长期培养的大鼠原代肝细胞功能和形态学观察

长期培养的大鼠原代肝细胞功能和形态学观察
庄鹏;江元森;马会慧;李志刚;麦丽;杨林;姚集鲁
【期刊名称】《中国病理生理杂志》
【年(卷),期】2005(021)005
【摘要】目的:研究大鼠原代肝细胞长期体外培养后功能和形态的变化. 方法: 采用两步胶原酶原位灌流法分离大鼠肝细胞,并用Percoll分离液进行密度梯度离心进一步纯化肝细胞,采用0.4%台盼蓝染色观察细胞活力.然后将细胞接种于HepatoZYME-SFM培养基中培养,定期收集肝细胞培养液上清检测丙氨酸氨基转
移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白、尿素氮的水平.采用乙氧基试
卤灵O-脱乙基酶活性(EROD)方法检测肝细胞P450的CYPⅠA1功能. 结果: 新鲜分离的大鼠肝细胞总数(2-3)×108cells/whole liver,Percoll分离液纯化后活力和
纯度在90%以上.HepatoZYME-SFM培养下肝细胞生长良好并保持正常形态.AST、ALT水平在培养3 d后下降显著,6-9 d后趋于相对稳定的低水平.白蛋白的分泌功能、尿素合成能力在18 d内维持在较高水平.可在3-6 d检测到CYPⅠA1酶活性. 结论: Percoll液纯化新分离肝细胞可提高其活率和纯度,HepatoZYME-SFM培养
条件下肝细胞可有效保持良好形态结构和一定的生物合成代谢能力,适合肝细胞的
体外长期培养和功能研究.
【总页数】5页(P1001-1005)
【作者】庄鹏;江元森;马会慧;李志刚;麦丽;杨林;姚集鲁
【作者单位】中山大学附属三院传染科,广东,广州,510630;中山大学附属三院传染科,广东,广州,510630;中山大学附属三院传染科,广东,广州,510630;中山大学附属三
院传染科,广东,广州,510630;中山大学附属三院传染科,广东,广州,510630;中山大学附属三院传染科,广东,广州,510630;中山大学附属三院传染科,广东,广州,510630【正文语种】中文
【中图分类】R363
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