兔支气管败血波氏杆菌的分离培养及初步鉴定_胡北侠
兔支气管败血波氏杆菌检测方法的建立及应用
兔支气管败血波氏杆菌检测方法的建立及应用支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)是一种重要的病原菌,广泛感染包括猪、犬等家畜,兔、豚鼠等实验动物,雪貂、考拉熊及栗鼠等野生动物在内的多种哺乳动物,并造成急慢性的呼吸道疾病。
人也有感染该菌的报道,尤其是小孩和免疫力缺陷的人群。
近年来,随着我国规模化养兔业的发展,支气管败血波氏杆菌感染明显增加,并常与多杀性巴氏杆菌、葡萄球菌等混合感染,已成为兔业养殖中发病率和死亡率增加的重要原因之一,给养兔业造成重大的经济损失。
本研究由三部分组成,一是OMP-ELISA抗体检测方法的建立及应用;二是针对支气管败血波氏杆菌的菌毛蛋白建立并比较了三种抗体检测方法;三是PCR检测方法的建立及应用。
主要试验和结果如下:1.应用超声波裂解结合超速离心法提取支气管败血波氏杆菌外膜蛋白(OMP),包被酶标板,建立了检测兔波氏杆菌病抗体的间接ELISA方法。
试验确定抗原的包被浓度为14.44μg/mL,检测血清作1:400稀释,以及间接ELISA的最佳反应条件。
该方法有很高的特异性和重复性,与微量凝集试验相比,符合率为87.56%,敏感性提高约33倍。
该ELISA方法不仅敏感、特异、快速、简便,而且经济、易于重复,适于推广应用。
2.利用超声波处理结合TritonⅩ-100溶解法制备粗提的菌毛抗原,建立了三种用于支气管败血波氏杆菌的抗体检测方法:琼脂免疫扩散试验(AGE))、玻片凝集试验(SAT)、间接血凝试验(IHA)。
临床检测了458份兔血清样品,结果发现,IHA试验的阳性检出率最高(73.36%),其次为AGID(63.54%)和SAT试验(61.79%);IHA与AGID的符合率为90.17%,与SAT试验的符合率为86.68%,AGID与SAT的符合率为89.08%。
IHA更为敏感,且与AGID有较好的符合率,可用于支气管败血波氏杆菌的血清学监测。
兔支气管败血波氏杆菌不同感染途径研究
兔支气管败血波氏杆菌不同感染途径研究摘要用兔支气管败血波氏杆菌分离株BJL0504菌株（I相菌）经滴鼻、肺内、气管、静脉、皮下对30~ 40日龄兔攻毒，并进行临床观察和微生物学检查，比较不同攻毒方法的优势。
结果显示，经静脉注射的家兔发病率和死亡率高，症状较典型；经肺内注射也可以引起部分发病和死亡；滴鼻和气管注射感染均可以复制到典型的临床症状，但是解剖病变都不明显。
由此可见，支气管败血波氏杆菌经静脉攻毒可以较好的复制病例，这对支气管败血波氏杆菌的致病机理的研究、疫苗的研制和评价提供了理论基础。
关键词兔；支气管败血波氏杆菌；感染途径支气管败血波氏杆菌（Bordetella bronchiseptica，Bb）也称支气管鲍特杆菌或博德特氏杆菌，是引起多种哺乳动物呼吸道疾病的主要病原菌之一，广泛感染家畜、野生动物和实验动物上呼吸道，能引起猪、马、猫、狗、兔、小鼠、豚鼠等哺乳动物的呼吸道疾病[1，2]，常导致感染动物发生鼻炎和支气管肺炎。
该菌常存在于家兔上呼吸道黏膜，在气候骤变的秋冬之交极易诱发此病。
这主要是由于家兔受体内、外各种不良因素的刺激，抵抗力下降，导致该菌得以侵入机体内而引起发病[3]。
在兔群中感染率非常高，并常与巴氏杆菌、葡萄球菌等混合感染[4，5]，引起严重的呼吸道疾病。
本文通过不同途径使家兔感染支气管败血波氏杆菌，比较不同感染途径的优势，以期对该菌的致病机理进行进一步的研究。
1材料和方法1.1支气管败血波氏杆菌菌株支气管败血波氏杆菌菌株BJL0504分离于鼻炎发病兔，由江苏省农业科学院兔病与兽医生物技术项目组分离鉴定并冻干保存。
1.2试验动物21只30~40日龄健康兔由南京军区南京总医院比较医学科提供。
将购入的健康试验兔隔离观察3d，每天观察精神状态、是否有鼻炎、打喷嚏等症状，无异常情况后再采集鼻拭子涂布麦康凯平板和绵羊血鲍姜氏平板，同时采集血液分离血清。
鼻拭子未分离到支气管败血波氏杆菌、血清与标准菌株玻片凝集试验阴性的兔可以进行人工感染试验。
鉴别家兔多杀性巴氏杆菌与支气管败血波氏菌的双重TaqMan qPCR方法的建立
Bio-Product Engineering,Ministry ofAgriculture .Nanjing 210014 ,China；2. Joint International Research Laboratory of
Animal Health and Food Safety/ College of Veterinary Medicine ,Nanjing Agricultural University,Nanjing
中 国 兽 医 科 学 2021，51(06):67卜677 Chinese Veterinary Science
网 络 首 发 时 间 ：2 0 2 1-03-24
D O I ：10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0104 中图分类号：S852.61 文献标志码：A 文章编号：1673-4696(2021 )06-067卜07
CHENG Xu12,QIU Ru-long^FAN Zhi-yu^HU Bo1,CHEN Meng-meng1,S0NG Yan-hua1,XUE Jia-bin1,
ZHU Wei-feng1， QIAN Ying-juan2* ， WANG Fang1*
(1. Institute of Veterinary Medicine ,Jiangsu Academy ofAgricultural Sciences / Key Laboratoryfor Veterinary
摘 要 ：为 提 高 家 兔 呼 吸 道 疫 病 主 要 细 菌 性 病 原 检 测 的 可 靠 性 和 标 准 化 ，根 据 G e n B a n k 中多杀性巴氏杆 菌 （PasteureWa muitoc/c/a ) K m t 基 因 与 支 气 管 败 血 波 氏 菌 （Borc/eteWa bronch/sept/ca) F 丨a 基 因 分 别 设 计 特 异 性 引 物 和 探 针 ，对 反 应 条 件 进 行 优 化 ，建 立 兔 多 杀 性 巴 氏 杆 菌 和 支 气 管 败 血 波 氏 菌 双 重 T a q M a n q P C R 方 法 ， 并初步 用于检 测家 兔肺脏 及鼻拭 子临 床样 本。结 果 显 示 ，该 方 法 建 立 的 标 准 曲 线 在 标 准 品 浓 度 为 2.3 5 X 106〜 2.35 copies/ n L 时 有 良 好 的 线 性 关 系 ；与 绿 脓 杆 菌 、肺 炎 克 雷 伯 菌 、大 肠 杆 菌 、沙 门 菌 、产 气 荚 膜 梭 菌 无 交 叉 反 应 ；最 低 检 测 限 均 为 2.35 copies/ M L ;批 内 、批 间 重 复 性 检 验 变 异 系 数 均 小 于 2 % 。