高效液相色谱仪操作规程-U3000-7.1
高效液相色谱仪的操作步骤及注意事项
高效液相色谱仪的操作步骤及注意事项一、操作步骤：1.开机前先将流动相过滤和超声：水流动相用混合滤膜（0.2μm）过滤,有机流动相用有机滤膜过滤，之后超声脱气15-20分钟。
（过滤的目的是除去流动相里的杂质，以免杂质进入色谱柱堵塞色谱柱；超声的目的是排除流动相里面的气体，以防气体进入色谱柱损害色谱柱，影响柱效能）注：试验过程中由于只有0.45μm的混合滤膜，第一次使用时感觉效果不好，于是过滤水时同时使用两张混合滤膜过滤水流动相。
2.超声结束后，将流动相放置到规定位置（1号泵接水流动相，2号泵接有机流动相），开机逐个排气（先启动泵，排气结束后再打开检测器）。
3.排气结束后，关闭所有排气阀。
先用纯有机流动相冲洗色谱柱20-30分钟，基线走稳之后，再打开水流动相（注意：水流动相和有机流动相流速之和为1ml/min），继续走基线，直到基线平稳。
注意：实验结束后，再用纯有机流动相冲洗色谱柱20-30分钟，冲出色谱柱内残留的样品物质，预防长时间不使用仪器样品的残留物质沉积在色谱柱内，导致下次使用难以冲出，色谱柱柱压偏高，基线不稳，出现大量鬼峰。
（不同规格的色谱柱其所允许的最大流速之和不同）4.走基线时，应将进样阀处于Load状态，用注射器进样时应快速进样，进样后将进样阀立即扳回到Inject状态，此时液相系统开始进入采样状态。
采样结束后，可在数据分析里面查看分析结果并可进行编辑，也可以在脱机状态下查看样品的分析结果并编辑。
二、使用中常见的问题及注意事项1.过滤时有时会出现流动相漏液。
可能的原因是滤膜放置不正确（有点偏）和接头有点错位，导致流动相从缝隙中漏出。
注意：操作时，应先向滤瓶内倒入少量流动相，观察是否漏液并开始过滤，若未漏液，再向滤瓶中添加流动相。
2.超声时，瓶外液体的液面应高于瓶内流动相的液面，否则流动相内的气体可能无法排出液体，气体仍然残留在流动相内，以致开机排气时无气泡排出。
3.开机排气结束后，应先将流动相流量调小，再关闭排气阀，否则会导致柱压瞬间升高超过压力上限，致使泵停止工作。
U3000高效液相色谱仪操作规程及封面
省产品质量监督检验检验研究院仪器设备操作规程（cg———2016）设备编号（）仪器名称U3000 液相色谱仪操作规程编制审核批准2016 年月日U3000高效液相色谱仪操作规程一基本原理U3000高效液相色谱系统由：①输液泵②自动进样器、③色谱柱温箱、④检测器、⑤数据处理系统组成。
使用高效液相色谱时，液体待检测物由流动相带入色谱柱，通过压力在色谱柱中移动，由于试样中各组分在色谱柱固定相与流动相间分配或吸附特性的差异，不同的物质组分顺序离开色谱柱，经检测器检测得到不同的色谱峰信号，依据组分的保留时间和响应值（峰面积或峰高）进行定性和定量分析。
二操作前准备1.1流动相的配制：1.1.1根据所供试品的性质、相关的文献资料、工作经验等按比例配制流动相。
1.1.2根据流动相的性质确定采用有机膜（0.45um）还是水相膜(0.45um)对流动相进行过滤。
1.1.3将过滤后的流动相进行超声脱气10~15分钟。
1.2对照品供试品处理：1.2.1称取或量取适量的对照品或供试品，用适当的溶剂（最好采用流动相或流动相的主成分）进行充分溶解（也可借助超声波进行超声溶解），使其浓度为0.1~1mg/mL（根据检测结果再适当调节溶液的浓度）。
1.2.2根据对照品或供试品的性质确定采用有机针头滤膜（0.45um）还是水相针头滤膜(0.45um)进行过滤。
1.3色谱柱的选择：根据样品的性质选择适当的色谱柱。
三操作顺序1.开机2.1打开UPS（不间断电源）电源，打开仪器接线板电源开关；2.2打开电脑显示器电源，打开电脑主机电源（POWER），启动电脑；2.3依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源；2.4双击屏幕右下角“服务管理器”快捷图标,出现对话界面后点击“启动仪器控制器”启动,等显示“本地仪器控制器运行空闲”,可以关闭界面。
2.5双击在桌面上的Chromeleon 7图标（工作站主程序）。
2.6在左下方点击仪器，则在右边会自动显示该仪器控制面板。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程高效液相色谱仪（HPLC）是一种重要的分析仪器，广泛应用于化学、生命科学、环境监测等领域。
为了保证色谱仪的正常运行和准确分析结果，需要遵守以下操作规程：1. 准备工作a. 首先，确保色谱仪及其附件的电源已接通，并确认仪器处于正常工作状态。
b. 检查溶剂桶内的溶剂是否充足并无杂质，并确认管路连接正常。
c. 检查流动相液位是否正常，并调整泵的流速和梯度程序参数。
2. 样品制备和准备a. 样品应充分溶解并过滤净化，以避免样品中的杂质对色谱分离产生干扰。
b. 选择合适的进样方式（自动或手动），并根据进样方式调整进样器的参数。
3. 进样器操作a. 将样品注射器插入进样口，并注意不要损坏色谱柱。
