甘草饮片、药对以及四君子汤中药效组分的测定
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
5] 中二者的含量。张玲等 [ 用 HPLC 法测定甘草酸和甘
, 依据其功能与主治,
选用临床上常用的四君子汤中, 炙甘草的单味药, 2个 药对, 四君子汤中的含量测定, 探讨内蒙古炙甘草的质
2] 量特征和评价方法。何三民 [ 依据《 中华人民共和国
草苷含量在四君子汤复方中分别为 1 41 % 和 1 44%。
内蒙古甘草为传统道地的中药。中药甘草( Radix Glycyrrhizae )是 豆 科 植 物 甘 草 Glycyrrhiza uralensis Fisch 、 胀果 甘 草 Glycyrrhiza inf lata Bat或 光 果 甘 草 Glycyrrhiza glabra L的干燥根及根茎。甘草具有补脾 益气、 止咳祛痰、 清热解毒、 缓急定痛、 调和诸药的功 能。 目前内蒙古炙甘草补脾益气的临床应用, 本研究 在中药药效组分理论的指导下
, 和甘草皂
[ 11]
苷类成分质量。四君子汤作为治疗脾胃气虚证, 在中 医内科脾胃气虚证的治疗中得 到 了 广 泛 的 运 用 。
12 ] 甘草苷和异甘草苷具有抗溃疡、 抗菌、 抗炎 [ , 而其衍
生物既能促进胰岛素的吸收, 还具有抗心律失常、 镇
13 ] 痛、 抗过敏、 抗缺氧等作用 [ 。
·7 9 6 ·
WORLD CHINESE M EDICINE June. 2014 , Vol. 9, No. 6
甘草饮片、 药对以及四君子汤 中药效组分的测定
李景松 张贵君
( 北京中医药大学中药学院, 北京, 100102 )
摘要 目的: 以内蒙古野生炙甘草单味药、 药对、 复方为研究载体, 测定甘草中 4 种药效组分含量, 探索药效组分变化规律。方 法: 采用单味药、 药对配伍、 复方配伍组分 - 液相色谱综合分析法。结果: 药效组分甘草苷 - 甘草素 - 甘草酸 - 异甘草苷在单味 药( 内蒙古野生炙甘草) 中含量为( 12 14 ± 0 31 ) , ( 3 25 ± 0 19 ) , ( 38 75 ±1 77 ) , ( 1 4± 0 25 ) ; 在药对( 炙甘草 -人参) 中含 量为( 2 87 ± 0 04 ) , ( 0 74 ± 0 02 ) , ( 6 42 ± 0 18 ) , ( 0 37 ± 0 03 ) ; 在药对( 炙甘草 -白术) 中含量为( 5 99 ± 0 01 ) , ( 2 16 ± 0 09 ) , ( 22 4± 1 8) , ( 0 77 ±0 02 ) : 在复方 ( 四君子汤) 中含量为 ( 2 99 ±0 03 ) , ( 0 81 ±0 04 ) , ( 10 05 ±0 31 ) , ( 0 32 ± 0 03 ) 。结论: 甘草中 4 中药效组分在单味药、 药对、 复方中含量存在一定差异, 为进一步完善甘草药材质量的制定提供新思路 和科学依据。 关键词 内蒙古野生甘草; 质量评价指标; 药效组分; 四君子汤 Determination of Active Components Alignments from Licorice Single Herb , Pair Herb and Sijunzi Decoction Li Jingsong, Zhang Guijun ( School ofM ateria M edica, Beij ing University ofChinese M edicine, Beij ing 100102 , China) Abstract Objective: To explore regularity of the active components alignments ( ACA ) through determination of the ACA in inner M on golia wild licorice single herb , herb herb and prescription. Methods : The ACA were determined by reversed phase high performance liq uid chromatography ( RP HPLC )in single herb , herb herb and prescription. Results: The contents of liquiritin liquiritigenin glycyrrhizin acid Isoliquiritin in single liquorice herb were ( 12. 