ST206Lysozyme_溶菌酶_20KU_mgx-碧云天

碧云天细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)说明书

细胞自噬染色检测试剂盒(MDC 法)产品简介：碧云天生产的细胞自噬染色检测试剂盒(MDC 法)，即Autophagy Staining Assay Kit with MDC ，是一种使用丹酰尸胺，也称单丹磺酰尸胺、丹酰尸胺或丹酰戊二胺(monodansylcadaverine, MDC)作为荧光探针快速便捷地检测细胞自噬的试剂盒。

自噬(autophagy)是一种在进化上高度保守的通过溶酶体吞噬并降解部分自身组分的细胞内分解代谢途径。

自噬与多种生理功能有关，在饥饿等环境条件下，细胞通过自噬降解多余或异常的细胞内组分，为细胞的生存提供能量及原材料，促进生物体的生长发育、细胞分化及对环境变化产生应答。

自噬异常与多种病理过程如肿瘤、神经退行性疾病、代谢疾病、病原体感染等都有密切关系。

由于细胞自噬在生理和病理过程中都有重要作用，自噬已经成为细胞生物学领域的一个研究热点。

MDC 是细胞自噬检测最常用的荧光探针之一。

MDC 可以通过离子捕获(ion trapping)和与膜脂的特异性结合，从而特异性标记自噬体(autophagosome)，也称autophagic vacuole ，因而常用于细胞自噬的检测。

MDC 是一种嗜酸性荧光探针，很多酸性膜性结构也会被MDC 染色，因此MDC 染色时正常的细胞也会有一定的染色背景。

本产品的染色原理决定了本产品只能用于培养的细胞或者组织的细胞自噬荧光染色检测，不能用于冻存的或固定的细胞、组织或者组织切片的染色检测。

使用本产品染色后可以通过荧光显微镜拍照观察，也可以通过荧光酶标仪或流式细胞仪进行荧光检测。

荧光显微镜观察时可以使用紫外区激发光激发，发出绿色荧光。

荧光酶标仪或流式细胞仪推荐的激发波长为335nm (330-360nm 均可)，发射波长为512nm (510-540nm 均可)。

本产品用于细胞自噬染色的效果参考图1。

图1. 细胞自噬染色检测试剂盒(MDC 法)的染色效果图。

溶菌酶的测定方法

溶菌酶的测定方法溶菌酶（lysozyme）是一种广泛存在于生物界的酶类分子，能够切断细菌细胞壁的三葡聚糖链（N-醋酸氨基葡庚糖-N-乳酸氨基葡庚糖-β1,4-N-乳酸氨基葡庚糖）。

溶菌酶的测定方法可以从不同的角度进行，包括溶菌酶活性的测定、溶菌酶的产量测定以及溶菌酶在生物体内的测定。

一、溶菌酶活性的测定方法：1. 醋酸甲酯法：该方法通过测量溶菌酶对醋酸甲酯的水解产生的醋酸乙酯的量来间接测定其活性。

首先使用醋酸甲酯制备醋酸乙酯标准曲线，然后将酶样液和醋酸甲酯复合反应一段时间，加入硫酸中断反应，测定产生的醋酸乙酯的吸光度，并通过标准曲线计算出酶的活性。

2. 改良的漆酶法：该方法以溶菌酶对大肠杆菌产生的透明圈直径为基础，通过测量透明圈的直径或面积来间接测定其活性。

方法简单易行，主要用于溶菌酶活性快速筛选。

3. 电导法：该方法基于溶菌酶在水溶液中产生的游离离子影响电导率的原理。

通过将一定浓度的酶溶液加入含有特定离子的缓冲溶液中，测定加入酶溶液前后的电导差异，从而计算出酶的活性。

二、溶菌酶的产量测定方法：1. 透明圈法：该方法将溶菌酶产生菌株接种于含有含有菌斑形成的凝胶平板上，经过一定时间后，用碘溶液显色，可在平板上观察到菌株周围出现的透明圈，通过透明圈的直径或面积来判断酶的产量。

2. 血凝法：该方法使用牛血液和凝血酶来测定溶菌酶产量。

将溶菌酶产生菌株培养得到的培养基与牛血液相混合，通过观察血凝情况来判断溶菌酶产量的大小。

三、溶菌酶在生物体内的测定方法：1. 酶活测定：通过采集动物的血液、组织或细胞，制备相应的提取液，然后通过测定其对某种特定底物的酶活性来间接测定生物体内溶菌酶的水平。