b. 设置进样体积和进样速度等参数，并进行一次空白进样以清洗进样器。
4. 色谱柱准备a. 定期检查色谱柱是否损坏，并根据需要更换。
b. 根据实验需要选择合适的色谱柱，并注意记录色谱柱的批号和使用次数。
5. 柱温控制a. 根据分析需要选择合适的柱温，并使用温度控制系统保持恒定。
b. 注意避免温度突变和波动，以保证分析结果的准确性和重复性。
6. 检测器操作a. 根据需要选择合适的检测器，如紫外-可见光检测器（UV-Vis）、荧光检测器、电导检测器等。
b. 设置检测器的参数，如波长、增益和灵敏度，并进行基线校准。
7. 数据采集与处理a. 启动数据采集系统，并设置采集参数，如采样率、数据类型和运行时间等。
b. 对采集到的数据进行处理和分析，如峰识别、定量分析和峰面积计算。
8. 清洗和维护a. 实验结束后，关闭色谱柱和进样器的阀门，并用溶剂清洗色谱柱和进样器，以防止堵塞和降低杂质残留。
b. 清洗完成后，注意关闭色谱仪的电源，并按照要求对色谱柱和进样器进行维护和保养。
总结：高效液相色谱仪的操作规程包括准备工作、样品制备、进样器操作、色谱柱准备、柱温控制、检测器操作、数据采集与处理以及清洗与维护等。
遵守这些规程可以确保色谱仪的正常运行和准确分析结果，提高实验效率。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程1．开关机顺序●开机顺序：打开LC各单元电源－控制器电源－电脑－LC-Solution工作站，开机后能听到“哔”声。
●关机顺序：与开机顺序相反，即先关闭LC-Solution工作站－控制器－LC各单元电源2．流动相及样品的准备●流动相配制所用的有机相必须是色谱级的，所用的水必须是双重蒸馏水。
流动相必须经0.45um 的微孔滤膜过滤后方能进入LC系统。
水和有机相所用的微孔滤膜不同，有机相（如甲醇）的过滤用F膜，水用水膜。
●样品溶液亦必须用0.45um 的微孔滤膜过滤后才能进样。
3．工作站的进入及系统的开启●双击桌面上的“labsolution”图标，选择“operation”项并单击，在弹出窗口后按OK进入工作站。
●首先打开A、B泵上的排空阀（open方向旋转180度）。
然后按二泵面板上的“purge”键开始自动清洗A、B流路3分钟，然后在分析参数设置页中设置流速1ml/min，BCONC 0％，并设置合适的检测波长，柱温，停止时间。
在完成后点击“Download”将分析参数传输至主机。
●分析方法的保存：选择file－save method file as－取名保存文件●系统的启动：点击“instrument on/off”键开启系统（此时泵开始工作。
4．进样准备●观察基线及柱压，待基线平直（－5～80mv），压力稳定（0.5Mpa内）时方可进样。
5. 进样●点击助手栏中的“single start”键，弹出对话框，在对话框中输入“sample name”“method”“data file”等。
●填完后点击“start”，出现触发窗口，进样，仪器开始自动采样分析。
6. 数据文件的调用及查看●点击助手栏中的“Postrun analysis”键，打开数据处理窗口。
●打开文件搜索器，定位至数据文件所在文件夹，选择文件的类型，双击文件名即可打开数据文件（此时可以查看峰面积、保留时间等参数）。
高效液相色谱（HPLC）操作规程
高效液相色谱（HPLC）操作规程一操作1.准备工作⑴流动相的准备应根据实验选择合适的流动相，所有流动相原则上应选择HPLC级别，水应选择超纯水，并应保持新鲜。
所有流动相在进行实验前应经过相应的脱气处理，脱气时间应根据流动相的量相应增加，但一般超声脱气不应少于20min。
在实验过程中应保证足够的流动相，流动相的量与流速、洗脱时间等有关，应根据具体情况进行准备。
⑵样品的准备对于待测的样品，在进样之前应经过滤膜过滤，根据样品的不同选择不同种类、不同直径的滤膜。
2. 排气打开purge阀，键入stop→prime，直到无气泡停止stop。
B泵同样操作。
关闭purge阀。
3. 开机打开电脑主机和显示器，点击Galaxie，进入工作站。
选择系统，点击Agilent HPLC.点击overview，可观察仪器各部分状态。
打开泵及检测器的电源。
二 分析方法建立1.进入工作站系统界面。
点击数据，文件→新建→方法，出现视窗，点击前进即可。
键入方法名和相应描述→点击ok后出现方法文档。
2.210的设定点击控制→210图标→Elution。
选择流动相A和B的种类。
Compressibility、Pressure Constant以及Refill Time属于内置参数无需设定。
设置A、B流动相的比例，通过改变B的比例设定。
如需梯度洗脱，则根据方法对Equilibrium Time 和Hold Time进行设定。
点击Misscellaneous。
Start Mode选择Inject Trigger on Pump A。
End of Sequence 选择Leave Pump on。
210设定结束。
3.325的设定点击325图标，选择Signal。