14 ± 0. 31 ) , ( 3. 25 ± 0. 19 ) , ( 38. 75 ±1 . 77 ) , ( l1 . 4± 0. 25 ;in herb herb ( honey fried licorice ginseng)were ( 2. 87 ± 0 04 ) , ( 0. 74 ± 0 02 ) , ( 6. 42 ± 0. 18 ) , ( 0. 37 ± 0 03 ) ;in herb herb ( honey fried licorice big head atractylodes rhizome )were ( 5. 99 ± 0 01 ) , ( 2. 16 ± 0 09 ) , ( 22. 4± 1. 8) , ( 0. 77 ± 0 02 ) ;in prescription were ( 2. 99 ± 0 03 ) , ( 0. 81 ± 0 04 ) , ( 10 05 ± 0. 31 ) , ( 0. 32 ± 0 03 ) .Conclusion:There are some differences in the content of liquiritin liquiritigenin glycyrrhizic acid Isoliquiritinin in single herb, herb herb and prescription, which provides scientific basis and a new way for the establish ment of improving the quality of licorice. Key Words Liquorice ;Quality standard indicators;Active components alignments;Sijunzi decoction 中图分类号: R284 2 文献标识码: A doi: 10. 3969 / j. issn. 1673 - 7202. 2014. 06第 9 卷第 6 期
·7 9 7 ·
成分为甘草苷、 异甘草苷、 甘草素和异甘草素等甘草黄 酮类具有抑菌、 以及保肝作用等活性
[ 7- 10 ]
草及其他中药, 加 10 倍量水浸泡 30 min 后煎煮两次, 第一次 30 min , 第二次 20 min , 合并煎液, 趁热过滤, 滤 液浓缩至每 1 mL 相当于原药材 0 1 g 的浓缩液, 取浓 缩液 1 mL 至 10 mL 容量瓶中, 用甲醇稀释至刻度, 静 置 20 min , 分 出 上 清 液, 相 对 中 药 浓 度 为 0 01 g · mL -1 , 即为供试液。进样前用 0 45 μ m 滤膜过滤。 2 结果 2 1 线性关系考察 甘草苷标准品溶液分别进样 0 3、 3、 6、 9、 12 、 18 μ L, 异甘草苷标准品溶液分别进样 1、 4、 8、 12 、 16 、 20 μ L, 甘草素标准品溶液分别进样 1 、 3、 6、 9、 12 、 18 μ L, 甘草酸标准品溶液分别进样 0 5、 4、 8、 12 、 16 、 20 μ L。以标准品浓度为横坐标, 峰面积为纵坐 标进行 线 性 回 归, 得 甘 草 苷 回 归 方 程 Y =146 5X + 20 51, R2 = 0 9993 , 表明甘草苷在 25 800 ~154 800ng 线性关系良好。异甘草苷的回归方程 Y = 28 25 X 2 1 177 , R = 0 9996 , 表明异甘草苷在 10 000 ~ 200 000 ng 线性关系良好。甘草素的回归方程 Y = 45 61 X 2 0 022 , R =0 9996 , 表 明 甘 草 素 在 20 000 ~360 000 ng 线性关系良好。甘草酸的回归方程 Y = 75 32X 2 0 398 , R =0 9998 , 表 明 甘 草 酸 125 000 ~5000 000 ng 在线性关系良好。 2 2 精密度试验 分别精密吸取甘草苷、 异甘草苷、 甘草素、 甘草酸标准品溶液, 连续进样 6 次, 安各成分 的色 谱 条 件 测 定 峰 面 积。 RSD 分 别 为 1 04%、 1 5 1 %、 1 69%、 1 19%, 表明仪器精密度良好。 