葡萄糖杂质检查及葡萄糖注射液分析实验报告 2014

实验报告葡萄糖的杂志检验名字：学号：1145039 2014年3月28日
检品名称：葡萄糖批号：规格：__
一、目的要求
1. 掌握药物的一般杂质检查原理与实验方法。

2. 掌握杂质限度试验的概念及计算方法。

3. 熟悉一般杂质检查项目与意义。

二、主要仪器与药品
50mL纳氏比色管、坩埚、鼓风干燥箱、马弗炉、药物天平、葡萄糖、氯化钠原料药等。

三、原理：
葡萄糖是用淀粉以无机酸水解或在酶催化下经过水解得稀葡萄糖液，再经脱色、浓结晶制得。

1．国内生产方法有以下几种：
⑴酸水解法：以无机酸将淀粉水解为葡萄糖。

⑵双酶水解法：以生物酶为催化剂将淀粉水解为葡萄糖。

⑶酸酶水解法：以盐酸为液化剂，糖化酶为催化剂，将淀粉水解为葡萄糖。

根据葡萄糖生产工艺特点，应进行氯化物、重金属、砷盐等一般杂质检查，进行蛋白质、可溶性淀粉等特殊杂质检查。

四、实验方法
1.酸度取本品
2.0g，加水20mL溶解后，加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）0.20mL，应显粉红色。

2. 氯化物取本品0.6g，加水溶解使成25mL，再加稀硝酸10mL；溶液如不澄清，应滤过；置50mL纳氏比色管中，加水使成约40mL，摇匀，即得供试溶液。

另取标准氯化钠溶液6.0mL，置50mL纳氏比色管中，加稀硝酸10mL，加水使成40mL，摇匀，即得对照溶液。

于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0mL，用水稀释，使成50mL，摇匀，在暗处放置5分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较（附录A）。

供试溶液所显浑浊度不得较对照液更浓（0.01%）。

3. 硫酸盐取本品2.0g，加水溶解使成约40mL；溶液如不澄清，应滤过；置50mL纳氏比色管中，加稀盐酸2mL，摇匀，即得供试溶液。

另取标准硫酸钾溶液2.0mL，置50mL纳氏比色管中，加水使成约40mL，加稀盐酸2mL，摇匀，即得对照溶液。

于供试溶液与对照溶液中，分别加入25%氯化钡溶液5mL，用水稀释至50mL，充分摇匀，放置10分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较（附录B）。

供试溶液所显浑浊度不得较对照液更浓（0.01%）。

4. 亚硫酸盐与可溶性淀粉取本品1.0g，加水10mL溶解后，加碘试液1滴，应即显黄色。

5. 干燥失重取本品，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过9.5%（附录C）。

6. 炽灼残渣不得过0.1%（附录D）。

7. 蛋白质取本品1.0g，加水10mL溶解后，加磺基水杨酸溶液（1→5）3mL，不得发生沉淀。

8. 铁盐取本品2.0g，加水20mL溶解后，加硝酸3滴，缓缓煮沸5分钟，放冷，加水稀释使成45mL，加硫氰酸铵溶液（30→100）3mL，摇匀，如显色，与标准铁溶液2.0mL用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.001%）。

9. 重金属取25mL纳氏比色管两支，甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL后，加水稀释成25mL。

取本品4.0g，置乙管中，加水适量溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL，加水使成25mL；若供试液带颜色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之与乙管颜色一致。

再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2mL，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深（附录
E），含重金属不得过百万分之五。

五、实验结果
1．酸度
原理：检品中酸性杂质被碱中和，过量的碱使酚酞显粉红色。

实验现象：显粉红色。

见图一。

结论：符合规定。

2. 氯化物检查
原理：Cl－＋Ag＋HNO3 AgCl↓（白色）
实验现象：样品管浑浊度浅于标准管。

见图二。

结论：符合规定（﹤0.01%）。

3.硫酸盐
原理：SO4 2- 十Ba2+ —→ BaS04↓
实验现象：样品管浑浊度浅于标准管。

见图三。

结论：符合规定（﹤0.01%）。

4.亚硫酸盐与可溶性淀粉
原理：黄色为碘试液本身的颜色，证明无亚硫酸盐与可溶性淀粉存在。

当有亚硫酸盐与可溶性淀粉存在时，淀粉遇碘遍蓝色，亚硫酸盐与碘发生氧化还原反应生成碘离子，变为无色。

实验现象:溶液显黄色。

见图四。

结论：符合规定。

5.干燥失重
原理：干燥失重是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量，根据所减失的重量和取样量计算供试品干燥失重的百分率。

实验现象：干燥失重8.0%
结论：符合规定（﹤9.5%）。

6. 炽灼残渣
实验现象：m0=20.0014g m1=22.7435g m2=22.7410g
残渣重=(m1-m2)/(m1-m0)*100% =0.09%
结论：符合规定（﹤0.1%）
7. 蛋白质
实验现象：没有发生沉淀。

见图五。

结论：符合规定。

8.铁盐
原理：Fe3++6SCN-—→ [Fe(SCN)6]3- 红色
实验现象：样品管颜色浅于标准管。

见图六。

结论：符合规定。

9.重金属
原理：硫代乙酰胺在弱酸性(pH约3.5)溶液中水解，产生硫化氢，可与重金属离子结合生成有色硫化物的均匀沉淀，可与对照标准液同法处理比较。

实验现象：样品管颜色浅于标准管。

见图七。

结论：符合规定。

六、结果分析
图一葡萄糖酸度图二葡萄糖氯化物
注：葡萄糖中酸性杂质被碱中和，注：左为供试管，右为标准管碱使酚酞显粉红色左管浊度浅于右管
图三葡萄糖硫酸盐图四亚硫酸盐与可溶性淀粉注：左管为标准管，右管为供试管注：溶液显黄色左管浊度深于右管
图五葡萄糖蛋白质实验图六葡萄糖铁盐实验
注：葡糖糖水溶液与磺基水杨酸注：上管为标准管，下管为供试管溶液不产生沉淀上管溶液颜色深于下管
图七葡萄糖重金属实验
注：左管为标准管，右管为供试管
左管颜色深于右管
七、讨论
1.观察实验结果时，比色方法一般是将两管同置于白色背景上，从侧面观察；比浊方法是将两管同置于黑色或白色背景上，自上而下地观察。

