHC 2+
高强度 (2.5–5 倍) IHC 3+
必须至少： • 包括 5 个（成团）细胞的活检样本 • 手术标本中的 10%
足够数量的活组织且具有 代表性的活检样本（理想 数目为 6–8） 手术标本的代表性样本
EMA 认可的 HER2 检测方案
与乳腺癌类似 – 首选 IHC 检测 – HER2 阳性： IHC 3+ 或 IHC 2+/FISH+ ISH等检测方法
•
处理时间
• 处理时间不得超过 5 个工作日 （转移性胃癌发展极为迅速） • •
ToGA 中采用的 HER2 检测方法
使用抗体检测 HER2 蛋白质表达： HercepTest™ (Dako)
IHC
IHC 3+： >10% 的肿瘤细胞出现了中等至高强度完 整/基底外侧细胞膜染色（除活检 – 阳性细胞外）
FISH
使用荧光 DNA 探针检测 HER2 基因扩增： PharmDx ™ (Dako) FISH+: HER2:CEP17 ≥2
HER2 阳性定义为 IHC 3+ 和/或 FISH+
不同肿瘤部位的 HER2 状态
胃癌 HER2 阳性 HER2 -阴性 总计 HER2 +阳性 (%) 489 1,852 2,341 20.9 食管胃结合 部癌 63 127 190 33.2 转移瘤 37 191 228 16.2 总计 589 2,170 2,759 21.3
• 具有 IHC 和 FISH 结果的病例的 HER2 状态 (n=3,280)
IHC 0 n (%) FISH+ 94 (4.9) 1,815 (95.1) 1,909 (100) IHC 1+ n (%) 96 (15.7) 514 (84.3) 610 (100) IHC 2+ n (%) 212 (54.6) 176 (45.4) 388 (100) IHC 3+ n (%) 354 (94.9) 19 (5.1) 373 (100) 总计 n (%) 756 (23) 2,524 (77) 3,280 (100)
异质性 HER2 IHC 染色： 胃癌活检标本
IHC 3+ IHC 2+
IHC 1+
IHC 0
图片由 F. Hoffmann-La Roche Ltd. 提供
需要多个胃部活检样本
图片由 F. Penault-Llorca 提供，未经允许，不得复制。
修订后的活检样本肿瘤细胞中的细胞膜反应临界值
• 胃癌特异性评分标准并未规定活检样本肿瘤细胞中的细胞膜反应临界 百分比
IHC 2+ 染色范例
图片由 F. Hoffmann-La Roche Ltd. 提供
IHC 1+ 染色范例
图片由 F. Hoffmann-La Roche Ltd. 提供
胃癌 IHC 染色范例：活检标本
IHC 3+ 染色范例
HercepTestTM 3+
CONFIRMTM 4B5 3+
使用不同抗体的效果
HercepTestTM 2+
CONFIRMTM 4B5 3+
胃癌细胞的 IHC 3+ 染色不同于乳腺癌细胞
肿瘤异质性在胃癌和胃食管交界癌中十分常见
• 异质性染色在胃癌和胃食管交界癌中较乳腺癌中更为常见1 • 在胃癌中，有 5%–30% 的病例出现肿瘤异质性1,2
胃癌中的 HER2 评分标准
手术标本 活检标本 分值 HER2过表达 情况评估
无反应或 <10% 肿瘤 细胞膜染色
任何肿瘤细胞无膜染色
0
阴性
肿瘤细胞团微弱或隐约可见膜染色 ≥10% 肿瘤细胞微弱或隐约可见 （不管着色的肿瘤细胞占整个组织 膜染色；仅有部分细胞膜染色 的百分比）
1+
阴性
肿瘤细胞团有弱到中度的基底侧膜、 ≥ 10% 肿瘤细胞有弱到中度的基 侧膜或完全性膜染色（不管着色的 底侧膜、侧膜或完全性染色 肿瘤细胞占整个组织的百分比，但 至少有5个成簇的肿瘤细胞着色）
2+
不确定
肿瘤细胞的基底侧膜、侧膜或完全 ≥ 10% 肿瘤细胞基底侧膜、侧膜 性膜强染色（不管着色的肿瘤细胞 或完全性膜强染色 占整个组织的百分比，但至少有5 个成簇的肿瘤细胞着色）
3+
阳性
《胃癌HER2检测指南》编写组 胃癌HER2检测指南 中华病理学杂志 2011；40（8）：553-557.
使用不同抗体的效果
总计，n HER2 阳性，%
1,277
1,884 32.2*
1,031
1,098 6.1
507
637 20.4
2,815
3,619 22.2
肠型胃癌的 HER2 阳性率明显更高
*P<0.001
Bang YJ, et al. J Clin Oncol 2009;27:Abstract 4556.
成功的 HER2 IHC和FISH筛查的统计分析
HER2检测的判读及评分
胃癌HER2检测现状
2
胃癌与胃食管交界癌的 HER2 检测
• 晚期胃癌和乳腺癌的总体 HER2 过表达率相当
• 胃癌中 HER2 分布的异质性十分常见
– 胃食管交界癌的 HER2 过表达率高于胃癌 – 弥漫型胃癌的 HER2 过表达率低于肠型
• 检测流程需要反映出乳腺癌和胃癌之间的差异
HER2 过表达与胃癌及胃食管交界癌(GEJC) 的肿 瘤位置密切相关，P<0.001
Bang YJ, et al. J Clin Oncol 2009;27:Abstract 4556.
