介绍一种改进的组织蜡块封存方法
细胞蜡块技术
细胞蜡块技术细胞蜡块技术是一种常用的实验方法，用于制备和处理细胞样本。
细胞蜡块是将细胞样本固定在蜡块中，以便进行细胞学研究和分析。
本文将介绍细胞蜡块技术的原理、应用和步骤。
细胞蜡块技术的原理是利用石蜡的固化特性，将细胞样本固定在蜡块中，并使细胞结构完整保留。
这种方法可以用于保存和保存大量的细胞样本，并且可以长期保存。
与其他固定方法相比，细胞蜡块技术具有较低的成本、易于操作和保存长期保存细胞样本的优势。
细胞蜡块技术在病理学和生物学研究中得到了广泛的应用。
在病理学中，细胞蜡块可以用于制备组织切片，进行病理诊断和分子生物学研究。
在生物学研究中，细胞蜡块可以用于制备细胞切片，观察细胞形态学和细胞结构的变化。
此外，细胞蜡块还可以用于免疫组织化学染色、原位杂交和蛋白质分析等实验。
制备细胞蜡块的步骤通常包括以下几个步骤：收集细胞样本、固定细胞、包埋细胞和切片。
首先，收集细胞样本，可以是细胞培养物、组织样本或体液样本。
然后，用适当的固定剂对细胞样本进行固定，以保持细胞结构的完整性。
常用的固定剂包括福尔马林、乙醛等。
接下来，将固定的细胞样本置于蜡块模具中，加入熔化的石蜡，使细胞样本被蜡块包埋。
最后，用切片机将蜡块切割成薄片，以便观察和分析。
细胞蜡块技术的优点之一是可以长期保存细胞样本。
由于细胞样本被固定在蜡块中，可以避免细胞样本的降解和变性，使得细胞样本可以保存数年甚至数十年。
这对于长期研究和样本的交流和共享非常重要。
细胞蜡块技术还可以应用于临床诊断和治疗。
通过制备细胞蜡块，可以对疾病进行病理诊断和分子生物学分析，为临床治疗提供依据。
例如，通过对癌细胞蜡块的染色和分析，可以确定肿瘤的类型、分级和预后，指导临床治疗的决策。
细胞蜡块技术虽然在细胞学研究中得到了广泛应用，但仍然存在一些局限性。
首先，制备细胞蜡块需要专门的实验设备和技术，对实验人员的要求较高。
其次，细胞蜡块制备过程中可能引入一些伪影或变性，影响细胞结构的观察和分析。
组织蜡块处理过程中出现的问题及解决方法
组织蜡块处理过程中出现的问题及解决方法摘要】为了解决组织蜡块处理过程中出现的问题，通过工作经验的累积及阅读大量相关的文献，本文就组织蜡块无法制片或制片困难的原因及处理进行综述，以求在日后的工作中更好地解决问题,制作出优秀的常规HE石蜡切片。
【关键词】组织蜡块；处理不足；处理过度；解决方法【中图分类号】R36 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）27-0012-02Paraffin tissue processing problems and solutionsXiao Feiying1,Xu Linjie2 .1.Department of Pathology, Zhejiang Province Tumour Hospital, Hangzhou 310022, China;2.Department of Pathology, First Hospital of Zhejiang Province, Hangzhou 310000, China【Abstract】 In order to solve the problems of organizational wax block processing, through a large number of relevant literature accumulated work experience and reading, this paper is to summarize the causes and treatment of the block difficult or impossible to cut. In order to solve the problem in the future workand make paraffin section better.【Key words】The paraffin block; Under-processed; Over-processed; Solution在病理常规制片过程中，经常会遇到石蜡组织切片困难或无法切片的情况。
植物石蜡切片包埋_修蜡过程的改进
收稿日期:2010-01-06;修回日期:2010-01-18基金项目:十一五科技支撑项目(2006BAD07B06-10)作者简介:姜建福(1982-),男,硕士,汉族,主要从事果树栽培生理生态研究;通讯作者:方金豹(1963-),男,博士,汉族,研究员,E ma i :l jf ang @pub li c2 zz ha cn 。
do i 10.3969/j issn 1008-9632.2011 01 085植物石蜡切片包埋、修蜡过程的改进姜建福,赵长竹,方金豹(中国农业科学院郑州果树研究所 中国农业科学院果树生长发育与品质控制重点开放实验室,河南郑州450009)摘 要:传统的石蜡切片包埋、修蜡操作过程耗时费力。
采用金属框替代纸质包埋盒进行组织包埋,将蜡块冷水冷却改为自然冷却,趁蜡块未完全变硬之前进行快速修整。
该方法不仅提高了实验效率,而且修出的蜡块工整一致,同时对后面的切片过程无任何影响。