检 测 7 0 份 临 床 样 本 D N A 结 果 显 示 ，多 杀 性 巴 氏 杆 菌 阳 性 率 为 5 0 . 0 % , 支 气 管 败 血 波 氏 菌 阳 性 率 为 4 2 . 9 % , 混 合 感 染 率 为 21.4%, 该 方 法 与 细 菌 分 离 培 养 和 常 规 P C R 符 合 率 分 别 为 8 0 . 0 % 、9 2 . 0 % 。以 上 数 据 表 明 ，本 研 究 建 立 的 双 重 TaqMan q P C R 方 法 特 异 性 强 、灵 敏 度 高 、重 复 性 好 ，无 需 病 原 菌 的 培 养 即 可 用 于 临 床 样 品 的 快 速 检 测 ，为兔多杀性巴 氏 杆 菌 、支 气 管 败 血 波 氏 菌 的 实 验 室 诊 断 及 流 行 病 学 调 查 提 供 了 快 速 、高 效 、准 确 的 检 测 方 法 。
兔支气管败血波氏杆菌的分离培养及初步鉴定
次每只 ４ Ｌ 约合每千克体重 ０２ ｇ 以下的葫芦茶 ｍ（ ．６ ）
后 ， 出 的卵囊 数均 有所 增 加 ， 增 幅范 围 在 ０５倍 检 其 ． 至 ｌ 倍 不等 。 是 由于投 药后 葫芦 茶 浸 膏剂 刺 激 ０余 这
了球 虫 卵囊 的增 殖 ，还是 由 于粪便 取 出后 到检 查 期 间一 直 泡 在生理 盐 水 中 ，其 间因 间隔 时 间过 长而 发 生 卵 囊增 殖 ， 待 于进 一步 观察 。 有 ３ ２ 据报 道 ， ． 葫芦 茶 给羊 投 服每 次 ０ ５— ． ｇ 小 ． ２５ 、 白 鼠投 服 浸 膏剂 每 次 ２ ５— ． ｇ ． ５ ０ ，均 未 引 起 中毒 死
混 合 感 染 相 当 普 遍 ， 已成 为 兔 病 防 治 的 一 大 难 ２ ２ 细菌 染 色 ．
一 实 践 与体 会 一
革 兰 氏 阴性 小 杆 菌 ， 端钝 圆 ， 两 多
题 。笔 者 通 过 对 某 兔 场 有 明显 鼻 炎 症 状 的 兔 群 进 行 细 菌 学 检 查 ，就 波 氏 杆 菌 的基 本 特 性 作 一 初 步 研 究 ，为 兔 鼻 炎 的 预 防 、诊 断 提 供 一 定 的 理 论 依
常 高 ，所 导致 的家兔 鼻 炎 的发病 率也 非常 高 。 特别
是 在 规模 化 养兔 场 ， 氏杆 菌与 巴氏杆 菌 、 萄球 菌 波 葡
维普资讯
１ ＣｉｓＪ ｒ ｌ Ｒｂｔ ａ ｉ ５２ ２ ０ ｈ ｅ ｕ ａｏ ａ ｉ ｒ ｎ ｎｅ ｏ ｎ ｆ ｂＦｍ ｇ ／０ ０
３ 左 仰 贤 ．球 虫 学 ．天 津 ： 天 津 科 学技 术 出版 社 ， １９ ． ９ １
２ ～３Ｏ ９
．
４ 李树 荣， 李琦 华 ， 吴艳 梅 等 ．葫 芦茶 粉 剂 对 山 羊 体 内寄 生 虫 虫 卵 的 效 果 观 察 ．中 兽 医 医 药 杂 志 ，２ ０ ，２ （ ） ０２ １１ ：
一例兔支气管败血波氏杆菌感染的诊治
实用技 术
一
例兔 支气管败血 波 氏杆 菌感染 的诊治
王俊江 ， 青 闫
（． １ 吉林省 白城 市洮 北 区畜牧 站 ， 白城 １７ ０ ； ３ ０ ０
２ 吉林 省 白城 市洮 北 区动 物疫病 预 防控 制 中心 ， ． 白城 １７ ０ ） ３００ 中图分 类号 ： ５ ． Ｓ８ ８２ １ ９ 文献标 识码 ： Ｂ 文章编 号 ： ０ — ３ ７ ２ ０ ）６ ０ １— ２ １ ５ ６ ２ （０ ８ ０ — ０ ２ ０ ０
琼脂 培养 基 生 长 良好 ， 形成 圆形 、 隆起 、 滑 、 光 闪光 的
对病 死兔 进行无 害化 处理 ，病兔 调 出兔 舍隔 离饲
养 ． 舍及 饲养用 具用 ０１ 兔 ．％的百 毒杀溶 液 每周进 行一
小 菌落 ， 质地 似 奶 油样 ， 血 营 养 琼脂 上产 生 ｐ型 溶 鲜
明胶 ， 不产生靛基质 和 Ｈｓ 还原硝酸盐， 柠檬酸 ：， 利用 钠 ， 氧 化 氢 酶 、 素 分 解 酶 、 化 酶 试 验均 为 阳性 ， 过 尿 氧
Ｖ Ｐ试 验 阴性 ， Ｒ试 验 阴性 。 — Ｍ．．
３ 动 物试 验 ． ４
取 健康 豚 鼠 ４只 ， 分为 实验 和对 照 两
途 径 给药疗 效要 显 著 。
磺 胺 二 甲基 嘧啶 、磺胺 一 一 ６ 甲氧 嘧啶高 敏 （ 菌 圈 ≥ 抑 １ｒ ，对 土霉 素 、环丙 沙星 中敏 （Ｏ ５ ｍ） ａ １ｍｍ≤抑 菌 圈＜ １ｍ ， ５ ｍ）对链 霉素 、 庆大 霉素耐 药 （ 菌 圈＜Ｏ 抑 ｌｍｍ） 。 综合 临床 表现 、 理 变化和 实验室 检验结 果 分析 ， 病
一
剖检 病死 兔多 只 ， 病变 基本一致 。鼻 腔黏 膜充 血 、
家兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定
２ Ｃ ｉｅｅＪｕｎｌｆＲ ｂ ｉＦｒ ｉｇ ５２ ０ ４ ｈ ｓ ｏｒａ ｏ ａｂｔ ａｍ ｎ ／０ ８ ｎ
疾 病 防 治
家兔支气管败血波氏杆菌 的分 离鉴定
马增 晖 尹 秀凤 薛家宾 ３， ， ， ． 宁官保 ・ ★
家兔 支气 管败血 波 氏杆菌病 是 由支气 管 败血 波 氏 杆 菌 引起 的一 种 广泛 流行 的呼 吸道传 染 病 ｆ 。当机 ｌ 之 体 抵抗 力 受 到各 种 因素 ， 气候 骤 变 、 养 密度 过 大 、 如 饲 寄生虫 病等影 响 而降低 时易 引发流 行 ｌ 。特别是 在规 ３ ］ 模 化养 兔场 ， 氏杆 菌 与 巴氏杆 菌 、 波 葡萄 球菌 混 合感 染 相 当普 遍 ， 已成 为兔病 防治 的一大 难题 者通 过对 安 ， 笔 徽 、 南、 河 山东 、 吉林 等 省兔 场 送 检 的病 兔 进行 细 菌 学 检查 ， 就所分 离 的波 氏杆 菌 的基本 特性作 初 步研究 ， 为
１ 材料 与方 法
１１ 精 聃 ．
１ ． 病料 来 自安徽 、 ．１ １ 河南 、 山东 、 吉林等地兔场送 检 的病兔 。 １ ． 普通培养基 鲜血琼脂平板 、 ．２ １ 麦康凯平板 、Ｓ ＴＡ 平 板 、 硫乳 （ ＨＬ 平 板 、 丁 肉汤 （ 照 常 规 方法 配 胆 Ｄ ） 马 按
制 ） 。
１１ 生化培 养基及 试 剂 ．． ３
蛋 白胨水 、硝酸盐 还原 培
Ａ ｒ ｕｔｒｌ ｃ ｎｅＮａｊ ｇ２ ０ ， ｈｎ ） ｇｉ ｌ ａ Ｓｉ ｃ ， ｎｎ １ １ Ｃ ｉａ ｃ ｕ ｅ ｉ ０ ４