其中Detector Bunch Rate建议设置成2（10Hz），Noise Monitor Length建议设定成64，Response Time建议设定0.5。
根据方法设定相应波长。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程
《高效液相色谱仪操作规程》
一、实验目的
本实验旨在通过高效液相色谱仪分析样品，准确测定目标化合物的含量，并学习高效液相色谱仪的操作方法和技巧。
二、实验设备
1. 高效液相色谱仪
2. 注射器
3. 色谱柱
4. 移液管
5. 色谱仪软件
三、操作步骤
1. 打开高效液相色谱仪的电源并进行系统初始化，启动色谱仪软件。
2. 调整流速，进样量等参数，使得实验条件符合要求。
3. 将样品通过移液管注入色谱柱中，注意避免样品泡沫和气泡的产生。
4. 设置色谱条件，如梯度洗脱，流速等，启动色谱分析。
5. 记录实验数据和结果，并进行数据处理和分析。
6. 清洗色谱仪，保持设备清洁。
四、实验注意事项
1. 在操作色谱仪时，要严格按照操作步骤进行，严禁随意更改参数。
2. 在进行样品进样时，要小心操作，避免产生气泡和样品泡沫。
3. 在进行色谱分析时，注意梯度洗脱条件的设置，保证分析结果准确。
4. 在实验结束后，及时清洗色谱仪，保持设备干净。
五、实验结果
根据实验数据和结果，可以得出目标化合物的含量和纯度，并进行结果的解释和分析。
通过《高效液相色谱仪操作规程》的学习，使我们更加熟悉高效液相色谱仪的操作方法和技巧，能够准确进行样品分析，为科研工作的开展提供了重要的技术支持。
高效液相色谱仪常规分析操作步骤及规程
高效液相色谱仪常规分析操作步骤及规程高效液相色谱仪操作步骤（原文摘录自网络）：1)．过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。
2)．对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。
3)．打开HPLC工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。
4)．进入HPLC控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。
5)．有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。
冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。
冲洗进样阀，需要在manual菜单下，先点击purge，再点击start，冲洗时速度不要超过10 ml/min。
6)．调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。
点击injure，选用合适的流速，点击on，走基线，观察基线的情况。
7)．设计走样方法。
点击file，选取select users and methods，可以选取现有的各种走样方法。
若需建立一个新的方法，点击new method。
选取需要的配件，包括进样阀，泵，检测器等，根据需要而不同。
选完后，点击protocol。
一个完整的走样方法需要包括：a.进样前的稳流，一般2-5分钟；b.基线归零；c.进样阀的loading-inject转换；d.走样时间，随不同的样品而不同。
8)．进样和进样后操作。
选定走样方法，点击start。
进样，所有的样品均需过滤。
方法走完后，点击postrun，可记录数据和做标记等。
全部样品走完后，再用上面的方法走一段基线，洗掉剩余物。
9)．关机时，先关计算机，再关液相色谱。
10)．填写登记本，由负责人签字。
注意事项：1)．流动相均需色谱纯度，水用20M的去离子水。
脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。
2)．柱子是非常脆弱的，第一次做的方法，先不要让液体过柱子。
3)．所有过柱子的液体均需严格的过滤。
4)．压力不能太大，最好不要超过2000 psi。
U3000戴安液相色谱仪操作规程
U3000戴安液相色谱仪操作规程一、实验目的1.熟悉U3000戴安液相色谱仪的基本操作方法；2.学习正确使用液相色谱仪的技巧和注意事项；3.实现对待测物质的定性和定量分析。
二、实验器材和试剂1.U3000戴安液相色谱仪；2.色谱柱；3.手套，安全护目镜；4.甲醇、乙醇等有机溶剂；5.待测物质溶液。
三、操作步骤1.安全操作a.穿戴好实验室服装，佩戴手套和安全护目镜；b.检查液相色谱仪的电源线是否接地，仪器是否工作正常；c.检查色谱柱是否安装正确，连接管路是否紧固。
2.准备工作a.打开液相色谱仪的电源开关，待仪器启动完成后，打开色谱软件；b.打开软件后，进行仪器的空白检测，用纯溶剂进行洗涤柱和平衡柱的操作；c.调整柱温为合适的温度，一般为室温。
3.样品处理a.将待测物质溶解在合适的溶剂中，制备样品溶液；b.将样品溶液通过5μm的滤膜过滤，以去除杂质。