关键词:石蜡切片;包埋;修蜡;改进中图分类号:Q -336文献标识码:B文章编号:1008-9632(2011)01-0085-02Improve m ent i n paraffi n e mbedding and finis hingJIvANG Jian fu ,Z HAO Chang zhu ,FANG Ji n bao(K ey Laboratory f or Fruit T ree G ro w th ,D evel op m e nt and Q uality Contro,l Zhengzhou Fruit R esearc h I nst itute ,CAA S ,Zhengzhou 450009,China)Abstrac t :The traditiona l pa ra ffi n e mbedd i ng and fi n ishi ng was ti m e consu m i ng and l abo rious .The tissues w ere e m bedded by using m eta l fra m e i nstead o f pape r box ,na t ura l coo li ng i nstead of hydro coo ling ,repa i red para ffi n block qu i ckly before it turned harden co m p l etely .T h i s m ethod no t only enhanced the exper i m ental effic i ency but a l so un ifor m ed size of block .T here w as no any i nfl uence on late r process .K eywords :para ffi n sec tion ;e m bedd i ng ;paraffi n fi nish i ng ;i m prove m ent石蜡切片法是生物学中一种基础实验方法,广泛用于多个学科领域的研究,但其制作过程繁琐,包括脱水、透明、浸蜡、包埋、修蜡、切片、展片、染色、封片等一系列步骤,并且各步互相关联,任何一个环节出现差错都会影响整个实验的进程和质量[1-4]。
教几种自己动手为爱车封釉打腊的方法.doc
什么是封釉，如何自己打蜡、封釉关键点：封釉剂就是油溶性聚四氟乙烯，一种新型车蜡封釉比普通车蜡优点突出自己封釉很容易操作的封釉一次一般可以保持2-3个月一瓶封釉剂一般可以封釉3次以上，价格在百元以内。
对于什么是封釉，是否存在封釉，封釉的效果如何，一直都是众说纷纭。
有人说所谓的封釉完全是个骗局，也有人很推崇封釉，这里就结合本人的一些实践，写成此文供各位车友参考。
一、到底存不存在封釉，封釉剂到底是什么材料1、英文里没有对应的汽车封釉概念非常遗憾，找遍了所有的英文关于车辆美容方面的资料，你都看不到什么叫汽车封釉，因此所谓的汽车封釉至少在英文媒体里是不存在的一个词汇。
然而当年第一个引进美国所谓高新技术的汽车封釉概念青岛美鹰公司又是怎么回事呢。
其实你可以逆向的推出这个答案。
青岛美鹰的美国封釉剂据说是美国进口在国内封装的，在包装上你看不到任何关于封釉剂原料是什么的标注。
但是在一些卖家销售的别的原装进口的封釉剂上，你看到的所有英文标注中，也找不出任何和中文“封釉”对应的英文，但是都明确的写着“WAX”，也就是车蜡。
2、难道所谓的封釉剂就是一种车蜡吗？是的，没错，所谓的封釉剂就是一种车蜡。
本人找寻了一些资料后终于得到了正确的答案，所谓的封釉剂其实就是一种车蜡。
所以你可以认为封釉就是一场骗局，但是这种车蜡和普通的车蜡也还真是有点区别。
3、那么普通的车蜡是什么呢？是油溶性的聚乙烯。
我们知道聚乙烯广泛用于食品包装的塑料袋上。
说到底，给汽车打蜡，就是在车表面覆盖一层聚乙烯的塑料袋，等到油份挥发出去，经过擦拭打光，就在车表面形成一层聚乙烯的膜，用于保护车漆，使车漆显得光亮如新。
4、那么在英文包装上也标注为车蜡的所谓封釉剂，又是什么材料呢？是油溶性的聚四氟乙烯。
5、聚四氟乙烯的性能与应用一说到聚四氟乙烯，有些常识的朋友立刻就能顿悟了。
的确，作为车辆表面的膜材料，再没有比聚四氟乙烯更合适的了。
为什么这么说呢，聚四氟乙烯的俗称叫做“塑料王”，一听到这名字就能想到这种塑料材料的特性了。
常规石蜡切片中浸蜡包埋方法的改进
HE染色封固时出现的问题及解决方法支喜兰1 谭德银2 (1西安解放军323医院病理科 710054 2陕西省高级人民法院司法技术室病理组)【中图分类号】 R361.2 【文献标识码】 B 【文章编号】1007-8096(2000)04-0303-01 要获得一张满意的HE切片,除与取材、切片、染色关系密切外,封固也是很重要的一个步骤。
我们在观察切片中,发现有许多与封固有直接关系的质量问题,影响病理诊断。
作者根据多年的制片经验,就封固中出现的问题进行总结:1 类似色素样颗粒(俗称空气色素)即在封固干燥后,切片中出现类似色素样颗粒,散在或呈片状,圆形或不规则形,易被误认为黑色素或甲醛色素沉着。
但这种类似色素样的物质分布无规律,可在任何组织切片中出现。
其产生的原因是切片染色后,封固时切片中的二甲苯已完全挥发,中性树胶封固剂不能完全封固而形成的组织片干燥的空气气泡或腔隙。
1.1 导致气泡或腔隙产生的诱因1.1.1 操作者为了减少二甲苯的吸收,习惯于将切片从二甲苯中取出,待二甲苯挥发后再封固。
或切片很多,封固开始并未出现此情况,待二甲苯基本挥发或完全挥发,组织干燥后封固可出现。
1.1.2 树胶封固剂过稀,封固当时并不出现,当封固干燥或待二甲苯挥发后可出现上述情况。
1.1.3 树胶封固剂粘稠时,滴加的封固剂不能完全覆盖切片所致。
1.2 解决方法1.2.1 封固时,当切片中二甲苯挥发后,应重新放入到二甲苯中透明。
1.2.2 调整树胶封固剂的浓度,不能过于粘稠或过稀。