Ａｂｓｒ ｃ Ｓ ｘｓｒ ｉ ｓｏ ａ ｔ ｒａｗｅ ｅ ｉｏ ａｅ ｒ ｍ ｕ ｇ ｔｓ ｕ ｓｏ ｎ ｅ ｔ ｄ ｒ ｂ ｔ ｓｓｏ ｒ ｈ ｌ ｇ ｔ ａ ｔ： ｉ ｔａｎ ｆｂ ｃｅ ｉ ｒ ｓ ｌ ｔｄ ｆｏ ｌ ｎ ｉｓ ｅ ｆｉ ｆ ｃｅ ａ ｂｉＴｅ ｔ ｆｍｏ ｐ ｏ ｏ ｙ，ｃ ｌｕ ｅ ． ｕｔｒ ｄ ｓｉ ｇ ｓ ｎ ｂ ｏ ｈ ｍｉｔｙ ｐ ｔ ｏ ｅ ｉ ｉ ａ ｄ ｎ ｉ ｉ ｔｃ ｅ ｉｉ ｉ ｓ ｏ ｄ ｈ ｂａ ｔｒａ ｉｔｎ ｕｉｈｉ ｇ， ｉ ｃ ｅ ｓｒ ， ａ ｈ ｇ ｎ ｃ ｔ ｙ ｎ ａ ｔｂ ｏ ｉ ｓ ｎｓｔｖｔ ｙ ｈ ｗｅ ｔｅ ｃ ｅ ｉ ｗａ Ｂｏ ｄ ｔ ｌ ｓ ｒｅｅｌ ａ ｂ ｏ ｃ ｉｅ ｉａ ｗｉ ｉ ｈ ｒｐ ｔ ｇ ｎｉ ，ａ ｄ ｔ ｅ ｇ ｒ ｏ ｏ ｒ ｓ ｏ ｓ ｉｏａ ｅ ｏ ｔ ｅ ｉ ｆ ｃｅ ａ ｂ ｔ ｒ ｎ ｈｓ ｐｔ ｔ ｈ ｇ ｅ ａｈｏ ｅ ｃ ｎ ｈ ｅ ｍ ｆｃ ｒｅ ｐ ｎｄ ｗａ ｓ ｌ ｔｄ ｆ ｍ ｈ ｎ ｅ ｔ ｄ ｒ ｂ ｉ．Ｔｈｅ ｃ ｈ ｒ ｉｏ ａ ｅ ｔａｎ ｉ ｉ ｈ ｓ ｎ ｉｉ ｅ ｔ ｈ ｅ ｒ ｃ ｃｉ ｅ，ｌ ｖ ｆｏ ａ ｉ ｓ ｌ ｔｄ ｓｒ ｉ ｓｈ ｇ ‘ｅ ｓｔ ｏ ｔ ｅ ｔｔａ ｙ ｌｎ ｖ ｅ ｏ ｘ ｃ ｎ，ｃｐ ｏ ｏ ａ ｉ ｌ ｉ ｒ ｆ ｘ ｃ ｎ，Ｓ ｌ ＭＺ－ ＴＭＰ，ａ ｉｈ ｏ ｃ ｎ ｚｔ ｒ ｍｙ ｉ ． Ｋｅ ｒ Ｒａ ｂｉ；Ｂｏ ｄ ｔ ｌ ｏ ｃ ｉｅ ｉａ；Ｉｏ ａｉ ｎ ａ ｄ ｎ ｉ ｃ ｔ ｎ ｙ ｗｏ ｄｓ ｂ ｔ ｒ ｅ ｅ ｌ Ｂｒ ｎ ｈ ｓ ｐｔｃ ａ ｓ ｌｔｏ ｎｄ Ｉ ｅ ｔ ｉ ａ ｉ ｆ ｏ
兔波氏杆菌病的诊治
鸯 参嗣嚣
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３ 生化 特性 检查
该养兔户饲养兔 １０多只 ，０９年 １ 月在 ２ ２ ２０ １ 个兔舍 中有 ２ 只 ４ １ ０日龄 以下 的幼兔在一周 内相 继发病 ， 陆续死亡 ｌ 只。临床表现精神不振 ， １ 食欲 减退 ， 鼻孔周围有浆液性 、 粘液性及脓性鼻汁 ， 有的 病兔 不 断打 喷嚏 ， 呼吸加 快 。 ２ 剖检变化 剖检病死兔 ７只 ， 可见支气管充血 ， 内有粘液 脓性 分泌 物 。肺 脏有 多量 粟粒 大或少 量 如栗子 大 的 脓疱 ， 切开脓疱流出乳 白色奶油样脓液。有的病例 胸腔有多量黄色稀薄的脓性积液 ， 胸膜及心包均呈 纤维索性化脓性炎症 。心肌上有广泛灰 白色坏死 灶 。有 的病兔肝脏上有大量粟粒大至豌豆大 的脓 疱。 偶见腹腔充满脓液 ， 呈弥漫 眭化脓性腹膜炎。 肝 表面被覆灰白色脓液 ， 肝脏边缘处有多量大小不等 的灰 白色坏死 灶 ，肝膈 面中部有大小不等的坏死 区。大网膜出血 ， 盲肠浆膜广泛出血 。 ３ 实验室诊断 ３１ 涂片 、 检 ． 镜 无菌操作取病兔肝脏 、 肺脏脓疱液抹片 ， 经革 兰氏染色后镜检 ， 见有大量大小不等的革兰氏阴性 杆菌 ， 美蓝 染色 ， 两极 浓染 。 ３ 细茵分 离培养 ． ２ 量得 以保证的同时 ， 会增加精饲料 的投人成本。因 此 ， 了实现这一 目标 ， 为 要彻底 改变玉米秸秆作为 唯一 粗 饲 料 的 局 面 ，应 加 大 玉米 青 贮 和 黄 贮 的 比 例 ， 而增加奶 牛 的粗 饲料采 食量 。 从 ４ 北方城郊每头奶牛需要 ０ ９ｈ ． ３ ． ｍ 土地 ，耕地 ２ 种值面积分别为玉米占 ４ ％、青贮玉米 占 ２ ％、 ２ ４ 苜 蓿草 占 ３ ％， ４ 这种 种 植结 构有 利 于 奶牛 粗 饲料 的需 要。 玉米 、 青贮玉米和苜蓿草种植结构为 ４ ：４３ 。 ２２ ： ４
兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及某些生物学特性研究
兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及某些生物学特性研究支气管败血波氏杆菌（Bordetella bronchiseptica，Bb）是引起多种哺乳动物呼吸道隐性感染及急、慢性炎症的病原菌，病兔临床上以发生鼻炎，出现打喷嚏和呼吸困难，从鼻腔流出浆液、粘液性分泌物为特征。
支气管败血波氏杆菌与百日咳波氏杆菌（B．pertussis）、副百日咳波氏杆菌（B．parapertussis）列为一群，将包括禽波氏杆菌（B．avium）在内的其余四种归为另一群，列于革兰氏阴性好氧杆菌和球菌，博德特氏菌属（Bordetella Moreno-Lopez，1952）。
近年来，随着我国规模化养兔业的发展，支气管败血波氏杆菌感染明显增加，并常与多杀性巴氏杆菌、葡萄球菌等混合感染，已成为兔业养殖中发病率和死亡率增加的重要原因之一，给养兔业造成重大的经济损失。
本研究从Bb的分离和鉴定、病例的复制、菌相免疫学和粘附特性四个方面进行了系统的研究，结果如下：1、兔支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定：2005年10月～2006年12月间，通过对江苏南京地区4家实验兔场和山东淄博1家商品兔场有鼻炎症状的患兔鼻腔分泌物进行兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定，了解支气管败血波氏杆菌在兔群中的感染情况，并对该菌的某些生物学特性进行研究。
共采集有明显鼻炎症状的194份患兔鼻腔分泌物，分离出56株支气管败血波氏杆菌，分离率为17.87％～39.39％，平均分离率28.86％，结果显示支气管败血波氏杆菌是引起家兔鼻炎的重要病原菌，分离率较高，该病的发生与季节具有一定的相关性，分离菌具有特定的生长特性、形态特性、生化反应特性和对抗生素的敏感特性。
2、支气管败血波氏杆菌人工感染动物模型的建立：对鉴定后的19株支气管败血波氏杆菌进行了ICR小鼠毒性比较研究，并以此为基础进行了分离菌对兔致病性差异研究；用BJL0504菌株（Ⅰ相菌）以不同攻毒途径对30～40日龄兔进行致病作用比较研究；用冻干保存的3株强毒力菌株以静脉注射途径攻毒家兔，根据致病性筛选毒力稳定的菌株作为疫苗候选株。
兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其免疫原性检测
收稿日期:2006211214 基金项目:国家自然科学基金资助项目(3067114,30740077);山东省自然科学基金资助项目(Y2006D09) 作者简介:王 伟(19812),男,在读研究生。
3通讯作者,E 2mail :zhurl @兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其免疫原性检测王 伟1,朱瑞良13,李新苍1,胡晓娜1,王永花2 (1.山东农业大学动物科技学院,山东泰安271018;2.上海美农公司,上海201000)摘要:2004年,山东省某一大型养兔场的20～30日龄幼兔突然大批发病死亡。