2.精密称定，选用的是精确度为千分之一的称量天平。

3.铁盐试验中，由于缓缓煮沸叫麻烦，可在温度80。

C水中水浴约五分钟，实验结果也十分明显。

4.酸度实验中，氢氧化钠溶液可添加至0.4mL，若还不显粉色，可再滴加氢氧化钠溶液。

实验报告葡萄糖注射液分析名字：开德美学号：1145039 2014年3月28日
检品名称：葡萄糖注射液批号：规格：
一、目的要求
1. 掌握pH值测定原理和pH计的正确操作。

2. 掌握比旋度的概念、求算方法和旋光法测定旋光性物质含量的原理与计算。

3. 熟悉紫外法检查杂质的原理与方法。

4. 了解注射液杂质检查的一般项目。

二、主要仪器与药品
WZZ-1自动指示旋光仪、pH酸度计、PH试纸、纳氏比色管、紫外分光光度仪、10%葡萄糖注射液。

三、原理
本品为无水葡萄糖的灭菌水溶液。

含葡萄糖（C6H12O6·H2O）应为标示量的
95.0%~105.0%。

[鉴别]取本品，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀。

原理：
5-羟甲基糠醛
原理：葡萄糖注射液在高温加热灭菌时，易分解产生5-羟甲基糠醛：
利用5-羟甲基糠醛在284nm的波长处有吸收，而葡萄糖无吸收，将样品配制成一定浓度的溶液，在284nm的波长处测定，规定吸收度不得大于0.32来控制5-羟甲基糠醛的量。

[含量测定]
旋光法（原理：葡萄糖分子中含不对称碳原子，具有旋光性，在一定条件下，其水溶液的比旋度[α]t D为＋52.5°～＋53.0°，根据旋光度α与浓度C的比例关系可进行含量测定：
式中L为液层厚度（dm），C为溶液的百分浓度（g/mL，按干燥品或无水物计算）。

所以：
四、实验方法
1.鉴别取本品，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀。

[检查] pH值应为3.2~5.5。

2.精密量取本品适量（约相当于葡萄糖1.0g），置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，在284nm的波长处测定，吸收度不得大于0.32。

3.重金属取本品30ml（约相当于葡萄糖3g），必要时，蒸发至约20mL，放冷，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL与水适量使成25mL，置25mL纳氏比色管中。

另取标准铅溶液1ml与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL后，加水稀释成25mL，置另一25mL纳氏比色管中。

若供试液带颜色，可在标准管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之与样品管颜色一致；再在两管中分别加硫代乙酰胺试液各2mL，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，样品管所显颜色与标准管比较，不得更深）。

按葡萄糖含量计算，含重金属不得过百万分之五。

4.含量测定精密量取本品100ml（约相当于葡萄糖10g），置100mL量瓶中，加氨试液0.2mL （10%或10%以下规格的本品可直接取样测定），用水稀释至刻度，摇匀，静置10分钟，测定旋光度。

用读数至0.01°并经过检定的旋光计，将测定管（长度为1dm）用供试液体冲洗数次，缓缓注入供试液体适量（注意勿使发生气泡），置于旋光计内检测读数，记录旋光度，同法读取旋光度3次，取3次的平均值作为样品的旋光度。

与2.0852相乘，即得100mL供试液中含有C6H12O6·H2O的重量（g）。

测定前用水校正零点，测定后再用水核对零点，若零点变动，应重测。

五、实验结果
1. 鉴别
原理：
实验现象：生成红色沉淀。

见图一。

结论：符合规定。

2.检查
实验现象：pH为
结论：符合规定。

（3.2~5.5）
3.吸光度
实验现象：吸光度为0.142
结论：符合规定（<0.32）
4.重金属
实验现象：样品管颜色浅于标准管。

见图二。

结论：符合规定。

4.含量测定
实验现象：旋光度为5.35，100mL供试液中含有C6H12O6·H2O的重量（g）为11.16g。

结论：符合规定。

六、结果分析
图一鉴别实验图二葡萄糖注射液重金属实验注：葡萄糖注射液与碱性酒石酸铜溶液反应注：左为样品管，右为标准管，成红色，pH约为4.8。

左管颜色浅于右管。

七、讨论
1．pH值测定时，每次更换标准缓冲液或供试液前，应用纯化水充分洗涤电极，然后将水吸尽，也可用所换的标准缓冲液或供试液洗涤。

配制标准缓冲液与溶解供试品的水，应是新沸过的冷蒸馏水，其pH值应为5.5~7.0。

2．旋光仪接通电源后需预热5～20分钟。

每次测定前后应用溶剂作空白校正。

配制溶液及测定时，均应调节温度至20℃±0.5℃（除另有规定外）。

供试溶液应澄清，如显浑浊或含有混悬的小粒，应预先滤过，并弃去初滤液。

旋光管装样时应注意光路中不应有气泡，使用后应立即用水洗净晾干，切勿用刷子刷，也不能用高温烘烤。

3、用旋光度法测定葡萄糖的含量时，要加氨试液，是加速变旋作用，促进达到平衡，否则测得的旋光度数据不准。