以细玻璃棒蘸树胶,拿起成滴状,滴速2～3滴/sec适中。
2 形成气泡气泡是封固切片中最常见的问题,直接影响病理观察。
2.1 形成气泡的原因2.1.1 切片厚薄不均,主要是组织纤维成分多,切片困难,或切片刀不锋利,切片形成搓板样结构,切片不平整所致。
2.1.2 捞片水温低,切片未完全展开,或在捞片过程中,水底产生气泡漂浮于组织片上而形成。
2.1.3 树胶封固剂过稀或过于粘稠均可引起。
中高渗产层清防蜡方式优化组合
中高渗产层清防蜡方式优化组合中高渗产层是石油开采中常见的一种油藏类型，相比于低渗透油藏，中高渗透油藏的开采难度更大。
在油藏工程中，清防蜡是一项非常重要的工作，它能够有效地防止油藏中的蜡沉积，提高油井产能，延长油田的生产寿命。
选择合适的清防蜡方式优化组合对于中高渗产层的开采非常关键。
本文将从清防蜡的基本原理和现有的方式进行介绍，然后提出一种优化的清防蜡方式组合，希望能够为中高渗产层的开采工作提供一定的参考。
一、中高渗产层清防蜡的基本原理中高渗产层中的原油中含有大量的蜡质，一旦原油温度降低，蜡质就会凝固并在管道或油井中产生沉积，从而影响原油的输送和油井的产能。
清防蜡的目标就是尽量减少或延迟蜡质的凝固，避免其对油田生产的影响。
目前，常见的清防蜡方法主要有以下几种：1. 加热方式：通过加热原油或管道油气来延迟蜡质的凝固，常见的加热方式包括蒸汽加热、电加热以及燃料燃烧加热等。
2. 添加剂方式：通过向原油中添加一定的蜡防剂来改变原油的物理化学性质，使得蜡质在一定温度范围内不易凝固，从而达到清防蜡的目的。
3. 换热方式：通过利用地热或其他能源来对原油进行换热，提高原油的温度，增加其流动性，从而减少蜡质的凝固。
以上几种方法各有优缺点，没有一种方法能够完全解决中高渗产层清防蜡的问题。
需要通过组合不同的清防蜡方式来达到更好的效果。
在实际应用中，单一的清防蜡方式往往无法完全满足中高渗产层油藏的需要，因此需要综合考虑各种方式的优缺点，选择合适的组合方式来进行清防蜡工作。
根据中高渗产层清防蜡的实际情况，我们建议采用以下方式进行优化组合：1. 加热与添加剂优化组合采用加热方式和添加剂方式的优化组合，既可以通过加热延迟蜡质的凝固时间，又可以通过添加剂改变原油的物理化学性质来提高蜡质的流动性。
在实际应用中，可以根据不同的油藏特点和地质条件，合理搭配加热设备和蜡防剂，使其相互协同作用，达到更好的清防蜡效果。
对于一些地质条件较好的中高渗产层油藏，可以考虑采用地热或其他能源进行换热加热原油，同时通过添加剂方式改善原油的流动性。
（完整word版）石蜡包埋的基本步骤及注意事项
（完整word版）石蜡包埋的基本步骤及注意事项石蜡包埋的基本步骤和注意事项第一部分石蜡包埋的基本步骤一、脱水脱水就是用脱水剂完全除去组织内的水分，为下一步透明及浸蜡创造条件。
此外，脱水还可以使组织再次发生一定的硬化，脱水剂必须是与水在任何比例下均能混合的液体。
一．常用的脱水剂1．酒精：是制片最常用的试剂，可与水在任何比例下相混合，酒精的脱水能力比较强，又能硬化组织。
但是酒精的船头速度很快，对于组织会有明显的收缩作用。
因此在以酒精作为脱水剂时，应该先从浓度较低的酒精开始，然后递增其浓度，这样可以避免组织过度收缩。
第一瓶酒精浓度随固定剂，脱水组织的大小和种类而异，经水溶性固定剂固定的细柔组织需要慢慢脱水，从50％酒精开始。
如眼球，组胚组织等大多数组织标本则是从70％酒精开始，再经80％，95％以至无水酒精。
但是有时为了某种特殊要求，例如要做糖元的切片标本或是要做尿酸结晶染色切片标本，为了防止糖元和尿酸结晶在水中消失却要直接投入无水酒精中固定，而不需要经过水洗和低浓度酒精的脱水过程。
经无水酒精固定后的组织只需要再经过换一次无水酒精脱水即可。
用AAF固定液固定的组织可直接置于95％酒精开始脱水。
用醇性固定剂（如Carnoy）则可置于高浓度无水酒精内，但应多次换液以除酸。
一般情况下，组织经过70％，80％，90％，95％，以至无水酒精的脱水程序，即可达到脱水的要求。
但是为了能使大量的组织块同时进行脱水，则要求保持液体的浓度以保证脱水的作用，最好是以两次95％酒精，两次100％酒精重复进行脱水，以保证组织的水分脱净。
脱水时间应视组织种类，组织块大小，厚薄和固定剂的不同而异。
如脱钙的骨组织，实质性脏器等的脱水过程宜短，而疏松结缔组织，脂肪组织等，脱水过程则宜适当延长。
水分必须脱干净，脂肪必须溶去。
含有铬酸的固定剂固定的组织，脱水时间不宜过长，而镀银组织更应注意，脱水时间应比为镀银的同类组织要短。
脱水的基本原则：从低浓度酒精开始逐渐升到高浓度酒精，以保持组织中的水分完全脱净。
介绍一种改进的组织蜡块封存方法
介绍一种改进的组织蜡块封存方法目的为提高日常工作中组织蜡块封存质量，缩短组织蜡块封存所需的时间。
方法对本科室当天切片后的100个组织蜡块利用石蜡包埋机的包埋盒预热槽和板台进行组织蜡块封存。
结果封存后的100个组织蜡块封存面光滑平整，耗时180 s 。
结论利用石蜡包埋机的包埋盒预热槽和板台进行组织蜡块封存效果显著，值得推广。
标签：改进；组织蜡块；封存方法众所周知，组织蜡块是宝贵的医学资料，是病理档案的重要组成部分，在病理科研和教学中发挥着举足轻重的作用，同时也是具有重要法律意义的物证，必须由专人按规定负责保管。
卫生部曾在2009年3月颁布的《病理科建设与管理指南（试行）》第十八条明确指出组织蜡块的保存期限为15年，甚至更久[1]。
在此期间，组织蜡块如果保存不当导致无法利用，就会造成严重后果。
因此，如何长期有效地保存组织蜡块是病理工作者尤其是病理技术人员的一项重要任务，保存蜡块最重要的是如何封存蜡块。
