地中海贫血基因检测案例

地中海贫血基因检测案例
——从罕见地贫基因到双线检测
钦州市妇幼保健院
基因科学与遗传医学诊断中心
汇报人：龚菲菲组员：龙驹、龚菲菲、施狄秋、张城鸿
引言
地中海贫血是一种单基因遗传疾病，广西人群中地贫基因携带率约为25%。

目前常规地贫基因分析试剂盒所检测的范围是4种α缺失基因、3种非缺失型α地贫和17种非缺失型β地贫。

研究表明，人群中有一定的地贫基因携带者，其携带的基因型不在常规地贫基因检测试剂盒检测范围内。

本案例将阐述一例由罕见地贫基因的检出而改进地贫基因检测分析流程，进而降低地贫基因检测漏诊风险的事例。

2015年6月，一对夫妇来我院进行地中海贫血基因检测。

在检查过程中，我们发现了一些问题。

先证者（来自A家系）是一个28岁的男性个体，其妻子在孕期4个月时检出为--SEA携带者。

其丈夫血液学数据如表所示。

结果显示MCH稍低，于是采用MLPA进行检测以排除罕见型。

AⅡ-1 性别-年龄M-28
MCV(fL) 82.3
MCH(pg) 26.5
Hb(g/dL) 16.1
HbF (%) 0.8
HbA2 (%) 2.4 Hb Bart’s+Hb H
(%)
0 Ferritin (μg/L)306.8 α 常规基因型αα/ααβ基因型βA/βA
一例罕见地贫家系的检出
该先证者的临床表型
MLPA结果图
MLPA结果显示其缺失的断裂点位于337和142探针，以及283和310探针之间。

同时采集了他们家系进行分析。

此时，也发现一例患儿疑似携带该变异，合并研究。

结果显示，该家系疑似携带2.4KB缺失型基因
电泳和测序验证-α2.4等位基因的确诊。

（A）家系A和一例HbH
病患者的琼脂糖电泳图
（wt表示野生型）。

3个
个体检出300bp的PCR产
物。

（B）测序结果以及-α2.4等
位基因的示意图。

家系图
先证者
携带该罕见地贫基因的家族系图：先证者为基因型为-α2.4/αα。

由该罕见地贫基因的检出引发的思考 该罕见地贫基因的检出，揭示了人群中含有一定量的罕见地贫基因，如果其漏检，会为产前诊断工作带来风险；
我们常规的质量管理还不足以更好保证医疗安全，为了防止潜在的不足与其他不良情况的发生，有必要采取改进的措施。

制定PDCA计划
为了进行持续改进措施，将质量管理改进分为四步：
（一）计划：发现质量管理过程中存在的问题，并制定方针和目标，以及改进计划
（二）执行：设计具体的方法、方案和计划布局。

定期执行计划，持续改进
（三）检查：总结执行计划的结果，明确效果，找出问题。

（四）改进：对总结检查的结果进行处理，对成功的经验加以肯定，并予以标准化
计划（P）
计划加强实验检测质量与完善管理体系。

1.地中海贫血基因检测的质量控制仍需加强，计划对罕见型地贫予以二线加测，进一步保障就诊者医疗安全。

2.完善质量管理体系。

质量管理体系贯彻不到位，体系执行不力，应对质量手册进行更新修订，加强执行力度，持续提高服务质量，提高技术水平。

3.持续执行一段时间后进行效果评价，总结执行结果。

4.核查效果情况，汲取好的经验，重视失败的教训，对于没有解决的问题，应提交给下一个PDCA循环中继续解决。

执行（D）
对检测项目方法的改进。

检测地中海贫血基因，我们
在常规试验的基础上，增加
了对部分罕见型的检测，对
检测出的阳性患者，联系他
们携带家属前来做免费的家
系检测，以查出基因来源，
防患于未然。

制定了“地中
海贫血基因检测第二线操作”
规范。

检测二线操作流程
实验操作流程
在常规地贫基因检
测试剂盒检测的同
时，使用自研实时
荧光检测体系对地
贫基因进行进一步
检测。

在复核检测
结果的同时，筛出
部分罕见地贫基因。

实时荧光结果示例
紫色通道=扩增成功，橙色=A1对照，绿色= -α2.4阳性，蓝色= -α21.9阳性
完善质量管理体系，对质量手册进行编写修正，力求手册适用于本科室，符合科室实情，具有实际指导意义。

增加检测罕见
型操作规范
经讨论后增加内容
检查（C）
持续改进计划进行过程中，扩大了检测范围，并对质量手册进行了完善。

1.从2018年至今，我们检测出多名携带罕见型地贫的患者，
为患者带来了更全面的医疗保健服务。

2.修订后的质量手册符合科室实情，更适用于科室发展。

符合“一法两纲”的要求，对科室运行能够起到控制作用，员工质量意识普遍增强，能够主动运动文件，并按文件实施，得到了较好的改进效果。

检查（C）
也遇到了患者不理解，管理体系贯彻不够到位的问题：1.对于检测出罕见型地贫但表型正常的患者，联系对方携带家属
前来家系检测时，患者常不予以重视，不肯通知家属前来，或者报以不信任的态度拒绝继续检测。

2.实验仪器较多，部分实验仪器购买时间长，重新加以管理有一
定难度。

3.质量手册内容还不够完善，除了修订不正之处，还要补充不足，
比如：试剂与校准品的相关管理制度。

4.部分员工对于体系文件理解不到位，导致执行力不够。

改进（A）
我们对持续改进过程中遇到的问题与效果进行了改进和评价。

1.质量手册的修整，为日常质量控制带来了便利，对于可能出现的问题采取了
预防措施，减少了医疗事故的发生率，为患者带来了更贴心、科学、专业、快
捷的优质服务。

2.加增地贫基因的罕见性检测，对提高人口出生素质，提高妇女儿童健康水平，推进妇幼保健事业发展有着重大意义。

3.加强了与临床和兄弟医院的沟通联系，使得检测过程更加流畅严谨。

4.就患者对于罕见型地贫家系检查的不理解，我们采取了多次跟进、耐心沟通、联系就诊医生与其协调的办法，慢慢减少了患者拒绝进一步检查的情况。

5.加强员工对质量手册的理解，每月定期培训，力求加强员工执行力度，不应
付检查，让质量管理方针得到实际落实，真正使质量管理体系得到贯彻。

6.设立设备管理员，明确岗位职责，一步步对缺失的设备管理进行修复备案，
相关实验人员予以配合。

7.对于未能发现的问题，要持续进行改进计划，争取做到更好！
成效
检测流程的持续改进，避
免了部分罕见地贫基因的
漏诊，为辖区地贫防控工
作提供了保障。

持续的改进，培养了团队
的能力，涌现出一批地贫
防治的优秀人才。

团队的成长，产出了一定
数量的优秀成果，发明了
一定数量的具有自主知识
产权的检测体系，推进了
辖区地贫防控工作。

结语
目前大部分医疗机构的质量管理总体还处于较低水平，仍停留在初步控制阶段，未能做到全面管理。

制定的质量手册内容生涩，也得不到实际运用。

因此，我们不仅要应对日益激烈的医疗压力，也要与时俱进、准确及时更新质量管理体系，承担起人类保健工作，承担起计划生育技术服务的职责，减少出生缺陷，提高出生人口素质。

未来，我们要强化自身优势，摒弃缺陷不足，只有管理质量和服务质量的持续改进与提高，才是我科室永恒的发展目标！。