2. 分子生物学方法：通过采用PCR扩增技术、核酸杂交等方法，检测生物体内溶菌酶基因的表达水平和突变情况，从而间接测定生物体内溶菌酶的含量。

总结起来，溶菌酶的测定方法可以根据需求选择。

溶菌酶活性的测定方法主要包括醋酸甲酯法、漆酶法和电导法；溶菌酶的产量测定方法主要有透明圈法和血凝法；溶菌酶在生物体内的测定方法包括酶活测定和分子生物学方法。

碧云天生物技术Oligomycin A产品说明书

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线：400-1683301或800-8283301订货e-mail：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站微信公众号Oligomycin A (ATPase抑制剂)产品编号产品名称包装SC0366-10mM Oligomycin A (ATPase抑制剂) 10mM×0.2mlSC0366-5mg Oligomycin A (ATPase抑制剂) 5mgSC0366-25mg Oligomycin A (ATPase抑制剂) 25mg产品简介：化学信息：化学名Spiro[2,26-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-4,18,20-triene-27, 2'-[2H]pyran]-3,9,13-trione,22-ethyl-3',4',5',6'-tetrahydro-7,11,14,15-tetrahydroxy-6'-[(2 R)-2-hydroxypropyl]-5',6,8,10,12,14,16,28,29-nonamethyl-, (1R,2'R,4E,5'S,6S,6'S,7R,8S,10R,11R,12S,14R,15S,16R,18 E,20E,22R,25S,28S,29R)-简称Oligomycin A别名oligomycin中文名寡霉素A化学式C45H74O11分子量791.06CAS号579-13-5纯度≥98%溶剂/溶解度Water <1mg/ml; DMSO 10mg/ml; Ethanol <1mg/ml溶液配制5mg加入0.63ml DMSO，或者每7.91mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。

SC0366-10mM用DMSO配制。

碧云天生物技术 Beyotime Biotechnology BeyoFusion

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线: 400-1683301或800-8283301订货e-mail:******************技术咨询: *****************网址: 碧云天网站微信公众号BeyoFusion™ DNA Polymerase产品编号产品名称包装D7220 BeyoFusion™ DNA Polymerase 200U产品简介：碧云天生产的BeyoFusion™ DNA Polymerase，是一种以嗜热古细菌DNA聚合酶(hyperthermophilic archaeon Pyrococcus-like DNA polymerase)为基础通过突变等改造而获得的超高性能DNA聚合酶，它具有扩增速度快、保真度极高、扩增片段可以轻松达到12kb等优点。

BeyoFusion™ DNA Polymerase扩增速度极快，扩增小于6kb的DNA片段时，延伸1kb只需要15秒(参考表1)。

普通的DNA聚合酶延伸1kb通常需要1-2分钟。

BeyoFusion™ DNA polymerase由于其超快的扩增速度，可以显著缩短PCR扩增所需的时间。

BeyoFusion™ DNA Polymerase是一种高保真DNA聚合酶。

BeyoFusion™ DNA Polymerase不仅可以非常高效地催化5'至3'方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合反应，它同时还具有3'至5'的外切酶活性(proofreading activity)，它的错误发生概率比Taq酶要低52倍，比pfu酶要约低6倍(参考表1)。

表1. BeyoFusion™ DNA polymerase的主要性能与Taq酶及同类产品的比较。

Product Name Concentration Manufacture Velocity Target Size Fidelity Product end Taq 5U/μl Various 1min/kb <3kb 2.3×10-5/nt/cycle3'overhangs Pfu 5U/μl Various 2min/kb <5kb 2.6×10-6/nt/cycle Blunt Platinum Taq 5U/μl Thermo 30s/kb 15kb 3.8×10-6/nt/cycle 3'overhangs Phusion HF 2U/μl Thermo 15-30s/kb 20kb 4.4×10-7/nt/cycle BluntLongAmp Taq 2.5U/μl NEB 50s/kb 30kb 1.2×10-5/nt/cycle 3'overhangs Phusion HF 2U/μl NEB 15-30s/kb 20kb 4.6×10-7/nt/cycle BluntPfuUltra HF 2.5U/μl Agilent 1-2min/kb 17kb 1.3×10-6/nt/cycle BluntPfuUltra II FH - Agilent 15-30s/kb 19kb 1.2×10-6/nt/cycle BluntKOD Dash 2.5U/μl TOYOBO 30s/kb 18kb 5.8×10-6/nt/cycle 3'overhangsKOD FX 1U/μl TOYOBO 30s-1min/kb 40kb 2.1×10-6/nt/cycle BluntBeyoFusion™ 2.5U/μl Beyotime 15-60sec/kb >12kb 4.4×10-7/nt/cycle Blunt BeyoFusion™ Plus 2.5U/μl Beyotime 15-60sec/kb >12kb 2.2×10-6/nt/cycle 3' overhangs BeyoFusion™ DNA Polymerase的扩增长度长，可以达到12kb。