我们经过一段时间的摸索，不断总结经验，发现利用石蜡包埋机右侧的（习惯用左手者可以左侧）包埋盒预热槽和板台进行组织蜡块封存，操作快速、简便、封存效果理想，现报道如下。
1 材料与方法1.1 材料LEICA EG 1150H型石蜡包埋机1台；当天切片后的蜡块100个；熔蜡20 mL。
1.2 方法①首先使包埋机处于工作状态，将右侧的包埋盒预热槽温度设定在65°C，板台温度设定在60°C（图1）。
②将100个蜡块按顺序排放整齐，放置于包埋机右侧，用纸巾擦拭预热槽和板台，以免交叉污染。
③从石蜡槽中放取大约20 mL 左右熔蜡，倒入预热槽，使其底部有2 mm厚的溶蜡，右手拿起蜡块，使蜡块组织切面朝下，在预热槽底部蘸取熔蜡（图2）。
④拿起后迅速在包埋机板台上轻压划过（图3）蜡块切面表面则形成了一层平整的蜡膜。
封存后的蜡膜在数秒钟之内干燥（图4），按顺序排列归档。
图1 设定包埋机温度图2 蜡块蘸取熔蜡2 结果整个过程中100个组织蜡块封存时间仅耗时180 s，在此期间预热槽不需再加入溶蜡，100个组织蜡块仅需10 mL左右的熔蜡即可完成封存工序，无需其他设备、原料，外观蜡膜非常平整、光滑，蜡膜与蜡块结合非常牢固紧密。
介绍一种简便的组织蜡块修边法
·３６２·
临床与实验病理学杂志 ＪＣｌｉｎＥｘｐＰａｔｈｏｌ ２０２０Ｍａｒ；３６（３）
１．４ 统计学分析 利用统计学两独立样本 ｔ检验处理两种 修边方法的数据和利用 χ２ 检验对蜡块修边“合格率”比较 组间差异，Ｐ＜００５为差异有统计学意义。
２ 结果
两组余蜡量平均值比较，差异有统计学意义（ｔ＝４９３６， Ｐ＜００５，表 １），蜡块烫削比人工刮削的修边方法石蜡回收 利用率更大；两组修边耗时平均值比较，差异有统计学意义 （ｔ＝７３４６，Ｐ＜００５，表 ２），蜡块烫削比人工刮削的修边方 法更省时。两组修 边 方 法 “合 格 率 ”的 比 较，差 异 有 统 计 学 意义（χ２＝４０２，Ｐ＜００５，表 ３），蜡块烫削比人工刮削的修 边方法削出来的蜡块质量更好（图 ３）。
陈 稳
关键词：蜡块；修边；跳片；制片；效率 中图分类号：Ｒ３３ 文献标志码：Ｂ 文章编号：１００１－７３９９（２０２０）０３－０３６１－０２ ｄｏｉ：１０．１３３１５／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｊｃｅｐ．２０２０．０３．０２９
在病理组织制片过程中，传统的组织蜡块修边法常常是 技术人员用刀具或者其它工具对蜡块逐一刮削的方法，修掉 蜡块周围余蜡（组织周围要留有余蜡）［１］。随着病理标本的 增多，蜡块数量也不断增加。手工逐一刮削蜡块包埋盒的修 边方法已满足 不 了 日 益 增 加 的 工 作 需 要，严 重 影 响 制 片 效 率，且人工成本较大，安全性低，影响切片的质量。本科室在 日常制片工作中发现，利用包埋机的工作台去烫融组织蜡块 包埋盒（以下简称“烫削”）四边的方法修边，既经济环保又 高效率，现介绍如下。
作者在实际工作中发现，切片厚度以 １～１５μｍ效果最 好。切片太厚（３μｍ以上），不宜观察基膜病变的组织和结 构，如肾小球 结 构 不 清 楚，“钉 突 ”病 变 结 构 显 示 变 得 模 糊。 在 ＰＡＳＭＭａｓｓｏｎ套 染 过 程 中，Ｂｏｕｉｎｓ液、六 胺 银 工 作 液 及 Ｍａｓｓｏｎ液温度可自行调节，浸染效果更方便把控。此外，需 控制 ＰＡＳＭ工作液和 Ｍａｓｓｏｎ液染色时间，每个步骤结束均需 镜下观察染色程度及时进行调节。如 ＰＡＳＭ 染色需要微镜 下观察到肾小球基膜的着色，背景无明显着色即可终止。不 宜着色过深，否则会影响后续的染色并人为增加基膜的非特 异性着色。另外，高 浓 度 乙 醇 脱 水 耗 时 较 少，耗 时 较 多 则 会
一种用于科研工作的病理切片和蜡块存放装置[实用新型专利]
![一种用于科研工作的病理切片和蜡块存放装置[实用新型专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/10e543c8af45b307e9719773.png)
专利名称：一种用于科研工作的病理切片和蜡块存放装置专利类型：实用新型专利
发明人：赵荧,王卉芳,任雨洁,牛蔓
申请号：CN201921254404.8
申请日：20190805
公开号：CN210654240U
公开日：
20200602
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本实用新型公开一种用于科研工作的病理切片和蜡块存放装置，包括存放盒和与其活动连接的盖体，所述存放盒包括设于中部的备用区、第一存放区以及第二存放区；所述第一存放区用于存放蜡块；其被隔板一分为多个存放单元，每个存放单元内放置多个蜡块；所述第二存放区用于存放若干个切片；还包括定位装置，其可用于定位夹持所述存放单元内的蜡块；还包括减震单元，其包括设于第二存放区底部的减震垫一和设于盖体的内壁上的减震垫二。
本实用新型提供了一种用于科研工作的病理切片和蜡块存放装置，其可将蜡块和切片同时放置于同一盒体内，不仅具有方便存储、携带、方便对比查找，而且具有减震的作用，防止切片的损毁以及蜡块移位的问题。
申请人：西安市第四医院
地址：710004 陕西省西安市新城区解放路21号
国籍：CN
代理机构：西安尚睿致诚知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：何凯英
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石蜡包埋步骤（推荐五篇）
