蝙蝠葛碱对人食管癌细胞Eca-109的增殖和凋亡影响的实验研究
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【关键词】 食管癌 蝙蝠葛碱 细胞 Ｅｃａ－１０９ 增殖 凋亡
ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆｄａｕｒｉｃｉｎｅｏｎｈｕｍａｎｅｓｏｐｈａｇｅａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＥｃａ－１０９ａｎｄｉｔｓａｐｏｐｔｏｓｉｓ．ＪＩＡＨｏｎｇ－ｙｕ， ＷＡＮＧＨｅ－ｎａｎ，ＸＩＡＦｅｎｇ－ｙｕ，ｅｔａｌ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＤｉｇｅｓｔｉｖｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＴｈｅＦｉｒｓｔＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＱｉｎｈｕａｎｇｄａ，ＱｉｎｈｕａｎｇｄａｏＨｅｂｅｉ０６６０００，Ｃｈ食管癌细胞 Ｅｃａ－１０９的增殖和凋亡的影响。方法 １２ｈ、２４ｈ、４８ｈ采用 ＭＭＴ 实验检测 ０μＭ、２０μＭ、４０μＭ、８０μＭ的蝙蝠葛碱作用于人食管癌细胞 Ｅｃａ－１０９增殖的抑制率，并经流式细胞仪对人 食管癌细胞 Ｅｃａ－１０９凋亡周期、早期凋亡率进行检测，同时应用 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法对细胞凋亡基因 Ｃａｓｐａｓｅ－３、Ｂａｘ、Ｂｃｌ－２ 表达进行检测。结果 与 ０μＭ蝙蝠葛碱比较，２０～８０μＭ蝙蝠葛碱均能对 Ｅｃａ－１０９细胞的增殖进行抑制，并细胞生长 抑制率随着蝙蝠葛碱浓度增加、作用时间延长而增高，差异有统计学意义（Ｐ ＜０．０５）；相较于 ０μＭ蝙蝠葛碱，２０μＭ、 ４０μＭ、８０μＭ蝙蝠葛碱的 Ｇ１期细胞均增加，并 Ｇ１期细胞随着蝙蝠葛碱浓度的逐渐增加而不断增多，差异有统计学意 义（Ｐ ＜０．０５）；Ｇ２Ｍ期细胞随着蝙蝠葛碱的浓度增加而呈增多趋势；２０～８０μＭ蝙蝠葛碱对人食管癌 Ｅｃａ－１０９细胞凋 亡均具有促进作用，且细胞凋亡率随着蝙蝠葛碱应用浓度增加而不断升高，差异有统计学意义（Ｐ ＜０．０５）；２０～８０μＭ 蝙蝠葛碱作用 ２４ｈ后 Ｃａｓｐａｓｅ－３蛋白活性、Ｂａｘ蛋白的表达均增强，而 Ｂｃｌ－２蛋白的表达减少，差异有统计学意义（Ｐ ＜０．０５）。结论 ２０～８０μＭ蝙蝠葛碱能对人食管癌细胞 Ｅｃａ－１０９增殖进行抑制，促进 Ｅｃａ－１０９细胞凋亡，并呈剂量、 时间依赖性，分析原因可能与上调 Ｃａｓｐａｓｅ－３、Ｂａｘ蛋白表达、下调 Ｂｃｌ－２表达有关。
临床和实验医学杂志 ２０１９年 ９月 第 １８卷 第 １８期
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１－４６９５．２０１９．１８．００７ 文章编号：１６７１－４６９５（２０１９）１８－１９２７－０４
·１９２７·
蝙蝠葛碱对人食管癌细胞 Ｅｃａ－１０９的增殖和凋亡影响的实验研究
贾红玉 王赫楠 夏风宇 孙艳 刘红利 李姗姗 闫丽丽 徐梅梅 姜东春 （秦皇岛市第一医院消化内科 河北 秦皇岛 ０６６０００）
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆｄａｕｒｉｃｉｎｅｏｎｈｕｍａｎｅｓｏｐｈａｇｅａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＥｃａ－１０９ａｎｄｉｔｓａｐｏｐｔｏｓｉｓ，ｉｎｏｒ ｄｅｒｔｏｐｒｏｖｉｄｅｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｆｏｒｃｌｉｎｉｃａｌｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｅｓｏｐｈａｇｅａｌｃａｎｃｅｒ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆｈｕｍａｎｅｓｏｐｈａ ｇｅａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＥｃａ－１０９ｂｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ（０μＭ，２０μＭ，４０μＭ，８０μＭ）ａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｍｅ（１２ｈ，２４ｈ，４８ｈ）ｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ ｂｙＭＭＴｔｅｓｔ．ＴｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｃｙｃｌｅａｎｄｅａｒｌｙａｐｏｐｔｏｓｉｓｒａｔｅｏｆｈｕｍａｎｅｓｏｐｈａｇｅａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＥｃａ－１０９ｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓｇｅｎｅｓＣａｓｐａｓｅ－３，ＢａｘａｎｄＢｃｌ－２ｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ２０～８０μＭ ｄａｕｒｉｃｉｎｅｃｏｕｌｄｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｐｒｏ ｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＥｃａ－１０９ｃｅｌｌｓ，ａｎｄｔｈｅｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｒａｔｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｏｆｔａｒｕｃｕｄｉｎｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｌｏｎｇｅｄａｃｔｉｏｎｔｉｍｅ （Ｐ ＜０．０５）．Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅＧ１ｐｈａｓｅｃｅｌｌｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｄａｕｒｉｃｉｎｅｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ａｎｄｔｈｅＧ１ｐｈａｓｅｃｅｌｌｓｉｎ ｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｄａｕｒｉｃｉｎｅ（Ｐ ＜０．０５）．ＴｈｅＧ２Ｍ ｐｈａｓｅｃｅｌｌｓｓｈｏｗｅｄａｎｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｔｒｅｎｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｏｆｔｈｅｃｏｎ ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｄａｕｒｉｃｉｎｅ；ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｄａｕｒｉｃｉｎｅａｌｌｐｒｏｍｏｔｅｄｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｈｕｍａｎｅｓｏｐｈａｇｅａｌｃａｎｃｅｒＥｃａ－１０９ｃｅｌｌｓ，ａｎｄｔｈｅａｐｏｐ ｔｏｓｉｓｒａｔｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｄａｕｒｉｃｉｎｅ（Ｐ ＜０．０５）．ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣａｓｐａｓｅ－３ｐｒｏｔｅｉｎａｎｄＢａｘｐｒｏｔｅｉｎｉｎｃｒｅａｓｅｄａｆｔｅｒ２４ｈｏｆ２０ ～８０μＭ ｄａｕｒｉｃｉｎｅ，ｗｈｉｌｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＢｃｌ－２ｐｒｏｔｅｉｎｄｅｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｄａｕｒｉｃｉｎｅｃａｎｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎ ｅｓｏｐｈａｇｅａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＥｃａ－１０９ａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆＥｃａ－１０９ｃｅｌｌｓｉｎａｄｏｓｅ－ ａｎｄｔｉｍｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍａｎｎｅｒ．Ｔｈｅｒｅａｓｏｎｍａｙｂｅ ｒｅｌａｔｅｄｔｏｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇＣａｓｐａｓｅ－３ａｎｄＢａｘｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇＢｃｌ－２ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．
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临床和实验医学杂志 ２０１９年 ９月 第 １８卷 第 １８期
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１－４６９５．２０１９．１８．００７ 文章编号：１６７１－４６９５（２０１９）１８－１９２７－０４
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蝙蝠葛碱对人食管癌细胞 Ｅｃａ－１０９的增殖和凋亡影响的实验研究
贾红玉 王赫楠 夏风宇 孙艳 刘红利 李姗姗 闫丽丽 徐梅梅 姜东春 （秦皇岛市第一医院消化内科 河北 秦皇岛 ０６６０００）
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆｄａｕｒｉｃｉｎｅｏｎｈｕｍａｎｅｓｏｐｈａｇｅａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＥｃａ－１０９ａｎｄｉｔｓａｐｏｐｔｏｓｉｓ，ｉｎｏｒ ｄｅｒｔｏｐｒｏｖｉｄｅｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｆｏｒｃｌｉｎｉｃａｌｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｅｓｏｐｈａｇｅａｌｃａｎｃｅｒ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆｈｕｍａｎｅｓｏｐｈａ ｇｅａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＥｃａ－１０９ｂｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ（０μＭ，２０μＭ，４０μＭ，８０μＭ）ａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｍｅ（１２ｈ，２４ｈ，４８ｈ）ｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ ｂｙＭＭＴｔｅｓｔ．ＴｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｃｙｃｌｅａｎｄｅａｒｌｙａｐｏｐｔｏｓｉｓｒａｔｅｏｆｈｕｍａｎｅｓｏｐｈａｇｅａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＥｃａ－１０９ｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓｇｅｎｅｓＣａｓｐａｓｅ－３，ＢａｘａｎｄＢｃｌ－２ｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ２０～８０μＭ ｄａｕｒｉｃｉｎｅｃｏｕｌｄｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｐｒｏ ｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＥｃａ－１０９ｃｅｌｌｓ，ａｎｄｔｈｅｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｒａｔｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｏｆｔａｒｕｃｕｄｉｎｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｌｏｎｇｅｄａｃｔｉｏｎｔｉｍｅ （Ｐ ＜０．０５）．Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅＧ１ｐｈａｓｅｃｅｌｌｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｄａｕｒｉｃｉｎｅｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ａｎｄｔｈｅＧ１ｐｈａｓｅｃｅｌｌｓｉｎ ｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｄａｕｒｉｃｉｎｅ（Ｐ ＜０．０５）．ＴｈｅＧ２Ｍ ｐｈａｓｅｃｅｌｌｓｓｈｏｗｅｄａｎｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｔｒｅｎｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｏｆｔｈｅｃｏｎ ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｄａｕｒｉｃｉｎｅ；ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｄａｕｒｉｃｉｎｅａｌｌｐｒｏｍｏｔｅｄｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｈｕｍａｎｅｓｏｐｈａｇｅａｌｃａｎｃｅｒＥｃａ－１０９ｃｅｌｌｓ，ａｎｄｔｈｅａｐｏｐ ｔｏｓｉｓｒａｔｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｄａｕｒｉｃｉｎｅ（Ｐ ＜０．０５）．ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣａｓｐａｓｅ－３ｐｒｏｔｅｉｎａｎｄＢａｘｐｒｏｔｅｉｎｉｎｃｒｅａｓｅｄａｆｔｅｒ２４ｈｏｆ２０ ～８０μＭ ｄａｕｒｉｃｉｎｅ，ｗｈｉｌｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＢｃｌ－２ｐｒｏｔｅｉｎｄｅｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｄａｕｒｉｃｉｎｅｃａｎｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎ ｅｓｏｐｈａｇｅａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＥｃａ－１０９ａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆＥｃａ－１０９ｃｅｌｌｓｉｎａｄｏｓｅ－ ａｎｄｔｉｍｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍａｎｎｅｒ．Ｔｈｅｒｅａｓｏｎｍａｙｂｅ ｒｅｌａｔｅｄｔｏｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇＣａｓｐａｓｅ－３ａｎｄＢａｘｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇＢｃｌ－２ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．