病兔早期精神不振,多数病兔鼻腔流出脓性鼻液,随着病程的延长逐渐表现为呼吸困难,并出现鼻鼾声,以体况瘦弱,腹泻为主要症状。
从中主要分离到4株细菌,根据其形态学特性、培养特性、生化特性、血清学反应特性等将分离菌鉴定为兔支气管败血波氏杆菌。
然后对所分离到的兔支气管败血波氏杆菌菌株进行(G +C )mol %含量的测定以及16SrRNA 的扩增,结果(G+C )mol %含量为61.7%～62.4%,与Kersters K 结果相符(61.6%～62.6%);而该菌16SrRNA 核苷酸序列与GenBank 中收录的AF177666株禽波氏杆菌核苷酸序列同源性为82.7%,与本实验室保存的禽波氏杆菌及兔败血波氏杆菌参考菌株S80103株同源性高,分别为99.7%和99.9%。
利用所分离到的兔支气管败血波氏杆菌菌株制备免疫原,通过免疫孕前母兔,使仔兔获得母源抗体,而使幼仔兔获得早期保护,效果较好。
关键词:兔;波氏杆菌;鉴定;(G +C )mol %;16SrRNA ;免疫中图分类号:S852.61 文献标识码:A 文章编号:100524545(2008)0820897204Isolation ,identif ication and molecular biology characterisitics of rabbit Bor detell abronchise pticaWAN G Wei 1,ZHU Rui 2liang 13,L I Xin 2cang 1,HU Xiao 2na 1,WAN G Y ong 2hua 2 (1.College of A n 2i m al H usband ry and V eteri nary M edici ne ,S handong A g ricult ural U ni versit y ,T ai an ,S han 2dong 271018,Chi na;2.S hang hai Mei non g Feed Co ,L t d ,S hang hai 201000,Chi na ) Abstract :In 2004,the 20,302day 2old young rabbits of a large 2scale farm in Shandong were diseased suddenly andwere caused to death.The rabbits discharged the purulent nasal secretion in early phase ,and with the process of dis 2ease ,the rabbits manifested the dyspnea ,snore ,feebleness ,and diarrhea.Four bacteria were isolated ,and through morphological ,cultural ,biochemical characteristics and serial reactional traits ,the bacteria were identified as rabbit B ordetella bronchise ptica .The G +C mol %of isolated bacteria was from 61.7%to 62.4%,which accorded to theresults of Kereters (61.6%262.6%);the homology of gene sequnence of 16srRNA from the isolated strains with the corrensponding parts of avian B ordetella bronchiseptica recorded in G eneBank was 82.7%;and the homology of gene sequnence of 16srRNA with the corrensponding parts of Avian strian and rabbit B ordetella bronchise ptica Ref 2erence strian A F177666was higher ,which was 99.7%and 99.9%,respectively.The immunogens were prepared u 2sing the isolated bacteria ,and the female rabbits were vaccinated before pregnancy.The new 2born rabbits showed the high titer abtibody and the good protection against rabbit B ordetella bronchiseptica . K ey w ords :rabbits ;B ordetella bronchise ptica ;idenfiction ;(G +C )mol %;16SrRNA ;immune 3Corres ponding author ,E 2mail :zhurl @ 兔支气管败血波氏杆菌病是家兔常见的传染病,主要引起哺乳仔兔和断乳仔兔的急性死亡,成年兔的鼻炎、支气管炎和脓疱性肺炎等,对养兔业造成很大的危害[122]。
兔支气管败血波氏杆菌的临床诊断
管理科朴香丽尹洪哲董亮＊◎兔支气管败血波氏杆菌的临床诊断兔支气管败血波氏杆菌（Bordetella bornchispetica,Bb）也称支气管鲍特杆菌或博德特氏杆菌，属于波氏杆菌属。
波氏杆菌是由Ferry于１９１０年首次分离。
近些年来Ｂｂ在自然界中很广泛的分布着，其易感动物除了兔以外，啮齿类、家畜、人等多种哺乳动物上呼吸道也会寄生本病菌，并且相互可以传染。
由波氏杆菌引起的呼吸系统疾病一般在春秋两季气温多变的季节多发。
支气管败血波氏杆菌，革兰氏染色阴性，呈小球杆状，单在或成双排列。
无芽孢，最适生长温度３５－３７℃，需氧或兼性厌氧。
初分离有荚膜，有鞭毛。
营养要求不高，在普通琼脂平板、血液琼脂平板、麦康凯琼脂平板等培养基上均能生长。
兔支气管败血波氏杆菌病是家兔养殖中常见的呼吸道传染病，以引起哺乳仔兔和断奶仔兔的急性死亡，成年兔的鼻炎、支气管炎和脓疱性肺炎为主要特征。
仔幼兔患病多取急性经过，病初从鼻腔流出少量浆液性鼻液，很快发展成粘液性或脓性鼻液，继而出现呼吸困难，迅速死亡，病程仅２－３ｄ。
成年兔患病通常表现两种临床症状：一是鼻炎型，病兔鼻腔粘膜充血，鼻孔流出多量浆液性或粘液性鼻液，多不见脓性；二是支气管肺炎型，病兔鼻炎长期不愈，鼻腔经常流出粘液性或脓性分泌物，打喷嚏，呼吸急促，食欲不振，渐进性消瘦。