溶菌酶的检测方法

溶菌酶的检测方法
溶菌酶（lysozyme）是一种能够破坏细菌细胞壁的酶。

以下是一种常用的溶菌酶检测方法：
1. 直接检测法：将待检测溶菌酶样品加到含有适宜浓度的细菌悬浮液中，观察是否有菌落溶解现象。

溶菌酶能够使细菌细胞壁破裂，导致菌落的溶解。

2. 比色法：使用一个富含胞菌的琼脂平板，将待检测溶菌酶样品滴在琼脂平板上并孵育。

溶菌酶会溶解菌落，形成透明的区域。

通过比较孵育前后孔的大小，可以判断溶菌酶的活性。

3. 比浊法：使用涉及胞菌的悬浊液，加入待测溶菌酶样品并在一定时间内孵育。

溶菌酶的作用使细菌细胞溶解，悬浊液逐渐变清，通过浊度的减少来判断溶菌酶的活性。

4. 酶联免疫吸附试验（ELISA）：使用溶菌酶特异性抗体涂覆在微孔板上，然后将待测溶菌酶样品加入孔中，溶菌酶与抗体结合。

再加入与溶菌酶反应的底物和发色剂，通过检测发色强度来测定溶菌酶的浓度。

这些方法都是常用的溶菌酶检测方法，具体选择哪种方法取决于实验的需要和条件。

溶菌酶

（3 ）活力测定：先将酶和底物分别放入25℃恒温水浴预热10分钟，吸取底物悬浮液4mL放入比色杯中，在450nm波长读出吸光度，此为零时读数。然后吸取样品液0.2mL（相当于10µg酶），每隔30s读1次吸光度，到90s时共计下四个读数。活力单位的定义是：在25℃，pH6.2，波长为 450nm时，每分引起吸光度下降0.001为1个活力单位。
中含有较多碱性氨基酸残基，所以其等电点高达10.8左右，最适温度为50OC，最适PH为6～7 左右。在280nm的消光系数[ ]为13.0。该酶活性可被一些金属离子Cu2+、Fe2+、Zn2+（105～10-3M）以及N-乙酰葡萄糖胺所抑制，能被 Mg2+、Ca2+（10-5～10-3M）、NaCl所激活。
(500mL)
2实验试剂 ⑴ 鸡蛋清（鲜鸡蛋） ⑵ 底物微球菌粉 ⑶ D152大孔弱酸性阳离子交换树脂 ⑷ 固体氯化钠（NaCl）；固体硫酸铵(NH4)2SO4；固体磷酸氢二钠（Na2HPO4•12H2O）；固体磷酸二氢钠（NaH2PO4•2H2O）；固体磷酸钠（Na3PO4） ⑸ 乙醇；蒸馏水；甲醇；考马斯亮蓝；三氯醋酸；
四·溶菌酶的制备.分离. 活力测试
实验原理：溶菌酶（lysozyme）是由弗莱明在
1922年发现的，它是一种有效的抗菌剂，全称为1，4-β-N-溶菌酶，又称作粘肽N-乙酰基胞壁酰水解酶或胞壁质酶。活性中心为天冬氨酸52 和谷氨酸35，是一种糖苷水解酶，能催化水解粘多糖的N-乙酰氨基葡萄糖（NAG）与N-乙酰胞壁酸（NAM）间的β-1，4糖苷键，相对分子质量14700Da，由129氨基酸残基构成，由于其
三.溶菌酶分布
1.1 鸡蛋清溶菌酶：鸡蛋清溶菌酶占蛋清总蛋白的 3.4％～3.5％，

碧云天生物技术产品说明书.pdf_1694034760.8424914

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线：400-168-3301或800-8283301订货e-mail：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站微信公众号mVSMC-SV40 (小鼠永生化主动脉平滑肌细胞)产品编号产品名称包装C7419 mVSMC-SV40 (小鼠永生化主动脉平滑肌细胞) 1支/瓶产品简介：Organism Tissue Morphology Culture Properties Mus musculus (Mouse) Aorta/smooth muscle Fibroblast Adherent本细胞株详细信息如下:General InformationCell Line Name mVSMC-SV40 (Mouse Immortalized Aortic Smooth Muscle Cells)Synonyms －Organism Mus musculus (Mouse)Tissue Aorta/smooth muscleCell Type －Morphology FibroblastDisease －Strain －Biosafety Level* －Age at Sampling －Gender －Genetics －Ethnicity －Applications －Category －* Biosafety classification is based on U.S. Public Health Service Guidelines, it is the responsibility of the customer to ensure that their facilities comply with biosafety regulations for their own country.CharacteristicsKaryotype －Virus Susceptibility －Derivation －Clinical Data －Antigen Expression －Receptor Expression －Oncogene －Genes Expressed －Gene expressiondatabases －Metastasis －Tumorigenic －Effects －Comments This cell line was SV40 immortalized. If needed, blasticidin (1-2µg/ml, should be tested before adding) should be added directly to the cells in culture to maintain the immortalization.Culture Method Doubling Time －Methods for Passages Wash by PBS once then 0.05% trypsin-EDTA solution and incubate at room temperature (or at 37ºC), observe cells under an inverted microscope until cell layer is dispersed (usually within 1 to 5 minutes)2 / 5 C7419 mVSMC-SV40 (小鼠永生化主动脉平滑肌细胞)400-1683301/800-8283301 碧云天/BeyotimeMedium DMEM/F-12 (1:1)+10% FBSSpecial Remarks － Medium Renewal － Subcultivation Ratio － Growth Condition 95% air+ 5% CO 2, 37ºC Freeze medium DMEM (high glucose)+20% FBS+10% DMSO ，也可以订购碧云天的细胞冻存液(C0210)。

