神经生长因子几丁质管修复兔面神经缺损.pdf

·论著·神经生长因子几丁质管修复兔面神经缺损
南京军区南京总医院口腔科（!"###!）张森林孟昭业董震杨震寿柏泉
目的：评价神经生长因子（$%&’%(&)*+,-./+)&，012）几丁质管在修复兔面神经缺损中的作用。

方法：在"3
只新西兰兔的两侧面神经上颊支上分别造成455缺损，左侧用管腔内注入012的几丁质管修复，右侧用自
体神经移植修复作对照。

术后4周和"3周分别取4只动物进行电生理和组织学检查及计算机图像分析。

结
果：术后4周，实验组的再生神经已通过近远中吻合口，神经纤维密集成束；术后"3周，再生神经纤维的数量
增加，神经纤维束增粗，形态接近于正常神经。

电生理检测和图像分析显示实验组和对照组的神经传导速度
和有髓神经轴突总截面积均无显著差异（!!#6#7）。

结论：012几丁质管可为免面神经缺损提供良好的修复
环境。

关键词面神经几丁质神经生长因子神经再生
分类号89::!
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对于肿瘤或外伤造成的颅外段面神经缺损，临床上常采用自体的耳大神经或腓肠神经等移植修复［"］。

此法存在着增加手术创伤和出现供区并发症等缺陷，因而近年来人们积极研究应用生物材料制作的神经导管修复面神经缺损。

制作导管的生物材料通常分为可吸收性和非可吸收性两类。

非可吸收性材料如硅胶等术后长期存留体内可造成神经受压而需再次手术取出［!］，难以在临床推广应用。

本研究用可吸收的几丁质管复合神经生长因子（$%&’% (&)*+,-./+)&，012）桥接兔面神经缺损，以自体神经移植作对照，评价其修复功能。

"材料与方法
"6"几丁质管制备
将粉末状的几丁质（中国科学院上海昆虫研究所提供）溶解于二甲基乙酰胺和氯化锂的混合溶液中，制成O P的几丁质胶状物。

将其注入特制的模具中，再放入水中固定成形，脱出模具后在蒸馏水中漂洗O4,以除去溶剂；将其凉干后再复水制成内径"6755、管壁厚#6755、长"!55的几丁质管，浸泡于Q7P的酒精中。

使用前在生理盐水中漂洗:#5A$。

第":卷第:期!##:年!月
中国现代医学杂志
K,A$.R)G&$.>)-S)J%&$S%J A/A$%
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"
""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""
2%H6!##:
!"#实验动物及手术方法
选健康新西兰兔（南京军区医学动物实验中心提供）!$只，雌雄不限，重#"$!%"&’(。

用%)戊巴比妥钠（%&*(／’(）经耳缘静脉麻醉。

在左颊部常规脱毛、消毒、铺巾，作横切口暴露左侧面神经上颊支，切除长+**神经，任其回缩，造成,**的神经缺损。

在手术放大镜下，用几丁质管桥接此神经缺损，即将两神经断端各嵌入管内#**，用-.&丝线将两端神经外膜与几丁质管壁各缝合固定#!+针；然后用微量加样器向管腔内注入!&"!/01（南京军区医学研究所提供），内含/01!&"(。

同样方法暴露右侧面神经上颊支，切取,**神经后再放回原位，用-.&丝线在两端行神经外膜缝合固定+!$针。

%.&丝线分层缝合伤口。

!"%观察指标
!"%"!大体观察分别于术后,周和!$周麻醉动物，每次,只，通过原切口显露左右两侧的面神经上颊支，观察神经修复和几丁质吸收情况。

!"%"#电生理检测行大体观察后，用美国产/23456782’29(#型诱发电位仪测定动物两侧的面神经上颊支缺损修复区近远中端之间的神经传导速度。

!"%"%组织学观察在电生理检测后，处死动物，手术显微镜下切取两侧面神经上颊支的缺损修复区及其近远中各#**的神经组织，每个标本约长!#**；标本平分为%等份，用中性福尔马林液固定，近中段和远中段作纵切片，中间段作横切片，:;染色，光镜下观察。

!"%"+图像分析用<=>972*67?@&A型彩色图像分析仪对横切片中的有髓神经轴突总截面积进行测定分析。

!"+统计学分析
用B C D医用统计软件包对所得数据进行!检验。

#结果
#"!大体观察
几丁质管组术后,周，几丁质管由原来的半透明变为淡黄色，质地较脆，与周围组织无粘连；仔细剥去管壁，见近端神经已与远端神经相连，中间段较细，用镊子轻拉神经近端，可使整个神经在张力下移动，无断裂。