4.色谱条件设置a.在色谱软件中设置所需的流动相体系、流速、波长等参数；b.在样品进样器上设置进样体积、进样方式等参数；c.设置检测器的检测波长和灵敏度。
5.进样操作a.将处理好的样品溶液注入进样器中，并设定好进样体积；b.执行进样操作，确保样品被成功进入流动相中。
6.开始分析a.点击软件上的开始分析按钮，启动色谱仪的工作；b.液相色谱仪将自动进行样品的分离和检测；c.注意观察色谱图，确认是否出现所需的峰。
7.数据处理a.分析所得的色谱图，测量峰的面积、时间、高度等参数；b.将峰的参数与标准曲线进行比对，获得待测物质的定量结果；c.记录分析结果和实验过程中的注意事项。
四、操作注意事项1.操作前需熟悉液相色谱仪的相关知识，并按照规定的操作步骤进行使用；2.所选用的色谱柱要与待测物质的性质相适应；3.操作过程中应避免尽量摔打液相色谱仪和碰触色谱柱；4.操作中应小心不要发生溶剂泄漏或喷洒，避免涉及皮肤和眼睛；5.在进样前，应先调节进样器的进样速度，以避免进样不均匀。
高效液相色谱仪操作流程
高效液相色谱仪操作流程高效液相色谱仪操作流程1、准备工作：（1）校准：在使用高效液相色谱仪之前，应先进行校准，以保证测定结果的准确性。
校准时要使用一系列标准物质，以便检验仪器的性能和精密度。
常用的校准模式有线性校准、多项式校准和外部校准等。
（2）柱温控制：所有的分析柱都有一定的温度要求，高效液相色谱仪的温度控制精度要求比较高，因此需要进行柱温控制。
（3）泵调试：泵是气液色谱系统中最重要的部件，也是最容易发生故障的部件。
使用前，应检查泵的抽真空度、流量稳定性等性能，以保证测定的精度和准确性。
（4）色谱柱稳定性检查：色谱柱的稳定性是检测的重要因素，影响到测定结果的准确性和精度。
在使用之前，应检查柱内各部分的稳定性，以确保其能够按照设定的条件正常工作。
2、色谱柱装载：（1）清洗色谱柱：色谱柱在使用前必须进行清洗，以去除柱内可能存在的有机物，并保证柱内液体的稳定性。
（2）安装色谱柱：色谱柱的安装是非常重要的，因为不正确的安装会影响测定结果的准确性。
色谱柱的安装应紧固，确保柱的稳定性，避免柱管损坏。
（3）组装液体系统：液体系统的组装包括柱头部、柱底部、负压调节器等，组装时应确保所有部件的密封性，以免出现压力泄漏等情况。
3、液相色谱仪系统调试：（1）开机：首先将高效液相色谱仪通电，根据用户手册按步骤启动计算机系统，以及液相色谱仪的电子控制系统。
（2）程序设定：根据实际检测要求，设定相应的程序参数，包括柱温、梯度曲线、进样量、采集时间等。
（3）样品进样：根据实际检测要求，将样品按要求的体积加入样品管中，然后将样品管放入色谱柱内，以开始检测。
4、色谱检测：（1）检测：将样品按照设定的梯度曲线进行移动，并根据程序参数进行数据采集和处理。
（2）分析数据：根据所采集的数据，可以分析出样品中各种成分的含量、比例等信息，从而得出测定结果。
（3）打印报告：将测定结果打印出来，以便查看和记录。
5、清洁：（1）清洁柱头部：在使用完毕后，应及时清洗柱头部，以免柱头部的污染影响下一次测定的准确性。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程
一、所需流动相经过滤、脱气处理后待用。
安装好色谱柱。
二、检查供电电源是否稳定，各部件连接是否牢固。
三、开启仪器检测器和泵电源，待检测器电源指示灯由黄灯变成绿灯后，开启
仪器工作站，即双击桌面上图标LCwin1.0。
四、点击工作站中控制采集，点击开启，待仪器自检通过后，进入仪器控制采
集界面。
五、依次用甲醇、甲醇：水=2：8、流动相进行冲洗色谱系统，每次更换更换溶
液时，均需拧开放空阀，选择菜单泵下的快速冲洗模式，选定合适的时间进行冲洗，赶走泵内气泡。
确定泵内无气泡后，停止冲洗模式，关闭放空阀。
六、更换换上流动相后，按样品分析条件设置选择合适的流速、波长。
待色谱
设备达到平衡状态（柱压稳定，工作站基线稳定，一般需30-40min）后，即可进样分析。
七、分析完毕后，流动相中存在缓冲盐等溶剂，需先用甲醇：水=2:8，进行冲洗
至少30min，再用甲醇冲洗，待柱压降至正常值（依色谱柱而定，即柱压稳定后），停泵。
柱压降为零后关闭检测器和泵的电源。
八、样品分析应做好原始纪录，内容包括分析样品名称、送样时间、分析时间、
样品编号、检测数据、报告结果、报告时间、送样单位、分析员以便统计和查阅。
九、仪器如出现故障，应及时报告专业维修单位或专职维修人员，未经专业维
修培训或未取得维修资格证书的不能进行维修工作。
十、仪器室内严禁吸烟或进行任何无关明火操作。
仪器室内应配备二氧化碳灭
火器，分析人员应能正确操作使用。
UltiMate3000型高效液相色谱仪操作规程
Ultimate 3000型高效液相色谱仪操作规程一、开机前的准备工作1.检查设备电源、流路、信号连接是否完好。
2.流动相：配制相应的流动相，经0.45µm微孔滤膜抽真空过滤后，超声脱气15分钟，必须使用色谱纯的溶剂，水或缓冲盐溶液要用超纯水；盛放样品溶液和流动相所用的玻璃容器必须用超纯水清洗。
