用于硼中子捕获疗法的组合物及其使用方法[发明专利]

[19]
中华人民共和国专利局
[12]发明专利申请公开说明书
[11]公开号CN 1124921A
[43]公开日1996年6月19日
[21]申请号94192350.9[22]申请日94.5.27
[30]优先权
[32]93.06.03 [33]US [31]08/071702
[86]国际申请PCT/US94/06011 1994.05.27
[87]国际公布WO94/28875 EN 1994.12.22
[85]进入国家阶段日期1995.12.04[71]申请人加州大学董事会
地址美国加利福尼亚州
[72]发明人弗里德里克·M·霍索恩 黛布拉·阿琳·
费克斯 肯尼恩·约翰·谢利
[74]专利代理机构永新专利商标代理有限公司代理人程伟[51]Int.CI 6
A61K 9/127
A61K 41/00C07F 5/02
权利要求书 13 页 说明书 34 页 附图 12 页
[54]发明名称
用于硼中子捕获疗法的组合物及其使用方法
[57]摘要
硼中子捕获疗法可使用X y B 20H 17L，其中X为碱
金属，y为1至4，L为一个双电子给体如NH 3，这类
化合物中包括Na 2B 10H 9NCO。

这些硼氢化合物的盐
可以以游离的或封入脂质体的方式使用。

脂质体可
将碳硼烷包埋在其双层结构中以提高其运载的10B
的量和/或提高脂质体的肿瘤特异性。

94192350.9权 利 要 求 书第1/13页
1、一种含有脂质体的用于硼中子捕获疗法的肿瘤治疗剂，该脂质体具有至少一层包封用双层结构和一个由该包封双层结构所限定的内部空间；以及在此内部空间中的硼烷，其中硼烷化合物选自下述基团： (a)X y B20H17L，其中X选自碱金属和
四烷基铵，y为1至4，L为任意的2电子给体；
(b)X s B10H9L，其中X选自碱金属和四
烷基铵，S为1或2，L为任意的2电子给体；及
(c)(a)和(b)的混合物。

2、根据权利要求1所述的肿瘤治疗剂，其特征在于硼烷选自Na y B20H17NH3，其中y为1或
3，和Na2B10H9NCO。

3、根据权利要求1所述的肿瘤治疗剂，其特征在于，碱金属选自Na，K，Cs和Rb。

4、根据权利要求1所述的肿瘤治疗剂，其特征在于，X选自四甲基铵和四乙基铵。

5、根据权利要求1所述的肿瘤治疗剂，其特征在于，L选自-NHR1R2，其中R1和R2相同或不
同，且选自氢、苄基、烷基和二胺基；-S R1R2，其中R1和R2相同或不同，且选自氢或烷基；-C N；-CO；-NCO；-CH2OH；-CO2R1；烷
基；-NHCONHR1；-COOH和-CONHR1
，其中R1选自氢、苄基、烷基和二胺基。

6、根据权利要求1所述的肿瘤治疗剂，其特征在于：X为四甲基铵。

7、根据权利要求1所述的肿瘤治疗剂，其特征在
于L为氨类。

8、根据权利要求7所述的肿瘤治疗剂，其特征在于L为NH3。

9、根据权利要求1所述的肿瘤治疗剂，其特征在于脂质体含有1∶1摩尔比的DSPC和胆固醇。

10、根据权利要求8所述的肿瘤治疗剂，其特征在于脂质体含有1∶1摩尔比的D S P C和胆固醇，并且为单层结构。

11、一种治疗肿瘤的方法，包括给予由下述物质组成的肿瘤治疗剂：
一种脂质体，该脂质体含有至少一层包封用双层结构和该包封双层结构所限定的内部空间，和位于该内部空间内的一种硼烷化合物，其中硼烷选自：
(a)X y B20H17L，其中X选自碱金属和
四甲基铵，y为1至4，L为任意的2电子给体；
(b)X s B10H9L，其中X选自碱金属和四
烷基铵，s为1或2，L为任意2电子给体；及
(c)(a)和(b)的混合物。

12、根据权利要求11所述的方法，其特征在于，硼烷选自Na y B20H17NH3，其中y为1或3，
和Na2B10H9NCO。

13、根据权利要求11所述的方法，其特征在于硼烷为Na3B20H17NH3或Na2B10H9NCO，
其中，当肿瘤治疗剂转运至肿瘤并暴露于热能化中子之中时，该肿瘤治疗剂具有治疗作用。