碧云天 BeyoPure

BeyoPure™ YPD Broth (premixed powder)产品编号产品名称包装ST961-5LBeyoPure™ YPD Broth (premixed powder)10×500ml产品简介：碧云天生产的BeyoPure™ YPD Broth (premixed powder)，即BeyoPure™ YPD培养基(预混粉末)，即酵母膏蛋白胨葡萄糖培养基(Yeast Extract Peptone Dextrose Medium)预混粉末，简称YPD或YEPD预混粉末，也称酵母浸出粉蛋白胨葡萄糖培养基预混粉末，是一种由高纯度高质量的酵母提取物(Yeast extract)、和大豆蛋白胨(Peptone)和葡萄糖(Dextrose)均匀混合而成的用于酵母培养的完全培养基预混粉末。

本产品使用时无需称量，每瓶或每两瓶本产品直接加入500ml或1L超纯水、去离子水或蒸馏水，无须溶解，直接121ºC高压灭菌15分钟，就可以制备成YPD液体培养基，可用于后续酵母等的培养。

每瓶本产品中含有高纯度高质量的酵母膏5g、大豆蛋白胨10g 和葡萄糖10g，具体可以参考下表。

Reagent Amount (g/bottle for 500ml)Yeast extract 5Peptone10 Dextrose (D-glucose)10 YPD培养基属于非选择性酵母培养基(Non-selective isolation medium)，非常适合酿酒酵母属、毕赤酵母属、接合酵母属、假丝酵母属的培养，常用于分子克隆、蛋白质表达或菌株培养等实验。

本YPD培养基支持大多数异养微生物的生长，培养基中的蛋白胨提供氮营养，酵母提取物提供含氮营养物质以及维生素B等，葡萄糖为酵母的生长提供碳水化合物和能量来源。

由于培养基组成简单，一般被用作酵母常规培养的基础培养基。

一个包装的本产品，共可以配制5L YPD液体培养基。

碧云天BeyoPure

BeyoPure™ Ultrapure Water (PCR 级, Sterile)产品编号产品名称包装 ST873-100mlBeyoPure™ Ultrapure Water (PCR 级, Sterile)100ml产品简介：碧云天的BeyoPure™ Ultrapure Water (PCR 级, Sterile)，BeyoPure™ Ultrapure Water (PCR grade, Sterile)，即用于普通PCR 、qPCR 、RT-PCR 等分子生物学级别的无菌、无核酸酶的超纯水，是采用了Merck Millipore 先进的反渗透技术，辅以核子级离子交换树脂、高能量双波长紫外灯和Q-Gard ®超纯水柱，并配合BioPak ®终端超滤器而生产出的无热原(pyrogen-free)、无核酸酶(DNase/RNase-free)、无蛋白酶(Protease-free)、无细菌(bacteria-free)的超纯水。

主要用于PCR 等分子生物学实验中各种缓冲液和溶液的配制。

实验室常用的水有：超纯水(ultrapure water)也称为UPW 或高纯水(high-purity water)、去离子水(deionized water)、反渗透水(reverse osmosis water ，即RO 水，也常称为纯水)、蒸馏水(distilled water)、双蒸水(double-distilled water/dd H 2O)和三蒸水(triple-distilled water)。

其中超纯水是纯度非常高的水，可以满足绝大部分实验用水要求，特别是高灵敏度ICP/MS(电感耦合等离子体质谱)、同位素分析、以及疾控中心、药检所、质检所、环监站、高校和科研院所等实验室及各种高端精密仪器用水。

实验室常用水的特征、制备工艺及比较参考下表。

除超纯水外，其它水的最终水质和制备用水源的质量关系极大。

碧云天,TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)

TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)产品简介：碧云天生产的显色法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。

对于待检测的细胞或组织样品，经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤，即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。

细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。

细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。

基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP)，随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合，最后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞，从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞，这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。