3.样品溶液：按方法取样或配制标准样品溶液，0.45µm滤膜过滤。
二、仪器的组成及开机平衡系统1.仪器组成：本仪器由Ultimate 3000分离单元、DAD-3000（RS）检测器、Chromeleon 7色谱工作站和打印机组成。
Ultimate 3000分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气机，可容纳120个样品瓶的自动进样系统，柱温箱，内置的柱塞密封垫清洗系统，溶剂托盘，液晶显示器，键盘用户界面及软盘驱动器。
2.开机：依次接通Ultimate 3000分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。
接通Ultimate 3000分离单元后，仪器开始自检约20s，打开电脑，双击电脑右下角的变色龙软件的服务管理器，单击“启动Chromeleon仪器控制器”，激活服务管理器，双击电脑桌面的“Chromeleon 7”图标，进入变色龙软件。
3.脱气（Degasssger）：向上掀开泵头前面板，拧松快速清洗阀（逆时针两圈左右），然后按“冲洗”键，泵将以3.0ml/min的速度自动快速清洗泵类残留的气泡，5min将自动停止。
若想手动停止，只要再按“冲洗”键，将停止清洗。
4.清洗有缓冲盐的那个通道前后，一定要用超纯水清洗管路和泵头，以防止缓冲盐溶液直接与纯有机相混合而产生结晶堵塞比例阀。
5.清洗完毕，先停泵，再拧紧快速清洗阀。
切记不要在泵未停止清洗前拧紧快速清洗阀。
三、编辑仪器方法1.在Chromeleon Console“创建”菜单中点击“仪器方法”。
2.采集时间和采集通道设置：在弹出的“仪器方法向导”窗口中输入分析运行时间；在“诊断通道”项下点击“取消选择所有通道”，点击下一步。
U3000高效液相色谱仪操作规程及封面
安徽省产品质量监督检验检验研究院仪器设备操作规程（cg———2016）设备编号（）仪器名称U3000 液相色谱仪操作规程编制审核批准2016 年月日U3000高效液相色谱仪操作规程一基本原理U3000高效液相色谱系统由：①输液泵②自动进样器、③色谱柱温箱、④检测器、⑤数据处理系统组成。
使用高效液相色谱时，液体待检测物由流动相带入色谱柱，通过压力在色谱柱中移动，由于试样中各组分在色谱柱内固定相与流动相间分配或吸附特性的差异，不同的物质组分顺序离开色谱柱，经检测器检测得到不同的色谱峰信号，依据组分的保留时间和响应值（峰面积或峰高）进行定性和定量分析。
二操作前准备1.1流动相的配制：1.1.1根据所供试品的性质、相关的文献资料、工作经验等按比例配制流动相。
1.1.2根据流动相的性质确定采用有机膜（0.45um）还是水相膜(0.45um)对流动相进行过滤。
1.1.3将过滤后的流动相进行超声脱气10~15分钟。
1.2对照品供试品处理：1.2.1称取或量取适量的对照品或供试品，用适当的溶剂（最好采用流动相或流动相的主成分）进行充分溶解（也可借助超声波进行超声溶解），使其浓度为0.1~1mg/mL （根据检测结果再适当调节溶液的浓度）。
1.2.2根据对照品或供试品的性质确定采用有机针头滤膜（0.45um）还是水相针头滤膜(0.45um)进行过滤。
1.3色谱柱的选择：根据样品的性质选择适当的色谱柱。
三操作顺序1.开机2.1打开UPS（不间断电源）电源，打开仪器接线板电源开关；2.2打开电脑显示器电源，打开电脑主机电源（POWER），启动电脑；2.3依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源；2.4双击屏幕右下角“服务管理器”快捷图标,出现对话界面后点击“启动仪器控制器”启动,等显示“本地仪器控制器运行空闲”,可以关闭界面。
2.5双击在桌面上的Chromeleon 7图标（工作站主程序）。
2.6在左下方点击仪器，则在右边会自动显示该仪器控制面板。
U3000高效液相色谱仪操作规程及封面
U3000高效液相色谱仪操作规程及封面第一章绪论1.1编写目的本操作规程的目的是为了规范和指导U3000高效液相色谱仪的使用，保证实验室成员能够正确有效地操作仪器，获得准确可靠的实验结果。
1.2适用范围本操作规程适用于U3000高效液相色谱仪的使用者。
1.3安全注意事项1.3.1操作前检查仪器电源是否正常，地线是否入地良好。
1.3.2仪器操作需戴好实验手套，以免对操作人员造成伤害。
1.3.3仪器操作时需注意化学品的毒性和腐蚀性。
1.3.4在进行一些实验操作前，需事先测定溶剂的pH值。
1.3.5离开仪器时，关闭电源并断开电源线。
第二章仪器准备工作2.1开机操作2.1.1检查电源、电源线是否连接正常。
2.1.2打开仪器电源开关，待仪器启动完成后进入下一步操作。
2.2仪器检查2.2.1检查进样器是否安装正确。
2.2.2检查流量计、压力计是否正常。
2.2.3检查溶剂瓶是否已加满溶剂。
2.3校准仪器2.3.1进行空气校正和流量校正。
2.3.2校准UV检测器和荧光检测器。