14、根据权利要求12所述的方法，其特征在于硼烷为Na3B20H17NH3或Na2B10H9NCO，
其中，当肿瘤治疗剂转运到肿瘤并暴露于热能化电子之
中时，该肿瘤治疗剂具有治疗作用。

15、根据权利要求13所述的方法，特征在于，使用95％的富集10B，每克肿瘤中至少有10μg 的10B。

16、根据权利要求11所述的方法，其特征在于，L选自-NHR1R2，其中R1和R2可相同或不同，
并选自氢、苄基，烷基和二胺；-S R1R2，其中R1和R2可相同或不同，并选自H或烷基；-CN；
-CO；-NCO；-CH2OH；-CO2R1；烷基；
-NHCONHR1；-COOH；和-CONHR1，
其中R1选自氢、苄基，烷基和二胺。

17、根据权利要求11所述的方法，其特征在于，X为四甲基铵。

18、根据权利要求11所述的肿瘤治疗剂，其特征在于碱金属选自Na，K，Cs和Rb。

19、根据权利要求11所述的肿瘤治疗剂，其特征在于，X选自四甲基铵和四乙基铵。

20、化合物Na y B20H17NH3，其中y
为1或3。

21、一种水溶性的B20H17NHR1R2-2，
其中R1和R2相同或不同，且选自氢、苄基、烷基和二胺，z为1或3。

22、根据权利要求21所述的盐，其特征在于，其阳离子选自碱金属和四烷基铵，其中的烷基是使该盐的水溶性仍能保持的任何烷基。

23、根据权利要求22所述的盐，其特征在于，其阳离子为四甲基铵。

24、根据权利要求21所述的盐，其特征在于，
R1和R2为乙二胺。

25、封入脂质体的硼烷化合物，其中的硼烷是胺官能化的。

26、根据权利要求25所述的封入脂质体的硼烷，其特征在于所述脂质体中包埋有碳硼烷。

27、一个治疗肿瘤的方法，包括给予具分子式X1B20H17L的化合物的步骤，其中X选自碱金属
和四烷基铵，L为任意的二电子给体，y为1至4。

28、根据权利要求27所述的方法，其特征在于，L选自：
-NHR1R2，其中R1和R2相同或不同，且选
自氢，苄基，烷基和二胺；-S R1R2，其中R1和R2相同或不同，且选自H或烷基；-CN；-CO；
-NCO；-CH2OH；-CO2R1；烷基；
-NHCONHR1；-COOH和-CONHR1，其中
R1选自氢，苄基，烷基和二胺。

29、根据权利要求28所述的方法，其特征在于，L选自-NH2-CH2-Ph，
-NH2CH2CH2NH2和-NH2(CH2)7CH3。

30、根据权利要求27所述的方法，其特征在于，X为Na，K，Cs或Rb。

31、根据权利要求27所述的方法，其特征在于，X为四甲基铵。

32、根据权利要求28所述的方法，其特征在于，二胺为乙二胺。

33、根据权利要求27所述的方法，其特征在于，L为NH3。

34、根据权利要求27所述的方法，其特征在于，
L为NH3，y为3，脂质体是单层结构的。

35、一种治疗肿瘤的方法，包括给予硼烷化合物的步骤，该硼烷化合物在体内可被胞内蛋白亲核进攻。

36、根据权利要求35所述的方法，其特征在于硼烷选自X y B20H17L和X s B10H9L，其
中X选自碱金属和四烷基铵，s为1或2，y为1至4，L为任意的二电子给体。

37、根据权利要求36所述的方法，其特征在于，L选自-NHR1R2，其中R1和R2相同或不同，
且选自氢、苄基、烷基和二胺；-S R1R2，其中R1和R2相同或不同，且选自H或烷基；-CN；
-CO；-NCO；-CH2OH；-CO2R1；烷基；
-NHCONHR1；-COOH；和-CONHR1，
这里R1选自氢，苄基、烷基和二胺。