哺乳母兔患病主要表现咳嗽，呼吸困难，精神萎靡，食欲减退甚至废绝，以及被毛粗乱，发病３－４ｄ后，多以死亡告终。
该病通常会给养兔业带来很大的经济损失。
一、材料与方法１.实验动物。
2013年8月龙井市来延边大学动物医院就诊的病例，四只病死兔。
２.试验用培养基及试验用药品。
普通琼脂培养基，麦康凯培养基、肉汤培养基，尿素酶培养基、枸橼酸盐培养基，糖（醇）类发酵管、蛋白胨水；细菌生化微量反应管；革兰氏染液、美兰染液及药敏纸片均购自青岛海博生物试剂有限公司。
３.试验用器材。
手术刀片、镊子、剪刀、注射器等常规解剖器械；培养皿、载玻片、盖玻片、显微镜等常规镜检器材。
兔波氏杆菌病的实验室诊断
兔波氏杆菌病的实验室诊断作者：邵立岩来源：《现代畜牧科技》 2015年第11期邵立岩（辽宁省丹东市宽甸县八河川动物卫生监督管理所 118225）兔波氏杆菌病又称为支气管败血波氏杆菌病，引起兔的一种以慢性鼻炎、支气管肺炎及咽炎为特征的呼吸道传染病。
1 病原学诊断1.1 细菌培养样品采集：病兔，将灭菌棉拭子在无菌生理盐水中浸湿，插入病兔鼻腔内，深约10mm，小心转动，蘸取鼻汁；死亡兔或扑杀致死兔，取鼻腔、气管、肺部病变材料用于细菌分离培养。
细菌分离：将附着在棉拭上的黏液涂抹在麦康凯培养基或DHL培养基上，37℃培养48h。
肺部病变材料进行培养时，还可用血液琼脂培养基。
结果判定：在改良麦康凯培养基上，支气管败血波氏杆菌菌落直径约1~2mm，圆整、光滑、隆起、透明，略呈茶红色，较大菌落中心厚，呈茶黄色。
在DHL琼脂平皿上形成无色半透明，2mm左右菌落。
1.2 病原鉴定生化试验:不发酵碳水化合物，葡萄糖、荒糖、乳糖、甘露醇、果糖木糖呈碱性反应。
M.R.试验、靛基质试验、硫化氢产生阴性，V-P试验、枸橼酸盐利用、尿素酶产生、硝酸盐还原、运动力试验阳性。
动物接种试验:常选用幼兔或豚鼠，鼻内接种4h培养物0.1mL，应在几天内出现鼻炎和肺脓肿的典型症状和病理变化。
0.5mL剂量耳静脉接种家兔，应于24~48h内死亡。
从死亡兔的病变组织及扑杀的活兔的肺脏中均可分离到本菌。
血清平板凝集反应:在清洁的玻片上加一滴阳性血清（约0.3mL），充分混入一铂圈被检菌，轻轻晃动玻片，室温下放置2min。
液滴中出现大凝集块或小的粒状凝集物，液体透明，判为阳性。
每次试验应设有阴性血清对照和缓冲生理盐水对照。
结果判定：液滴中出现大凝集块或小的颗粒状凝集物，液体透明，判为阳性。
免疫荧光检测抗原:应用直接荧光抗体技术，检查鼻甲骨、气管、细支气管及肺脏上皮细胞，观察到颗粒样抗原者判为阳性。
该试验一般在感染后7~28天即可检出抗原。
2 血清学诊断2.1 凝集反应将Ⅰ相菌接种到胰蛋白酶大豆肉汤中，37℃培养24~48h，加福尔马林灭活，作为抗原。
兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析
ｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｋａｎａｍｙｅｉｎ ａｎｄ ｎｏｒｆｌｏｘａｅｉｎ Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｇｅｎｅｓ ｏｆ ｂｌａＴＥＭ ａｎｄ ｔｅｔＢ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ．
ｉｎ ｔｈｉｓ ｉｓｏｌａｔｅ， ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ｃｏｎｓｉｓｔａｎｔ ｗｉｔｈ ｄｒｕ ｇ—ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ．
Ｉｎ ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ，ｔｈｅｓｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｉｌｌ ｂｅ
ｈｅｌｐｆｕｌ ｆｏｒ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｇｕｉｄｅ ｏｆ ｒｅａｓｏｎａｂｌｅ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｕｓｅ ｔｏ ｒｅａｔ Ｋ ｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｂｒｏｎｃｂｉｓｐｅｔｉｃａ；ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ｄｒｕ ｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ； ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｇｅｎｅ
作 者 简 介 ：牛 江 婷 ，硕 士 研 究 生 ，从 事 动 物 病 原 研 究 。 通讯 作者 ：胡 桂 学 。Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｕｉｘｕｅ１９６４＠ １２６．ｅｏｍ
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中国兽药杂志 ２０１８年 ２月第 ５２卷第 ２期 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｔ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｒｕｇ
ｄｏｉ：１０．１１７５１／ＩＳＳＮ ．１００２—１２８０．２０ｌ８．０２．０４
兔 支 气 管败 血 波 氏杆菌 的分 离鉴 定 及 耐药 性 分 析
牛江婷 ，方 词 ，伊淑 帅 ，张 双 ，何 羽扬。，董 国英 ，胡桂学
兔支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定
兔支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定
李长安;方艳琴;陈晓霖;张耀相
【期刊名称】《西北农业学报》
【年(卷),期】2011(020)010
【摘要】对陕西商洛某养殖场病死兔解剖、无菌采取病料,从病料中分离到1株革兰阴性小杆菌,经生物学特性试验和生理生化试验鉴定,为兔支气管败血波氏杆菌.药敏试验结果表明,该分离菌株对环丙沙星、氟哌酸、氧氟沙星等抗生素高度敏感；对氯霉素、红霉素、四环素等抗生素耐药.外毒素试验和动物致病性试验对小白鼠均有致病作用.