本试剂盒有如下优点。

(1) 高灵敏度：背景染色极低，阳性染色强，可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。

(2) 特异性好：TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。

(3) 快速：仅需约2-3个小时即可完成。

(4) 应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。

TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。

这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。

碧云天生物技术 Beyotime Biotechnology 产品说明书

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线：400-168-3301或800-8283301订货e-mail：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站微信公众号MuERVL-Gag Rabbit Polyclonal Antibody产品编号产品名称包装AF0240 MuERVL-Gag Rabbit Polyclonal Antibody 50μl产品简介：来源用途交叉反应性分子量Rabbit ICC, IF M 67KDa WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence; IHC, Immunohistochemistry; ICC, Immunocytochemistry;FC, Flow Cytometry; ELISA, Enzyme-linked Immunosorbent Assay; ChIP, Chromatin Immunoprecipitation Assay.H, Human;M, Mouse; R, Rat; C, Chicken; Cw, Cow; Dg, Dog; Gp, Guinea pig; Hm, Hamster; Hr, Horse; Mk, Monkey; Pg, Pig;Rb, Rabbit; S, Sheep; Z, Zebrafish; All, all species expected.配套提供了Western一抗稀释液，可以用于Western检测或其它适当用途时的一抗稀释。

建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整)：WB IP IF IHC ICC FC ELISA ChIP- - 1:200 - 1:200 - - -抗体详细信息如下:About this AntibodyName MuERVL-Gag Rabbit Polyclonal AntibodyCategory Polyclonal antibody(pAb); Primary antibodyIsotype IgGPurification Peptide affinity purifiedAbout the ImmunogenImmunogen This antibody is produced by immunizing rabbits with a synthetic peptide (KLH-coupled) corresponding to MuERVL-Gag.Gene ID - SwissProt - Synonyms - CategoryBackground A large number of retrotransposons are expressed when the zygotic genome is first transcribed, including the endogenous retroviruses (ERVs), LINE-1 elements, and the non-autonomous SINE elements. At the 2C stage, MuERV-L/MERVL retrovirus-like elements are transiently de-repressed and produce 3% of the transcribed mRNAs. Following the 2C stage, MERVL-retroelement expression is silenced. The newly study discovered that this regulated pattern of MERVL expression overlapped with greater than one hundred 2C-specific genes that have co-opted regulatory elements from these foreign retroviruses to initiate their transcription.包装清单：产品编号产品名称包装AF0240 MuERVL-Gag Rabbit Polyclonal Antibody 50μlAZ050 Western一抗稀释液50ml－说明书1份保存条件：MuERVL-Gag Rabbit Polyclonal Antibody -20ºC保存，Western一抗稀释液-20ºC或4ºC保存，一年有效。

碧云天 Western及IP细胞裂解液说明书 P0013J

Beyotime Biotechnology400-1683301800-8283301e-mail***********************************Western及IP细胞裂解液(无抑制剂)产品简介：Western及IP细胞裂解液(无抑制剂)(Cell lysis buffer for Western and IP without inhibitors)，是一种在非变性条件下裂解细胞或组织样品从而制备蛋白样品的裂解液。

本细胞裂解液裂解的细胞或组织样品，可以用于PAGE，Western，免疫沉淀(immunol precipitation，IP)，免疫共沉淀(co-IP)和ELISA等，以及许多兼容1% Triton X-100的酶活性或者生物小分子的检测。

使用本裂解液时，用户可以根据具体用途自行添加特定抑制剂或者不添加抑制剂。

本产品可以用于动物、植物的细胞或组织样品，也可以用于真菌或细菌样品。

碧云天生产的不同裂解液的主要特点和差异，以及如何选择裂解液可参考我们的网页：/support/lysis-buffer.htm。

Western及IP细胞裂解液(无抑制剂)的主要成分为20mM Tris (pH7.5)，150mM NaCl，1% Triton X-100，不含蛋白酶、磷酸酯酶等抑制剂。

在添加蛋白酶抑制剂的情况下，可以有效维持原有的蛋白间相互作用。

使用本裂解液获得的蛋白样品，如果用于酶活性检测或一些生物小分子的检测，需要测试标准品用本裂解液稀释后是否会显著影响标准曲线。

如果本裂解液对于标准曲线无显著影响，则可以使用本裂解液。

用Western及IP细胞裂解液(无抑制剂)裂解得到的蛋白样品，可以用碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0009/P0010/ P0010S/P0011/P0012/P0012S)测定蛋白浓度。

由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

碧云天BeyoZonase

BeyoZonase™超级核酸酶(≥99%)产品简介：碧云天生产的BeyoZonase™超级核酸酶(≥99%) (BeyoZonase™ Super Nuclease, ≥99%)是一种来源于粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens )的非特异性核酸内切酶，可在非常宽泛的条件下降解单链、双链、线状、环状、天然或变性等各种形式的DNA 或RNA ，产生长度为3至5个碱基的5'-单磷酸寡核苷酸。