38、根据权利要求35所述的方法，其特征在于硼烷被封入脂质体中。

39、根据权利要求38所述的方法，其特征在于脂质体中包埋有硼烷。

40、根据权利要求35所述的方法，其特征在于，硼烷为X y B20H17NH3。

41、根据权利要求35所述的方法，其特征在于，硼烷为X2B10H9NCO。

42、一种具有至少一层包封用双层结构和一个由包封双层结构所限定的内部空间的脂质体，其特征在于碳硼烷包埋在它的双层结构中。

43、根据权利要求42所述的脂质体，其特征在于，在脂质体的双层结构中存在0.05％至20％(重量)的硼。

44、根据权利要求42所述的脂质体，其特征在于，在脂质体的双层结构中存在0.5％至10％(重量)的硼。

45、根据权利要求42所述的脂质体，其特征在于，双层结构中含有DSPC和胆固醇。

46、根据权利要求45所述的脂质体，其特征在于，DSPC和胆固醇的摩尔比为1∶1至3∶1。

47、根据权利要求42所述的脂质体，其特征在于，双层结构中含有磷脂。

48、根据权利要求47所述的脂质体，其特征在于该双层结构进一步包含胆固醇。

49、根据权利要求42所述的脂质体，其特征在于碳硼烷选自：
(a)具有下述分子结构的碳硼烷：
其中X选自碱金属和四烷基铵，R为亲脂性的烷基；
(b)具有下述分子结构的碳硼烷：
(c)具有下述分子结构的碳硼烷：
其中R1和R2相同或不同，它们均为亲脂性的烷基，或者，R1或R2为H，R1或R2的另一个为一亲脂
烷基；和
(d)具有下述分子结构的碳硼烷：
其中X选自碱金属和四烷基铵，其中R1和R2相同或不同并为亲脂性烷基，或者R1或R2为H，R1或
R2的另一个为亲脂性烷基。

50、根据权利要求49所述的脂质体，其特征在于，R、R1和R2为-(CH2)x CH3，x为1
1至19。

51、根据权利要求50所述的脂质体，其特征在于，R为n-C16H33。

52、根据权利要求49所述的脂质体，其特征在于，R1和R2为n-C18H37。

53、根据权利要求42所述的脂质体，其特征在于碳硼烷为：
这里M选自Fe III，Cr III和Co III，R1和
R1为相同或不同的亲脂性烷基。

54、根据权利要求53所述的脂质体，其特征在于，R1和R2为-(CH2)x CH3，x为11至
19。

55、根据权利要求54所述的脂质体，其特征在于，R1和R2为n-C16H33。

56、根据权利要求53所述的脂质体，其特征在于，R1和R2为n-C18H37。

57、根据权利要求42所述的脂质体，其特征在于碳硼烷为：
其中，R1和R2为相同或不同的亲脂性烷基。

58、根据权利要求57所述的脂质体，其特征在
于：R1和R2为-(CH2)x CH3，x为11至
19。

59、根据权利要求58所述的脂质体，其特征在于，R1和R2为n-C16H33。

60、根据权利要求57所述的脂质体，其特征在于，R1和R2为n-C18H37。

61、根据权利要求42所述的单层脂质体，其特征在于碳硼烷为：
这里n为12，14或16或18。

62、一种提高脂质体特异性的方法，它包括在脂质体的双层结构中包埋一种碳硼烷的步骤。

63、根据权利要求62所述的方法，其特征在于，碳硼烷选自权利要求49，53，57和61中的碳硼烷。

64、一种治疗肿瘤的方法，它给予具有至少一层包封用双层结构和一个由该双层结构所限定的内部空间
的脂质体，其中在双层结构中包埋有碳硼烷。

65、根据权利要求64所述的方法，其特征在于，在脂质体双层结构中含有0.05％至20％(重量)的硼。

66、根据权利要求64所述的脂质体，其特征在于，在脂质体双层结构中含有0.5％至10％(重量)的硼。

67、根据权利要求64所述的脂质体，其特征在于，双层结构中含有DSPC和胆固醇。

68、根据权利要求67所述的脂质体，其特征在于，DSPC与胆固醇的摩尔比为1∶1至3∶1。

69、根据权利要求64所述的脂质体，其特征在于，双层结构中含有磷脂。

70、根据权利要求69所述的脂质体，其特征在于，双层结构中还含有胆固醇。

71、根据权利要求64所述的脂质体，其特征在于，碳硼烷选自权利要求49，53，57，和61中的碳硼烷。

72、一种含有脂质体的肿瘤治疗剂，脂质体具有至少一层包封用双层结构和一个由该包封双层结构所限定的内部空间，其中，在内部空间中有一种硼烷化合物，在双层结构中包埋有碳硼烷。