【总页数】4页(P16-19)
【作者】李长安;方艳琴;陈晓霖;张耀相
【作者单位】西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌 712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌 712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌 712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌 712100
【正文语种】中文
【中图分类】S855.1+2
【相关文献】
1.狐狸支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定 [J], 秦绪伟
2.兔支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定 [J], 王一霖;孟洋;王丽萍;张彦龙
3.皮兔支气管败血波氏杆菌病并发兔瘟病 [J], 刘汉忠;梁铎
4.兔支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定 [J], 李峰;沈志强;管宇;刘金华
5.小熊猫支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定 [J], 王艳君;张琴;冯永其;毕靖征因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
兔波氏杆菌病防治
兔波氏杆菌病防治刘继霞【期刊名称】《四川畜牧兽医》【年(卷),期】2015(000)009【总页数】1页(P59-59)【作者】刘继霞【作者单位】河南省林州市动物疫病预防控制中心，河南林州 456500【正文语种】中文【中图分类】S858.291.512兔波氏杆菌病也称兔支气管败血波氏杆菌病，是由支气管败血波氏杆菌引起的一种常见呼吸道传染病。
1 病原支气管败血波氏杆菌为卵圆形至杆状的多形态小杆菌，其呈革兰氏阴性。
2 流行特点患波氏杆菌病的兔会出现慢性鼻炎、支气管肺炎和咽炎等。
病菌可通过空气传播，经呼吸道引起感染。
本病幼兔发病率高，并且有死亡，成年兔发病较少。
自然条件下，多种哺乳动物的上呼吸道中都有本菌存在，天气突变、兔抵抗力下降、兔舍空气污浊等情况可促发此病。
3 症状本病潜伏期为7～10 d。
成年病兔出现鼻炎和支气管炎，其有多量的浆液性、黏液性鼻液流出，病兔鼻炎长期不愈，并出现打喷嚏，呼吸困难，不食，消瘦等症状。
病仔兔多呈急性经过，其出现鼻炎病状后，即表现为呼吸困难，并迅速死亡。
鼻炎型病兔鼻黏膜潮红，鼻流浆液性或脓性分泌物。
支气管炎型病兔支气管黏膜充血、出血，管腔内有黏液性或脓性分泌物。
病兔肺有大小不一、数量不等的脓肿，其小如粟粒，大如乒乓球，有时见胸腔浆膜及肝、肾、睾丸等有脓肿，此外尚可见化脓性胸膜炎、心包炎等变化。
4 诊断4.1 镜检取病兔鼻咽部黏液、分泌物及病变器官脓液涂片，自然干燥，火焰固定，革兰氏染色，镜检，见波氏杆菌为革兰氏阴性、多形态的小杆菌。
病料美蓝染色，镜检，见波氏杆菌为多形态的两极着染的小杆菌，其与巴氏杆菌极为相似。
4.2 分离培养病料接种于绵羊鲜血琼脂平板和改良麦康凯平板，病菌在两种培养基上都能生长，且不发酵葡萄糖，据此判为波氏杆菌，如病菌仅在鲜血琼脂平板上生长，不在改良麦康凯平板上生长，则判为巴氏杆菌。
4.3 动物试验取病料接种于豚鼠和小鼠，如试验动物在接种48h内死亡，且剖检试验动物见腹膜炎变化，并能从试验动物体内分离出支气管败血波氏杆菌，则可诊断为波氏杆菌病。
兔多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌复合PCR方法的建立及临床应用
兔多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌复合PCR方法的建立及临床应用范志宇;魏后军;胡波;宋艳华;王芳;薛家宾;徐为中;苏国清【摘要】根据GenBank中多杀性巴氏杆菌ATP合成酶基因(atpB)的保守序列设计特异性引物,建立巴氏杆菌PCR检测方法,并与已建立的支气管败血波氏杆菌PCR检测方法进行合并,经反应条件的优化,成功建立多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌复合PCR诊断方法.该方法检出的最小多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌菌数分别为40 CFU和4 CFU;对兔源产气荚膜梭菌、大肠杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、猪鼻支原体、链球菌的检测结果均为阴性,说明该方法具有良好的特异性.用该方法对中国4个省份采集的临床鼻拭子样本共712份进行检测,结果显示,多杀性巴氏杆菌阳性率为25.56％,支气管败血波氏杆菌阳性率为34.55％,双阳性率为13.20％.该复合PCR方法能快速、敏感地从家兔鼻拭子样品中检出多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌,为临床疾病检测和流行病学调查提供了技术保障.【期刊名称】《江苏农业学报》【年(卷),期】2015(031)002【总页数】6页(P376-381)【关键词】兔支气管败血波氏杆菌;多杀性巴氏杆菌;复合PCR【作者】范志宇;魏后军;胡波;宋艳华;王芳;薛家宾;徐为中;苏国清【作者单位】江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014【正文语种】中文【中图分类】S858.291.51+2兔多杀性巴氏杆菌病,又称兔出血性败血病,是由多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)引起的一种在家兔生产中广泛存在而且危害性较大的呼吸道传染病。
家兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药基因检测
家兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药基因检测曹洪志;李成贤;彭茜翎;其美拉姆;史纪强【期刊名称】《饲料工业》【年(卷),期】2024(45)5【摘要】为深入了解兔支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb),试验将病兔体内分离得到的菌株进行菌株鉴定、生长曲线测定、致病性研究、药敏试验及耐药基因检测,期望了解该菌的生长规律,为临床用药及防控奠定基础。
通过Gram染色镜检、分离培养、16S rDNA序列分析对分离菌株进行鉴定,测定了该分离株的生长曲线、半数致死量、耐药性并对分离菌株进行β-内酰胺酶耐药基因的检测。
结果表明:分离得到1株革兰氏阴性杆菌,命名为P201215,该分离株的16S rDNA基因序列与GenBank中支气管败血波氏杆菌(登录号为NR113628.1)的同源性为99%。
分离株的对数生长期为2~9 h,9 h后进入平台期;对KM小鼠的半数致死量为1.19×107 CFU。
药敏试验结果显示,分离株对部分头孢菌素类药物耐药,对大部分β-内酰胺类、喹诺酮类、四环素类及氨基糖苷类药物敏感,PCR检测未检出超广谱β-内酰胺酶耐药基因。
【总页数】7页(P70-76)【作者】曹洪志;李成贤;彭茜翎;其美拉姆;史纪强【作者单位】宜宾职业技术学院;四川农业大学动物医学院;西藏自治区林芝市察隅县上察隅镇农牧综合服务中心【正文语种】中文【中图分类】S855.12【相关文献】1.家兔支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定2.兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药基因检测3.家兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定4.西部白眉长臂猿支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其耐药基因检测5.四川省猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药基因和毒力基因检测分析因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
安徽省兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及PCR诊断方法的建立
安徽省兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及PCR诊断方法的建立谢长文;范红结;刘德义【期刊名称】《安徽科技学院学报》【年(卷),期】2022(36)2【摘要】目的:从皖北多个大型兔场无菌采集发病兔肺脏进行兔支气管败血波氏杆菌(Bb)分离鉴定,并建立PCR诊断方法,为养兔场及时了解Bb的流行状况及本病的防控提供依据。