第三章样品准备与进样3.1样品准备3.1.1按照实验需要将样品制备好。
3.1.2不同样品需使用不同的溶剂进行稀释。
3.2进样准备3.2.1将样品注射到进样器中。
3.2.2调整进样量和进样方式。
第四章仪器操作4.1开始分析4.1.1设置分析条件：流速、柱温、波长等。
4.1.2选择合适的柱和检测器。
4.2进行分析4.2.1打开仪器操控软件，点击开始分析。
4.2.2实时监测色谱图，记录实验数据。
4.3实验结束4.3.1点击停止按钮结束分析。
4.3.2关闭仪器，清洗仪器各部件。
第五章紧急故障处理5.1仪器故障分类5.1.1仪器无法启动。
5.1.2仪器无法进行分析。
5.1.3色谱图异常。
5.2故障排除方法5.2.1仪器无法启动：检查电源和电源线连接是否正常。
5.2.2仪器无法进行分析：检查润滑油和溶剂是否已用尽。
5.2.3色谱图异常：检查柱是否老化或损坏。
ThermoU-3000液相色谱操作规程
ThermoU-3000液相色谱操作规程Thermo U-3000 液相色谱操作规程一、仪器操作1.准备工作1)检查管道氮气、流动相流路与压力是否正常。
如不合适请调整气路、气源与流动相流路。
2)检查实验室环境，包括温度、湿度等是否正常。
温度保持在21-25 oC，；湿度保持在70%以下。
如不合适请联系相关维修人员3)确认各流动相瓶内溶液体积大于瓶体积50%；有机流动相使用HPLC级与HPLC级以上的乙腈与甲醇；离子对添加剂使用HPLC级与HPLC级以上的甲酸、甲酸铵、乙酸铵等；高纯水存放时间不超过一周。
4)流动相中仅能加入5 mM浓度以下的挥发性缓冲盐，如甲酸铵、乙酸铵等。
5)所有新配置的流动相均充分混匀后在超声10分钟，排除气泡。
2.开机过程：1)打开电脑进入windows的桌面。
2)打开液相各个模块的电源（没有顺序）。
3)打开氮气管道开关阀，确证压力指示在0.3 Mpa。
4)打开变色龙服务器软件，点击连接数据传输。
5)打开变色龙色谱工作站。
6)在Create Program窗口中编辑液相方法并保存。
7)打开液相色谱流路，平衡液相系统。
8)点击进样按钮开始进样。
3.待机过程：1)待机前，将色谱流动相流路切换至90%乙腈水溶液，以0.3 mL/min流速冲洗色谱柱20分钟。
2)在5分钟内将色谱流速从1 mL/min 缓慢降至0 mL/min。
3)关闭柱温箱加热功能，关闭CAD检测器氮气气路。
4.长假关机过程：1)关闭液相色谱各模块的加热功能2)关闭流动相流速。
3)关闭所有软件和电脑。
4)关闭液相所有模块的电源。
5)关闭氮气减压阀。
6)关机结束。
二、仪器维护1.做完实验：使用纯水、纯乙腈冲洗色谱管路；2.关闭紫外检测器，关闭柱温箱的加热功能。
3.废气与废液排放空间通畅；三、液相可能存在的问题与排查方法1.可能存在的问题1)灵敏度突然间降低2)空白溶液背景很高2.排查方法1)检查流动相是否新鲜配置2)检查各个温度，气体流速，流动相流路3)检查进样系统是否正常工作4)检查紫外检测器是否工作正常5)检查色谱柱是否堵塞，是否漏液。
简述下高效液相色谱仪的操作全流程
高效液相色谱仪的操作全流程一、实验准备阶段1. 配置流动相：高效液相色谱仪的操作首先需要配置好所需的流动相。
流动相是液相色谱中推动样品组分在色谱柱上移动并分离的溶剂或溶剂混合物。
配置流动相时，应注意所使用的溶剂不能对实验或设备造成影响或损害，如堵塞或腐蚀。
同时，流动相必须经过滤和脱气处理，以避免气泡对实验结果的影响。
在更换流动相时，还需要保证两种溶剂的互溶性，如不互溶，则需要使用一种中间溶剂进行过渡。
2. 冲洗和平衡色谱柱及仪器：在配置好流动相后，需要对仪器及色谱柱进行冲洗和平衡。
这是为了确保仪器压力正常，基线稳定，以及色谱柱的填料处于最佳状态。
冲洗和平衡的过程中，应使用与实验流动相相同的溶剂，并设定适当的流速和压力。
3. 样品处理：在进样前，样品需要经过必要的净化处理。
这包括通过0.45um以下的微孔滤膜过滤，确保样品是澄清溶液。
过滤后的样品应装入合适的液相色谱样品瓶中待用。
二、样品运行阶段1. 设置方法参数：根据实验需要，在仪器的控制软件中设置或调用相应的参数。
这些参数包括流速、流动相组成、进样量、柱温、检测波长等。
这些参数的设定将直接影响色谱分离的效果和实验结果的准确性。
2. 编辑进样序列表：根据样品信息，编辑进样序列表。
进样序列表应包含每个样品的名称、进样量、进样次数等信息。
编辑完成后，保存并运行序列方法以分析样品并得到数据。
三、数据分析阶段色谱得到的原始数据为色谱图，色谱图上的每个峰代表一个组分。
需要对色谱峰进行积分处理，获得峰面积。
峰面积的大小与组分的浓度成正比，因此可以用来定量计算组分的浓度。
根据实验需要，可以使用不同的方法进行定量计算，如外标法、内标法、面积百分比法等。
此外，仪器还可以得到光谱或质谱信息，通过这些信息可以获得定性信息，如组分的结构、分子式等。
四、实验结束阶段1. 冲洗色谱柱：在实验结束后，应使用高有机相/水相冲洗柱子以清除残留的样品和杂质。