2 3 稳定性试验 称取内蒙古野生炙甘草供试品 6 g, 按供试品按供试品的溶液的制备项下方法制备供试 品溶 液, 室 温 放 置, 分 别 在 0, 2, 4, 6, 8, 10 , 12 h 按 2 1 1 项下进行峰面积测定, 甘草苷、 异甘草苷、 甘草 素、 甘草酸 RSD 依次分别为 1 93%, 1 69%, 1 46%, 2 73%, 表明供试品溶液在 12h 内稳定。 2 4 重复性试液 精密吸取同一批供试品溶液, 进样 10 μ L, 依照标准曲线测定方法连续测定 6 次, 根据峰 面积计算 RSD 值, 得到 4 种组分重现性 RSD 值分别为 1 84%, 1 77%, 1 64%, 2 24%, 表明本方法重现性良 好。 2 5 加样回收率试验 精密称取取内蒙古野生炙甘 草饮片 6 份, 按供试品溶液制备项下方法制备, 分别精 密加入 4 种基本等量标准品溶液, 注入液相色谱仪进 行含量测定, 见表 1 。 2 6 药效组分测定 分别制备 3 批供试品, 每个供试 品连续进样 3 次, 进样量 10 μ L, 高效液相色谱测定峰 面积, 根据外标法计算各组分的含量, 见图 1 -图 8 , 表 2。
6] 使用薄层色谱法定性鉴别六味地黄丸中的甘 刘红文 [
草苷, 使用液相色谱法测量甘草苷的含量, 为该味成药 的生产提供相应的质量控制标准。以控制其主要活性
药典》 使用 HPLC 法测定 2010 年版一部收载有甘草
基金项目: 中药新产品开发与产业化及中药资源保护利用研究, 课题名称: 蚕砂药效组分中药研究( 编号: 桂科攻 10124008 - 14 ) 作者简介: 李景松( 1987 —) , 研究方向为中药药效组分及药效组分质量评价体系研究, E- mail: Xiao_ 853801792@qq com 通信作者: 张贵君( 1954 —) 男, 大学学历, 北京中医药大学教授, 博士生导师, 研究方向为中药鉴定方法学研究, 中药药效组分及药效组分质量评 价体系研究, 中药基原与药效组分资原研究, E- mail : guigunzhang@163 com
[ 1]
Lycyrrhiza uralensis Fisc的甘草苷和甘草素、 异甘草素
3] 的含量分别为 3 64%、 0 14%、 0 125 %。栾海云等 [
建立甘草中甘草苷含量测定的 HPLC 法, 测定不同产
4] 采 地甘草中甘草苷的含量, 以控制其质量。刘磊等 [
用 HPLC 法测定了同一产地、 批次的生甘草和炙甘草 中甘草苷和甘草酸的含量, 发现蜜炙甘草后的甘草苷 和甘草酸的含量增加, 验证蜜炙因素可显著增加甘草
, 依据其功能与主治,
选用临床上常用的四君子汤中, 炙甘草的单味药, 2个 药对, 四君子汤中的含量测定, 探讨内蒙古炙甘草的质
2] 量特征和评价方法。何三民 [ 依据《 中华人民共和国
草苷含量在四君子汤复方中分别为 1 41 % 和 1 44%。
内蒙古甘草为传统道地的中药。中药甘草( Radix Glycyrrhizae )是 豆 科 植 物 甘 草 Glycyrrhiza uralensis Fisch 、 胀果 甘 草 Glycyrrhiza inf lata Bat或 光 果 甘 草 Glycyrrhiza glabra L的干燥根及根茎。甘草具有补脾 益气、 止咳祛痰、 清热解毒、 缓急定痛、 调和诸药的功 能。 目前内蒙古炙甘草补脾益气的临床应用, 本研究 在中药药效组分理论的指导下
, 和甘草皂
[ 11]
苷类成分质量。四君子汤作为治疗脾胃气虚证, 在中 医内科脾胃气虚证的治疗中得 到 了 广 泛 的 运 用 。
12 ] 甘草苷和异甘草苷具有抗溃疡、 抗菌、 抗炎 [ , 而其衍
生物既能促进胰岛素的吸收, 还具有抗心律失常、 镇
13 ] 痛、 抗过敏、 抗缺氧等作用 [ 。
·7 9 6 ·
WORLD CHINESE M EDICINE June. 2014 , Vol. 9, No. 6
甘草饮片、 药对以及四君子汤 中药效组分的测定
李景松 张贵君
( 北京中医药大学中药学院, 北京, 100102 )
摘要 目的: 以内蒙古野生炙甘草单味药、 药对、 复方为研究载体, 测定甘草中 4 种药效组分含量, 探索药效组分变化规律。方 法: 采用单味药、 药对配伍、 复方配伍组分 - 液相色谱综合分析法。结果: 药效组分甘草苷 - 甘草素 - 甘草酸 - 异甘草苷在单味 药( 内蒙古野生炙甘草) 中含量为( 12 14 ± 0 31 ) , ( 3 25 ± 0 19 ) , ( 38 75 ±1 77 ) , ( 1 4± 0 25 ) ; 在药对( 炙甘草 -人参) 中含 量为( 2 87 ± 0 04 ) , ( 0 74 ± 0 02 ) , ( 6 42 ± 0 18 ) , ( 0 37 ± 0 03 ) ; 在药对( 炙甘草 -白术) 中含量为( 5 99 ± 0 01 ) , ( 2 16 ± 0 09 ) , ( 22 4± 1 8) , ( 0 77 ±0 02 ) : 在复方 ( 四君子汤) 中含量为 ( 2 99 ±0 03 ) , ( 0 81 ±0 04 ) , ( 10 05 ±0 31 ) , ( 0 32 ± 0 03 ) 。