73、根据权利要求72所述的肿瘤治疗剂，其特征在于，硼烷化合物选自：
(a)XB20H17L，其中X选自碱金属和四
烷基铵，L为任意二电子给体；
(b)XsB10H9L，其中X选自碱金属和四
烷基铵；s为1或2，L为任意的2电子给体；和
(c)(a)和(b)的混合物。

74、根据权利要求72所述的肿瘤治疗剂，其特征在于，硼烷选自Na y B20H17NH3，其中y
为1或3，和Na2B10H9NCO。

75、一种治疗肿瘤的方法，它包括给予含有脂质体的肿瘤治疗剂，所述脂质体具有至少一层包封用双层结构和一个由该包封双层结构所限定的内部空间，其中，在内部空间中有硼烷化合物，同时在双层结构中包埋有碳硼烷。

76、根据权利要求75所述的方法，其特征在于，硼烷化合物选自：
(a)XB20H17L，其中X选自碱金属和四
烷基铵，L为任意的二电子给体；
(b)X s B10H9L，其中X选自碱金属和四
烷基铵，s为1或2，L为任意的二电子给体；和
(c)(a)和(b)的混合物。

77、根据权利要求75所述的方法，其特征在于碳硼烷选自权利要求49，53，57和61中的碳硼烷。

78、一种制备包埋碳硼烷的单层脂质体的方法，该方法包括的步骤有：
提供DSPC，胆固醇和碳硼烷；
将D S P C，胆固醇和碳硼烷溶于一种溶剂中； 挥发去溶剂以制成含有D S P C，胆固醇和碳硼烷的脂质层；
在水质溶剂中水化所得的脂质层以形成悬浊液；和将悬浊液均质化。

79、制备XB10H9CO的方法，其中X选自
Ph3PMe和Et3NH，Cs和(CH3)4N，
该方法包括将草酰氯与X2B10H10反应的步骤。

80、根据权利要求79所述的方法，其特征在于，反应在CH2Cl2中进行。

94192350.9说 明 书第1/34页用于硼中子捕获疗法的组合物及其使用方法
发明领域
本发明总的来说涉及治疗肿瘤的组合物和方法，尤其是涉及使用游离的和封入脂质体的硼烷衍生物来治疗肿瘤的组合物及方法。

发明的背景
中子捕获疗法在癌症治疗中是一项很有吸引力的方法，特别是对于恶性肿瘤的治疗。

其一般反应涉及一热能化的中子(通常来源于带有特殊减速剂和特殊阀门的核反应堆)被一具有较大中子捕获截面的适当原子核所捕获。

随后的衰变释放出可杀死附近肿瘤细胞的高能粒子(α粒子)。

由于高能和细胞毒性的α粒子在组织中仅能前进大约为一个细胞直径的距离，优选的方法应通过将α粒子前体仅置于肿瘤细胞上或肿瘤细胞其中的方法来标明准备杀死的细胞类型。

例如硼-10(也标示为10B)就具有这样一种适当的原子核并具有适于这一方案的良好特性。

硼-1 0/热能化中子捕获反应如下(*指出硼原子核的一个
不稳定的中间状态)：
10
B＋1n→[11B]*→7Li(0.87Mev.)＋4He(1.52Mev.) 为了保证这一疗法有效，在肿瘤内必须引入足够量的10B以产生所需密度的粒子。

