淋巴细胞亚群的临床及科研应用

NK细胞(CD3-CD16+和/或CD56+)能够介导 对某些肿瘤细胞和病毒感染细胞的细胞毒性 作用。
下表为常见疾病的T 淋巴细胞的变化：
疾病
T 细胞亚群 CD4+/CD8+
类风关
CD4+ （活动期）
CD8+
SLE
- 或 （活动期）

Sjogren综合症


多发性硬化症

重症肌无力


膜型肾小球肾炎


胰岛素依赖性糖尿病


乙型肝炎

自身溶血性贫血


上呼吸道感染



传染性单核细胞增多症
（急性期）
巨细胞病毒感染



乙肝
（急性期/慢性肝炎）

结核
（胸水/重症外周血）
麻风



疟疾

血吸虫病

43;
Reversed CD4/CD8 Ratios of Tumor-Infiltrating Lymphocytes Are Correlated with the Progression of Human Cervical Carcinoma Received February 11, 1999; revision received May 21, 1999; accepted May 21, 1999. © 1999 American Cancer Society
CD4/CD8比值与肿瘤
恶性肿瘤患者术前CD4/CD8比值低与术后比 值恢复正常。
当发生癌转移时,CD3 、CD4 细胞数明显减 少的同时CD8 细胞数明显增多,CD4/ CD8 比 值明显降低,提示恶性肿瘤患者晚期细胞免疫 功能更低,预后更差。
肿瘤终未期患者CD4/CD8比值异常，可预测 患者存活期
2）绝对计数（TruCount） 3）活化淋巴细胞的检测 （CD69/HLADR/CD71） 4）CD4+ Th/i 和CD8+Ts/c的进一步区分 5）Naive/Memory T 细胞亚群的检测6） Th1/Th2亚群的检测
总T和总B可以用来判断某些免疫缺陷和自身免疫性 疾病。
CD4+和CD8+T细胞有助于监测患有免疫缺陷疾病 （如SCID、AIDS的病人体内CD4+细胞亚群的百分 率相对降低，而CD8+群体的百分率相对升高）， 自身免疫性疾病（如在SLE病人中，CD8+淋巴细胞 的相对百分比往往会降低，但当使用类固醇药物治 疗时，也可能上升。在急性GVHD和移植排斥中， CD8+淋巴细胞所占的比例有可能在正常人的范围 之外）
绝对数与百分比之间的关系
CD3+T细胞正常范围为：50-84% CD19+B细胞正常范围为：5-18% 如果CD3细胞数量增加，而B细胞数量不变时：
CD19+B细胞
CD19+B细胞含量降低
总淋巴细胞+增加CD3细胞 实际上此时B细胞的绝对数量可能仍在正常范围之内。
与血细胞计数仪联用，得出各淋巴细胞百分比后乘 以淋巴细胞数量，得出各淋巴细胞的绝对浓度。
Prognostic value of the CD4+/CD8+ ratio of tumour infiltrating lymphocytes in colorectal cancer and HLA-DR expression on tumour cells. Diederichsen AC, Hjelmborg JB, Christensen PB, Zeuthen J, Fenger C. Biomedical Laboratory, University of Southern Denmark, Winslowparken 23, 5000 Odense C, Denmark. a.diederichsen@dadlnet.dk
1.IVD和RUO试剂的区分
IVD试剂为体外临床诊断用试剂 （in vitro diagnosis），通过美国FDA，生产工 艺完全GMP标准，质量可以得到保证，可 用于临床诊断用。
淋巴细胞亚群与临床
一、淋巴细胞亚群的临床检测
1.淋巴细胞亚群的检测内容与临床意义 通过淋巴细胞亚群的检测可了解在
不同情况下体内免疫功能状态，辅助临 床疾病的诊断，探索疾病的发病机理、 病程、预后，监测、指导临床治疗方案。
目前主要可以做以下项目的检测：
1）T/B/NK/CD4/CD8/ CD4CD8
项目
正常参考值:
BD SimulTEST IMK-
Total B lymphocyte (CD19+)
Lymphocyte Kit (反向 NK cell (CD3-/CD16+56+)
设门法双色淋巴细胞表
型分析)
Total T lymphocyte (CD3+)
健康中国人参考范围（使T helper/inducer cell 用SimunlSET自动软件）(CD3+/CD4+)
CD4+/CD8+的比值：评价那些自身免疫失调 或被怀疑是免疫失调或已知患有免疫缺陷的 病人的免疫状态，此外，这一比值还可用来 监测骨髓移植病人以免受到急性GVHD的攻 击
CD4/CD8 升高：自身免疫性疾病，如类 风湿性关节炎、SLE。
CD4/CD8 降低：病毒感染、恶性肿瘤、 再生障碍性贫血等。
B细胞特异性标志物：CD19
NK自然杀伤细胞：识别病毒感染细胞表面表 达的相应配体，NK细胞一经识别病毒感染细 胞后即对之施加杀伤作用。
NK细胞表面标志物：CD3-/CD16+CD56+
目录： 一．淋巴细胞亚群的临床检测和科研
淋巴细胞亚群的检测内容与临床意义 淋巴细胞亚群的检测结果与正常参考值 二．淋巴细胞亚群的检测试剂的选择 1）IVD和RUO试剂的区分 2）BD试剂的优势 3）BD所提供的所有检测内容的相应试剂 三．淋巴细胞亚群检测的质量保证 重要性 从试剂/软件上保证 定期室内质控
lymph node FNAs with increased CD4/CD8 ratio Osvaldo Hernandez, Thaira Oweity and Sherif Ibrahim* Address: New York University Medical Center, Department of Pathology, New York, New York, USA Email: Osvaldo Hernandez - hernao01@; Thaira Oweity - thiara.oweity@; Sherif Ibrahim* - ibrahs01@ * Corresponding author
淋巴细胞亚群的临床及科研应用
BD FACScalibur
流式细胞仪原理介绍
淋巴细胞亚群基础知识
T淋巴细胞：主要杀伤病原体感染细胞及肿瘤 细胞。
表面标志物：CD3，与TCR形成复合体，是T 细胞识别抗原和转导信号的主要单位。
CD3+/CD4+：辅助性T细胞 CD3+/CD8+：杀伤性T细胞
辅助型T细胞可分泌不同的细胞因子，具有辅助其 他免疫细胞分化和调节免疫应答的（促进和抑制） 作用。
TH0：可向TH1/TH2分化。
TH1：细胞偏向于分泌IL-2和IFN-r，与TDTH(迟发超 敏反应型T细胞)和Tc（细胞毒性T细胞）的分化发 育有关。
TH2：可分泌IL-4和IL-10等，与B细胞增殖、成熟 和促进抗体有关，可增强体液免疫。
健康中国人参考范围 （使用MultiSET自动软 件）
项目
百分含量（% T淋 巴细胞）
Total T lymphocyte (CD3+)
绝对含量 （cells/ L）
770-2041
T helper/inducer cell (CD3+/CD4+/ CD8-)
T supressor/cyto toxic cell (CD3+/CD4/CD8+)
CD8+
CD4+/CD8+
肿瘤