结论: 甘草中 4 中药效组分在单味药、 药对、 复方中含量存在一定差异, 为进一步完善甘草药材质量的制定提供新思路 和科学依据。 关键词 内蒙古野生甘草; 质量评价指标; 药效组分; 四君子汤 Determination of Active Components Alignments from Licorice Single Herb , Pair Herb and Sijunzi Decoction Li Jingsong, Zhang Guijun ( School ofM ateria M edica, Beij ing University ofChinese M edicine, Beij ing 100102 , China) Abstract Objective: To explore regularity of the active components alignments ( ACA ) through determination of the ACA in inner M on golia wild licorice single herb , herb herb and prescription. Methods : The ACA were determined by reversed phase high performance liq uid chromatography ( RP HPLC )in single herb , herb herb and prescription. Results: The contents of liquiritin liquiritigenin glycyrrhizin acid Isoliquiritin in single liquorice herb were ( 12. 14 ± 0. 31 ) , ( 3. 25 ± 0. 19 ) , ( 38. 75 ±1 . 77 ) , ( l1 . 4± 0. 25 ;in herb herb ( honey fried licorice ginseng)were ( 2. 87 ± 0 04 ) , ( 0. 74 ± 0 02 ) , ( 6. 42 ± 0. 18 ) , ( 0. 37 ± 0 03 ) ;in herb herb ( honey fried licorice big head atractylodes rhizome )were ( 5. 99 ± 0 01 ) , ( 2. 16 ± 0 09 ) , ( 22. 4± 1. 8) , ( 0. 77 ± 0 02 ) ;in prescription were ( 2. 99 ± 0 03 ) , ( 0. 81 ± 0 04 ) , ( 10 05 ± 0. 31 ) , ( 0. 32 ± 0 03 ) .Conclusion:There are some differences in the content of liquiritin liquiritigenin glycyrrhizic acid Isoliquiritinin in single herb, herb herb and prescription, which provides scientific basis and a new way for the establish ment of improving the quality of licorice. Key Words Liquorice ;Quality standard indicators;Active components alignments;Sijunzi decoction 中图分类号: R284 2 文献标识码: A doi: 10. 3969 / j. issn. 1673 - 7202. 2014. 06第 9 卷第 6 期
·7 9 7 ·
成分为甘草苷、 异甘草苷、 甘草素和异甘草素等甘草黄 酮类具有抑菌、 以及保肝作用等活性
[ 7- 10 ]
