实验九 new 微丝的观察-鬼笔环肽标记
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• f. 在载玻片上加一滴PBS, 反扣盖玻片（生长有 细胞的一面朝下），随后可以用荧光显微镜进行 观察。
• 为长期保存，可以在片子自然干燥后封片并于4℃ 避光保存，保存时间可长达6个月左右。
实验结果
荧光显微镜
激光共聚焦显微镜
显示的细胞中的微丝分布
作业
• 1 为什么不能使用细胞松弛素B标记微丝结构？
• 2 Triton-x 100溶液处理细胞的作用是什么？
• 3 本实验中能物细胞内重组表达的GFP-Actin 融合蛋白也 能装配成微丝，试设计实验观察GFP-Actin装配形 成的微丝结构，拟出实验的标题，原理、目的和 实验的步骤。
• PBS配制的3.7%甲醛溶液。 • 0.1% Triton X-100的PBS洗涤液 • 含有5%BSA和0.1% Triton X-100的PBS按照1:200的比例
稀释Actin-Tracker Green
实验步骤
• a 用PBS洗涤细胞或组织切片2次。每次0.4ml.
• b.弃去洗涤液，用PBS配制的3.7%甲醛溶液室温固 定细胞或组织切片约10分钟。注意：甲醇可以破 坏actin蛋白，因此不能使用含有甲醇的固定液。 并且尽量使用不含甲醇的甲醛。每孔0.2 ml.
动物细胞内重组表达的gfpactin融合蛋白也能装配成微丝试设计实验观察gfpactin装配形成的微丝结构拟出实验的标题原理目的和实验的步骤
实验九 new 微丝的观察-鬼笔 环肽标记
主要仪器与溶液
• 主要仪器 • 荧光显微镜、移液器（1000ul 和100ul) • 材料：细胞爬片，两人一孔。 • 溶液
• c.弃去固定液，用含0.1% Triton X-100的PBS洗 涤2-4次，每次约5分钟。每次0.2 ml.
• d 弃去洗涤液，把Actin-tracker Green染色工作 液按照每个片子约100μl的比例滴加到片子上， 室温避光孵育30分钟。
实验步骤
• e. 用含0.1% Triton X-100的PBS洗2-4次，每次 约5分钟。每次200ul。
• 为长期保存，可以在片子自然干燥后封片并于4℃ 避光保存，保存时间可长达6个月左右。
实验结果
荧光显微镜
激光共聚焦显微镜
显示的细胞中的微丝分布
作业
• 1 为什么不能使用细胞松弛素B标记微丝结构？
• 2 Triton-x 100溶液处理细胞的作用是什么？
• 3 本实验中能物细胞内重组表达的GFP-Actin 融合蛋白也 能装配成微丝，试设计实验观察GFP-Actin装配形 成的微丝结构，拟出实验的标题，原理、目的和 实验的步骤。
• PBS配制的3.7%甲醛溶液。 • 0.1% Triton X-100的PBS洗涤液 • 含有5%BSA和0.1% Triton X-100的PBS按照1:200的比例
稀释Actin-Tracker Green
实验步骤
• a 用PBS洗涤细胞或组织切片2次。每次0.4ml.
• b.弃去洗涤液，用PBS配制的3.7%甲醛溶液室温固 定细胞或组织切片约10分钟。注意：甲醇可以破 坏actin蛋白，因此不能使用含有甲醇的固定液。 并且尽量使用不含甲醇的甲醛。每孔0.2 ml.
动物细胞内重组表达的gfpactin融合蛋白也能装配成微丝试设计实验观察gfpactin装配形成的微丝结构拟出实验的标题原理目的和实验的步骤
实验九 new 微丝的观察-鬼笔 环肽标记
主要仪器与溶液
• 主要仪器 • 荧光显微镜、移液器（1000ul 和100ul) • 材料：细胞爬片，两人一孔。 • 溶液
• c.弃去固定液，用含0.1% Triton X-100的PBS洗 涤2-4次，每次约5分钟。每次0.2 ml.
• d 弃去洗涤液，把Actin-tracker Green染色工作 液按照每个片子约100μl的比例滴加到片子上， 室温避光孵育30分钟。
实验步骤
• e. 用含0.1% Triton X-100的PBS洗2-4次，每次 约5分钟。每次200ul。