石蜡包埋步骤（推荐五篇）第一篇：石蜡包埋步骤石蜡包埋步骤1组织脱水、渗透与包埋脱水：○50% 乙醇（90min）→70% 乙醇（90min）→85%乙醇(90min)→95%乙醇(90min)→100%乙醇(60min)→100%乙醇(60min)。
注：○1若组织数量过多时，应分开脱水（20个组织左右）○2脱水的体积至少为组织提及的4倍○3乙醇纯度越高时，脱水的时间减少，否则引起组织过硬○4 最好能搅拌，使脱水充分透明：○1/2乙醇＋1/2二甲苯→ 二甲苯→ 二甲苯，每步60min。
注：在二甲苯的时间不宜过短或过长。
时间过短引起透明不充分，影响后面渗透包埋；时间过长则引起组织变脆。
渗透：○ 1/2二甲苯＋1/2石蜡(90min)→石蜡I(120min)→石蜡II(120min),62℃。
注：若出现从脱水到渗透时间太长，可在1/2二甲苯＋1/2石蜡或石蜡I的步骤停下,即将进入1/2二甲苯＋1/2石或石蜡I后，立即冷却，将组织封进里面，到第二天复融；第二天融解时温度不能超过65℃，并且需到完全溶解时开始进入步骤算时间。
包埋：○将组织放入盛有石蜡的模具中，摆好位置，于石蜡包埋机的冷台上冷却。
注：包埋时，切忌用手按石蜡盒中间，因为冷凝后，中间仍较软。
切片和贴片将包埋好的组织块于切片机中约5µm，放于漂片机中展开，再将切片捞于多聚赖氨酸附膜载玻片上，编号，70℃干烤1h，贴片后60℃烤5h。
第二篇：石蜡包埋人体组织STR检验的探讨【摘要l目的探讨普通甲醛对人体组织dna的影响及提高str检出率的手段。
方法取少量石蜡包埋组织，65℃水浴脱蜡，chelex一100法提取dna，pcr扩增，循环次数分别为28次和28+6次，扩增产物经310型测序检测。
结果普通甲醛固定5 d以内的组织基本上可检出amel及15个str基因座。
固定时间延长，检出率下降；pcr循环次数增加，灵敏度增加，但有错误分型的情况。
石蜡块包埋组织怎么用，一文就够了
石蜡块包埋组织怎么用，一文就够了目前，随着高通量基因和生物信息学发展，常见的高端文章要么是冷冻电镜解析一个结构（大爆发，华人学者一周内发表10篇CNS 主刊！），要么就是大批临床标本的大规模测序识别突变和表达信息（简讯：太牛了！测了2000多肿瘤样本的circRNA数据，怪不得发Cell！）。
实验技术越来越先进，实验思路越来越跨界，而做实验的学生们则越来越迷茫。
为此，本文尝试“温故而知新”，选取了一个最普通基础的主题：石蜡块，来做一次相关内容的汇总。
图源：网络一、组织石蜡块的准备与制作用于制作石蜡块的组织要新鲜，组织固定液为10%中性福尔马林，固定液体积最好为组织体积的10倍以上，如果低于5倍或者只是液体浸没组织，则会导致组织固定不充分，只是表面固定，内部组织随着时间会腐烂，影响结果。
经福尔马林固定的组织并不是能够长时间保存，需要在72小时内尽快完成石蜡块的包埋为最佳，以保证组织蛋白的表达结果不受实验偏倚影响。
如果不能在数天内完成下一步的石蜡块包埋，最好能在4度冰箱冷藏保存，而不宜常温保存。
石蜡块的包埋需要经过脱水和浸蜡。
脱水的质量好坏直径影响后期组织与蜡的相互融合。
此外，石蜡原材料的原则也是至关重要，面对不同的组织，需要动态调整石蜡成分，韧性高的实质组织，可以采用高熔点的石蜡块，而像肠壁和腺体等柔软的组织，可以选较低熔点的石蜡块。
此外，包埋石蜡块的底座平整与否直接影响了标本切片时的损耗。
所以，这里提醒一点：同样的石蜡块组织，可能由于石蜡块底部的坑洼，导致修片过程中大量的损耗了组织。
二、常用制作石蜡块途径（如果是大佬课题组，请直接跳过这段。
）1. 自制优点：几乎没有额外费用，即做即用。
缺点：国内大部分中小规模的实验室或者课题组并没有配套相应石蜡块制作设备。
2. 石蜡块制作外包的选择目前大部分的课题所需石蜡块均为外包途径。
而外包对象主要有两种：专门实验技术公司和大学基础医学病理相关的服务支持。
如何选择呢？专门公司制作石蜡块，第一速度快，毕竟以利益为驱动；第二服务好，一个电话，就可以像寄快递一样，足不出户，上门收货上门送货；第三具有服务行业的优点，除外可能威胁直接经济利益的，其他配套服务，比如提供咨询和配套材料均会免费，毕竟现在国内的专门实验技术公司尚处于市场开展阶段，没有浓重的官僚气或者垄断局面。
蜡封法原理
蜡封法原理
蜡封法是一种常见的封口方法，通常应用于药品、化妆品、食品等行业。
其原理是将一定量的蜡料涂在包装容器的口部，待蜡料冷却凝固后，就可达到封口的效果。
在蜡封法中，蜡料的选择非常重要，不同的蜡料具有不同的物理和化学特性，对产品的密封效果和保质期都有影响。
常见的蜡料有乳蜡、合成蜡、石蜡等。
蜡封法的原理比较简单，但是要注意一些技巧，如涂蜡时要保证涂层均匀，涂层厚度要适中，否则会影响封口效果。
同时，蜡料的温度也需要控制好，过高或过低都会导致封口质量下降。
蜡封法封口效果好，具有防潮、防氧化、防污染、保鲜等优点，因此得到了广泛的应用。
但是，蜡封法的缺点也比较明显，如不能重复打开，不利于使用后的储存等。
因此，在实际应用中，需要根据产品的特性和需要选择合适的封口方法。
- 1 -。
介绍一种组织蜡块防蛀的方法
１１ 材料 ．
① 甲醛 ； 石蜡 ； 高效 氯氰 菊 酯 杀虫 剂 （ｉ ② ③ ｈ
ｅｉｉ ｔ ｉｍｒ ｃｐｒ ｅ ｒ ， Ｅ Ｃ江苏省 杨州农药 厂生产 ） ｆｃ ｎ ｃ ｔ ￣ ｙ ｅ ｔ ｉ Ｈ Ｃ ｅ ｓ ｍ ｈｎ ； ④取 １９ ９０年经 氯氰 菊酯石 蜡 液浸 蜡后 ， 纯石 蜡液 包埋 的 用