再障及粒细胞减少症



巨细胞病毒感染


血小板减少


活动性特应性皮炎



过敏性皮炎


2.淋巴细胞亚群的检测结果与正常参考值
目前临床只有淋巴细胞亚群的百分数结果，为
了更准确地了解体内的免疫功能，有必要知道淋 巴细胞亚群的绝对数。BD 公司与卫生部临检中心 合作，现提供全国成人的淋巴细胞亚群的正常参 考值（包括百分数和绝对数）。在结果解释时除 注意：NK细胞中也有一些细胞是CD8阳性的。少 量的单核细胞也能表达CD4 外，应结合淋巴细胞 绝对数来看待某一亚群百分比的改变。
恶性肿瘤患者T 细胞亚群和SIL22R 的变化及意义卢香兰1 ,李霞1 ,王萍萍1 ,李玲2 ,李艳1·3 4 2 ·中国医科大学学报 J Chin Med Univ 第33 卷 第3 期 2004 年6 月
癌组织侵润淋巴细胞CD4/CD8
研究发现癌组织中侵润淋巴细胞CD4/CD8比值愈低 其预后愈差
T supressor/cytotoxic cell (CD3+/CD8+)
Th/Ts
百分含量（%淋巴细 胞）
5-18% 7-40% 50-84% 27-51% 15-44% 0.71-2.78
BD TriTEST CD4 FITC/CD8 PE/CD3 PerCP with TruCOUNT Tubes (T 淋巴细胞三色分析并绝 对计数)
CD3+CD4+CD8+ cell
Th/Ts
34-70% 25-54%
414-1123 238-874
0.5-4.0%
6-56
0.68-2.47
二．淋巴细胞亚群的检测试剂的选择
在选择临床检测用的单抗试剂时，为了保 证实验结果的可靠性，必须使用临床诊断用 试剂。BD 公司提供淋巴细胞亚群检测的全套 试剂盒。
磷癌和腺癌患者外周血及癌组织侵润淋巴细 胞CD4/CD8比值
淋巴结转移后，节内CD4/CD8比值变化
具有大体积肿块患者CD4/CD8比值进一步下降
淋巴瘤患者细胞穿刺样本 CD4/CD8比值升高
Is an increase in CD4/CD8 T-cell ratio in lymph node fine needle aspiration helpful for diagnosing Hodgkin lymphoma? A study of 85
细胞因子IL-2治疗后，侵润淋巴细胞CD4/CD8比值 增加
Neoadjuvant immunotherapy of oral squamous cell carcinoma modulates intratumoral CD4/CD8 ratio and tumor microenvironment: a multicenter phase II clinical trial. Timar J, Ladanyi A, Forster-Horvath C, Lukits J, Dome B, Remenar E, Godeny M, Kasler M, Bencsik B, Repassy G, Szabo G, Velich N, Suba Z, Elo J, Balatoni Z, Pocza K, Zemplen B, Chretien P, Talor E. National Institute of Oncology, Department of Otolaryngology and Head and Neck Surgery, Semmelweis University, Budapest, Hungary.
TH1和TH2细胞之间相互牵制，各自分泌的 细胞因子可对对方起负反馈调节作用。
CD8+T细胞又称细胞毒性T细胞，Tc或CTL， 它在T细胞免疫应答中发挥重要功能。
Tc细胞识别抗原活化后释放胞浆内颗粒毒素： 穿孔素perforin和颗粒酶granzyme，杀伤靶 细胞。
B淋巴细胞是免疫系统中的抗体产生细胞。1， 产生的抗体可与抗原起特异性的结合，如中 和细菌的外毒素使其失去毒性作用；2，抗体 与抗原结合后形成的复合物易被吞噬细胞清 除；3，抗体与抗原结合后再结合补体清除病 原体。