这一浓度有各种不同
的估计，大约为每毫克肿瘤细胞10-50μg10B。

另外，应控制正常组织和血液中的10B的浓度并最好使其低于肿瘤中的浓度以减少对健康细胞和血管的损伤。

H. Hatanaka(1986)Boron-Neutron Capture Therapy for Tumors(肿瘤的硼中子捕获疗法)；Nishimura Co.，Ltd.p.1-16。

已试验过大量含有硼的化合物以考查其是否可以达到上述标准。

几乎无一例外，所有的化合物均由于在肿瘤细胞内定位的硼的量不足且血液中硼的浓度过高而不能满足有效的中子捕获疗法的要求。

在日本所做的Na2B12H11SH的人体临床实验显现出本方法
的一些希望，但仅限于有限的脑肿瘤。

I d.16-26。

如果可以获得一种将高浓度的10B转移到肿瘤中的通用方法的话，中子捕获疗法的可用性将会大大提高。

如果聚集于肿瘤中的10B比血液中的高，则该方法更加可行。

最近，应用具有特定组成结构的脂质体将药物和其它化合物选择性地转送至肿瘤中已成为可能。

参见欧洲专利申请No.87311040.7，1988年6
月22日公开；Presant的美国专利No.5,019,369；及″Liposomes from Biophysics to Therapeutics″，M. J.Ostro，Ed，Marcel Dekker，Inc.，New York (1987)，所有这些均作为本文的参考文献。

作为有效的中子捕获疗法的必要条件，将具有较高渗透性的化合物结合于脂质体的内部空间而不是外部，依赖于在最大浓度地结合10B时不显著改变脂质体的有益的生物分布特性的可行性。

这样，可达到每克肿瘤组织至少10μg的10B(假设使用大于90％10B的浓
缩物)。

Na2B20H18及它的氢氧化物已经公知，参
见M.F.Hawthorne，R.L.Philling，and P.M.
Garrett，J.Am.Chem.Soc.87，4740(1965)。

已知可使用含有硼的多聚磷酸来治疗钙化的肿瘤。

参见欧洲专利申请No.82200784.5，1983年5
月1日公开。

用于中子捕获疗法的硼化卟啉化合物也已公知。

参见Miura的美国专利No.4959，3
56，Gabel的美国专利No.5,116,98
0和Hadd的美国专利No.4,466,952。

对于可将治疗浓度的10B选择性地转运至肿瘤的方法，人们期待已久但一直未能找到。

对于可用于硼中子捕获疗法的10B组合物和转移载体也存在着类似的需求。

发明目的
本发明的目的之一是提供可用于中子捕获肿瘤治疗法组合物和方法以将有效治疗浓度的含硼化合物转运至肿瘤中。

本发明的另一个目的是提供硼烷和封入脂质体的硼烷化合物，它们对脂质体内的硼烷化合物具有缓释的作用且不明显损坏脂质体。

本发明的另一个目的是提供一种癌症的治疗方法，该方法使用游离的和封入脂质体的硼烷化合物并达到转运至动物和人肿瘤中至少10毫克10B每克肿瘤组织，同时降低10B在血液中的浓度。