术后!$周，几丁质管大部分被吸收，仅有管壁碎屑包绕在再生神经周围；再生神经逐渐增粗，但仍稍细于其近端神经。

自体神经组术后,周，移植的神经生长良好，与近远中断端连接处可耐受一定的牵张力而不断裂。

术后!$周，移植的神经逐渐增粗。

#"#电生理检测
几丁质管组和自体神经组在术后,周和!$周的神经传导速度均无显著差异（表!）。

表!再生神经的神经传导速度（*／E，"F#）
时间例数几丁质管组自体神经组7$
,周,#$"%#F?"#+##"!@F?"$,!"?#!&"&? !$周,%%"?,F@"$?#-"-!F,"?@&"-$!&"&?
#"%组织学观察
几丁质管组：术后,周，再生神经位于几丁质管中央，已通过近远中吻合口，雪旺细胞呈增生状态，神经纤维稍紊乱，但已形成束状结构，沿材料界面有大量巨噬细胞（图!）；!$周，再生神经纤维的数量增加，神经纤维束增粗，形态接近于正常神经，其周边部有少量巨噬细胞（图#）。

自体神经组：术后,周，原来的神经束结构中可见大量的神经变性，束与束之间被大量的纤维组织分隔，在纤维组织和原来的神经束结构中可见新生的神经轴突并密集成束（图%）；!$周，再生的神经纤维束增粗，形态接近正常神经。

图!实验组术后,周，再生的神经纤维紊乱，但已形成束状结构，雪旺细胞呈增生状态（:;G+&）
图#实验组术后!$周，再生的神经轴突排列规则，纤维束增粗，形态接近于正常神经（:;G!&&）
第%期张森林，等：神经生长因子几丁质管修复兔面神经缺损
图!对照组术后"周，原来的神经束有大量的神经的神经变性，束与束之间大量的纤维组织分隔，新生的神经
轴突分散在纤维组织和原来的神经束结构中（#$%
&’）
()&图像分析
几丁质管组和自体神经组在术后"周和*+周的有髓神经轴突总截面积均无显著差异（表(）。

表(再生神经中有髓神经轴突总面积（,／-，!."）
时间例数几丁质管组自体神经组/# "周"!)(01.’)1(+()2&!.’)+"!*)*’!’)’1 *+周"&)+&(.’)0(*&)*&0.’)1!0*)+0!’)’1
!讨论
目前被用于制作神经导管的可吸收材料有聚乳酸、聚羟乙酸［&］和几丁质［1］等，这些可吸收神经导管植入体内后随着神经再生的完成而逐渐降解吸收。

几丁质是一种天然的多糖类纤维素，即甲壳素，具有良好的组织相容性和生物降解性［+］，已被用于制作可吸收缝线、人造血管和骨缺损修复材料等。

苟三怀［1］等用几丁质管桥接大鼠的坐骨神经，缺损得到修复，功能恢复满意。

但是用单纯的几丁质管，缺损区神经再生的速度较慢。

本研究在几丁质管内注入345，用其修复兔面神经缺损，取得了良好的效果。

345是目前发现的唯一对正常神经细胞有营养作用，对损伤的神经再生修复机能有调节作用的生物活性因子。

研究表明［0］：用管腔内注入345的硅胶管修复兔面神经缺损，其效果明显优于不含345的硅胶管修复组。

345可经损伤的运动神经元轴突逆行运输至胞体，防止因轴突反应所致的胞体尼氏体溶解乃至坏死；另外，在345逆行运输至胞体后，可通过第二信使系统产生多种信息分子，对神经元的基因表达、代谢及功能进行调控，通过增强其生化代谢，包括氨基酸和小分子物质摄取、葡萄糖利用加强，导致结构蛋白和功能蛋白合成增多，前者为轴突再生提供原料，后者则有助于再生神经的功能恢复［"］。

本研究用含345的几丁质管桥接",,兔面神经缺损，术后"周，再生神经已通过近远中吻合口，神经纤维己密集成束；术后*+周，再生神经纤维的数量增加，神经纤维束增粗，形态接近于正常神经。

电生理和组织学研究均显示其修复效果与自体神经移植相近。

在此研究中，几丁质管作为人工室桥接神经缺损能有效地阻止瘢痕组织的侵入，引导轴突再生，同时为施加外源性345提供了有益的空间并长时间地维持其有效浓度。

6789:;;<和张朝跃等［2，*’］认为，理想的神经导管应具备：良好的组织相容性和生物降解性，能与周围组织融为一体并支持神经再生和成熟；足够的长度和直径；导管全长有神经再生所需的物质；可防止瘢痕的侵入。

本研究所用的几丁质管基本符合这些条件，是用来替代自体神经修复面神经或其它外周神经缺损的理想材料。

参考文献
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(’’*；**（1）：*!
（(’’(S’!S((收稿彭解英审稿李沐纯编辑）
中国现代医学杂志第*!
卷。