农杆菌的电转化过程
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农杆菌转化(电转化)
电阻：农杆菌400欧姆
(Ecoli 200 欧姆)
电容：25uF
电压：2500V
电击杯:0.2cm
标准反应体系为每管40ul感受态,加入1ul的质粒
(在感受态中加入质粒,混匀后在转入电转化杯)
1 将混匀好的感受态和质粒转到电击杯中(此步在冰上进行)
2 在电转化仪上电击一下,拿出后立刻加入1ml的LB培养基(不加任何抗生素)混匀.
3 吸出,转移到1.5ml的eppendorf管中,28℃温育1-2小时,使细胞恢复生长.
4 涂板,从恒温箱中取出eppendorf管,在离心机上甩一下,使菌沉淀下来,然后,从管中吸
出800ul的LB培养基,剩余的用枪混匀,涂在LB(kan50 Rif50)板上,置于28℃恒温箱中培养,直到长出菌落.。