优选实施方式概述
上述目的可由本发明实现。

本发明的一个方面是在硼烷框架上有两个电子给体的有治疗作用的硼的衍生物被封入脂质体的内部水质空间，产生的脂质体给予肿瘤患用。

本发明的另一个方面是，有助于中子捕获疗法的某些自由硼烷经发现具有有益的生物分布。

自由态和封入脂质体的Na3B20H17NH3均优选应用于本
发明的这些方面。

本发明的另一个方面是，有治疗作用的碳硼烷衍生物包埋在脂质体的双层结构中然后给药。

所产生的脂质体具有增强了的肿瘤选择性并可用作前面提到的硼烷衍生物和其它药物的包封载体。

本发明的另外一个方面是开发出了新的衍生硼烷以用于硼中子捕获疗法。

附图说明
图1给出了脂质体膜的组成及其结构。

图2给出了带有EMT6肿瘤的BALB/c小鼠
体内Na2B10H10和Na2B12H11SH的
生物分布。

图3为B10H9NCO2-与胞内蛋白的预计反
应。

图4给出了带有EMT6肿瘤的BALB/c小鼠
鼠体内Na2B10H10和Na2B10H9NCO
的生物分布。

图5给出了由B10H102-衍生的多种可胞内
结合的硼试剂。

图6给出了B20H17NH33-四甲基铵盐的
X射线衍射晶体结构和11B的NMR谱。

图7给出了带有EMT6肿瘤的BALB/c小鼠
体内脂质体Na3B20H17NH3的生物分布。

图8给出了胞内氧化反应及随后胞内蛋白亲核进攻。

图9给出了另一个带有EMT6肿瘤的BALB/
c小鼠体内脂质体Na3B20H17NH3的生物分
布。

图10给出了带有EMT6肿瘤的BALB/c小
鼠体内自由态Na3B20H17NH3的生物分布。

图11给出了带有EMT6肿瘤的BALB/c小
鼠体内对脂质体硼烷的肿瘤硼保留作用。

图12所示为适于嵌入磷脂双分子层的亲脂性硼类化合物的合成。

图13所示为适于嵌入磷脂双分子层的亲脂性硼类化合物的合成。

图14所示为带有EMT6肿瘤的BALB/c小
鼠体内脂质体
K[CH3(CH2)15C2B9H11]
的生物分布。

图15所示为带有EMT6肿瘤的BALB/c小
鼠体内脂质体
K[CH3(CH2)15C2B9H11]
的生物分布。

优选实施方式的详细说明
下述为本发明优选实施方式的说明，其中包括发明人最近仔细考虑过的最佳方式。

“囊泡”指一种特定微团，此微团一般为球形，通常由形成双层膜结构并被称作“脂质体”的脂类物质产生。

脂质体为含有部分磷脂的微观构造。

制成这些脂质
体的方法目前为止，在此领域已非常熟悉，任何这样的方法均可用于本发明之中。

参见，例如G a m b l e的美国专利No.4,753,788，及Braken
的美国专利No.4,953,171。

代表性的做法
是由磷脂来制备脂质体，例如由二硬酯酰卵磷脂(也称作“DSPC”)，也可包括其它物质，例如中性脂类，如胆固醇，还可包括表面调节剂，例如带正电荷或负电荷的化合物。

磷脂由两条脂肪酸链组成，这两条链与甘油缩合，甘油上带有一个磷酸酯首基的附加取代。

通过与特定的磷脂分子结合，制成体内稳定的脂质体。

已知相转变点是烃链长度的一个函数。

参见L a n f o r d，The Hydrophobic Effect，2
nd Ed.(1980)。

某些磷脂分子表现出较高
的相转变温度(大于37℃)，在本文所述的组合物中使用这些磷脂可制成体内稳定性较高的脂质体。

D S P C微团的稳定性可通过与胆固醇的结合而提高。

带有正电荷的分子，例如硬脂酸胺或甘露糖胺或胆固醇的甘露糖醇胺衍生物，或带有负电荷的分子，例如二烷基磷酸酯也可结合入囊泡之中。

[某些碳硼烷类化合物，如下文中所详细讨论的，也可接合入囊泡的双层结构中。

]
当磷脂微团被引入血流之后，微团移动至病人体内肿瘤生长的特定部位。

为了提高磷脂囊泡稳动至特定部位的能力，可靠先将带有正电荷的磷脂囊泡引入病人的血流中以抑制病人体内的巨噬细胞或其它吞噬细胞。

结合于这些磷脂囊泡上的带有正电荷的分子可以是甘露糖胺或胆固醇的甘露糖醇胺衍生物。

同时或经过一段合适的时间，例如约1小时，可将其它的磷脂囊泡引入病人
的血流中以移动至病人体内的特定位置，这样的磷脂囊泡可包括胆固醇并且可为中性或带正电荷，如包括硬脂酰胺或甘露糖胺或胆固醇的甘露糖醇胺衍生物，或者可带负电荷，如包括联十六烷基磷酸酯。