草及其他中药, 加 10 倍量水浸泡 30 min 后煎煮两次, 第一次 30 min , 第二次 20 min , 合并煎液, 趁热过滤, 滤 液浓缩至每 1 mL 相当于原药材 0 1 g 的浓缩液, 取浓 缩液 1 mL 至 10 mL 容量瓶中, 用甲醇稀释至刻度, 静 置 20 min , 分 出 上 清 液, 相 对 中 药 浓 度 为 0 01 g · mL -1 , 即为供试液。进样前用 0 45 μ m 滤膜过滤。 2 结果 2 1 线性关系考察 甘草苷标准品溶液分别进样 0 3、 3、 6、 9、 12 、 18 μ L, 异甘草苷标准品溶液分别进样 1、 4、 8、 12 、 16 、 20 μ L, 甘草素标准品溶液分别进样 1 、 3、 6、 9、 12 、 18 μ L, 甘草酸标准品溶液分别进样 0 5、 4、 8、 12 、 16 、 20 μ L。以标准品浓度为横坐标, 峰面积为纵坐 标进行 线 性 回 归, 得 甘 草 苷 回 归 方 程 Y =146 5X + 20 51, R2 = 0 9993 , 表明甘草苷在 25 800 ~154 800ng 线性关系良好。异甘草苷的回归方程 Y = 28 25 X 2 1 177 , R = 0 9996 , 表明异甘草苷在 10 000 ~ 200 000 ng 线性关系良好。甘草素的回归方程 Y = 45 61 X 2 0 022 , R =0 9996 , 表 明 甘 草 素 在 20 000 ~360 000 ng 线性关系良好。甘草酸的回归方程 Y = 75 32X 2 0 398 , R =0 9998 , 表 明 甘 草 酸 125 000 ~5000 000 ng 在线性关系良好。 2 2 精密度试验 分别精密吸取甘草苷、 异甘草苷、 甘草素、 甘草酸标准品溶液, 连续进样 6 次, 安各成分 的色 谱 条 件 测 定 峰 面 积。 RSD 分 别 为 1 04%、 1 5 1 %、 1 69%、 1 19%, 表明仪器精密度良好。 2 3 稳定性试验 称取内蒙古野生炙甘草供试品 6 g, 按供试品按供试品的溶液的制备项下方法制备供试 品溶 液, 室 温 放 置, 分 别 在 0, 2, 4, 6, 8, 10 , 12 h 按 2 1 1 项下进行峰面积测定, 甘草苷、 异甘草苷、 甘草 素、 甘草酸 RSD 依次分别为 1 93%, 1 69%, 1 46%, 2 73%, 表明供试品溶液在 12h 内稳定。 2 4 重复性试液 精密吸取同一批供试品溶液, 进样 10 μ L, 依照标准曲线测定方法连续测定 6 次, 根据峰 面积计算 RSD 值, 得到 4 种组分重现性 RSD 值分别为 1 84%, 1 77%, 1 64%, 2 24%, 表明本方法重现性良 好。 2 5 加样回收率试验 精密称取取内蒙古野生炙甘 草饮片 6 份, 按供试品溶液制备项下方法制备, 分别精 密加入 4 种基本等量标准品溶液, 注入液相色谱仪进 行含量测定, 见表 1 。 2 6 药效组分测定 分别制备 3 批供试品, 每个供试 品连续进样 3 次, 进样量 10 μ L, 高效液相色谱测定峰 面积, 根据外标法计算各组分的含量, 见图 1 -图 8 , 表 2。
6] 使用薄层色谱法定性鉴别六味地黄丸中的甘 刘红文 [
草苷, 使用液相色谱法测量甘草苷的含量, 为该味成药 的生产提供相应的质量控制标准。以控制其主要活性
药典》 使用 HPLC 法测定 2010 年版一部收载有甘草
基金项目: 中药新产品开发与产业化及中药资源保护利用研究, 课题名称: 蚕砂药效组分中药研究( 编号: 桂科攻 10124008 - 14 ) 作者简介: 李景松( 1987 —) , 研究方向为中药药效组分及药效组分质量评价体系研究, E- mail: Xiao_ 853801792@qq com 通信作者: 张贵君( 1954 —) 男, 大学学历, 北京中医药大学教授, 博士生导师, 研究方向为中药鉴定方法学研究, 中药药效组分及药效组分质量评 价体系研究, 中药基原与药效组分资原研究, E- mail : guigunzhang@163 com
[ 1]
Lycyrrhiza uralensis Fisc的甘草苷和甘草素、 异甘草素
3] 的含量分别为 3 64%、 0 14%、 0 125 %。栾海云等 [
建立甘草中甘草苷含量测定的 HPLC 法, 测定不同产
4] 采 地甘草中甘草苷的含量, 以控制其质量。刘磊等 [
用 HPLC 法测定了同一产地、 批次的生甘草和炙甘草 中甘草苷和甘草酸的含量, 发现蜜炙甘草后的甘草苷 和甘草酸的含量增加, 验证蜜炙因素可显著增加甘草