冲洗时，应注意纯相的比例不要超过95%，以避免对色谱柱造成损害。
简述高效液相色谱仪器操作流程
简述高效液相色谱仪器操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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U3000戴安液相色谱仪操作规程
1.5接通电源，检查插座上各插孔的指示灯是否显示正常。
1.6准备好超声过的流动相和流路冲洗溶剂。
2开机2.1撤下设备停用卡，换上设备运行卡。
2.2换上A、B、C、D管路的溶剂：A、B、D管路为溶剂管路，可以放置流动相，C管路为洗进样针管路。
一般A路放甲醇，B路为纯化水，C路放5%甲醇水，D路放流动相。
C管路在运行样品时用5%甲醇水清洗进样针，做完样品用纯甲醇灌满，C管路中软管为冲洗泵头管路，并随仪器开机工作。
2.3运行检查：从上至下打开仪器各部件开关，待机器自检，核实无异常。
2.4开启仪器工作站：打开电脑，双击电脑桌面上仪器图标，显示工作站主界面；2.5脱气操作：在工作站主界面上，点击泵：XPG-3X00(RS,SD)，将旁通阀开关逆时针旋转一圈（自动进样器上），冲洗顺序为B→C→D→A，每个管路冲洗5分钟，每个管路脱气前，需先设参数为100%，再依次点击冲洗→忽略警告执行，每个管路冲洗时间均在自动进样器显示屏上显示（注意：D管路冲洗完成后，需将D管路设置为0，点击开始冲洗，方可冲洗A管路）。
冲洗排气完成后关闭旁通阀。
2.6清洗进样器在WPS-3000 SL项下启动栏中依次点灌注注射器、清洗缓冲环、外部清洗针。
注意：外部清洗针运行完毕后，点击进样阀栏中到进样位置。
2.7升流速：在XPG-3X00(RS,SD)界面，在流速/压力栏中填写所需的流速（注意：流速设定要0.2个单位逐步到所设定的流速，待柱压稳定后，再增加流量）。
2.8设柱温箱温度在TCC-3x00项下温度控制栏中设所需温度，点击回车。
2.9点紫外灯在VWD-3x00（RS）项下信号栏中输入所需波长，在命令栏中点击紫外灯（切记点一下）注意：待温度稳定5～10分钟后再开灯以上各项必须点击各项下的模块连接栏中连接才能执行命令。
待紫外灯点亮后可在xPG-3x00（RS，SD）项下流速/压力栏中输入所需流速开始平衡，平衡时间约30分钟。
2.10看基线点击监视基线即可看到当时状态。
高效液相色谱戴安U-3000操作手册
U-3000操作手册1．操作条件：电压：220V, 温度：10-40℃，湿度：10%-85%。
2．注意事项：密封圈清洗溶液为1：9甲醇/水，每次使用前更换，样品必须经过μm的滤膜过滤，流动相也必须经过μm过滤（色谱纯除外）并脱气。
3．若流动相含有无机盐或酸，每天仪器使用完后，要用5%：95%的甲醇/水清洗系统至少30min 后再用100%甲醇冲30min关机。
开机则用5%：95%的甲醇/水冲10min，换流动相。
先开仪器电源，再开电脑，待电脑右下角的服务器监测器由黄色变为灰色，双击面上的图标，进入工作站，如图为工作站根目录，点击快捷栏内的“default panel tabset”出现以下界面，点开“”My Computer”前加号：选择“Chromeleon Server”,“OK”，出现下面的控制界面，分别在“Pump”下设置比例和流速如果流路内有气泡，拧松泵混合器上的“Purge”阀，点上图内的“Purge off”前的按钮，快速排气泡，待气泡排完后，上图内的“Purge off”前的按钮停止，拧紧“Purge”阀，在“Col．Comp”下设置柱温，在“VWD”下开氘灯，设置波长。
系统开始平衡，点快捷栏内的兰色圆点“”采集基线，待基线稳定后，点“”停止采集基线，准备测样。
新建文件夹（第一次使用必须）点快捷栏内“”，回到根目录，右键点击根目录，，点“New Directory”，输入文件夹名称，“OK”。
建立程序文件点“File”下“New”，“OK”，“下一步”，设置温度，“下一步”，设置流速和各通道比例，“下一步”，设置取样和推样速度，“下一步”，设置采集时间，选择采集信号，“下一步”，“下一步”，“下一步”，设置波长，“下一步”，“完成”，如需要，可更改一些参数后，点右键，选“Check”，“确定”，点快捷栏内的“”，选择保存路径，输入名称后“Save”，关闭窗口。
新建方法文件点“File”下“New”，点“File”下“Save As”选择保存路径，输入名称后“Save”，关闭窗口。
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赛默飞世尔(原戴安)
液相色谱操作规程-U3000
一、操作前准备：
流动相的配制：
1.1.1根据所供试品的性质、相关的文献资料、工作经验等按比例配制流动相。
1.1.2根据流动相的性质确定采用有机膜（）还是水相膜对流动相进行过滤。
1.1.3将过滤后的流动相进行超声脱气10~15分钟。
对照品供试品处理：