本产品用途广泛，常用于重组蛋白、病毒疫苗等生物制品中去除核酸，以及有效降低细胞、组织、微生物等蛋白裂解液样品的粘度等。

本产品为超纯级，纯度≥99%，无蛋白酶活性，内毒素极低，<0.25EU/KU 。

BeyoZonase™超级核酸酶，又称全能核酸酶或广谱核酸酶，与Benzonase endonuclease 、TurboNuclease 等类似酶的氨基酸序列基本一致(主要是蛋白的氨基端或羧基端所带的标签或残留氨基酸序列略有不同)，具有同样的酶催化活性和相同的用途，大多数情况下可以相互替代。

具体使用时，需要注意纯度和内毒素水平对于后续分析检测的影响。

BeyoZonase™超级核酸酶的稳定性非常好。

37ºC 保存3-5周，BeyoZonase™超级核酸酶能保持>90%的酶活性，在25ºC 保存10周后，酶活性基本没有变化.BeyoZonase™超级核酸酶采用碧云天自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化，表达纯化获得的重组蛋白与Serratiamarcescens 中的天然核酸内切酶氨基酸序列完全一致，没有额外的标签，没有额外的氨基酸，与天然粘质沙雷氏菌的核酸内切酶相比在生化特性方面相同。

和本产品相似的带有His tag 的为BeyoZonase™超级核酸酶(≥99%, with His -tag) (D7126)单量<0.25EU/KU 。

碧云天生物鱼溶菌酶（LYS）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书

鱼溶菌酶（LYS）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定鱼血清，血浆及相关液体样本中溶菌酶（LYS）的活性。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼溶菌酶（LYS）水平。

用纯化的鱼溶菌酶（LYS）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入溶菌酶（LYS），再与HRP 标记的LYS抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的溶菌酶（LYS）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鱼溶菌酶（LYS）浓度。

试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：225U/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