方法:用5%绵羊血改良的B-G培养板对无菌采集的兔病变肺脏病料进行细菌培养,对分离菌株的形态、血清、生化特性等进行研究,并利用16S rRNA-PCR扩增技术加以验证;针对Bb表面特有的丝状血凝素(FHA)蛋白基因序列设计1对引物,建立检测Bb的PCR方法,并对反应条件进行优化。
结果:本研究所得的Bb菌株在形态学、血清学、生化特性与标准Bb菌株一致,16S rRNA-PCR鉴定方法在1492 bp处扩增出目的条带,基因序列与Bb16S rRNA(E06073)同源性达到99.1%;新建的PCR方法25 mmol/L MgCl_(2)1.0μL、退火温度为58℃、30个循环),可扩增出特异醒目的目的条带(约730 bp);特异性试验显示该方法对兔巴氏杆菌、兔魏氏梭菌、金黄色葡萄球菌和兔大肠埃希氏菌检测均为阴性,敏感性试验显示该方法在Bb菌液浓度仅为7.2×10^(3)CFU/mL时仍能获得目的条带。
结论:本研究从兔肺脏病料中分离的菌株经鉴定为Bb,并建立了检测该细菌的PCR方法,可用于临床鉴别和诊断兔支气管败血波氏杆菌病。
【总页数】6页(P15-20)【作者】谢长文;范红结;刘德义【作者单位】宿州职业技术学院;南京农业大学动物医学院;安徽科技学院动物科学学院【正文语种】中文【中图分类】S855.12【相关文献】1.兔金黄色葡萄球菌和支气管败血波氏杆菌双重PCR检测方法的建立2.PCR检测兔支气管败血波氏杆菌方法的建立及应用3.兔多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌复合PCR方法的建立及临床应用4.兔支气管败血波氏杆菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用5.兔支气管败血波氏杆菌PCR快速检测方法的建立及应用因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
新西兰白兔支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定
新西兰白兔支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定范志宇;恽时锋;薛家宾;徐为中;王芳【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2007(17)5【摘要】目的了解支气管败血波氏杆菌在实验兔群中的感染情况,并对该菌的生物学特性进行研究.方法从江苏南京地区四家实验兔场采集有鼻炎症状的患兔鼻腔分泌物63份进行细菌的分离鉴定,并对分离菌对小鼠的毒性,对断奶幼兔的致病性,对抗生素敏感性和生长培养特性等进行了研究.结果共分离出支气管败血波氏杆菌19株,分离率为30.16%,分离菌中有15株为强毒,1株为弱毒,3株无毒;对其中5株强毒株的抗生素敏感性试验表明,所有毒株对新霉素、氯霉素、红霉素、妥布霉素高度敏感,而对痢特灵、链霉素、洁霉素均不敏感,对其他抗生素的敏感性则各不相同.结论支气管败血波氏杆菌是引起实验兔鼻炎的重要病原菌,分离率较高,并与季节具有一定的相关性,分离菌对小鼠毒性较高,对幼兔具有一定的致病性,具有特定的生长特性、形态特性和对抗生素的敏感特性.【总页数】5页(P278-282)【作者】范志宇;恽时锋;薛家宾;徐为中;王芳【作者单位】南京农业大学动物医学院,南京,210095;南京军区南京总医院比较医学科,南京,210002;江苏省农业科学院,南京,210014;江苏省农业科学院,南京,210014;江苏省农业科学院,南京,210014【正文语种】中文【中图分类】S852.61+4【相关文献】1.日本大耳白兔、新西兰白兔的遗传分化研究 [J], 孙杰;赵宗胜;李大全;戴玉萍;王勇2.WHBE免血气-电解质分析及与日本大耳白兔和新西兰白兔比较研究 [J], 陈民利;吕建敏;徐孝平;潘永明;徐剑钦;王德军3.Vc-獭兔、日本大耳白兔与新西兰白兔血液蛋白多态性研究 [J], 周立波;任文陟;张嘉保;王玉平;郭雄明;朱玉峰4.豫丰黄兔与新西兰白兔、哈尔滨大白兔增重比较 [J], 胡永献;杨家民;李艳凤;刘朝玉5.福建白兔与新西兰白兔生长和生化指标比较 [J], 陈冬金;桑雷;孙世坤;陈岩锋;王锦祥;谢喜平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
兔感染波氏杆菌的诊治
兔感染波氏杆菌的诊治
吕金刚
【期刊名称】《畜牧兽医科技信息》
【年(卷),期】2016(000)003
【摘要】兔波氏杆菌病是由支气管败血波氏杆菌引起的在家兔疾病中最为常见的广泛流行和传播的慢性呼吸道疾病。
该病在春秋两季最为常见，但在其他季节中要时有发生，对任何年龄的家兔都较易感染。
其传播途径主要是通过患病兔的呼吸飞沫，经呼吸道传染给健康家兔。
不良的饲养管理也是导致该病暴发与流行的一个重要的原因。
2015年3月我辖区有养兔户暴发一起呼吸加快，身体渐进消瘦为主要特征的传染病。
经流行病学调查、临床诊断、剖检变化及实验室诊断确诊为兔波氏杆菌，并采取了有效的治疗措施，及时有效的控制了疾病的发生。
【总页数】2页(P122-123)
【作者】吕金刚
【作者单位】重庆市长寿区邻封镇畜牧兽医站,重庆401249
【正文语种】中文
【相关文献】
1.兔支气管败血波氏杆菌不同感染途径研究 [J], 范志宇;恽时锋;王芳;王欣;胡波;张则斌;徐为中;奚力中
2.一例兔支气管败血波氏杆菌感染的诊治 [J], 王俊江;闫青
3.兔球虫病并发巴氏杆菌混合感染的诊治 [J], 余小东;唐红英;沈坚
4.兔瘟巴氏杆菌病魏氏梭菌病混合感染诊治报告──兔“三联疫苗”临床预防效果
[J], 靳国昌;张士荣;张书松
5.兔波氏杆菌和巴氏杆菌混合感染的诊断与防治 [J], 张尤嘉;刘光远
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两株波氏杆菌生化试验结果 葡萄糖 磷酸盐 ;" ; 葡磷胨水 ; ; 木胶糖 ; ; 山梨醇 ; ; 8#9 ;# ; 苯丙氨酸 ; ; 靛基质 ; ;
注： ! 表示可以利用该种物质； " 表示不能利用该种物质； # 表示没有 8# 9 生成。
獭兔马杜拉霉素中毒报告
高 跃 * 浙江省丽水市农业局， 浙江丽水 &#&$$$ , 丽水市莲都区九里村、 #$$% 年 & 月 %# ’ %! 日， 凤化村两户规模獭兔场，先后发生兔群四肢麻痹、 尖叫、 绝食， 以内脏出血病变为主的急性病， 一周内 经临床症状、 病理解剖和 分别死亡 (() 只和 !%# 只。 药物添加剂调查，确诊为獭兔马杜拉霉素中毒。现 将发病情况及诊治经过报告如下： % 发病经过 & 月 %# 日，九里村一规模獭兔场畜主为预防 兔球虫病， 变换抗球虫药， 从市区某兽药店购买鸡 用抗球虫药—— — 球敌克粉 * 含 %+ 马杜拉霉素 , ， 按 每吨饲料添加球敌克粉 %!$- 的剂量， 于 %& 日傍晚 投喂 青年兔， % !$$ 只仔兔、 %. 日早晨再次投喂 后饲养员发现几只仔兔死亡， 未引起注意， 到中午 店购买了球敌克， 按每吨饲料添加 %$$-， 饲喂 % %$$ 只仔兔、青年兔后，也发生与九里村相同的兔急性 死亡率达 .(/ !+ 。 病， 一周内死亡 !%# 只， # 临床症状 两养兔户仔兔、青年兔的饲料及添加剂配方与 以前唯一不同的是更换了抗球虫药—— — 球敌克，用 该饲料两次饲喂后，约 1 小时后发生了大批仔兔、 青年兔死亡。病兔发病初期精神沉郁， 呆目仰视， 绝 食，绝水，口吐白沫，尖叫，部分病兔四肢痉挛、抽 搐， 盲目撞笼， 后期高度沉郁， 两腿瘫痪， 角弓反张， 急速衰竭而死， 病程急性的 # ’ . 小时， 也有 % ’ & 天 死亡， 病程长的最终多以腹水增多而渐渐死亡。 & 剖检病变 病死兔解剖后发现，病变以全身性出血为主， 心脏内膜和浆膜面有出血点， 肺部严重充血、 出血， 间质增宽、 水肿； 肝脏初期肿大、 有斑点状出血， 肾、 脾、肠胃等脏器均有出血性病变。后期肝脏色泽暗 红， 硬化萎缩， 出现严重腹水。
— 实践与体会 —
后的粪便， 经带回实验室作卵囊计数 #( ) 投药前、 后发现： 试 & 组至试 ! 组， 服药前后的虫卵囊数不但 未减少， 反而还有所增加； 试 * 组至试 + 组， 投药后 的卵囊数出现减少； 对照组的卵囊数自始至终增、 减 幅度不是太大。见下表。
表 组别 试&组 试#组 试,组 试)组 试!组 试*组 试5组 试2组 试+组 对照组 投药前后的球虫卵囊变化情况 用药前卵囊数 %个 " 0’ * )$$ # #!$ # 2$$ & &!$ & *$$ 2 5$$ ,$ ,$$ *!$ 5 *!$ * *$$ * *!$ ** 2!$ &,+ $$$ 5! $$$ #5 +!$ ! $!$ &5 $!$ 5 !$$ !!$ )$$ 用药后卵囊数 %个 " 0’ ,$ ,$$ *!$ 5 *!$ * *$$ * *!$ ** 2!$ &,+ $$$ 5! $$$ #5 +!$ ! $!$ &5 $!$ 5 !$$ ) )!$ & $$$ #$ *!$ 2!$ 死亡 !$ & $!$ 5$$ !