不同组织亚型的 HER2 阳性率
肠型 HER2 阳性，n 607 弥散性 67 混合型 130 总计 804
HER2 阴性，n
5倍
20 倍
40 倍
IHC: 样本排除标准
HER2 IHC 染色的活检/手术标本
边缘不光滑 的伪影
肿瘤组织 内
排除保存不当的肿瘤 组织
排除非特异性染色
非肿瘤组 织内
肠上皮化生、再生 能力改变（溃疡附 近）
胞浆、核、仅基底或管腔部分
图片摘自 Rüschoff J 等人 2010 年的资料，获得 Springer 允许。
评分标准
≥10% 的肿瘤细胞中出现高强度的完整、 基底外侧或侧膜染色，则为阳性 (IHC) 无活检临界百分比 - 需要 5 个阳性细胞的 细胞簇
HER2 评分与放大
IHC 3+
5倍
10 倍
IHC 2+
20 倍
IHC 1+
40 倍
不使用 显微镜亦可见
细胞膜染色 整体视野中可见
需要细节 放大
需要更高的 放大倍数
Van Cutsem E, et al. J Clin Oncol 2009;27:Abstract 4509.
胃癌的 HER2 阳性率
ToGA 人群
符合 ToGA 资格 (IHC 3+ 和/或 FISH+) 22% 6% IHC 0/FISH+ 或 IHC 1+/FISH+
探索性分析
目标 人群 (IHC 2+/FISH+ 或 IHC 3+)
16%
78%
78%
不符合 ToGA 资格
不符合 ToGA 资格
Bang YJ, et al. Lancet 2010;376:687–697.
胃癌和胃食管交界癌的HER2 检测推荐流程
患者肿瘤样本
IHC
0 1+ 2+ ISH 3+
–
+
需要进行曲妥珠单抗治疗
《胃癌HER2检测指南》编写组 胃癌HER2检测指南 中华病理学杂志 2011；40（8）：553-557.
胃癌HER2检测判读： IHC
IHC 结果判读 乳腺癌
IHC 0
IHC 1+
IHC 2+
IHC 3+
胃癌
鉴于乳腺癌、胃癌和胃食管交界癌的组织学和生物学差异，其评分有所不同
《乳腺癌HER2检测指南（2009版）》编写组 乳腺癌HER2检测指南 中华病理学杂志 2009;38 (12)：836-840 《胃癌HER2检测指南》编写组 胃癌HER2检测指南 中华病理学杂志 2011;40 (8)：553-557
胃癌标本的异质性 HER2 染色
胃癌标本中出现完整、基底外侧或侧膜反应
图片由 G Viale 教授和 Targos Molecular Pathology GmBH 提供。
胃癌 HER2 检测的独特性
组织收集
•
•
组织形态
• • 肿瘤高度异质性（小 HER2 阳性灶） ISH 需要的整个标本筛查 •
Hale Waihona Puke 探索性分析IHC 0 或 1+/FISH+ IHC 2+/FISH+ 或 IHC 3+
131 446
8.7 对比 10.0 11.8对比 16.0
1.07 0.65
0.70, 1.62 0.51, 0.83
0.2 0.4 0.6 1 偏向于曲妥珠 风险比 单抗治疗
2
3 4 5 偏向于不使用曲 妥珠单抗治疗
1. Hofmann M, et al. Histopathology 2008;52:797–805. 2. Rüschoff J, et al. Der Pathologe 2010;31:208–217.
胃癌细胞的异质性
胃癌的 HER2 状态：异质性与低水平扩增/蛋白表达
2+
3+
0
比 2.4 比 6.5
FISH–
总计
• 2,519 个 IHC 0/1+ 病例中，7.5% 为 FISH+ • 761 个 IHC 2/3+ 病例中，74.4% 为 FISH+
Bang YJ, et al. J Clin Oncol 2009;27:Abstract 4556.
不同 IHC 亚群的 HER2 FISH 比
• 胃癌的检测经验有限
– 到目前为止，曲妥珠单抗治疗胃癌 (ToGA) 试验是最佳数据来源
Hofmann M, et al. Histopathology 2008;52:797–805.
ToGA 试验筛查
• 在预试检测项目后，在中心实验室筛查局部晚期、复发性和/或转移性胃 癌或胃食管交界癌患者 (N=3,883) 的 HER2 表达
– 这是由于胃癌活检样本中 HER2 染色的高度异质性 – 如果至少五个细胞簇显示细胞膜 HER2 染色，则样本的评分应为 HER2 阳性
胃癌活检样本 HER2 IHC 3+ 染色
图片由 Ventana 提供
IHC 染色凸显胃部肿瘤和乳腺肿瘤之间的差异
• 差异包括肿瘤异质性和完整、基底外侧或侧膜反应