Ready-Lyse Lysozyme Solution 产品说明书

ManualReady-Lyse Lysozyme Solution F or Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.Ready-Lyse™ Lysozyme Solution is part of the Epicentre™product line, known for its unique genomics kits, enzymes, andreagents which offer high quality and reliable performance.Contents1. Introduction (3)2. Product designations and kit components (4)3. Product specifications (4)4. Protocols for using Ready-Lyse Lysozyme Solution (4)5. Further support (5)31. IntroductionReady-Lyse Lysozyme Solution is a stabilised lysozyme preparation for the lysis of Gram-negative bacteria such as E. coli , as well as some Gram-positive bacteria. It is supplied as a ready-to-use solution, in quantities of 4 or 10 × 106 units, that is stable at -20 °C and retains activity with repeated use. Ready-Lyse Lysozyme Solution is also more active than egg-white lysozyme, the traditionalenzyme used for bacterial lysis, and is optimally active at the neutral pH values common to most lysis buffers. Egg-white lysozyme is optimally active at pH values >9. In the pH 6.5-7.5 range, the specific activity of Ready-Lyse Lysozyme Solution is approximately 200 times higher than that of egg-white lysozyme.As less Ready-Lyse Lysozyme Solution is needed to lyse a given amount of bacteria, losses due tononspecific binding are virtually eliminated in nucleic acid purifications. In contrast, egg-white lysozyme can bind to and precipitate DNA, RNA or negatively charged proteins, reducing yield. For example, in Fig. 1, nearly 50% of the DNA in a plasmid purification has coprecipitated with the egg-white lysozyme (lane 7). An equivalent amount (in activity units) of Ready-Lyse Lysozyme Solution causes much less precipitation of DNA (compare lane 6 to lane 7).Figure 1. Decreased loss of DNA with Ready-Lyse Lysozyme Solution compared to egg-white lysozyme. pHC79 cosmid DNA (500 μg/mL) was incubated for 15 minutes at 22 °C with either 5 μg (30 KU)/mL of Ready-Lyse Lysozyme (RL), 500 μg/mL of egg-white lysozyme (EW) or no lysozyme (C) in conditions typically used for lysis of E. coli (25 mM Tris [pH 8.0], 10 mM EDTA). The solutions were then microcentrifuged for 10 minutes. The supernatants were removed and the pellets were resuspended in TE buffer containing 0.1% SDS. Supernatants (lanes 1-3) and pellets (lanes 5-7) were then analysed by electrophoresis in a 0.8% agarose gel.1 2 3 4 5 6 7C RLEW C RL EWSupernatantsPellets4 2. Product designations and kit components4. Protocols for using Ready-Lyse Lysozyme SolutionThese protocols are offered as guidelines for the use of Ready-Lyse Lysozyme and can be scaled, depending on the particular application. The precise amount of enzyme needed for complete digestion may vary with different strains of E. coli (see Notes).4.A. Protocol for preparing mini-lysates with Ready-Lyse Lysozyme1.Grow a culture of E. coli to A 600 = 1.9. 2.Divide the culture into 1.5-mL aliquots. 3.Pellet the cells by centrifugation.4. Completely resuspend the cells in 25 μL of TES Buffer (10 mM Tris-HCl [pH 7.5], 1 mM EDTA and100 mM NaCl).5. Dilute Ready-Lyse Lysozyme to a concentration of 250 U/μL in TES Buffer.6. Add 1 μL of the diluted enzyme to each aliquot of resuspended cells and mix.7. Incubate at room temperature with occasional swirling.4.B. Protocol for preparing large-scale lysates with Ready-Lyse Lysozyme1. Grow a 1,000-mL culture of E. coli to A 600 = 1.9.2. Pellet the cells by centrifugation.3. Completely resuspend the cells on ice in 25 mL of TES Buffer (10 mM Tris-HCl [pH 7.5],1 mM EDTA and 100 mM NaCl).4. Add 250,000 U of undiluted Ready-Lyse Lysozyme and swirl gently.5. Incubate at room temperature or in a water bath at 25 °C.3. Product specificationsStorage: Store only at -20 °C in a freezer without a defrost cycle.Storage buffer: Ready-Lyse Lysozyme Solution is supplied in a 50% glycerol solution containing 50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 M NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM dithiothreitol and 0.1% Triton ® X-100. Unit definition: One unit produces a decrease in A 450 of 0.001 per minute at 25 °C with a suspension (0.5 mg/mL) of lyophilised E. coli K802 cells in 50 mM Tris-HCl (pH 7.5).Contaminating activity assays: Ready-Lyse Lysozyme Solution is free of detectable exonucleaseand endonuclease activities.*Unit concentration value (U/µL) and the corresponding tube volume appears on the tube label as each lot varies.ProductKit size Reagent description Catalog number Part number VolumeNotesLysis: Lysis occurs quite rapidly at room temperature, but is greatly slowed by cold temperatures.With either protocol, complete digestion should occur within 15 minutes at room temperature; lysis is indicated by a gradual clearing of the culture with a concomitant increase in viscosity. Following lysis, the lysate can be treated according to standard protocols for the purification of nucleic acids or proteins.Bacterial strains: Ready-Lyse Lysozyme will digest the cell walls of most Gram-negative bacteria.For Gram-positive strains, adjust the concentration of Ready-Lyse Lysozyme to 5X that suggested in the above protocols. Addition of greater than 5X the concentration of Ready-Lyse Lysozyme is unlikely to result in lysis.5. Further supportIf you require any further support, please do not hesitate to contact our Technical Support Team:************************5Integrated tools. Accelerated science.For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.All trademarks and registered trademarks mentioned herein are the property of their respective owners. All other trademarks and registered trademarks are the property of LGC and its subsidiaries. Specifications, terms and pricing are subject to change. Not all products are available in all countries. Please consult your local sales representative for details. No part of this publication may be reproduced or transmitted in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, recording or any retrieval system, without the written permission of the copyright holder. © LGC Limited, 2021. All rights reserved. GEN/885/EK/0121 @LGCBiosearch。

溶菌酶（Lysozyme,10mgml）

溶菌酶（Lysozyme,10mgml）
北京雷根生物技术有限公司/doc/824231606.html,
溶菌酶(Lysozyme,10mg/ml)
简介：
溶菌酶(lysozyme)又称胞壁质酶(muramidase)，是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶，通过破坏细胞壁的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂，内容物逸出而使细菌溶解。

其特点在于：1、抗热性；2、有机溶剂无法使其完全失活；3、活力稳定；4、具有抗菌性，较广的抗菌谱；5、是有效的防腐剂等。

Leagene 溶菌酶(Lysozyme,10mg/ml)由溶菌酶和TRIS 等组成，多用于溶解细胞壁以便提取DNA 。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、按实验具体要求操作。

注意事项：
1、如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：12个月有效。

编号名称 NE0120 Storage Lysozyme(10mg/ml) 5ml -20℃ 使用说明书 1份编号名称 DC0032 Masson 三色染色液 NR0001 DEPC 处理水(0.1%) NR0003
Lezol(总RNA 提取试剂) PE0080
Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8) PS0013
RIPA 裂解液(强) PW0082
丽春红S 染色液(1×Ponceau S) TC1243 甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 单试剂比色法)。