（０ ，９＂ ５ ％） １９ ２年有 ３ （０ 蜡 块发生 上述 改变 ． １９ 盒 ３ ％） 但 ９５年
的各个 阶段 ， 都有较 强的 触杀和 胃毒作 用 ， 使病理 蜡块 得 以 长期保存 ：而且 此法不 影 响染 色效 果 ， 对人 体无害 ， 还具 有 成本 低廉 ， 使用方便 ， 操作 简单的优点 ， 一种值得 推广 的好 是
蜡块蛀噬 的效果很好 。 １ 材料与方法
定及氯青 菊酯 的杀虫效果是分不开 的。 【 １８ ９８年以后 ， 我们采用在 乙醇中加入 甲醛的方法不够 理 想 ， 以为是 我科 工作 量大 ， 天下午检 材结 束后 立 即上 机 原 每
处理 ， 组织 没有克分 固定 ， 导致组织蜡块 被昆虫蛀 噬， 但从抽 查的结果来看 ， 并不完 全是这样 。采用 甲醛 和氯氰 菊酯结合
组织蜡块 ４ ５ ， ２０例 并选 用 １８ 、９ ８ １９ 、９５、９８年 的部 ９６ １８ 、９＂ １９ １９ ２
的方法 ， 以上 的结果 已经证实是 比较理想 的防 虫蛀噬 的方 从 法 。经 查 １９ 年 后未经 氯氰 菊酯 石蜡液浸 蜡的蜡块 无 昆 ９５ 虫蛀噬现象 ， 从抽样 结果 分析 ， 一方 面可 能与 甲醛 的充 分 固 定 有关 ， 但主要与蜡块 的保存时 间短 有关 。我科还先 后将部 分 １９ ９０年经 甲醛处理及氯氰 菊酯石蜡 液浸蜡 的蜡块重新制 作常规 Ｈ Ｅ和各种特殊染色及免疫组化染色 ，及对 病理组织蜡块 的回顾性研 究中 ， 常发 经
巧用修蜡仪进行组织蜡块封存的一种方法
巧用修蜡仪进行组织蜡块封存的一种方法关键词：修蜡仪，病理组织蜡块，封存病理组织蜡块是病理科最基本最原始的医学资料，它不仅在病理诊断中发挥着不可替代的作用，也为教学和科研积累了大量实验资料[1]。
根据卫生部《病理科建设与管理指南(试行)》规定，病理组织蜡块的保存期限为15年，其中住院患者的病理资料为30年。
因此组织蜡块的保存尤为重要，它要求我们得有高度的责任心，细致地管理。
若蜡块封存不当，容易出现霉变、凹陷、破碎等情况。
如何简单有效并且迅速地做好组织蜡块封存工作，这是病理技术人员的一项重要工作。
为了提高蜡块的封存质量，缩短封存工作时间，笔者在工作中发现，改良巧用修蜡仪，可达到迅速封蜡的效果。
1 材料与方法1.1 材料已切片蜡块100个（来源于中山大学附属第五医院病理科），颗粒状石蜡（范牌石蜡），磨刀石1.2 设备修蜡仪（维格斯）1.3 方法如图使用磨刀石垫高修蜡仪，使修蜡仪平面与水平面齐平。
然后抓取数颗石蜡放置于修蜡仪平整面上，等待石蜡融化后，快速地把蜡块平面划过液体石蜡。
2 结果每个蜡块的封存时间平均为1～2 s，组织蜡块上石蜡面完整，与蜡块贴合牢固。
3 讨论目前尚无有关蜡块自动封存的机器设备，因此蜡块封存都是由病理技术员纯手工完成，目前手工封蜡存在以下两种情况：其一，利用酒精灯将载玻片加热，再把高温的载玻片作为热量的载体将组织蜡块逐个涂抹，利用高温将蜡块上标本组织周围的蜡熔化后涂抹封存，但该方法存在以下弊端:①温度难以均匀控制，由于加热的方式是酒精灯直接灼烧载玻片，温度受到火焰大小、灼烧时间、空气流动等几个因素影响，温控非常困难，若载玻片过热，会导致石蜡因温度过高而熔化过多，使标本组织脱落，也易灼伤操作者。
②存在明火隐患，有些医院病理科每天需要处理的蜡块数量巨大，按每天700～1000个蜡块，操作者在封蜡的速度上就有较大要求，此时快速地封蜡将存在碰翻酒精灯的风险，从而酿成火灾；③废气污染，蜡块受到温度过高的玻片加热后，标本组织、蜡块等相当于都受到炙烤，气味难闻，对周围环境、操作者身体造成伤害。
组织块石蜡包埋
组织块⽯蜡包埋组织块⽯蜡包埋的步骤：1.取材：尽量活杀，在处死30min内取材完毕，组织块的⼤⼩⼀般为（1.0-1.5cm）*1.0cm*(0.2-0.3cm)2.固定：常⽤甲醛液浓度为4%，是40%甲醛溶液和⽔按1:9⽐例配制⽽成。
固定时间以12-24h为宜。
（4℃冰箱可放置1-3个⽉）3.冲洗：将组织块放在固定的容器中⽤流⽔冲洗24h.4.脱⽔：⼀次70%酒精2h, 80%酒精2h, 90%酒精1h, 95%酒精40min,⽆⽔⼄醇Ⅰ40min,⽆⽔⼄醇Ⅱ30min。
可将组织放于70%酒精中过夜。
5.透明：将脱⽔后组织直接浸⼊⼆甲苯透明剂中（⼆甲苯Ⅰ, ⼆甲苯Ⅱ），每次透明为10min。
6.浸蜡：常规制⽚常⽤熔点⾼于56℃以上的⽯蜡，普通采⽤56℃-58℃⽯蜡。
先将组织浸⼊软蜡Ⅰ1h左右, 再浸⼊软蜡Ⅱ40min；硬蜡Ⅰ40min, 硬蜡Ⅱ1h。
（⼀般浸蜡时间为3-4h）软蜡熔点为45℃-50℃，硬蜡熔点为55℃-60℃。
7.包埋：将蜡液注⼊包埋硬具中，迅速将组织块平放⼊蜡液中，摆正并铺平，然后移⾄冷却台，使组织块同蜡液凝固在⼀起的过程。
（硬蜡凝固定型）⽯蜡切⽚法：在切⽚前应先切去标本周围过多的⽯蜡（此过程称为“修块”），但也不能留得太少，否则易造成组织破坏，连续切⽚时分⽚困难。
⼀般切⽚厚度为4-6µm。
贴⽚时先在⼲净的载玻⽚上涂⼀层蛋⽩⽢油，然后于60℃恒温箱中烘烤1h，若未烤⼲可适当延长时间；若组织剥脱可涂⼀层蛋清加以固定。
做免疫组化时，玻⽚应涂多聚赖氨酸，亦可买防脱玻⽚。
