单克隆抗体纯化工艺流程

单克隆抗体纯化工艺流程
单克隆抗体纯化工艺流程是一个复杂且精细的过程，主要涉及到细胞发酵培养后的处理以及后续的纯化步骤。

以下是对这一工艺流程的详细解释。

首先，在细胞发酵培养结束后，会采用深层过滤或连续流离心深层过滤的方法来去除发酵液中的细胞及细胞碎片。

这一步是至关重要的，因为它能有效地去除杂质，为后续纯化步骤提供高质量的上清液。

接着，上清液会进入纯化工艺。

整个纯化工艺主要包括ProteinA亲和色谱、低PH病毒灭活、阴/阳离子交换色谱（或复合模式色谱）、除病毒过滤、超滤浓缩换液以及除菌过滤等步骤。

在ProteinA亲和色谱步骤中，利用抗体结构中的Fc区域能特异性结合色谱填料偶联配基ProteinA蛋白的特性，进行色谱分离。

大部分杂蛋白等杂质因无法与色谱填料结合而流穿，而抗体则与ProteinA蛋白结合，随后以低PH溶液洗脱柱子，收集粗纯后的抗体，达到初步纯化的效果。

随后，阴离子交换色谱利用等电点的差异进行分离。

病毒、HCP、DNA等杂质因PI相对较低，呈酸性，在较高PH条件下与填料结合，而抗体PI一般相对较高，呈碱性，直接流穿，从而达到进一步分离去除杂质的效果。

除病毒过滤则采用特定规格的滤膜，如20nm左右的滤膜，进行纳滤，截留病毒颗粒，而蛋白则顺利流穿，从而实现病毒的去除。

最后，经过超滤浓缩换液和除菌过滤步骤，即可获得高质量的抗体原液。

这些步骤确保了抗体的纯度、活性和安全性，为后续的应用提供了保障。

整个单克隆抗体纯化工艺流程虽然复杂，但每一步都至关重要，不可或缺。

它充分展示了现代生物技术的精细和高效，为抗体药物的研发和生产提供了坚实的基础。