多种脂类颗粒可形成转运囊泡，这种囊泡可以不影响封入物的胞胞内转运。

例如，其它的磷脂转运载体，如Vestar Inc.专利公告EP027209
1号中所公开的内容可以利用，在本文中已将其列为参考文献。

这些载体由一个封入物质的单磷脂膜构成，该磷脂膜与一个与双亲性关联的底物有关。

而脂质颗粒优选包括磷脂，最优选为脂质体。

如上面所提到的，无论是多层或单层囊泡，脂质体已被证明作为动物和人体内药物转运的囊泡是很有价值的。

活性药物，包括小的亲水性分子和多肽，可被捕获于脂质体的水性核心，而疏水物质可溶于脂质体的双层膜中。

脂质体的结构易于注射并可构成缓释和药物转运至特定类型细胞或身体某部分的作用基础。

多层结构，主要由于它们较大，通常很快被网状内皮系统所吸收(肝和脾)。

本发明所应用的代表性的囊泡是可在循环系统中保持数小时，在被靶细胞内在化后分解的那些。

为满足这些要求，本发明中的肿瘤治疗试剂优选使用直径小于250nm，更优选小于100nm的单层结构。

就图1而言，当水化时，磷脂形成双层结构，其脂肪酸烃基尾端指向内部，极性头部基团指向外部。

参见K.Shelly，D.A.Feakes，M.F.
Hawthorne，P.G.Schmidt，T.
A.Krisch，W.F.Bauer，Proc.
A，1992，89，
9039，本文用作参考文献。

这些结构中，膜的双层分子通常封闭形成一水质的空间，并在所封闭的空间和外部溶液之间形成一可渗透的隔离层。

当水化的磷脂悬浮液被搅拌时，可形成类似小洋葱的多层囊泡，水将许多双层结构以类似于洋葱的形式分开，其直径为1-10μm(1000-10,000n m)。

在M L V悬浮液中施加剪切力或均化力，例如近距离声定位法(so-nication)，可产生大小范围通常为平均直径30-250n m，优选为50至100n m的小的单层囊泡。

单层结构一般指包括一至三层，优选一层和两层。

本发明中封入硼烷肿瘤治疗剂的脂质体的直径与声处理的时间和制备脂质体的方法有关。

50至100n m范围从最大体内循环时间和更好的肿瘤特异性方面考虑是优选的。

另外，如果脂质体过大，则肝和脾会吸收过多的包封在脂质体内的硼肿瘤治疗剂。

实际的平衡直径在很大程度上取决于所使用的脂质体的性质和所结合的其它脂类(如胆固醇)的量。

在硼中子捕获治疗中所应用的脂质体可在囊泡的水质内部空间承载本发明中多面体硼离子的亲水盐。

如下面将要讨论的，为转运硼所使用的脂质体的类型能以静脉注射的方式很好地定位于多种肿瘤中。

其它的脂类也可加入磷脂中以制取具有特殊性质的脂质体。

需特别指出的是，甾醇类例如胆固醇有助于稳定血浆中双层结构的泄露和破坏部分。

在脂质体中加入磷脂重量5～50％的胆固醇可制成稳定的脂质体。

带有电荷的脂类或带有特殊配位体功能的脂类也可以加入。

例如，虽然图1所示的脂质体含有在其极性末端无剩余电荷的磷脂，依照本领域中人们熟知的技术也可制备有
带有负电荷或正电荷的脂质体。

含有3∶1至1∶1摩尔比，优选1∶1摩尔比D S P C和胆固醇的小的单层囊泡在转运本发明的硼烷化合物至肿瘤部位方面具有突出的优点。

依据本发明应用于中子捕获疗法的硼化合物每个分子中可有两个或多个硼原子，但优选每个分子含有至少10个硼原子，更为优选每个分子含有至少20个硼原子。

硼的同位素的含量可由自然丰度的19.78％10 B至高度浓缩化合物中的大于95％10B。

自然丰度的物质对封入，生物分布，稳定性及等方面的实验研究非常有用。

高度浓缩的物质有助于需要最大可行浓度的治疗。

就本发明的一个方面来讲，含有硼的化合物对于治疗肿瘤有效是由于它们的高水溶性，在生理pH条件下带有很少或不带电荷，对于脂质体的磷脂双层结构较不易渗透，及对于治疗主体不具有或仅具较低的毒性。

这样的硼烷的例子，无论自由态的和封入脂质体的，包括具有分子式X y B20H17L的化合物。

X选自由碱
金属和四烷基胺组成的组，优选X为N a，K，C s或Rb，以及烷基，包括甲基，乙基和其它不导致所制成的盐不可溶的烷基。

L不任意的2电子给体，y为1至4。

优选的L基团选自-NHR1R2，其中，R1和
R2可相同或不同，并且选自由氢，苄基，烷基和二胺基(例如，乙烯基二胺)所组成的组；-S R1R2，其中R1和R2可相同或不同，它们选自氢或烷基；-CN；-CO；-NCO；-CH2OH；
-CO2R1；烷基；-NHCONHR1；
-COOH和-CONHR1，其中R1选自由氢，辛。