HE染⾊的步骤：⼆甲苯Ⅰ5-10min→⼆甲苯Ⅱ5-10min→⽆⽔⼄醇Ⅰ1-3min→⽆⽔⼄醇Ⅱ1-3min→90%酒精1min→80%酒精1min→70%酒精1min→⽔洗→苏⽊精3-5min→⽔洗→盐酸酒精1-3s→⽔洗→饱和碳酸锂（氨⽔）10-30s→⽔洗→伊红3-5min→⽔洗（短）→70%酒精1-2s→80%酒精3-5min→90%酒精3-5min→95%酒精3-5min→⽆⽔⼄醇5-10min→⼆甲苯Ⅰ3-5min→⼆甲苯Ⅱ3-5min→中性树胶封⽚染⾊液的配制：1.Harris苏⽊精的配制苏⽊精 1g硫酸铝钾 15g⽆⽔⼄醇 10ml蒸馏⽔ 200ml先⽤蒸馏⽔加热溶解硫酸铝钾，⽤⽆⽔⼄醇溶解苏⽊精再倒⼊已溶解的硫酸铝钾蒸馏⽔中，煮沸1min后，稍冷却，慢慢加⼊红⾊氧化汞0.5g，继续加热⾄染液变为紫红⾊，⽤纱布盖瓶⼝，⽤滤纸过滤后每100ml加冰醋酸5ml。
介绍一种改进的组织蜡块封存方法
介绍一种改进的组织蜡块封存方法
朱凯
【期刊名称】《中国现代医生》
【年(卷),期】2012(050)021
【摘要】目的为提高日常工作中组织蜡块封存质量,缩短组织蜡块封存所需的时间方法对本科室当天切片后的1OO个组织蜡块利用石蜡包埋机的包埋盒预热槽和板台进行组织蜡块封存结果封存后的100个组织蜡块封面光滑平整,耗时 180s 结论利用石蜡包埋机的包埋盒预热槽和板台进行组织蜡块封存效果显著,值得推广.【总页数】2页(P106-107)
【作者】朱凯
【作者单位】浙江省湖州市妇幼保健院病理科,浙江湖州 313000
【正文语种】中文
【中图分类】R362.2
【相关文献】
1.组织蜡块封存方法的改进 [J], 杨博;姚元春;慈日东;王彬;田玲
2.介绍一种简易的蜡块封存装置 [J], 刘军兰;张煦;王宗定;王艳惠;岳鹏磊
3.介绍一种安全可靠的蜡块封存方法 [J], 俞静英;朱有法
4.介绍一种自动包埋机包埋微小组织蜡块的冷冻方法 [J], 郑玉琴;李丽;王毅训;沈西华
5.介绍一种组织蜡块防蛀的方法 [J], 楚广民;罗伟;刘华;魏冰
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石蜡包埋技术
石蜡包埋技术组织石蜡包埋和切片技术包埋剂embedding agent在制作切片或超薄切片时，由于组织是柔软的，或局部的软硬不均，这样制作厚薄均匀的切片是困难的。
所以有必要用一定物质浸透组织内部，整个组织一样硬化，以利于切成薄片，这种物质叫做包埋剂。
一股用光学显微镜观察的切片，用石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等作包埋剂;电子显微镜则用环氧树脂、聚苯乙烯树脂、异丁烯树脂及水溶性树脂。
石蜡制片法是将材料经固定、脱水、透明、浸蜡后包埋在石蜡里面进行切片的方法。
此法适用范围，制片手段完备，能将材料切成极薄的片子(可切至2-8微米左右)，并能制成连续的片子，这是其它制片法难以达到的，因此在光学显微镜的制片技术上它是最常用的一种方法。
除了一些经不住石蜡切片法中所应用的各种药剂处理的材料不能应用石蜡切片以外，一般的材料都可以用此法制片，但有制作时间较长，操作过程复杂以及材料易发硬或发脆等缺点。
该法多采用旋转式切片机进行切片。
石蜡制片操作程序如下:(一)材料的采集与分割采集材料应根据制片的目的和要求而定，材料要有代表性，无病虫害或其它损伤，如要观察病理解剖，则要取病斑、病症部位。
采下的材料应立即放在标本箱或湿布包起来带回实验室进行分割固定(如有条件也可在试验地采集后进行分割固定)。
为使固定液能迅速的渗透材料，材料要进3行分割。
分割时动作要迅速，以防材料萎蔫。
分割块的大小，宜小不宜大，一般不超过1cm，分割后立即杀死固定。
(二)杀死与固定利用药剂迅速把细胞杀死，以保持材料本来的状态和结构。
常用的固定有F.A.A固定液、卡诺固定液等。
将固定液放在具塞小瓶中，投入材料，盖好瓶盖。
用F.A.A固定液固定，时间至少24小时。
F.A.A固定液既是良好的固定剂，也是保存剂，因此材料可长期保存在固定液中备用。
卡诺固定液穿透力强，固定较小材料一般1~6小时即可，最多不超过24小时。
因卡诺固定液不能做保存剂，所以固定后要用95%、85%酒精浸洗，每级约20min.，然后保存在70%的酒精中备用。
常规的石蜡包埋过程包括五个基本步骤
常规的石蜡包埋过程包括五个基本步骤，即固定，脱水，透明，浸蜡和包埋制作石蜡切片，切片前须将石蜡渗透组织包埋于石蜡中，而水与石蜡又是不相混合的，所以在浸蜡，包埋前必须将组织内所含的水分脱去。
而大多数的组织固定剂是水溶液，随后的水冲洗也使其含有大量水分，因此必须先行脱水，一般是浸入逐级增加浓度的酒精来完成。
由于酒精和石蜡不能混合，须再用一种石蜡的溶剂来置换酒精，因大多数石蜡溶剂有使组织的折光率增高并表现为透明或半透明状，所以此步骤又称透明。
最后用石蜡浸渍组织并铸制成坚实的蜡块。
常规的石蜡包埋过程包括五个基本步骤，即固定，脱水，透明，浸蜡和包埋，前一章中已述过固定。
第一节脱水脱水就是用脱水剂完全除去组织内的水分，为下一步透明及浸蜡创造条件。
此外，脱水还可以使组织再次发生一定的硬化，脱水剂必须是与水在任何比例下均能混合的液体。
一．常用的脱水剂1．酒精：是制片最常用的试剂，可与水在任何比例下相混合，酒精的脱水能力比较强，又能硬化组织。
但是酒精的船头速度很快，对于组织会有明显的收缩作用。
因此在以酒精作为脱水剂时，应该先从浓度较低的酒精开始，然后递增其浓度，这样可以避免组织过度收缩。
第一瓶酒精浓度随固定剂，脱水组织的大小和种类而异，经水溶性固定剂固定的细柔组织需要慢慢脱水，从50％酒精开始。
如眼球，组胚组织等大多数组织标本则是从70％酒精开始，再经80％，95％以至无水酒精。
但是有时为了某种特殊要求，例如要做糖元的切片标本或是要做尿酸结晶染色切片标本，为了防止糖元和尿酸结晶在水中消失却要直接投入无水酒精中固定，而不需要经过水洗和低浓度酒精的脱水过程。