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参考文献
李桂杰， 刘思当， 朱瑞良等 2 禽波氏杆菌内毒素致病性研 究 2 畜牧畜医学报， #$$% ， &% * . , ： &.) ’ &!# 王玉芝，朱瑞良 2 禽波氏杆菌病原性研究及防治初探 2 中国预防兽医学报， #$$% ， #. * # , ： %%5 ’ %#$ 李文玉等 2 犬波氏杆菌病的诊治 2 中国兽医杂志， #$$$ ， #( * # , ： &1 林悦厚，余柏容等 2 两种培养基对兔支气管败血波氏杆 菌分离培养的比较 2 中国养兔杂志， %)1( ， .： &)$ * 收稿日期： #$$# 6 $5 6 %5 ,
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— 实践与体会 —
两端钝圆， 多 #& # 细菌染色 革兰氏阴性小杆菌， 散在， 少数成双存在。两极染色不明显。 #& ) 培养特性 #& )& % !, 血清营养琼脂上 #- 小时形成灰白色小 菌落， 菌落湿润， 表面隆起， 中央稍凹陷， 边缘不整 齐。-. 小时菌落中等大小。 培养 #- 小时形 #& )& # 麦康凯培养基上生长良好， 成土黄色、针尖大菌落，表面隆起、湿润、光滑、透 明。培养基颜色由红色变为黄色。 灰 #& )& ) %$, 鸡血平板上 #- 小时形成菌落中等， 白色， 表面湿润、 光滑， 边缘整齐， 菌落周围有透明溶 血圈。 培养 #- 小时 #& )& - 马丁肉汤培养基内生长旺盛， 肉汤呈均匀一致浑浊，培养基表面形成一层较厚的 菌膜， 轻轻摇动菌膜沉入底部， 继续培养可再次形成 菌膜。 #& - 细菌毒力鉴定 ! 株波氏杆菌注射小鼠后， 其中有两株 1 分别命名为 23%、23# 4 对小鼠有致病 性， 小鼠在注射后 #- 小时内死亡。 死亡小鼠剖检， 见 皮下有红色胶胨样液体渗出，心脏有针尖大小出血 点， 肾脏、 脾脏出血， 肠道臌气、 粘膜出血。 #& ! 死亡小鼠的细菌分离 分别无菌取死亡小鼠 的脾脏、 肝脏， 经马丁肉汤增菌 # 小时后， 分别在麦 康凯上划线培养， 培养 #- 小时见有土黄色、 针尖大 菌落生长。 #& 5 细菌的的生化鉴定 两株有致病性的支气管 败血波氏杆菌的生化鉴定结果， 见表 %。
#& * 细菌的耐药性 两株波氏杆菌药敏试验结果 基本一致， 均对丙氯哌酸、 环丙沙星、 氯霉素、 诺氟沙
表# 细菌 23% 23% 丙氯哌酸 #-6 -$ #)6 -! 诺氟沙星 %56 )$ %.6 !$
星等较为敏感， 而对红霉素、 链霉素、 青霉素、 丁胺卡 那等有耐药性， 见表 #。
不同抗生素对两株波氏杆菌的抑菌圈直径 1 ’’ 4 氯霉素 #)6 #$ #$6 .$ 红霉素 .6 -$ %$6 -$ 氨苄青霉素 %)6 %$ %#6 !$ 链霉素 .6 !$ *6 )! 青霉素 .6 !. 56 !# 磺胺 %#6 )! %-6 !$ 丁胺卡那 76 !. 76 %$
环丙沙星 %.6 .$ %.6 -!
— 实践与体会 —
& 小结与讨论
中国养兔杂志
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&2 % 本研究通过对患有鼻炎的病兔鼻腔分泌物进 行细菌分离鉴定结果表明，波氏杆菌占细菌总数的 此外还有巴氏杆菌、 葡萄球菌等， 但是小鼠攻 !$+ ， 毒试验结果显示 !$+ 的波氏杆菌对小鼠有致死毒 力，另外一部分波氏杆菌和其他细菌都对小鼠无致 病能力，这说明波氏杆菌是兔鼻炎的主要致病性因 素，其他细菌在兔鼻炎中的致病机制尚有待进一步 研究。 相菌通 &2 # 由于波氏杆菌很容易发生菌相变异，! 常是有致病力的光滑型菌落， 可以变成无致病力的粗 糙型 " 相菌，在两者之间有过渡型的 # 相菌和 $ 相 菌。! 相菌除了含有波氏杆菌属共有的 3 抗原外，还 有一种特异的 4 抗原， 而"相菌没有 4 抗原。因此 4 抗原是波氏杆菌毒力的组成部分。 在机体抵抗力下降 的条件下， 寄生于呼吸道的无致病性的波氏杆菌也可 以通过菌相变异增强毒力， 导致兔群发病。
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,$3 $ 不喂药
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小结与讨论
,( & 据报道，球虫卵囊的孢子形成过程需要一定 氧气充足的 的温度、 氧气和湿度。 温度为 #+- 左右，
兔支气管败血波氏杆菌的分离培养及初步鉴定
胡北侠 任素芳 吴加强 颜世敢 崔锦鹏 % 山东省农科院畜牧兽医研究所， 山东济南 #!$&$$ ’ 波氏杆菌通常寄居于多种哺乳动物的上呼吸 道， 常引起鼻炎和支气管肺炎， 它在兔群中感染率非 常高，所导致的家兔鼻炎的发病率也非常高。特别 是在规模化养兔场， 波氏杆菌与巴氏杆菌、 葡萄球菌
)， !〕 亡〔 。但本试验从投药后的情况可以看出： 在每次
投药量 % ./ ’ $3 !
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投 服 2( $ 1 #$( $./ % 约 合 每 千 克 体 重 $( ! 1 &3 ,0 ’ 后， 其卵囊出现减少， 而投服 ,$( $./ % 约合每千克体 重 &( +0 ’ 后， 粪便中的卵囊减少的最多， 但同时兔也 出现死亡， 说明 &$4 浓度的葫芦茶浸膏剂对兔球虫 的有效剂量是 &( ) 1 &( * 千克体重用 23 $ 1 #$3 $./ % 即每千克体重 $( ! 1 &3 ,0 ’ ，同时也说明兔对葫芦 茶浸膏剂有一定的敏感性， 使用时应予注意。 至于是 何原因， 有待进一步研究。 )
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参考文献
杨 正 ( 现代养兔学 ( 北京：中国农业出版社， &+++ ， ,*+ 1 ,5$ 全国中草药汇编编写组 ( 全国中草药汇编 ( 北京：人民 卫生出版社， &+5! ， 2!* 1 2!5 左仰贤 ( 球虫学 ( 天津：天津科学技术出版社， &++& ， #+ 1 ,$ 李树荣， 李琦华， 吴艳梅等 ( 葫芦茶粉剂对山羊体内寄生 虫虫卵的效果观察 ( 中兽医医药杂志， #$$# ， #& % & ’ ： &$ 1 &# 李树荣， 李琦华， 杨柱昌等 ( 葫芦茶及浸膏剂对小白鼠毒 性的影响 ( 中兽医学杂志， #$$# ， &： ) 1 !$ % 收稿日期： #$$# 6 $* 6 #) ’