溶菌酶β-苷键

溶菌酶（lysozyme）是一种存在于生物体内的酶类蛋白质，具有降解和杀灭细菌细胞壁的作用。

它通过水解细菌细胞壁的β-1,4-苷键，使其发生断裂，导致细菌细胞失去结构完整性而死亡。

β-1,4-苷键是细菌细胞壁中的一种化学键。

细菌细胞壁主要由多糖聚合物组成，其中包括聚N-乙酰葡萄糖胺（N-acetylglucosamine，NAG）和聚N-乙酰穆尔酰葡萄糖胺（N-acetylmuramic acid，NAM）交替排列形成的链。

这些链通过β-1,4-苷键连接在一起，形成网状结构的细菌细胞壁。

溶菌酶通过与细菌细胞壁中的NAG和NAM之间的连接处结合，并水解连接它们的β-1,4-苷键。

这导致细菌细胞壁的结构破裂，细胞壁无法维持完整性，进而导致细菌细胞的溶解和死亡。

溶菌酶的作用在免疫系统中具有重要意义，它是人体自然免疫的一部分，可以帮助防止细菌感染。

溶菌酶广泛存在于多种生物体内，包括唾液、眼泪、汗液等体液中，具有抗菌和抗病毒的作用。

溶菌酶免疫组化

溶菌酶免疫组化
溶菌酶（Lysozyme）免疫组化是一种利用免疫组化技术检测组织或细胞中溶菌酶的存在和分布的方法。

这种技术可以帮助研究者了解溶菌酶在生物体内的分布和功能。

以下是进行溶菌酶免疫组化的一般步骤：
1．取样和固定：首先，需要获取组织样本或细胞，然后用适当的方法对其进行固定，以保持细胞结构的完整性。

2．抗体选择：选择合适的抗体，通常是特异性识别溶菌酶的抗体。

这些抗体可以是单克隆抗体或多克隆抗体。

3．抗原修复：对样本进行抗原修复，以增强抗体与目标抗原的结合。

4．膜透性化：使用适当的试剂使细胞膜对抗体更具通透性，以便抗体能够渗透到细胞内。

5．抗体孵育：将选择的抗体加入样本中，让其与目标抗原发生特异性结合。

6．辅助抗体：添加辅助抗体，通常是标记有荧光物质或酶的二抗，以增强检测信号。

7．染色和显微镜观察：如果使用荧光标记，可以直接观察荧光信号。

如果使用酶标记，需要添加适当的底物并使用显微镜或其他检测设备观察染色结果。

溶菌酶活性检验方法(药典)

溶菌酶拼音名：Rongjunmei英文名：Lysozyme书页号：E6-141本品系自新鲜鸡蛋清中提取的一种能分解粘多糖的碱性蛋白酶，常与氯离子结合成为溶菌酶氯化物。

按干燥品计算，每1mg的效价不得少于6250单位。

【性状】本品为白色或微黄色的结晶性或无定形粉末；无臭，味甜；水溶液遇碱易破坏。

本品在水中易溶，在丙酮或乙醚中不溶。

【鉴别】(1)取本品约2mg，加水2滴使溶解，加10％氢氧化钠溶液5滴与10％硫酸铜溶液1滴，混匀后显紫红色。

(2)取本品，加醋酸－醋酸钠缓冲液（取无水醋酸钠6.7g，加水约900ml，振摇使溶解，用醋酸调节pH值至5.4，加水稀释至1000ml,摇匀。

）制成每1ml中含溶菌酶0.4mg的溶液，照分光光度法（中国药典1995年版二部附录ⅣＡ）测定,在280nm的波长处有最大吸收，吸收度应为0.39～0.49。

【检查】酸度取本品0.1g，加水至10ml溶解后，依法测定（中国药典1995年版二部附录ⅥＨ），pH值应为3.5～6.5。

干燥失重取本品0.2g，置五氧化二磷干燥器中,减压干燥3小时，减失重量不得过5.0％（中国药典1995年版二部附录ⅧＬ）。

炽灼残渣取本品0.2g，依法检查（中国药典1995年版二部附录ⅧＮ），遗留残渣不得过4.0％。

总氮量取本品，照氮测定法（中国药典1995年版附录ⅦＤ第二法），按干燥品计算，含总氮量应为15.0～17.0％。

【效价测定】供试品溶液的制备取本品约25mg，精密称定，置25ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液[取磷酸二氢钠10.4g与磷酸氢二钠7.86g及乙二胺四乙酸二钠0.37g，加水溶解使成1000ml,调节pH值至6.2]适量使溶解,并稀释成每1ml中含溶菌酶50μg的溶液。

底物悬浮液的制备称取溶酶小球菌15～20mg，加磷酸盐缓冲液(pH6.2)0.5～1ml,在研钵内研磨3分钟，再加磷酸盐缓冲液(pH6.2)适量，使总体积约为50ml，使悬浮液于25±0.1℃时，在450nm的波长处测得的吸收度为0.70±0.05(临用前配制)。