1.2.1称取或量取适量的对照品或供试品，用适当的溶剂（最好采用流动相或流动相的主成分）进行充分溶解（也可借助超声波进行超声溶解），使其浓度为~1mg/mL（根据检测结果再适当调节溶液的浓度）。
1.2.2根据对照品或供试品的性质确定采用有机针头滤膜（）还是水相针头滤膜进行过滤。
色谱柱的选择：根据样品的性质选择适当的色谱柱。
二、开机：
打开UPS（不间断电源）电源，打开仪器接线板电源开关；
打开电脑显示器电源，打开电脑主机电源（POWER），启动电脑；
依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源；
双击屏幕右下角“服务管理器”快捷图标,出现对话界面后点击“启动仪器控制器”启动,等显示“本地仪器控制器运行空闲”,可以关闭界面。
双击在桌面上的Chromeleon 7图标（工作站主程序）。
在左下方点击仪器，则在右边会自动显示该仪器控制面板。
旋开泵上的排液阀(两圈以上)；设置A通道为100%，点击“冲洗”，然后再出现的对话框中点击“忽略并执行”；（默认冲洗5分钟）；然后分别“冲洗”流路中其他通道气泡；排完气泡后关闭排液阀；
设置流动相的比例及流速后，点击“马达”。
此时泵自动会以设置的流速进行运行。
在控制面板“柱温箱”控制框中，设置准备分析样品所使用的柱温箱温度。
清洗进样器：依次执行灌注注射器，清洗缓冲环，外部清洗针。
三、样品分析：
建立仪器方法：
建立处理方法及报告模板（此步骤可以省略，直接调用以前的）：
建立序列：
打开氘灯（待系统压力稳定后约15min后再开灯）：在控制面板“Detector”控制框中，选中“紫外灯”选框，及“可见灯”选框（如果波长在可见范围）。
在控制面板“UV”控制框中，设置波长，采集频率（10HZ），时间常数（）；点击“监视基线”，选中通道1并确定。
待基线稳定后，点击“监视基线”，点击确定，关闭查看基线。
点击左下方“数据”，并选中要分析的序列，然后点击“开始”启动样品表进行分析（如果序列里有完成的样品，则会变成继续，点继续；如果该序列还在队列中则会显示删除，点击删除后在点击继续）；
样品全部检测结束后，如果不再分析样品应立即关掉氘灯，延长氘灯使用的寿命
四、数据处理：
处理标准曲线；
打印标准曲线；
打印样品报告。
五、关机：
冲洗色谱柱（如果使用了缓冲盐，首先使用10%甲醇水溶液冲洗色谱柱30分钟，然后使用纯甲醇冲洗色谱柱30分钟）。
关闭泵马达，断开连接，关闭工作站。
关闭检测器、柱温箱、自动进样器、泵的电源。
关闭计算机。
关闭UPS电源或稳压电源。
六、注意事项：
溶剂泵的使用注意事项：
（1）使用时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转会磨损柱塞、缸体和密封环，最终产生漏夜。
（2）防止任何固体微粒进入泵体，因为尘埃或其他任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体颗粒。
流动相过滤，可采用滤
膜（或）等滤过。
（3）输液泵的工作压力不能超过规定的最高压力，否则会使高压密封环变形，产生漏夜。
（4）流动相应该先脱气，以免在泵内产生气泡，影响流量的稳定性，如果有大量的气泡，
泵就无法正常工作。
（5）溶剂泵长期不用时，用甲醇以min冲洗各个通道。
（6）泵的清洗液要勤换。
（7）每次开启泵之前要排除管道中是气泡。
（8）流动相由无机盐溶液转换有机溶剂前要用90%去离子水清洗管路。
（9）转换不同流动相时注意两者是否容易混合或者发生反应。
（10）长期不用或运输前要到空清洗液瓶。
色谱柱的使用注意事项：
（1）避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因
此在调节流速时应该缓慢进行，进样阀的转动不能过缓。
（2）一般说来色谱柱不能反冲，只有生产厂家指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。
否则反冲会迅速降低柱效。
（3）选择使用适宜的流动相（尤其是pH），以避免固定相被破坏。
有时可以在进样器前连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析之前
被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被破坏。
（4）避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。
保护柱一般是有相似固定相的短柱，也
有用浸透限制固定相短柱。
保护柱可以经常更换。
（5）保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。
绝对禁止将缓冲液留在柱内静置过夜或更长时间。
检测器的使用注意事项：
（1）长时间检测池中无流动相流动时，关闭检测器氘灯。
（2）不要将物品或其他仪器档住检测器的散热孔。
（3）检测器安装的位置应没有震动，温度变化不大，避免阳光直射。
（4）在关灯命令发出后，再次开灯须等待5分钟以上的时间。
否则灯会因为过热而损坏。