经无水酒精固定后的组织只需要再经过换一次无水酒精脱水即可。
用AAF固定液固定的组织可直接置于95％酒精开始脱水。
用醇性固定剂（如Carnoy）则可置于高浓度无水酒精内，但应多次换液以除酸。
一般情况下，组织经过70％，80％，90％，95％，以至无水酒精的脱水程序，即可达到脱水的要求。
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介绍一种改进的组织蜡块封存方法
作者：朱凯
来源：《中国现代医生》2012年第21期
[摘要] 目的为提高日常工作中组织蜡块封存质量，缩短组织蜡块封存所需的时间。
方法对本科室当天切片后的100个组织蜡块利用石蜡包埋机的包埋盒预热槽和板台进行组织蜡块封存。
结果封存后的100个组织蜡块封存面光滑平整，耗时180 s 。
结论利用石蜡包埋机的包埋盒预热槽和板台进行组织蜡块封存效果显著，值得推广。
[关键词] 改进；组织蜡块；封存方法
[中图分类号] R362.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2012）21-0106-02
众所周知，组织蜡块是宝贵的医学资料，是病理档案的重要组成部分，在病理科研和教学中发挥着举足轻重的作用，同时也是具有重要法律意义的物证，必须由专人按规定负责保管。
卫生部曾在2009年3月颁布的《病理科建设与管理指南（试行）》第十八条明确指出组织蜡块的保存期限为15年，甚至更久[1]。
在此期间，组织蜡块如果保存不当导致无法利用，就会造成严重后果。
因此，如何长期有效地保存组织蜡块是病理工作者尤其是病理技术人员的一项重要任务，保存蜡块最重要的是如何封存蜡块。
我们经过一段时间的摸索，不断总结经验，发现利用石蜡包埋机右侧的（习惯用左手者可以左侧）包埋盒预热槽和板台进行组织蜡块封存，操作快速、简便、封存效果理想，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
LEICA EG 1150H型石蜡包埋机1台；当天切片后的蜡块100个；熔蜡20 mL。
1.2 方法
①首先使包埋机处于工作状态，将右侧的包埋盒预热槽温度设定在65°C，板台温度设定在60°C（图1）。
②将100个蜡块按顺序排放整齐，放置于包埋机右侧，用纸巾擦拭预热槽和板台，以免交叉污染。
③从石蜡槽中放取大约20 mL左右熔蜡，倒入预热槽，使其底部有2 mm厚的溶蜡，右手拿起蜡块，使蜡块组织切面朝下，在预热槽底部蘸取熔蜡（图2）。
④拿起后迅速在包埋机板台上轻压划过（图3）蜡块切面表面则形成了一层平整的蜡膜。
封存后的蜡膜在数秒钟之内干燥（图4），按顺序排列归档。
图1 设定包埋机温度
图2 蜡块蘸取熔蜡
2 结果
整个过程中100个组织蜡块封存时间仅耗时180 s，在此期间预热槽不需再加入溶蜡，100个组织蜡块仅需10 mL左右的熔蜡即可完成封存工序，无需其他设备、原料，外观蜡膜非常平整、光滑，蜡膜与蜡块结合非常牢固紧密。
3讨论
由于目前市场上尚未推出组织蜡块自动封存的机器设备，因此蜡块封存必须由纯手工来完成。
我们发现以往的组织蜡块封存方法一般是将蜡块组织切面放在明火加热的金属板上烫涂封存，这种方法虽能使组织表面沾上一层薄石蜡，也有一定的保护作用，但金属板温度较高，容易使组织周边的石蜡融化，从而使组织突出于石蜡表面，久而久之组织容易发生霉变或虫咬，其次高温容易灼伤组织，破坏了组织原有结构。
再者，石蜡遇高温会产生有害人体的烟。
有人加以改进，如俞静英等[2]采用毛笔饱蘸熔蜡来进行组织蜡块封存，该方法封存效果值得肯定，但此方法存在不足，所需器材繁多，包括毛笔、电炉和搪瓷盆，病理科内存放有大量易燃易爆的各种化学试剂，明火加热法存在严重的火灾隐患，病理科应严格控制明火；而刘军兰等[3]利用包埋机板台和油画笔蘸熔蜡平涂法则需要油画笔先蘸取熔蜡再涂，步骤不够简洁，而且50个蜡块耗时180 s，平均每个蜡块耗时3.6 s，速度有待提高。
而我们所采用石蜡包埋机右侧的包埋盒预热槽和板台进行组织蜡块封存方法能很好地解决上述问题，LEICA EG 1150H型进口石蜡包埋机左右两侧各有一个包埋模预热槽（用来盛放待包埋的组织包埋盒），其底部宽大、平坦，预热槽里放入少量熔蜡，尽量控制用量，一般20 mL左右，如果放入的熔蜡量过多则蘸取时熔蜡容易溢到蜡块上部的塑料盒部分，不但影响美观，而且不利于操作，放入熔蜡量过少又起不到蘸取封存的效果。
我们选择的石蜡熔点为58～60℃的茂名大川石蜡，包埋机预热槽的温度为65℃（有55、60、65、70℃四项可供选择），从预热槽蘸取熔蜡后的蜡块迅速在60℃的板台上轻压划过，板台尽量不放熔蜡，平整板台使蜡块表面加压平整，板台温度选择60℃，比预热槽的温度稍低，两者有温度差有利于蜡块表面快速干燥。
本方法较刘军兰等无需画笔蘸蜡，省去一个步骤，100个蜡块封存时间耗时180 s，效率提高一倍，我们封存的蜡块蜡膜结合紧密，厚薄适中，蜡膜表面平整光滑，有利于蜡块的有序排放，有效地节约排放空间。
本方法非常适用于组织蜡块的归档前封存，就地取材，除了包埋机和石蜡无需其他材料工具，安全迅速、简单方便、实用，值得推广，尤其是蜡块数量较大的病理科。
[参考文献]
[1] 刘军兰，鲍荣荣，岳鹏磊等. 介绍一种简易的蜡块封存方法[J]. 诊断病理学，2010，17（2）：120.
[2] 徐思行，余心如. 病理诊断与技术规范[M]. 杭州：浙江大学出版社，2003：46.
[3] 余静英，朱有法. 介绍一种安全可靠的蜡块封存方法[J]. 浙江大学学报（医学版），2000，29（4）：148.。